（新版！）2025医疗器械微生物标准样品验证报告

医疗器械微生物标准样品验证报告

依据《医疗器械生产质量管理规范》《医疗器械监督管理条例》《医疗器

械注册与备案管理办法》《医疗器械生产监督管理办法》编制

一、报告基本信息

项目内容

报告编号RV-MICRO-STD-2025-001

对应验证方VP-MICRO-STD-2025-001(V1.0,已批准)

案编号

适用标准样1.ATCC标准菌株(ATCC25922大肠埃希菌、ATCC6538

品金黄色葡萄球菌、ATCC10231白色念珠菌)2.微生物质

控菌片(含枯草芽孢杆菌黑色变种，型号：QC-B-001)

验证类型首次全项目验证(含溯源性、纯度、浓度、稳定性、适用

性验证)

关联标准与1.2025版《医疗器械生产质量管理规范》

法规

2.YY/T0962-2014《医疗器械微生物限度检查》

3.ISO11133:2021《微生物学用于微生物检测的培养基

和试剂的质量控制》

4.GB4789.2-2022《食品安全国家标准食品微生物学检

验菌落总数测定》

5.公司《微生物标准样品管理规程》

报告编制人质量部(微生物检验工程师，资质编号：JY-MICRO-2025-

078)

编制日期2025-05-20

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审核人质量负责人(微生物检测高级工程师，资质编号：ZL-

MICRO-2025-015)

审核日期2025-05-23

批准人技术总监(医疗器械检验高级工程师，资质编号：JS-

2025-006)

批准日期2025-05-25

实际验证周2025-03-10至2025-05-15(含稳定性监测期)

期

实际参与人质量部微生物组(4人)、设备部(2人)、采购部(1

员人)、第三方检测机构(2人，CNAS资质编号：

L2025008)

关联核心文1.《微生物标准样品验证方案》

件2.《验证原始记录汇编》

3.标准样品溯源证书

4.仪器校准证书

5.《培养基适用性验证报告》

6.《偏差处理报告》

二、验证概述

2.1实施概况

·覆盖完整性：按方案完成5类核心验证(溯源性确认、纯度验

证、浓度校准、稳定性监测、检测适用性验证),覆盖3种ATCC

菌株+1种质控菌片；生成原始记录56份(含菌株复苏记录12

份、平板计数表单18份、稳定性监测日志15份、偏差处理文件

3份),数据符合ALCOA+原则，可追溯至菌株批号、操作人及

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医疗器械微生物标准样品验证报告2

检测仪器。

·执行规范性：质量部全程监督关键操作(菌株复苏、浓度计数、芽

孢活化),第三方机构独立复核纯度鉴定结果；所有测试严格遵循

ISO11133流程，菌株操作在BSL-2生物安全柜内进行，避免交

叉污染。

·合规性确认：验证过程符合《医疗器械检验工作规范》第19-25

条要求，性能指标判定标准与YY/T0962-2014、ISO11133完全

一致，溯源性符合国家计量院《标准物质管理办法》。

2.2关键验证结果摘要

验证模块关键指标实际结果方案要求标准符合性

溯源性确菌株批号与ATCC证书一证书有效，溯源链符合

认致，质控菌片溯源至NIM-完整(国家基准→

RM-2025005标准样品)

纯度验证3种菌株划线分离均为单一无杂菌污染，生化符合

菌落，生化鉴定匹配度100%鉴定匹配度≥99%

浓度确认ATCC25922浓度6.8×108菌株浓度在证书范符合

FU/mL(证书范围5.0×108围内，菌片回收率

1.0×10⁹);质控菌片回收90%~110%

率98%

稳定性验-80℃储存3个月浓度衰减储存衰减≤10%,运符合

证≤5%,室温运输48h存活率输存活率≥90%

≥95%

偏差处理1项一般偏差(ATCC10231偏差闭环，无遗留符合

首次复苏菌落数偏低),整风险

改后达标

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医疗器械微生物标准样品验证报告3

标准核查ATCC菌株证书证书在有效期符合溯源证书复印

样品(编号：2025-0301-内，溯源至国件(REC-CERT-

合规005)、质控菌片溯源家基准001)

性报告(NIM-RM-

2025005),批号一致

仪器生物安全柜(ESCO生物安全柜风符合校准证书

设备ClassII)、恒温培速(CAL-

就绪养箱(37℃±0.38~0.42m/s2025801~810)

