5年（2021-2025）湖北高考生物真题分类汇编：专题09 生物技术与工程（原卷版）

专题09生物技术与工程

考点5年考情（2021-2025）命题趋势

从近五年湖北省高考试题来

考点1发酵工程2024、2022、2021看，发酵工程主要考察微生物的接

种方法、果酒和果醋的制作原理、

泡菜的腌制等。细胞工程主要考察

考点基因工程、、、

22025202320222021植物体细胞杂交技术、植物组织的

培养及基本过程、动物细胞培养技

术等。在最近的高考中，这些考点

考点3细胞工程2025、2024、2023、2022、2021

常在选择题中进行考查。基因工程

中，基因表达载体的构建、PCR扩

增的原理与过程这些考点常在非

考点4胚胎工程2024、

选择题中出现。

考点01发酵工程

1、（2024·湖北·高考真题）制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常用于食

用醋的发酵。下列叙述错误的是（）

A．食用醋的酸味主要来源于乙酸B．醋酸菌不适宜在无氧条件下生存

C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内

2、（2022·湖北·高考真题）废水、废料经加工可变废为宝。某工厂利用果糖生产废水和沼气池废料生产蛋白

质的技术路线如图所示。下列叙述正确的是（）

A．该生产过程中，一定有气体生成

B．微生物生长所需碳源主要来源于沼气池废料

C．该生产工艺利用微生物厌氧发酵技术生产蛋白质

D．沼气池废料和果糖生产废水在加入反应器之前需要灭菌处理

3、（2021·湖北·高考真题）中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（）

A．泡菜制作过程中，酵母菌将葡萄糖分解成乳酸

B．馒头制作过程中，酵母菌进行呼吸作用产生CO2

C．米酒制作过程中，将容器密封可以促进酵母菌生长

D．酸奶制作过程中，后期低温处理可产生大量乳酸杆菌

考点02基因工程

1、（2023·湖北·高考真题）用氨苄青霉素抗性基因（AmpR）、四环素抗性基因（TetR）作为标记基因构建的质

粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体（重组质粒），

并转化到受体菌中。下列叙述错误的是（）

A．若用HindⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同

B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet（四环素）培养基中的菌落，不一定含有目的基因

C．若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否

D．若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp（氨苄青霉素）和Tet的培养基中能形成菌落

2、（2021·湖北·高考真题）限制性内切酶EcoRI识别并切割双链DNA，用EcoRI完全酶

切果蝇基因组DNA，理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为（）

A．6B．250C．4000D．24000

3、（2021·湖北·高考真题）某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带（引物与模板

完全配对）外，还有2条非特异条带（引物和模板不完全配对）。为了减少反应非特异条带的产生，以下措

施中有效的是（）

A．增加模板DNA的量B．延长热变性的时间

C．延长延伸的时间D．提高复性的温度

4、（2025·湖北·高考真题）某种昆虫病毒的遗传物质为双链环状DNA．该病毒具有包膜结构，包膜上的蛋白

A与宿主细胞膜上的受体结合后，两者的膜发生融合，从而使病毒DNA进入细胞内进行自我复制。回答下

列问题：

(1)要清楚观察病毒的形态结构需要使用的显微镜类型是。

(2)体外培养的梭形昆虫细胞，被上述病毒感染后会转变为圆球形，原因是病毒感染引起了昆虫细胞内

（填细胞结构名称）的改变。

(3)这类病毒的基因组中通常含有抗细胞凋亡的基因，这类基因对病毒的生物学意义是：。

(4)该病毒DNA能在宿主细胞中自我复制，却无法在大肠杆菌中复制。为解决这一问题，可在该病毒的DNA

中插入序列，以实现利用大肠杆菌扩增该病毒DNA的目的。

(5)用该病毒感染哺乳动物细胞，可以在细胞内检测到该病毒完整的基因组DNA，但无对应的转录产物。推

测其无法转录的原因是：。

(6)采用脂溶剂处理该病毒颗粒可使病毒失去对宿主细胞的感染性，其原因是：。

5、（2025·湖北·高考真题）治疗疟疾的药物青蒿素主要从植物黄花蒿中提取，但含量低。为培育青蒿素含量

高的黄花蒿新品种，科研工作者开展了相关研究，发现青蒿素主要在叶片的腺毛中合成与积累，并受到如

水杨酸（SA）和茉莉酸甲酯（MeJA）等植物激素的调节。研究表明，SA和MeJA通过调控miR160的表达量

（miR160是一种微小RNA，能与靶mRNA结合，引起后者降解），影响黄花蒿腺毛密度和青蒿素含量。miR160

的一种靶mRNA编码ARFI蛋白，该蛋白影响青蒿素合成关键酶基因DBR2的表达。研究结果如图所示。

回答下列问题：

(1)青蒿素主要在叶片的腺毛中合成与积累，其根本原因是：。

(2)据图分析可知，miR160的表达量与青蒿素含量间呈现相关性，并且可以推测外源MeJA处理

对青蒿素含量的影响是：。

(3)基于上述材料，miR160通过直接影响，调控青蒿素的合成。

(4)请写出SA、ARF1、miR160和DBR2调控青蒿素生物合成的通路（用“→”表示促进，用“—|”表示抑制，显

示各成员间的调控关系）：。

(5)请根据上述材料，提出一种培育青蒿素含量高的黄花蒿新品种的思路：。

6、（2022·湖北·高考真题）“端稳中国碗，装满中国粮”，为了育好中国种，科研人员在杂交育种与基因工程

育种等领域开展了大量的研究。二倍体作物M的品系甲有抗虫、高产等多种优良性状，但甜度不高。为了

改良品系甲，增加其甜度，育种工作者做了如下实验；

【实验一】遗传特性及杂交育种的研究

在种质资源库中选取乙、丙两个高甜度的品系，用三个纯合品系进行杂交实验，结果如下表。

杂交组合F1表现型F2表现型

甲×乙不甜1/4甜、3/4不甜

甲×丙甜3/4甜，1/4不甜

乙×丙甜13/16甜、3/16不甜

【实验二】甜度相关基因的筛选

通过对甲、乙、丙三个品系转录的mRNA分析，发现基因S与作物M的甜度相关。

【实验三】转S基因新品系的培育

提取品系乙的mRNA，通过基因重组技术，以Ti质粒为表达载体，以品系甲的叶片外植体为受体，培有出

转S基因的新品系。

根据研究组的实验研究，回答下列问题：

(1)假设不甜植株的基因型为AAbb和Aabb，则乙、丙杂交的F2中表现为甜的植株基因型有种。品系乙

基因型为。若用乙×丙中F2不甜的植株进行自交，F3中甜∶不甜比例为。

(2)下图中，能解释（1）中杂交实验结果的代谢途径有。

(3)如图是S基因的cDNA和载体的限制性内切核酸酶（限制性核酸内切酶）酶谱。为了成功构建重组表达载

体，确保目的基因插入载体中方向正确，最好选用酶切割S基因的cDNA和载体。

