新冠核酸检测测试(附参考答案)

新冠核酸检测测试(附参考答案)一、单项选择题（每题1分，共30分）1.新冠病毒核酸检测中，常用的咽拭子采集部位是A.舌根B.扁桃体隐窝C.软腭D.硬腭参考答案：B2.在荧光定量PCR中，Ct值与病毒载量的关系是A.Ct值越高，病毒载量越高B.Ct值越低，病毒载量越高C.Ct值与病毒载量无关D.Ct值与病毒载量呈线性负相关参考答案：B3.下列哪种试剂可用于病毒RNA的逆转录A.TaqDNA聚合酶B.MMLV逆转录酶C.T4DNA连接酶D.碱性磷酸酶参考答案：B4.新冠病毒ORF1ab基因编码的蛋白主要功能是A.核衣壳蛋白B.刺突蛋白C.非结构蛋白多聚体D.膜蛋白参考答案：C5.荧光定量PCR中，FAM通道检测的靶基因通常是A.E基因B.N基因C.ORF1abD.S基因参考答案：A6.采集咽拭子后，若不能立即检测，标本应暂存于A.4℃，24小时内B.−20℃，72小时内C.−70℃，长期D.室温，2小时内参考答案：A7.下列哪项不是核酸检测假阴性的常见原因A.采样不足B.运输温度过高C.扩增仪光源老化D.内标扩增失败参考答案：D8.新冠病毒核酸检测实验室分区中，试剂配制应在A.一区B.二区C.三区D.四区参考答案：A9.荧光定量PCR中，ROX染料的作用是A.标记探针B.校正荧光信号基线C.抑制引物二聚体D.增强Taq酶活性参考答案：B10.下列哪种情况需复检并重新采样A.单靶标阳性，Ct=38.5B.双靶标阳性，Ct=32C.内标阴性，靶标阴性D.内标阳性，靶标阴性参考答案：C11.新冠病毒核酸检测结果报告时限原则上为A.2小时B.6小时C.12小时D.24小时参考答案：B12.下列哪项属于核酸检测室内质控的“弱阳性质控”A.仅含内标B.仅含阴性质控品C.病毒RNA浓度102copies/mLD.病毒RNA浓度106copies/mL参考答案：C13.荧光定量PCR中，熔解曲线分析主要用于A.判定扩增效率B.识别非特异性扩增C.计算拷贝数D.校正基线参考答案：B14.新冠病毒N基因编码的蛋白功能为A.与病毒RNA结合形成核衣壳B.介导膜融合C.构成包膜D.抑制宿主干扰素参考答案：A15.下列哪项操作可降低气溶胶污染风险A.扩增后开盖加样B.一区与三区共用移液器C.使用UNG酶体系D.增加循环数至50参考答案：C16.核酸检测中，内标推荐采用A.人工合成RNAB.灭活病毒C.质粒DNAD.宿主基因RNaseP参考答案：D17.下列哪项不是新冠病毒变异株检测的常用方法A.全基因组测序B.荧光PCR熔解曲线C.高分辨率熔解曲线D.抗原胶体金参考答案：D18.咽拭子采样时，拭子应擦拭A.两侧扁桃体及后壁各3次B.舌面1次C.牙齿表面D.颊黏膜参考答案：A19.下列哪项属于核酸检测后污染A.标本间交叉B.扩增产物泄漏C.采样不足D.RNA降解参考答案：B20.新冠病毒核酸检测中，推荐使用的核酸提取方法是A.酚氯仿法B.柱提法C.磁珠法D.煮沸法参考答案：C21.荧光定量PCR中，标准曲线R²值应A.≥0.95B.≥0.85C.≥0.75D.≥0.65参考答案：A22.下列哪项不是核酸检测报告必须包含的内容A.检测方法B.标本类型C.采样时间D.患者体重参考答案：D23.新冠病毒核酸检测实验室生物安全级别应为A.BSL1B.BSL2C.BSL3D.BSL4参考答案：B24.下列哪项可导致Ct值偏高A.模板浓度过高B.引物浓度过低C.退火温度过高D.探针浓度过高参考答案：B25.新冠病毒核酸检测中，推荐使用的扩增片段长度A.<100bpB.100–200bpC.500–1000bpD.>2000bp参考答案：B26.下列哪项属于核酸检测室外质控A.阳性质控品B.阴性质控品C.室间质评样本D.内标参考答案：C27.荧光定量PCR中，基线期荧光信号应A.指数增长B.平台期C.平坦或轻微波动D.急剧下降参考答案：C28.新冠病毒核酸检测中，若仅N基因阳性，ORF1ab阴性，应A.报告阳性B.报告阴性C.复检并重新采样D.报告可疑参考答案：C29.下列哪项不是核酸检测实验室必备设备A.生物安全柜B.高速冷冻离心机C.荧光定量PCR仪D.紫外可见分光光度计参考答案：D30.新冠病毒核酸检测中，RNA提取后应在几小时内完成逆转录A.1B.2C.4D.24参考答案：B二、多项选择题（每题2分，共20分）31.下列哪些属于新冠病毒核酸检测靶基因A.ORF1abB.E基因C.N基因D.S基因参考答案：ABC32.可导致核酸检测假阳性的因素有A.实验室污染B.引物二聚体C.标本间交叉D.采样不足参考答案：ABC33.荧光定量PCR体系组成包括A.引物B.探针C.dNTPD.逆转录酶参考答案：ABCD34.下列哪些属于核酸检测质量控制措施A.