0.5℃)、菌落计数器,培养箱精度

(Bio-Rad)等10台±0.5℃

仪器均校准合格

培养营养琼脂、沙氏葡萄培养基符合符合培养基验证报

基适糖琼脂等5种培养基ISO11133要告(REP-MED-

用性均通过适用性验证求，有效期内2025003)

(促生长/抑制/

指示功能合格)

人员4名微生物检验员经培训合格，掌符合培训记录

资质ATCC菌株操作培训，握无菌操作与(TRN-MICRO-

达标考核成绩93~98分菌株复苏技能20250308)

(≥90分),持

BSL-2操作证书

环境BSL-2实验室温湿度温湿度符合环境监测记录

条件24±1℃/50±3%RH,20~26℃(REC-ENV-

满足洁净度万级，沉降菌/40~60%RH,MICRO-028)

≤1CFU/皿洁净度万级，

(30min)无交叉污染风

险

结果判定：所有前置条件均满足，顺利启动验证。

五、各阶段验证结果详情

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医疗器械微生物标准样品验证报告4

5.1标准样品溯源性确认

验证项目实际核查内容实际结果方案要求结果

标准判定

ATCC菌核查菌株冻干管批号批号完全一批号匹符合

株溯源(20250301-005)与致，证书含菌配，证书

ATCC官方证书一致株基因型鉴定有效，溯

性，验证溯源链结果，溯源链源至国际

(ATCC→国家计量院完整标准菌株

→公司)库

质控菌片核查菌片生产批号批号一致，定批号匹符合

溯源(QC20250305)与值方法为平板配，定值

NIM标准物质证书计数法(ISO方法合

(RM-2025005)一致4833),不确规，不确

性，确认定值方法定度±10%定度≤15%

5.2纯度验证

标准样品实际测试过程实际结果方案要求结果

类型标准判定

ATCC冻干管复苏后，营单一圆形菌落单一菌落符合

25922(大养琼脂平板划线分(直径1~2mm,形态，生

肠埃希离(37℃培养乳白色),生化化匹配度

菌)24h),挑取3个鉴定匹配度100%≥99%,无

菌落做生化鉴定(ID值杂菌

(VITEK2系统)99.9%),无杂菌

ATCC6538同上述流程，使用单一圆形菌落选择性平符合

(金黄色甘露醇高盐琼脂平(金黄色，β溶板上单一

葡萄球板(选择性培养)血),生化鉴定菌落，无

菌)匹配度100%,无杂菌

耐盐杂菌

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ATCC沙氏葡萄糖琼脂平单一酵母样菌落酵母样菌符合

10231(白板划线(25℃培养(乳白色，湿落形态，

色念珠48h),挑取菌落润),芽管试验芽管试验

菌)做芽管试验+生阳性，生化匹配阳性，无

化鉴定度100%杂菌

枯草芽孢菌片活化后，营养单一杆状菌落，单一菌符合

杆菌质控琼脂平板涂布，芽孢染色阳性落，芽孢

菌片37℃培养48h,观(绿色芽孢),特征匹

察菌落形态并做芽无杂菌生长配，无杂

孢染色菌

5.3浓度确认

标准样实际测试方法与实际结果方案要求结果

品类型数据标准判定

ATCC度稀释法(10-⁶平均菌落数：68CFU证书范围符合

2592210-稀释度),/平板(10-稀释5.0×108

每个稀释度3个度),浓度=6.8×~1.0×10⁹

平行平板，营养108CFU/mLCFU/mL

琼脂37℃培养

24h,计数菌落数

ATCC同上述方法，甘平均菌落数：72CFU证书范围符合

6538露醇高盐琼脂培/平板(10-稀释.0×108

养度),浓度=7.2×1.0×10⁹

108CFU/mLCFU/mL

ATCC沙氏葡萄糖琼脂平均菌落数：55CFU证书范围符合

10231培养(25℃,/平板(10-稀释.0×107

48h),10-5~10-7度),浓度=5.5×1.0×108

稀释度107CFU/mLCFU/mL

枯草芽菌片溶解后梯度标示浓度1.0×10⁶回收率符合

孢杆菌稀释(10³~10-CFU/片，实测90%~110%

5),营养琼脂培

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医疗器械微生物标准样品验证报告6

质控菌养，计算回收率1.02×10⁶CFU/

片=(实测浓度/片，回收率102%

标示浓度

)×100%

5.4稳定性验证

5.4.1长期储存稳定性(-80℃冰箱储存)