(4)用农杆菌侵染品系甲叶片外植体，其目的是。

(5)除了题中所示的杂交育种和基因工程育种外，能获得高甜度品系，同时保持甲的其他优良性状的育种方

法还有（答出2点即可）。

7、（2023·湖北·高考真题）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制

备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。

回答下列问题：

(1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）（填“需要”或“不需要”）通过原代培养

扩大细胞数量；添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是。

(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对和生

长具有抑制作用。

(3)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是。

(4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是。

考点03细胞工程

1、（2025·湖北·高考真题）水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲

生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮

的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是（）

转速（r/min）55657585

相对生长速

0.210.250.260.25

率

细胞干重

7.59.711.49.5

（g/L）

黄酮产量

0.20.270.320.25

（g/L）

A．黄酮产量与细胞干重呈正相关

B．黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的

C．氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的

D．转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累

2、（2025·湖北·高考真题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫苗，具有标准化、产量高等优点。

但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成

功获得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——XF06.下列叙述错误的是（）

A．XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率

B．细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染所导致

C．可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒

D．采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染

3、（2024·湖北·高考真题）植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细

胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（）

A．过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异

B．过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合

C．过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素

D．可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株

4、（2024·湖北·高考真题）糖尿病是危害人类健康的主要疾病之一。恢复功能性胰岛B细胞总量是治疗糖尿

病的重要策略。我国学者研究发现，向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受体单克隆抗体（mAb），可以促

进胰岛A细胞增殖，诱导少数胰岛A细胞向胰岛B细胞转化，促进功能性胰岛B细胞再生。根据上述实验

结果，下列叙述错误的是（）

A．mAb的制备可能涉及细胞融合技术

B．注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量

C．mAb和胰高血糖素均能与胰高血糖素受体特异性结合

D．胰高血糖素主要通过促进肝糖原分解和非糖物质转化为糖，升高血糖水平

5、（2023·湖北·高考真题）栽培稻甲产量高、品质好，但每年只能收获一次。野生稻乙种植一次可连续收获

多年，但产量低。中国科学家利用栽培稻甲和野生稻乙杂交，培育出兼具两者优点的品系丙，为全球作物

育种提供了中国智慧。下列叙述错误的是（）

A．该成果体现了生物多样性的间接价值

B．利用体细胞杂交技术也可培育出品系丙

C．该育种技术为全球农业发展提供了新思路

D．品系丙的成功培育提示我们要注重野生种质资源的保护

6、（2022·湖北·高考真题）灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（）

A．动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行

B．微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染

C．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌

D．可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌

7、（2022·湖北·高考真题）某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代神经元生长

缓慢，其原因不可能的是（）

A．实验材料取自小鼠胚胎的脑组织B．为了防止污染将培养瓶瓶口密封

C．血清经过高温处理后加入培养基D．所使用的培养基呈弱酸性

8、（2021·湖北·高考真题）自青霉素被发现以来，抗生素对疾病治疗起了重要作用。目前抗生素的不合理使

用已经引起人们的关注。下列关于抗生素使用的叙述，正确的是（）

A．作用机制不同的抗生素同时使用，可提高对疾病的治疗效果

B．青霉素能直接杀死细菌，从而达到治疗疾病的目的

C．畜牧业中为了防止牲畜生病可大量使用抗生素

D．定期服用抗生素可预防病菌引起的肠道疾病

9、（2021·湖北·高考真题）月季在我国享有“花中皇后”的美誉。为了建立月季某新品种的快速繁殖体系，以

芽体为外植体，在MS培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA进行芽体增殖实验，芽分化率（%）结果如表。

