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文档简介
ICS65.020.20
CCSB05
DB34
安徽省地方标准
DB34/T3715—2020
白鹤芋组培快繁技术规程
TechnicalregulationsfortissuecultureandrapidpropagationofSpathiphyllum
kochii
文稿版次选择
2020-11-27发布2020-12-27实施
安徽省市场监督管理局发布
DB34/T3715—2020
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由阜阳师范大学提出。
本文件由安徽省林业局归口。
本文件起草单位:阜阳师范大学、安徽大汇生态科技发展有限公司、亳州市花易捷花卉经营管理有
限公司、安徽农之源生态农业有限公司、安徽省农业科学院、太和县淼林现代农业发展有限公司。
本文件主要起草人:兰伟、凌飞东、郑萍、任杰、尚冰冰、刘晓艳、谢欣雨、张源、胡新、王静宇、
王显梅、刘峰、王先亮、侯林威。
I
DB34/T3715—2020
白鹤芋组培快繁技术规程
1范围
本文件规定了白鹤芋(Spathiphyllumkochii)组培快繁的组培设施、培养基配制、愈伤组织诱导培
养、继代增殖培养、生根培养、炼苗、组培苗分级、档案管理。
本文件适用于白鹤芋组培育苗生产。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
LY/T2289林木种苗生产经营档案
NY/T2306花卉种苗组培快繁技术规程
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4组培设施
按照NY/T2306的规定执行。
5培养基配制
5.1培养基类型的选择
选择MS培养基为基本培养基。
5.2MS培养基配制
按照NY/T2306的规定执行。
5.3培养基配方
5.3.1腋芽诱导培养基
MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+卡拉胶5.5g/L。
5.3.2继代增殖培养基
1
DB34/T3715—2020
MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT(6-糠基氨基嘌呤)0.1mg/L+白砂糖30g/L+卡拉胶
5.5g/L。
5.3.3生根培养基
1/2MS+NAA0.5mg/L+AC(活性炭)0.3g/L+白砂糖20g/L+卡拉胶5.5g/L。
5.4培养基pH值
用pH计或pH试纸测培养基pH值,用1mol/LHCL或1mol/LNaOH调节培养基pH值至5.8。
5.5培养基分装
利用自动灌装机分装,每升分装25~30瓶。分装时培养基不得沾在培养瓶口周围。
5.6培养基灭菌
在1.1kg·cm-2~1.2kg·cm-2、121℃下,培养基灭菌15min~20min,并尽快取出存放固定位
置,不得与未灭菌物品混放。配制的培养基应12h内进行灭菌。
6愈伤组织诱导培养
6.1外植体选取
在生长健壮、无病虫害的白鹤芋植株上,选取幼嫩的侧芽为外植体备用。
6.2外植体清洗
将选取的外植体在自来水下流水冲洗15min~20min。
6.3外植体消毒
在超净工作台上,用无菌滤纸吸干外植体表面水分,浸入70%乙醇中消毒20s~30s后,将70%
乙醇倒去,用无菌水冲洗3次,再浸入2.0%次氯酸钠溶液消毒15min~20min,倒出次氯酸钠溶液,
用无菌水冲洗4~5次,置于无菌滤纸上晾干备用。
6.4外植体接种
6.4.1接种工具消毒
将剪刀、镊子等接种工具在高压灭菌锅中灭菌后,放置在超净工作台上。接种时,接种工具用电热
灭菌器灭菌,然后在无菌工具放置架上冷却至室温备用。
6.4.2接种
将已消毒的外植体去除外层苞叶和下端切口,留取1.5cm~2.0cm长顶芽,接种在4.3.1腋芽
诱导培养基上。每瓶培养基接种2个~3个顶芽。
6.4.3标记
接种后,每批用记号笔将品种代号、培养基编号、工作人员编号及接种日期等信息标示在培养瓶上;
记录本人的接种数量,包括母瓶数和接种瓶数。
2
DB34/T3715—2020
6.5培养条件
培养温度为24℃~26℃,光照强度2000lx~3000Lx,连续定时光照时间12h/d。
6.6培养时间
外植体接种后,连续培养20d左右,外植体逐渐膨大,叶腋处萌发许多不定芽。继续培养45d~
50d后,不定芽长成芽丛。
7继代增殖培养
7.1转接
将芽丛分成大小相对一致的两半,转接到4.3.2继代增殖培养基上培养。如此反复,通过以芽丛
倍增的方式,实现幼苗大量增殖。
7.2培养条件
培养温度为24℃~26℃,光照强度2000lx~3000Lx,连续定时光照时间12h/d。
7.3培养时间
一般为45d左右。
7.4培养代数
继代增殖次数控制在10代以内。
8生根培养
8.1转接
将苗高3.0cm以上,生长健壮、长势一致的无根组培苗,转接到生根培养基中。
8.2培养条件
培养温度为24℃~26℃,光照强度2000lx~3000Lx,连续定时光照时间12h/d。
8.3培养时间
一般为30d左右。
9炼苗
9.1炼苗标准
培养瓶内生长的根、茎、叶俱全的完整植株,基部长出3~5条不定根,株高4.0cm~6.0cm,3~
4片叶时,便可炼苗。
9.2炼苗条件
3
DB34/T3715—2020
将培养瓶放置在遮阳度为50%~70%,温度为24℃~26℃的温室中,把培养瓶盖全部打开或半打
开炼苗。
9.3炼苗时间
一般炼苗时间为3d~5d,然后再移栽。
10组培苗分级
根据植株长势,叶片色泽,结合苗高,可将白鹤芋组培苗分为一级苗、二级苗、三级苗和不合格苗。
通常一级苗苗高6.0c
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