内标监测B.阳性质控C.阴性质控D.室间质评参考答案：ABCD35.新冠病毒核酸检测实验室分区包括A.试剂准备区B.标本制备区C.扩增区D.产物分析区参考答案：ABCD36.下列哪些情况需重新采样A.咽拭子干燥B.标本管无标签C.运输温度>8℃超过24hD.血量>1mL参考答案：ABC37.荧光定量PCR中，影响扩增效率的因素有A.引物二聚体B.模板降解C.Mg²⁺浓度D.探针荧光淬灭参考答案：ABCD38.下列哪些属于新冠病毒变异株关注株（VOC）A.AlphaB.BetaC.GammaD.Delta参考答案：ABCD39.核酸检测报告审核需关注A.质控结果B.Ct值C.标本信息D.临床诊断参考答案：ABCD40.下列哪些属于个人防护装备A.N95口罩B.护目镜C.双层手套D.防水隔离衣参考答案：ABCD三、判断题（每题1分，共10分）41.新冠病毒为单股正链RNA病毒。参考答案：√42.荧光定量PCR中，Ct值与起始模板量呈线性正相关。参考答案：×43.咽拭子采集后可常温保存48小时。参考答案：×44.核酸检测实验室三区可共用冰箱。参考答案：×45.内标失败必须复检。参考答案：√46.荧光探针5′端标记荧光基团，3′端标记淬灭基团。参考答案：√47.新冠病毒E基因比ORF1ab基因更保守。参考答案：√48.核酸检测结果阴性可完全排除感染。参考答案：×49.扩增产物开盖操作应在生物安全柜内进行。参考答案：√50.磁珠法提取RNA无需使用异丙醇沉淀。参考答案：√四、填空题（每空1分，共20分）51.新冠病毒核酸检测主要采用________技术。参考答案：荧光定量RTPCR52.咽拭子采集后应置于________保存液中。参考答案：病毒运送53.荧光定量PCR中，阈值线通常设定为基线荧光信号标准偏差的________倍。参考答案：1054.新冠病毒基因组全长约________kb。参考答案：3055.核酸检测实验室应至少划分________个区域。参考答案：356.荧光探针水解依赖________酶的5′→3′外切活性。参考答案：Taq57.弱阳性质控品浓度通常为________copies/mL。参考答案：1×10²–1×10³58.标本运输温度应为________℃。参考答案：2–859.核酸检测结果应在________小时内报告。参考答案：660.新冠病毒N蛋白主要与________结合。参考答案：病毒RNA61.荧光定量PCR标准曲线斜率理想值为________。参考答案：−3.3262.扩增效率理想范围为________%。参考答案：90–11063.新冠病毒变异株检测金标准为________。参考答案：全基因组测序64.核酸检测实验室空气流向应为________。参考答案：单向负压65.个人防护装备脱卸顺序应遵循________原则。参考答案：由外向内、由上向下66.荧光定量PCR中，ROX属于________染料。参考答案：被动参考67.新冠病毒核酸检测靶基因E基因全长________bp。参考答案：7768.磁珠法提取RNA最后一步洗脱体积通常为________μL。参考答案：50–10069.核酸检测阴性质控应每批至少________份。参考答案：170.新冠病毒核酸检测标本类型不包括________。参考答案：汗液五、简答题（每题10分，共30分）71.简述新冠病毒核酸检测假阴性常见原因及改进措施。参考答案：1.采样不足：规范采样培训，确保拭子擦拭双侧扁桃体及后壁各3次，停留≥10秒。2.运输不当：标本采集后2–8℃运输，4小时内送检；无法及时检测则−70℃冻存。3.提取失败：使用磁珠法并带内标监控；提取试剂批间验证；定期维护设备。4.抑制物残留：稀释模板或采用柱纯化；加入内标监测抑制。5.病毒变异：定期更新引物探针，覆盖保守区；采用多靶标检测。6.实验操作：分区管理，防止污染；定期校准移液器与PCR仪；规范人员操作。72.描述荧光定量PCR标准曲线制备步骤及质量评价指标。参考答案：步骤：1.合成含靶序列的质粒或体外转录RNA，测定浓度并换算拷贝数。2.10倍梯度稀释，制备10⁶–10¹copies/μL系列。3.每个梯度设3复孔，加入相同体积至PCR体系。4.运行PCR，记录Ct值。5.以log₁₀(拷贝数)为横坐标，Ct值为纵坐标，线性回归得标准曲线。指标：1.R²≥0.995。2.斜率−3.1至−3.8，对应效率90–110%。3.Y轴截距与理论值偏差<0.5Ct。4.复孔CV<5%。5.阴性对照无扩增。73.概述新冠病毒核酸检测实验室生物安全管理要点。参考答案：1.实验室分级：按BSL2管理，明确分区标识与流向。2.人员培训：岗前考核，定期演练，掌握穿脱流程与应急处理。3.个人防护：N95口