IBA/（mg·L-1）

6-BA/（mg·L-1）

0．10．20．30．40．5

1．03163584941

2．04095766950

3．03775645441

4．02535313025

5．08211284

关于上述实验，下列叙述错误的是（）

A．6-BA浓度大于4．0mg·L-1时，芽分化率明显降低

B．6-BA与IBA的比例为10：1时芽分化率均高于其他比例

C．在培养基中同时添加适量的6-BA和IBA，可促进芽分化

D．2．0mg·L-16-BA和0．2mg·L-1IBA是实验处理中芽分化的最佳组合

考点04胚胎工程

1、（2024·湖北·高考真题）波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产

中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（）

A．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理

B．胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测

C．普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体

D．生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选

2、（2024·湖北·高考真题）研究者探究不同浓度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精卵在体外发育的影响，实

验结果如下表所示。根据实验数据，下列叙述错误的是（）

甲的浓度（μg/mL）卵母细胞（个）第一极体排出（个）成熟率（%）卵裂数（个）卵裂率（％）

01067066.02840.0

11207965.84658.2

101135346.91528.3

1001124842.8510.4

A．实验结果说明甲抑制卵裂过程

B．甲浓度过高抑制第一极体的排出

C．添加1μg/mL的甲可提高受精后胚胎发育能力

D．本实验中，以第一极体的排出作为卵母细胞成熟的判断标准

3、（2021·湖北·高考真题）植物的有性生殖过程中，一个卵细胞与一个精子成功融合后通常不再与其他精子

融合。我国科学家最新研究发现，当卵细胞与精子融合后，植物卵细胞特异表达和分泌天冬氨酸蛋白酶ECS1

和ECS2。这两种酶能降解一种吸引花粉管的信号分子，避免受精卵再度与精子融合。下列叙述错误的是（）

A．多精入卵会产生更多的种子

B．防止多精入卵能保持后代染色体数目稳定

C．未受精的情况下，卵细胞不分泌ECS1和ECS2

D．ECS1和ECS2通过影响花粉管导致卵细胞和精子不能融合

一、单选题

1．（2025·湖北襄阳·三模）下列关于果酒、果醋和泡菜的说法，错误的是（）

A．因乙醇为挥发性物质，发酵时进气量不宜太大

B．先制酒后制醋，后期需要升高发酵温度，醋酸菌的代谢类型是异养需氧型

C．制作泡菜的过程中亚硝酸盐的含量先升高后下降最后趋于稳定

D．制作泡菜时加工好的蔬菜不能装满瓶子，泡菜液应没过原料，密封阴凉处发酵7~10d

2．（2025·湖北武汉·三模）谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，通过以下代谢途径发酵生产L—谷氨酰胺。

