实验室动物实验计划

实验室动物实验计划一、实验室动物实验计划概述

实验室动物实验计划是确保实验科学性、规范性和伦理性的重要文件，旨在明确实验目的、方法、操作流程、风险控制及动物福利保障等内容。本计划旨在为实验室动物实验提供系统性指导，确保实验结果可靠、数据准确，并符合相关伦理要求。

（一）实验计划目的

1.明确实验目标：确定实验要解决的问题及预期成果。

2.规范操作流程：确保实验操作符合标准，减少误差。

3.保障动物福利：在实验过程中遵循动物福利原则，减少动物痛苦。

4.风险控制：识别并评估实验风险，制定应对措施。

（二）实验计划内容

1.实验基本信息

(1)实验名称：清晰描述实验内容。

(2)实验地点：实验室具体位置。

(3)实验时间：计划开始及结束时间。

(4)实验人员：参与实验的人员及职责。

2.实验方法

(1)实验对象：说明实验动物种类、数量及来源。

(2)实验设计：详细描述实验分组、处理方法及对照组设置。

(3)数据采集：明确数据采集方法、指标及记录方式。

3.实验流程

(1)实验准备：列出实验所需设备、试剂及耗材。

(2)实验操作：分步骤描述实验操作流程。

(3)数据分析：说明数据分析方法及软件工具。

4.风险控制

(1)安全措施：制定实验安全操作规程，包括个人防护、设备操作等。

(2)应急预案：针对可能出现的意外情况，制定应对措施。

(3)风险评估：定期评估实验风险，及时调整实验方案。

二、实验操作规范

（一）动物准备

1.动物来源：选择健康、品种纯合的实验动物，确保来源可靠。

2.动物分组：根据实验设计，将动物随机分组，确保组间差异最小化。

3.动物适应：实验前将动物置于标准化环境中适应，减少应激反应。

（二）实验操作

1.手术操作：严格遵循无菌操作原则，减少感染风险。

(1)麻醉：选择合适的麻醉方法，确保动物舒适。

(2)术后护理：观察动物恢复情况，及时处理并发症。

2.样本采集：根据实验需求，规范采集血液、组织等样本。

(1)采集方法：选择合适的采集工具及方法，减少动物痛苦。

(2)样本处理：及时处理样本，避免污染及降解。

3.数据记录：详细记录实验过程及观察结果，确保数据可追溯。

（三）实验结束

1.动物处理：实验结束后，根据伦理要求对动物进行人道处理。

2.数据整理：汇总实验数据，进行统计分析。

3.报告撰写：撰写实验报告，总结实验结果及结论。

三、动物福利保障

（一）饲养环境

1.符合标准：确保动物饲养环境符合相关标准，包括温度、湿度、通风等。

2.清洁卫生：定期清洁饲养设施，减少病原传播风险。

3.兽医监控：定期进行动物健康检查，及时发现并处理疾病。

（二）行为需求

1.提供活动空间：确保动物有足够的活动空间，满足其行为需求。

2.社会交往：根据动物种类，提供适当的社会交往机会。

3.环境丰容：通过提供玩具、垫料等丰容设施，提高动物福利水平。

（三）伦理审查

1.实验申请：实验前提交实验计划，通过伦理委员会审查。

2.过程监督：实验过程中接受伦理委员会监督，确保符合伦理要求。

3.年度评估：每年对实验计划进行评估，及时改进动物福利措施。

四、实验数据管理

（一）数据采集

1.规范记录：使用标准化表格记录实验数据，确保数据准确、完整。

2.电子化管理：采用电子化工具管理数据，便于统计分析。

（二）数据分析

1.统计方法：选择合适的统计方法，确保数据分析结果的可靠性。

2.软件工具：使用专业统计软件进行数据分析，如SPSS、R等。

（三）数据共享

1.结果发布：通过学术会议、期刊等渠道发布实验结果。

2.数据公开：在符合保密要求的前提下，公开实验数据，促进科学交流。

**一、实验室动物实验计划概述**

实验室动物实验计划是确保实验科学性、规范性和伦理性的核心文件，旨在系统性地指导实验的设计、执行、监控和报告全过程。本计划不仅规范操作流程，减少实验误差，提升数据可靠性，更是保障实验动物福利、满足伦理要求的关键载体。通过制定详尽的实验计划，可以确保实验活动在可控、合规、人道的框架内进行，为科学研究提供坚实的基础。

