T-CFNA 6502-2024 胡椒及其制品中胡椒碱的含量测定

ICS67.020.10

CCSX40

CFNA

团体标准

T/CFNA6502—2024

胡椒及其制品中胡椒碱的含量测定

Determinationofpiperinecontentinpepper（PipernigrumL.）anditspreparation

（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

中国食品土畜进出口商会发布

T/CFNA6502—2024

胡椒及其制品中胡椒碱的含量测定

1范围

本标准适用于胡椒及其制品中胡椒碱的含量测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T12729.3香辛料和调味品分析用粉末试样的制备

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4方法原理

用紫外分光光度法测定胡椒及其制品中胡椒碱的含量。使用乙醇甲醇混合溶液提取样品中的胡椒碱，

在342nm-345nm之间的最大吸波长处测量吸光度值。

5试剂

95%乙醇，分析纯。

甲醇，分析纯。

乙醇-甲醇混合液：5mL甲醇（5.2）加入100mL乙醇（5.1）中，混匀。

胡椒碱标准物质：直接购买市售有证标准物质。

5.4.1胡椒碱标准储备液：准确称取100.00mg胡椒碱标准品，置于100mL容量瓶中，加入适量乙醇-

甲醇混合液（5.3）溶解后，用乙醇-甲醇混合液（5.3）定容至刻度，摇匀，备用。

5.4.2胡椒碱标准中间液：准确移取胡椒碱储备液（5.4.1）1mL，置于100mL容量瓶中，用乙醇-甲

醇混合液（5.3）稀释至刻度，摇匀，该溶液现配现用。

6仪器

分析天平：精确度为0.0001g。

紫外分光光度计：波长200nm-400nm,配备1cm石英比色皿。

实验室常用玻璃器皿。

7分析步骤

黑胡椒和白胡椒前处理

7.1.1制样

按GB/T12729.3规定执行。

7.1.2提取

准确称取混匀的样品粉末(过孔径250μm筛)0.5g，置于125mL锥形瓶中，加入70mL乙醇-甲醇混合

液（5.3），水浴回流1h，冷却至室温，过滤至200mL容量瓶中，滤渣用乙醇-甲醇混合液（5.3）洗涤，

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T/CFNA6502—2024

合并洗涤液于容量瓶中，用乙醇-甲醇混合液（5.3）定容至刻度，摇匀。准确移取上述溶液5mL置于100

mL容量瓶中，用乙醇-甲醇混合液（5.3）定容至刻度，摇匀，15min.内上机测定吸光度值。

胡椒油树脂的前处理

准确称取1g充分混匀的样品置于100mL棕色容量瓶中，用乙醇-甲醇混合液（5.3）定容至刻度，摇

匀，备用。准确移取10mL上述样品，置于100mL容量瓶中，用乙醇-甲醇混合液（5.3）定容至刻度，摇

匀，再准确移取1mL，置于100mL容量瓶中，用乙醇-甲醇混合液（5.3）定容至刻度，摇匀，15min.内

上机测定吸光度值。

测定

7.3.1标准曲线建立

准确移取胡椒碱标准品中间液（5.4.2）0.00ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml、

6.00mL，分别置于10mL容量瓶中，用乙醇-甲醇混合液（5.3）稀释至刻度，摇匀，标准中间液浓度分

别为0.00μg/mL、1.00μg/mL、2.00μg/mL、3.00μg/mL、4.00μg/mL、5.00μg/mL、6.00μg/mL。使用

1cm石英比色皿，以乙醇-甲醇混合液（5.3）调零，以乙醇-甲醇混合液（5.3）作参比，在343nm的最

大吸收波长下，测定系列标准品工作液的吸光度值，记为A1、A2、A3、A4、A5、A6，根据公式（1）换

算成1µg/mL时胡椒碱的平均吸光度值Aa。

7.3.2试样测定

使用1cm石英比色皿，以乙醇-甲醇混合液（5.3）调零，用乙醇-甲醇混合液（5.3）作参比，在343

nm的最大吸收波长下，测定试样（7.1.2）、试样（7.2）的吸光度值。

8结果计算与表示

结果计算

1µg/mL时胡椒碱的平均吸光度值Aa按照公式（1）计算：

A1A2A2A4A5A6

Aa=(＋＋＋＋＋)÷6··················································(1)

123456

胡椒碱含量%按照公式（2）计算：

퐴푠푓

胡椒碱%=×6×100·························································(2)

퐴푎푊푠×10

式中：As—样品溶液吸光度值；

Aa—1μg/ml时胡椒碱溶液的平均吸光度值；

f—稀释因子；

Ws—样品质量，g。

结果表示

计算结果保留两位有效数字。

9精密度

同一样品在相同条件下获得的两次独立测定结果的胡椒碱标准偏差应小于8%。

10特别提示

本方法测定的包括胡椒碱异构体和相关化合物（如有）的吸光度值，包括胡椒碱和次胡椒酰胺，

它们在所测波长下具有吸光度，但不像胡椒碱那样辛辣。分析过程中使用铝箔或黑纸将烧瓶包裹起来，

并尽快做测定，能减少这类化合物的形成，并防止样品刺激性物质的增加给测定结果造成影响。

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该方法并不要求在每次分析时都使用胡椒碱标准品。因此，相应的稳定性至关重要。如果采取任

何可能改变仪器响应的措施，必须用新标准重新校准。包括：预防性维护