下列叙述正确的是（）

A．提高谷氨酸脱氢酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L—谷氨酰胺产量

B．发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L—谷氨酰胺产量

C．通过稀释涂布平板法，不能判断发酵过程中是否发生球状细菌污染

D．发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品

3．（2025·湖北黄冈·三模）醪糟是糯米经蒸煮后，接种根霉，在有氧条件下，发酵生产的含低浓度酒精和不

同糖分的食品。根霉生长时会产生大量的淀粉酶，淀粉酶可将糯米中的淀粉水解成葡萄糖，同时根霉会利

用部分葡萄糖发酵产生酒精。使用不同的根霉菌种，可以生产不同酒精度和不同香味的醪糟。下列说法错

误的是（）

A．根霉菌有氧呼吸的场所为细胞质基质和线粒体

B．较之酵母菌，根霉菌优势表现为直接利用淀粉为碳源进行发酵

C．不同的根霉菌种代谢途径存在差异，从而形成不同的风味物质

D．由酵母菌酿酒转为醋酸菌酿醋时，需要适当降低发酵温度

4．（2025·湖北·三模）醪糟因其味醇香、柔美，酒精浓度低，深受人们喜爱。家庭制作醪糟的流程为：糯米

浸泡→蒸熟放置自然凉，加入酵母菌、乳酸菌等微生物→放入消毒容器→中间挖洞密封容器→32℃、48h制

成醪糟。下列叙述正确的是（）

A．发酵容器密封的目的是抑制乳酸菌的无氧呼吸

B．酵母菌将丙酮酸分解成酒精的过程会产生少量ATP

C．中间的洞中会先出现水是酵母菌进行有氧呼吸产生了水

D．将发酵温度从32℃提高到40℃后可明显缩短发酵的时长

5．（2025·湖北·模拟预测）某生物兴趣小组利用下图所示的发酵罐进行葡萄酒发酵主要过程的研究。下列关

于该发酵的叙述，正确的是（）

A．培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌

B．发酵过程中不断搅拌，其目的仅是增加溶氧量

C．大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成

D．正常发酵过程中，发酵罐内的压力与大气压相等

6．（2025·湖北黄冈·二模）人们根据微生物生长和代谢特征，在适宜的条件下，利用微生物将一些原料转化

为人类所需要的产物。下列有关说法正确的是（）

A．制作啤酒时，主发酵后需要进行灭菌，延长啤酒保存期

B．制作腐乳时，酵母和毛霉分泌相关酶的过程需要转运蛋白的参与

C．在青贮饲料中添加乳酸菌可以提高饲料品质、使饲料保鲜等

D．利用转抗乙型肝炎病毒抗体基因的工程菌，可大量生产乙型肝炎疫苗

7．（2025·湖北黄冈·二模）实验中常根据菌落特征（性状、大小和颜色等）鉴别微生物，进而对实验结果做

出判断，下列实验是根据菌落特征做出判断的是（）

A．利用刚果红作指示剂筛选纤维素分解菌

B．使用酸碱指示剂筛选产酸量高的黑曲霉菌

C．筛选Ti质粒T-DNA中是否插入了目的基因（抗虫基因）的农杆菌

D．判断以烃类为唯一碳源的琼脂培养基上生长的石油降解菌是否有不同种类

8．（2025·湖北襄阳·一模）单细胞蛋白即微生物菌体，是一种新型的蛋白质来源，利用发酵工程能提高其产

量和品质。下列叙述不合理的是（）

A．可通过基因工程定向改造微生物来培育优良菌种

B．单细胞蛋白发酵常以淀粉或纤维素水解液、制糖工业的废液等为原料

C．青贮饲料添加酵母菌可以提高饲料品质及动物的免疫力

D．发酵结束后可采用过滤、沉淀、干燥等方法获得菌体

9．（2025·湖北十堰·三模）传统发酵技术在我国已有几千年的历史，可以用于腐乳、酸奶、酱油、醋、泡菜

和豆豉等的制作。下列有关叙述错误的是（）

A．缺少糖源时，醋酸菌可直接利用乙醇转化为乙醛并最终生成乙酸

B．传统发酵技术可以直接利用原材料中天然存在的微生物

C．在一段时间内，果醋和果酒的制作过程中发酵液的pH均会逐渐降低

D．酸奶发酵所需的乳酸菌是厌氧型微生物，在空气和动植物体表面无法存活

10．（2025·湖北·二模）细菌培养常用牛肉膏蛋白胨培养基，酵母菌培养常用马铃薯琼脂培养基。下列有关

细菌和酵母菌纯培养实验的叙述正确的是（）

A．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃

B．酵母菌培养基通常比细菌培养基有更高的碳氮比

C．制备培养基的步骤为配制培养基→倒平板→灭菌

D．可用血细胞计数板测定酵母菌和细菌的种群数量

11．（2025·湖北襄阳·三模）超低温冷冻脱毒法是先用超低温对细胞进行选择性破坏，再对存活的细胞利用