标准样监测时实测浓初始浓衰减率方案要结果判

品类型间点度/回度/回/变化求(衰定

(储存收率收率率减率≤

后)10%)

ATCC1个月6.6×106.8×102.9%符合符合

2592288

CFU/mLCFU/mL

2个月6.5×106.8×104.4%符合符合

88

CFU/mLCFU/mL

3个月6.5×106.8×104.4%符合符合

88

CFU/mLCFU/mL

枯草芽3个月回收率102%-3.9%符合符合

孢杆菌98%

质控菌

片

5.4.2短期运输稳定性(室温20~25℃,模拟运输48h)

标准样品运输前浓运输后浓存活率/方案要求结果判

类型度/回收度/回收回收率变(存活率≥定

率率化90%)

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医疗器械微生物标准样品验证报告7

ATCC6.8×1086.6×10897.1%符合符合

25922CFU/mLCFU/mL

ATCC5.5×1075.2×10794.5%符合符合

10231CFU/mLCFU/mL

枯草芽孢102%99%97.0%符合符合

杆菌质控

菌片

5.5检测适用性验证

5.5.1无菌检查阳性对照适用性

标准样品测试过程(接种培养结果方案要求结果

类型100CFU至硫乙醇(37℃,14(48~72h内判定

酸盐流体培养基)天)浑浊生长)

ATCC接种后37℃培养24h内培养基浑符合符合

25922浊，涂片镜检为

革兰氏阴性杆菌

ATCC6538同上述流程36h内培养基浑符合符合

浊，涂片镜检为

革兰氏阳性球菌

5.5.2微生物限度检查回收率验证

标准样测试样品加菌量实测回收方案要求(回结果

品类型(无菌注射(CFU)率(%)收率判定

器外壳，70%~130%)

10g/件)

ATCC样品+菌10095符合符合

25922液

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ATCC样品+菌10092符合符合

10231液

六、偏差处理情况

偏差偏差描述偏差发生时根本原纠正措纠正效处理

编号级别间/因分析施果验证结果

场景

NCR-ATCC一般2025-复苏时1.调重新复关闭

MICR10231首偏差03-16水浴温整水浴苏后浓

0-次复苏/微生度偏低温度至度5.5

2025时，菌落物实验(35℃37℃±×107

001数仅3.2室,标准0.5℃CFU/mL

×10737℃);2.(符合

CFU/mL,导致重新复证书范

(低于证复苏效苏1围);

书下限率下降支同批后续复

5.0×10号冻干苏均按

7)管37℃操

作，无

异常

七、验证结论

综合各模块验证结果及偏差处理情况，得出以下结论：

1.溯源性完整：ATCC标准菌株与质控菌片均具备有效溯源证书，批

号一致，溯源链覆盖国际标准菌株库(ATCC)及国家计量院，符合

法规要求；

2.纯度达标：3种ATCC菌株经划线分离与生化鉴定，均无杂菌污

染，菌落形态与生化特征匹配度100%,质控菌片芽孢活化后无杂

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医疗器械微生物标准样品验证报告9

菌；

3.浓度合规：菌株浓度均在ATCC证书规定范围内，质控菌片回收率

98%~102%,满足微生物检测对浓度准确性的要求；

4.稳定性可靠：-80℃储存3个月浓度衰减≤5%,室温运输48h存

活率≥94.5%,可保障标准样品在储存与使用环节的有效性；

5.适用性良好：可有效用于医疗器械无菌检查阳性对照(48h内浑浊

生长)及微生物限度检查回收率验证(回收率92%~95%),能支撑

检测结果的准确性；

6.偏差已闭环：仅1项一般偏差(复苏温度不当),整改后指标合

格，无遗留风险，数据符合ALCOA+原则。

综上，本次验证的ATCC标准菌株及微生物质控菌片符合医疗

器械微生物检测需求，批准用于无菌检查、微生物限度检查及消毒

效果确认等环节，可作为微生物检测质量控制的合规依据。

八、后续要求

8.1再验证计划

验证类型再验证周期再验证内容触发条件

批次再验证每批次标准样品溯源性、纯度、新批次采购、供

到货后浓度确认应商变更

年度稳定性