（一）实验计划目的

1.**明确实验目标：**清晰界定实验要解决的具体科学问题，设定可衡量的预期成果，确保实验方向正确且具有研究价值。目标应包括主要研究目的和次要研究目的，以及希望达成的具体指标（例如，期望观察到某种生物标志物变化的具体范围或显著性水平）。

2.**规范操作流程：**制定标准化的实验步骤和操作规程，明确各环节的技术要求和注意事项，确保不同实验人员执行操作时的一致性，从而减少个体差异带来的实验误差，提高结果的可重复性。

3.**保障动物福利：**在实验设计的各个环节始终贯彻动物福利原则，遵循“减少（Reduction）、替代（Replacement）、优化（Refinement）”的3R原则，尽可能减少实验动物的使用数量、避免或减轻动物痛苦和损伤，并确保动物在饲养和实验期间获得良好的生活环境。

4.**风险控制：**全面识别实验过程中可能存在的生物安全风险、操作安全风险、动物福利风险等，并制定相应的预防措施和应急预案，以最大限度地降低风险发生的可能性及其影响。

（二）实验计划内容

1.**实验基本信息**

(1)**实验名称：**使用简洁、准确、具有描述性的词语命名实验，能够直接反映实验的核心内容和目的。例如，“某种新型化合物对小鼠肝细胞凋亡影响的研究”。

(2)**实验地点：**明确实验室的具体地址、实验室编号或名称，以及进行实验的具体区域（如特定功能间）。

(3)**实验时间：**详细列出实验的预计开始日期、结束日期，以及关键实验步骤或时间节点的安排（例如，动物处理日期、样本采集时间点、观察周期等）。

(4)**实验人员：**列出所有参与实验的核心人员及其具体职责分工，包括实验设计者、主要执行者、数据分析师、动物护理员等，并注明其资质和经验。

2.**实验方法**

(1)**实验对象：**

***动物种类与品系：**明确指定实验所使用的动物物种（如小鼠、大鼠、兔子等）及其具体品系或近交系（如有），说明选择该品系的原因（例如，遗传背景特定、对研究目标敏感等）。

***动物来源：**详细说明动物供应商名称、地址、资质证明（如ISO9031认证），以及动物的运输方式和验收标准。

***动物数量：**根据统计功效分析或预实验结果，确定每组所需的动物数量，并说明总动物使用数量。同时，应说明如何依据3R原则来确定最终动物数量，并可能设定动物保留计划（如有）。

***动物性别与年龄：**明确所选用的动物性别（如雌雄分开或混合）及年龄范围，并解释选择特定性别和年龄的原因。

***健康状态与检疫：**描述动物入组前的健康检查标准（如外观、行为、体重、基础生理指标等）和检疫流程（如隔离观察期、健康状况确认）。

(2)**实验设计：**

***研究设计类型：**明确采用的研究设计类型，如完全随机设计、配对设计、交叉设计、析因设计等。

***实验分组：**详细描述如何进行分组，包括分组依据、组数、每组动物数量、对照组设置（如空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组等）以及实验组的处理因素（如不同剂量的药物、不同处理方式等）。