组织培养技术培育为脱毒植株。以马铃薯茎尖为材料，采用超低温冷冻脱毒法可获得脱毒苗。下列叙述错

误的是（）

A．用茎尖能够获得脱毒苗的原因是植物顶端分生区病毒极少或无病毒

B．该方法利用了茎尖分生组织无成熟液泡不易形成冰晶，细胞结构不易被破坏的特点

C．利用射线或化学物质等处理被病毒感染的植株也是一种获得作物脱毒苗的方法

D．经超低温冷冻脱毒培养的马铃薯不一定比未脱毒的马铃薯抗病毒能力更强

12．（2025·湖北·三模）长春新碱是长春花植物体内产生的一种双吲哚类代谢物，具有显著的抗癌活性，科

学家利用长春花植物的茎尖作为外植体，通过植物细胞培养生产长春新碱。下列叙述正确的是（）

A．利用植物细胞工程获得长春新碱的过程中，没有体现细胞的全能性

B．长春新碱是植物产生的初生代谢物，不是植物生命活动所必需的

C．用纤维素酶和果胶酶处理长春花的茎尖，以获得单个细胞或细胞团

D．为避免杂菌污染，需要用酒精和盐酸对长春花的茎尖进行消毒处理

13．（2025·湖北·三模）利用植物体细胞杂交技术可以打破远缘杂交不亲和性，能获得同时产生两种植物有

效成分的杂种细胞。据图分析，下列叙述正确的是（）

A．一个植物细胞就是一个原生质体

B．图中过程②可形成两种融合细胞

C．图中过程③为脱分化过程，需要光照

D．愈伤组织需要经过再分化过程才能形成杂种植株

14．（2025·湖北·模拟预测）改良水稻的株高和产量性状是实现袁隆平先生“禾下乘凉梦”的一种可能途径。研

究人员克隆了可显著增高和增产的eui基因并开展探索，部分实验步骤如图所示。下列叙述错误的是（）

A．b经秋水仙素处理后，自交后代会发生性状分离

B．一般脱分化过程不需要光照，再分化过程需要光照

C．通过PCR技术鉴定d是否含有eui基因

D．d经鉴定后应侵染a以获得转基因再生植株

15．（2025·湖北·一模）科研人员利用育种手段得到两种烟草突变体，其与野生型性状差异如下：甲的叶肉

细胞缺乏硝酸还原酶，无法在硝酸盐环境下生存；乙的根细胞对卡那霖素敏感。利用两种突变体进行体细

胞杂交，以获得杂种细胞。为筛选融合成功的杂种细胞，下列叙述正确的是（）

A．该过程体现了植物细胞具有全能性

B．使用胰蛋白酶和胶原蛋白酶处理细胞以获得原生质体

C．可用含硝酸盐和卡那霉素的基本培养基进行筛选

D．可用不含硝酸盐但含卡那霉素的选择培养基

16．（2025·湖北·三模）科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，并利用其乳腺生产人生

长激素。为加速转基因奶牛的繁育，通过体细胞核移植技术对该转基因奶牛进行克隆。下列有关叙述正确

的是（）

A．从卵巢中取出的卵母细胞可以直接进行去核操作

B．可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合

C．为获得雌性犊牛，胚胎移植前需要进行性别鉴定

D．克隆得到的犊牛与转基因奶牛的遗传物质完全相同

17．（2025·湖北·三模）我国科学家利用如图所示的方法成功培育出体细胞克隆猴“中中”和“华华”。据图分析，

下列叙述错误的是（）

A．卵母细胞去核指的是去除纺锤体-染色体复合物

B．可用紫外线短时间照射破坏卵母细胞核，达到去核目的

C．桑葚胚、囊胚这些早期胚胎都未分化，常用于胚胎移植

D．“中中”“华华”诞生的生殖方式属无性生殖

18．（2025·湖北·二模）胚胎移植是医学和农业生产上应用较多的胚胎工程技术。下列生物技术需用到胚胎

移植的是（）

①体细胞核移植②胚胎分割③培育转基因动物④动物细胞培养⑤动物细胞融合

A．①②③B．②③④C．①③④D．②③⑤

19．（2025·湖北黄冈·二模）HER2是在胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞中特异性表达的膜蛋白。药物DM1能破坏细

胞骨架，临床上用靶向HER2的抗体-药物偶联物（T-DM1）治疗癌症，其中抗HER2抗体可通过杂交瘤细胞

制备。下列说法错误的是（）

A．HER2是胃癌、乳腺癌等肿瘤细胞的分子标签

B．T-DM1最终依靠抗体破坏肿瘤细胞的细胞骨架

C．用带标记的HER2对克隆化培养的细胞所产生的抗体进行检测

D．T-DM1能特异性识别并抑制胃癌、乳腺癌细胞的增殖

20．（2025·湖北·模拟预测）小鼠细胞有两条合成DNA的途径。主要途径是在细胞内由氨基酸和其他小分子

化合物合成核苷酸，进而合成DNA，氨基蝶呤是该途径的拮抗剂；另一途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷

存在的情况下，经HGPRT和TK两种酶的作用合成DNA。骨髓瘤细胞缺乏HGPRT和TK基因。基于以上原

理，研究人员配制HAT培养基用于单克隆抗体制备过程中杂交瘤细胞的筛选。下列叙述正确的是（）

A．HAT培养基中的成分应包括氨基蝶呤、次黄嘌呤、胸腺嘧啶核苷等

B．与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞需要通过培养以增加细胞数量

C．对经HAT培养基筛选得到的杂交瘤细胞进行细胞培养即可生产单克隆抗体

D．若小鼠曾接触过多种抗原，则将影响制备的单克隆抗体的纯度

21．（2025·湖北武汉·二模）抗体药物偶联物（ADC）是一种由单克隆抗体、细胞毒性药物和接头偶联而成的

靶向抗癌药物。ADC进入体内后，与肿瘤抗原形成ADC-抗原复合物，进入肿瘤细胞，释放药物发挥作用导

致肿瘤细胞死亡。下列叙述错误的是（）

A．ADC识别抗原后，ADC-抗原复合物通过胞吞进入靶细胞内部

B．DNA抑制剂类靶向抗癌药物导致肿瘤细胞死亡属于细胞坏死

C．来自溶酶体的酶特异性地水解接头从而释放出细胞毒性药物

D．靶向同一抗原上不同位点的双特异性ADC可以提高治疗效果

22．（2025·湖北·一模）诱导多能干细胞（iPSC）可分化成类似间充质干细胞（iMSC）。iMSC能合成和分泌Ⅴ

蛋白，用于治疗骨关节炎等疾病。下列叙述错误的是（）

A．可用病毒作为载体将某些基因转入小鼠成纤维细胞以诱导产生iPSC

B．iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSC

C．利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细胞，并添加V蛋白

D．iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、PH、渗透压和气体环境等条件

23．（2025·湖北武汉·模拟预测）牦牛胚胎移植过程中，发情处理方式会影响移植的成功率。实验受体母牛

均植入一个胚胎，统计结果如下表所示。其中自然发情是指牦牛繁殖季节未经外源激素处理而发情的受体

母牛。下列叙述正确的是（）

受体母牛数（头）妊娠数（头）

同期发情4019

自然发情3118

A．同期发情和超数排卵都提高了供体母牛的排卵数

B．与同期发情相比，自然发情提高了胚胎移植的成功率

C．移植胚胎的发育阶段是本实验无关变量，均应选用原肠胚

D．外源胚胎产生免疫排斥导致受体母牛不能实现全部妊娠

24．（2025·湖北·二模）我国的试管婴儿技术已经发展到第三代，技术成熟且效果显著，为许多不孕不育患

者实现了做父母的心愿。下列相关叙述正确的是（）

A．女性在取卵前可以注射促性腺激素促进自身超数排卵

B．采集来的卵母细胞和精子可以直接用于体外受精

C．胚胎移植前应选取囊胚的内细胞团细胞进行遗传病基因检测

D．为避免免疫排斥反应，胚胎移植前应对母亲注射免疫抑制剂

25．（2025·湖北武汉·一模）胚胎工程是一种重要的现代生物技术，能为优良牲畜的大量繁殖、稀有动物的

种族延续提供有效解决办法。下列叙述正确的是（）

A．试管动物技术包括体外受精、胚胎培养胚胎移植等环节

B．同期发情处理的对象是优良的供体母畜和优良的供体公畜

C．超数排卵处理的目的是让受体母畜排出更多成熟的卵子

D．为获得更多成活的克隆个体，需尽可能多次分割早期胚胎

26．（2025·湖北襄阳·三模）人体内一些正常或异常细胞脱落破碎后，其DNA会以游离的形式存在于血液中，

称为cfDNA；胚胎在发育过程中也会有细胞脱落破碎，其DNA进入孕妇血液中，称为cffDNA。近几年，结

合DNA测序技术，cfDNA和cffDNA在临床上得到了广泛应用。下列说法错误的是（）

A．可通过检测cfDNA中的相关基因进行癌症的筛查

B．提取cfDNA进行基因修改后直接输回血液可用于治疗遗传病

C．胚胎在发育过程中细胞脱落破碎属于细胞凋亡

D．孕妇血液中的cffDNA可以用于某些遗传病的产前诊断

27．（2025·湖北黄冈·三模）研究发现，HIV通过细胞膜上的A蛋白侵染人体细胞，同时发现若A基因缺失了

32个特定碱基对会导致A蛋白异常，从而aa个体天然免疫HIV。现为了快速辨别甲、乙、丙个体的基因型，

用引物F和R分别对三人的基因组进行PCR，每组PCR产物都分为两份，一份直接电泳，一份用ApoI酶切

割后电泳，结果如图所示。下列叙述错误的是（）

A．2号加样孔中的样品均为PCR产物直接电泳结果

B．乙个体两个加样孔条带一致可能是ApoI酶失活导致

C．测序比对3和4号条带可获得a基因缺失的序列

D．DNA分子迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小等有关

28．（2025·湖北黄冈·二模）研究人员将目的基因插入质粒，构建重组质粒的过程如图所示，再将该重组质

粒导入大肠杆菌中。由β—半乳糖苷酶基因编码产生的β—半乳糖苷酶可分解X—gal产生蓝色物质，使菌落

呈蓝色，否则菌落为白色。下列叙述正确的是（）

A．将目的基因插入质粒中时，需要用到的酶有XhoI、NheI和DNA聚合酶

B．大肠杆菌被导入重组质粒前需用Ca2+处理大肠杆菌，使其细胞壁软化

C．将按图示构建的重组质粒导入大肠杆菌后，大肠杆菌不能表达该目的基因

D．在含有X—gal和四环索的培养基上形成的蓝色菌落就是含重组质粒的大肠杆菌

29．（2025·湖北襄阳·一模）以T-DNA作载体将某突变基因导入拟南芥的染色体DNA时，可出现三种结果：

