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文档简介
ICS65.020.20
CCSB05
DB23
黑龙江省地方标准
DB23/T3055—2021
燕子花组培苗生产技术规程
2021-12-24发布2022-01-23实施
黑龙江省市场监督管理局发布
DB23/T3055—2021
前言
本文件依据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规
定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由黑龙江省林业和草原局提出。
本文件起草单位:东北林业大学、逊克县新立林场、东宁市林业和草原局、中国建筑西南设计研究
院有限公司山东分院、国营明水县明水林场。
本文件主要起草人:王玲、赵蕊阳、叶王斌、梁国爽、刘泽宇、弓悦、任昆仑、王磊、闫蕾、吕汝
彤、史恭发、付海静、刘桂伶、杨娟、李凤仪、周晟、裴艳春。
I
DB23/T3055—2021
燕子花组培苗生产技术规程
1范围
本文件规定燕子花(IrislaevigataFisch.)组培苗生产的环境与设备消毒、培养基配制、外植体制备、
诱导培养、增殖培养、生根培养、练苗、移栽和生产档案。
本文件适用于燕子花组培苗生产。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用性文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用
于本文件。
LY/T1882—2010林木组织培养育苗技术规程
NY/T2306—2013花卉种苗组培快繁技术规程
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4环境与设备消毒
4.1接种室消毒
接种室消毒按NY/T2306—2013中8.6的规定执行。
4.2培养室消毒
培养室消毒按NY/T2306—2013中8.7的规定执行。
4.3超净工作台消毒
超净工作台消毒按NY/T2306—2013中8.5和8.6的规定执行。
4.4接种器具消毒
接种器具按NY/T2306—2013中8.4的规定执行。
5培养基配制
5.1母液配制
培养基母液配制按NY/T2306—2013中7.3的规定执行。
5.2培养基配制
1
DB23/T3055—2021
5.2.1培养基配方
培养基配方如下:
a)诱导培养基:MS+0.5mg/LIBA+1.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+30g/L蔗糖+固化剂,固化
剂可采用9.0g/L琼脂粉,培养基灭菌前调制pH5.8~pH6.0;
b)增殖培养基:MS+0.5mg/LIBA+1.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA+30g/L蔗糖+固化剂,固化
剂可采用9.0g/L琼脂粉,培养基灭菌前调制pH5.8~pH6.0;
c)生根培养基:MS+0.2mg/LNAA+30g/L蔗糖+固化剂,固化剂可采用7.0 g/L琼脂粉,培养基
灭菌前调制pH5.8~pH6.0。
5.2.2培养基配制方法
培养基配制方法按NY/T2306—2013中7.4执行。
5.3培养基灭菌及保存
培养基灭菌及保存方法按LY/T1882—2010中4.2进行。
6外植体制备
6.1种子选择与层积
宜选取当年秋季采集的饱满种子。10 月下旬土壤结冻前(土壤温度>0℃),将种子与湿沙按1:3
体积比混合,种沙混合物含水量60%~65%,装入编织袋埋藏在室外土壤中层积,埋藏深度为20 cm~
30 cm。60d后取出备用。
6.2种子消毒
种子在稀释的洗涤剂水中浸泡10 min,置于流水下冲洗30 min,室温下清水浸种24 h。在超净工
作台中,先用75 %乙醇溶液消毒10 s后,用无菌水冲洗3 遍,再用2 %次氯酸钠溶液浸泡并震荡25 min,
后用无菌水冲洗≥5遍。
6.3种子萌发
在超净工作台中,将消毒后的种子放入培养皿中(内垫一层用无菌水浸透的滤纸作发芽床),水深
应达种子厚度的2/3,盖好培养皿盖放入培养室培养。培养室温度为24℃~26℃、光照周期16h/d,光
照强度为2000Lux~3000Lux。
6.4外植体的获取
将发芽的种子继续培养≥10d,在超净工作台中,选取长出2片~3片叶子的健壮幼苗,将叶子剪至
2cm~3cm、根部修剪至0.2cm后,作为外植体备用。
7诱导培养
外植体叶片向上,茎基部垂直接入不定芽诱导培养基中,深度0.5cm,培养35d~45d,光照周
期12h/d~14h/d、光照强度3000Lux~5000Lux、培养温度22℃~28℃,空气相对湿度70%~80%。
8增殖培养
将分化的不定芽单独切离下来接入增殖培养基中,培养35d~45d,光照周期12h/d~14h/d、
2
DB23/T3055—2021
光照强度3000Lux~5000Lux,培养温度22℃~28℃,空气相对湿度70%~80%。待形成芽丛,分割新
长出的不定芽,可按需求重复继代培养,继代次数应≤3次。
9生根培养
选取培养瓶中高度≥2cm、生长健壮的丛生芽,单个分割后,将叶片修剪至1.5cm~2cm,接种至
生根培养基中,光照培养≥30d。光照周期12h/d~14h/d、光照强度3000Lux~5000Lux,培养温
度22℃~28℃,空气相对湿度70%~80%。
10炼苗
组培苗高度3cm~4cm,基部长出≥3条、长2cm~3cm的新根时,将组培瓶盖打开,倒入无菌
水覆盖在培养基表面,在室内敞口炼苗3d后,取出组培苗,用清水冲干净根部残余培养基,修剪不健
康的根和枯黄的叶片,放入水中水培20d。
11移栽
11.1移栽准备
将草炭土和蛭石按体积比3:1混合,装入50孔的穴盘中,压实。穴孔的尺寸为540mm×280mm。
将穴盘浸入0.5 g/L的多菌灵溶液中消毒备用。
11.2移栽方法
取出水培的组培苗,轻度修剪不健康的根和枯黄的叶片,移栽至育苗盘中。
11.3移栽后管理
移栽初期,保持空气湿度≥85%,适时浇水,保持基质湿润,温度控制在18℃~25℃。生长期每2
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