***干预措施：**清晰描述对实验动物施加的处理或干预措施，包括处理方法（如给药途径、剂量、频率、持续时间；手术操作；行为处理等）、处理时间点、以及如何确保处理的准确性和一致性。

***观察指标：**列出需要观测和记录的指标，包括：

***生理指标：**体重、摄食量、饮水量、体温、呼吸频率等。

***行为学指标：**活动水平、特定行为（如探索、回避、社交）的观察和评分标准。

***血液学指标：**需要检测的血液生化项目（如谷丙转氨酶ALT、总胆固醇TC、血糖GLU等）及采样方法。

***组织学指标：**需要检查的组织器官（如肝脏、肾脏）、观察内容（如细胞形态学变化、炎症细胞浸润等）及取样方法、固定、脱水、包埋、切片、染色等处理流程。

***其他指标：**根据实验目的可能需要的特殊指标，如特定基因表达、蛋白质水平、细胞计数等，并说明检测方法和判定标准。

***数据采集方法与频率：**明确每个观察指标的具体测量方法、使用的仪器设备（需说明型号和校准情况）、记录表格格式、数据采集的频率（如每日、每周、实验结束时一次性）以及记录责任人。

(3)**数据分析：**描述计划采用的数据处理和统计分析方法。包括：

***数据处理方法：**如数据清洗、异常值处理等。

***统计分析方法：**明确使用的统计学软件（如GraphPadPrism,SPSS,R等）和具体的统计检验方法（如t检验、方差分析ANOVA、非参数检验等），说明选择该方法的原因。应考虑使用多个指标综合评价实验结果。

***显著性水平：**设定统计分析的显著性阈值（通常为p<0.05）。

3.**实验流程**

(1)**实验准备阶段：**

***动物准备：**详细列出动物接收、检疫、适应饲养、分组标记（如耳号）的具体步骤和时间安排。

***试剂与耗材准备：**列出实验所需的所有化学试剂、生物试剂、药品（需注明生产厂家、批号、浓度）、医疗器械（如手术器械、注射器、离心管、培养皿等）、动物笼具、垫料、清洁消毒用品等，并说明其获取途径、质量控制和存储要求。

***仪器设备准备：**列出所需使用的仪器设备，检查其运行状态、校准有效期，确保满足实验要求。

***人员培训：**明确需要接受培训的人员、培训内容（如实验操作、动物护理、麻醉技术、生物安全、数据记录等）、培训考核方式。

***伦理审查：**提交完整的实验计划至机构动物保护与伦理审查委员会（IACUC），获取批准。记录审查意见及据此修改的计划内容。

(2)**实验操作阶段（StepbyStep）：**

***动物分组与标识：**按照实验设计要求，使用随机化方法将健康合格的动物分配到不同组别，并进行清晰、持久的个体标识（如耳缘打孔、佩戴耳标）。

***模型建立（如适用）：**详细描述建立动物模型的具体步骤、所需时间、观察指标及注意事项，确保模型建立成功且稳定。

***干预处理：**按照预定方案和时间表，精确实施对各组动物的处理措施（如给药、手术、行为刺激等）。详细记录每次处理的动物编号、处理内容、剂量、时间、操作者等信息。

***指标监测与数据采集：**按照既定频率和方法，系统、规范地采集各项观察指标数据。强调记录的及时性、准确性和客观性，使用标准化表格或电子记录系统。对需要特殊处理的样本（如血液、组织、尿液），明确采集、保存、运输和初步处理（如离心、分装）的流程和时限。

***日常观察与护理：**规定每日对动物进行健康状况和行为变化的观察，记录异常情况（如食欲下降、活动减少、体重异常、伤口感染等），并描述相应的护理措施（如调整饲养环境、隔离治疗等）。

(3)**实验结束阶段：**

***实验终止判定：**明确实验结束的标准，如达到预设观察期、动物出现严重不良反应、研究目的达成等。

***动物处理：**规定实验结束时动物的人道终点处理方式。必须详细说明处理方法（如快速安乐死，需注明安乐死方法及其依据，如二氧化碳吸入、过量麻醉剂注射等），操作人员资质，以及处理过程的要求（如避免不必要的痛苦）。需遵守相关动物福利法规关于安乐死的规定。