仍为野生型（导入失败）、突变杂合子（在一对同源染色体上只导入1个突变基因）及突变纯合子。研究人

员用引物LP、RP和BP对上述三种拟南芥进行核酸电泳检测，结果如下图。下列说法正确的是（）

A．PCR时，核糖核苷酸最初添加在引物的3＇端

B．根据电泳结果推断模板链过长时无PCR产物

C．甲为突变纯合子

D．丙自交后代的核酸电泳结果与丙相同

30．（2025·湖北·模拟预测）欲获得H基因条件敲除（机制如图）的纯合小鼠，科学家先构建以下小鼠：在H

基因前后均插入LX序列突变成h基因（仍正常表达H蛋白），获得Hh雌性小鼠；将噬菌体的G酶基因插入

6号染色体上，获得G+G-雄鼠（G+表示插入，G-表示未插入G酶基因）。再让上述雌鼠与雄鼠杂交，下列说

法正确的是（）

A．子一代小鼠含H蛋白的比例为75%

B．Hh和G+G-两对等位基因不符合自由组合定律

C．最快在F2代可以获得经TM试剂处理的H基因条件敲除纯合小鼠

D．相较于H基因条件敲除小鼠，H基因完全敲除小鼠更适合用来研究H基因的功能

二、解答题

31．（2025·湖北武汉·模拟预测）肌醇具有促进动物生长、调节机体生理平衡等作用。大肠杆菌不能合成肌

醇，可将酿酒酵母中合成肌醇的关键酶基因导入大肠杆菌，获得生产肌醇的工程菌，如图1所示。图2为

大肠杆菌工程菌中的肌醇生物合成途径，其中EMP和PPP途径都是大肠杆菌生长代谢中的重要途径，其过

程会产生一些副产物，过量时会影响工程菌的生长和肌醇合成。

回答下列问题：

(1)图1中构建大肠杆菌工程菌的核心步骤是（填序号）。步骤③中可采用的方法为。

(2)在工程菌的培养基中，葡萄糖提供的主要营养是。

(3)工程菌生长代谢和肌醇合成之间存在竞争葡萄糖的关系，测得不同初始葡萄糖添加量条件下工程菌肌醇

产量的变化如下图所示。

①综合题干信息分析，不考虑渗透压的影响，初始葡萄糖添加量为14g·L-1时肌醇产量反而下降的原因

是。

②大肠杆菌也可利用甘油作为底物满足细胞正常的生长代谢。理论上推测，当甘油与图2中葡萄糖的代谢

途径（填“相同”或“不同”）时，向培养基中额外添加甘油会有利于葡萄糖转化为肌醇。

(4)在培养基中添加甘油的前提下，为进一步提高肌醇产率，可以利用基因敲除技术改造工程菌。改造方案

是。

32．（2025·湖北·三模）蛋白标签，它是一种与目的蛋白融合表达的多肽或蛋白，以便于目的蛋白表达、检

测、示踪和纯化。一基因片段长度为717bp的P基因编码人抗体P中的一段小肽，常作为融合蛋白标签。

成熟的血凝素（HA）包含HA1和HA2两个亚单位，其中HA1含有病毒与受体相互作用的位点。蛋白质分泌

依赖于信号肽的引导，研究中用信号肽Q代替HA自身信号肽，图示为试构建Q/HA1/P融合蛋白表达载体，

随后导入大肠杆菌表达和分泌。回答下列问题。

(1)本实验用信号肽Q代替HA自身信号肽有利于，PCR扩增目的基因时应该选择图中引物。

(2)引物序列的（答两点）直接影响着PCR过程中退火温度的设定。

(3)应该选择限制酶来切割质粒A，然后直接将PCR产物与质粒A混合，同时加入（填“E.coliDNA

连接酶”或“T4DNA连接酶”），使得目的基因与质粒A相连，选择该酶的理由为。

(4)融合蛋白中的标签蛋白有利于目的蛋白的分离和纯化，基因工程生产HA1作为疫苗时，选择人P基因作

为标签的优点还有。

(5)质粒A上有氨苄青霉素抗性基因，其作用为。

33．（2025·湖北荆州·模拟预测）转基因重组酵母乙肝疫苗是一种乙肝表面抗原（HbsAg）亚单位疫苗，它采

用转基因的方法将乙肝病毒表达表面抗原的基因进行质粒构建，转入啤酒酵母菌中，通过培养这种重组酵

母菌来表达乙肝表面抗原亚单位。转基因酵母的产生过程如下图所示。质粒上四种限制性酶切割位点和酶

切序列分别是SnaBl：TAC↓GTA；Avtll：C↓CTAGG；Sacl：GAGCT↓C；BglⅡ：A↓GATCT。请回答：

(1)编码乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的基因可通过酶从病毒DNA中获得，再通过得

到大量HBsAg基因。获得上述基因也可从乙肝患者的肝细胞中提取乙肝表面抗原的mRNA，原因

是。然后利用乙肝表面抗原的mRNA在催化作用下合成乙肝表面抗原基因。

(2)构建含抗病基因的重组质粒时，应选用限制性核酸内切酶（不定项选择）（A．SnaB

IB．AvrllC．SaclD．BglⅡ）对含HBsAg基因的DNA和质粒进行切割，切割一个含HBsAg基因的DNA

分子需要消耗个水分子。构建图中基因表达载体时，选用两种限制酶比一种限制酶操作的优势

是。

(3)为使乙肝表面抗原基因正常表达，基因表达载体的首端需要添加启动子，作用是。研究发现，

选用细菌为受体细胞时，即便使用强启动子，也不能得到大量具有免疫原性的HBsAg。这可能是由

于，故选用真核细胞（酵母菌）作为受体细胞更合适。

(4)为提高重组DNA导入酵母菌的转化效率，常用溶液处理酵母菌细胞。从微生物的特点角度分

析，用发酵工程的方法生产乙肝疫苗的优点是。

(5)检测HBsAg基因是否在受体细胞成功表达，可进行杂交，若有杂交带出现，明说受体细胞已

经合成HBsAg。

34．（2025·湖北襄阳·一模）昆虫体内产生的抗菌肽具有广谱抗细菌活性，在医学上具有重要应用价值。研

究人员根据抗菌肽A和抗菌肽D的部分氨基酸序列，人工设计并合成了抗菌肽AD基因，然后利用酵母菌发

酵生产抗菌肽AD。请回答下列问题。

氨基酸序列：MK……AK

5'ATGAAA……GCTAAG3'

AD基因3'TACTTT……CGATTC5'

AD基因上游AD基因下游

注：K为赖氨酸

A为丙氨酸HindⅢ：5'A↓AGCTT3'

M为甲硫氨酸（5'AUG3'）BamHI：5'G↓GATCC3'

起始密码子：5'AUG3'SalI：5'G↓TCGAC3'

终止密码子：5'UAA3'

注：Leu+为控制亮氨酸合成的基因，Ampr为氨苄青霉素抗性基因，O1为原核细胞复制原点，O2为真核细胞

复制原点。

(1)如图，通过抗菌肽AD的氨基酸序列推测出AD基因的碱基序列与原有AD基因的碱基序列有差异，可能

的原因是（答三点）。

(2)研究人员在人工合成AD基因后，设计了引物P1（由12个脱氧核苷酸组成，结合在AD基因的上游）和

P2（由15个脱氧核苷酸组成，结合在AD基因的下游），通过PCR扩增AD基因。已知P1的碱基序列：5'GGA

TCC…3'，AD基因与pC穿梭质粒构建重组质粒时所需的酶主要有。在P2引物中，除了构建相应限

制酶的酶切序列外，还要保证翻译过程在正确的位置停止。请根据上图写出P2引物中部分碱基序列，要求

从5'端开始的第4个碱基一直写到第12个碱基，其余碱基用…代替。

(3)已知亮氨酸是受体酵母菌的必需氨基酸，同时酵母菌对氨苄青霉素抗性弱。将AD基因重组质粒导入酵母

菌后，需用选择性培养基筛选并培养受体菌。从培养基的成分分析，与普通培养基相比，该选择性培养基

的成分应含有，不含。

(4)抗菌肽AD的生产菌选用酵母菌而不选用大肠杆菌，主要原因是（答一点）。

35．（2025·湖北十堰·三模）玉米又称棒子、苞米、苞谷等，是我国重要的粮食作物之一。研究玉米的光合

作用速率和培育玉米新品种均具有重要的意义。玉米在早期光合作用的过程中会产生大量可溶性糖，可溶

性糖在淀粉合成酶的作用下转化为淀粉，使玉米籽粒呈糯性。研究发现，与野生型相比，玉米的CST1基因

缺失突变体光合作用速率下降。回答下列问题：

(1)由题可知，若淀粉合成酶的合成受抑制，积累，籽粒就会呈甜味。玉米叶肉细胞光合作用合成的

有机物，一部分用于建造植物体本身，一部分用于作用。科研人员对玉米叶片的气孔开放程度进行

检测，结果如图1所示，据图分析，突变型玉米光合作用速率下降的原因可能是。

(2)科研人员培育出超量表达P蛋白的转基因玉米，以提高玉米的营养价值。利用Ti质粒构建的基因表达载

体如图2所示，其中强启动子能驱动基因的持续转录。将萌发的玉米种子的胚芽尖端割伤，有利于种子吸

收酚类化合物。

①在构建基因表达载体时，图2中切割目的基因的DNA片段应选用的限制酶是。同时用农杆菌侵染

玉米叶片外植体，其目的是，但科研人员在实验中发现，玉米等单子叶植物无法分泌酚类化合物，

导致农杆菌难以感染，为了提高转化的成功率，可将萌发的玉米种子的胚芽尖端割伤，然后在伤口处，

最后再置于农杆菌液中进行浸泡。

②为了检测P蛋白基因是否整合到玉米细胞的染色体DNA上，初步检测时最好在培养基中加入。

36．（2025·湖北·模拟预测）细菌中的M蛋白在酶X的作用下被ATP磷酸化，磷酸化的M蛋白积累会抑制

细菌的生长，酶Y则可使其发生去磷酸化。研究人员用X基因（编码酶X）、Y基因（编码酶Y）和GFP基

因（编码绿色荧光蛋白）构建3种融合基因（GFP基因均位于融合基因的上游），并将3种融合基因分别导

入不含X和Y基因的大肠杆菌中，以研究酶Y的功能。回答下列问题。

(1)将融合基因a和质粒构建的基因表达载体导入大肠杆菌后，接种在含卡那霉素的培养基上，从长出的菌

落中提取DNA，选用引物组合进行PCR，以检测融合基因a是否正确插入。若实验操作规范但未获得

扩增产物，其原因可能是。

(2)构建融合基因b时，应将GFP基因中编码的序列删除，使得受体细胞合成GFP-酶X融合蛋白。为

检测导入融合基因b的工程菌内融合基因b是否完整表达以及酶X的活性，首先从具有