***样本最终处理：**对采集到的样本进行最终的保存、固定或处理（如深低温冷冻、组织块制备）。

***数据整理与锁定：**彻底整理所有原始实验记录和数据，进行核查，确保完整、准确无误后，进行锁定，不再更改。

4.**风险控制**

(1)**生物安全措施：**

***实验室级别：**明确实验应在符合相应生物安全等级（BSL-1,BSL-2等）的实验室进行。

***个人防护装备（PPE）：**规定不同操作环节所需佩戴的PPE，如实验服、口罩、手套、护目镜等，并强调正确使用和更换。

***操作规程：**制定核心操作（如气溶胶产生操作、感染性物质处理）的标准操作规程（SOP）。

***消毒灭菌：**明确环境、设备、笼具、器械的清洁和消毒程序。

***废物处理：**规定实验废弃物（如动物尸体、组织、培养液、化学废物等）的分类、收集、暂存和最终处置方式，必须符合环保和安全要求。

(2)**操作安全措施：**

***设备安全：**定期检查使用中的仪器设备，特别是涉及电力、压力、锐器、高温等的设备，确保其安全性。

***化学品安全：**对有毒、有害、易燃、易爆的化学试剂，制定专人管理、规范储存和使用制度，提供化学品安全技术说明书（MSDS）并确保相关人员了解。

***锐器安全：**规定使用、传递、处理针头、手术刀等锐器的安全操作，提倡使用安全型器械，并配备锐器收集桶。

***应急准备：**配备必要的应急设备（如洗眼器、紧急喷淋装置）和药品，并对相关人员进行应急处理培训。

(3)**动物福利风险防范：**

***减少应激：**优化实验操作流程，减少对动物的惊扰和束缚时间，使用温和的麻醉和镇痛方法。

***疼痛管理：**对于可能引起疼痛或痛苦的手术或处理，应评估疼痛程度，并遵照指南给予适当的镇痛治疗。

***环境优化：**提供符合标准的饲养环境，包括适宜的温湿度、通风、光照、垫料等，保障动物舒适。

***兽医监控：**建立与合格兽医的联系，确保动物健康问题能得到及时诊断和处理。

(4)**应急预案：**

***设备故障：**如通风系统、温控系统故障，应制定应急联系和处置流程。

***意外事故：**如动物逃逸、人员受伤、发生疫情苗头等，应制定详细的报告、隔离、扑灭（如适用）、清洁消毒等应急措施。

***人员变动：**实验负责人或关键操作人员离职时，应有交接计划和应急预案，确保实验continuity。

(5)**风险评估与监控：**在实验前进行全面的风险评估，实验过程中定期（如每月）进行风险监控，根据实际情况调整实验方案或风险控制措施，并记录相关过程。

（三）动物福利保障

1.**饲养环境**

***设施标准：**动物饲养设施必须符合国家或行业标准，包括：

***通风：**确保充足、洁净的空气流通，控制氨气等有害气体浓度。

***温度与湿度：**维持在适宜范围内（如小鼠/大鼠：温度21±3°C，湿度40-70%），并保持相对稳定。

***光照：**提供适宜的光照周期（通常12小时明暗交替），避免强光直射。

***空间：**提供满足动物生理和行为需求的最低空间（笼体尺寸），并考虑群体饲养时的社会空间需求。

***笼具与垫料：**使用符合动物福利要求的笼具，定期更换垫料，保持清洁干燥，减少垫料粉尘和氨气刺激。

***环境控制：**安装必要的设备（如加热/制冷单元、通风过滤系统、光照控制装置）来维持和监测环境参数，并定期进行维护和校准。

***清洁卫生：**制定严格的笼具清洁消毒程序（频率、方法、消毒剂选择与使用），确保动物生活环境卫生，预防疾病传播。

2.**行为需求**

***物理丰容：**在笼内或活动区域内提供适当的丰容物品，如啃咬物（如木块、纸卷）、筑巢材料（如无尘木屑）、运动器械（如跑轮，根据品种选择）、遮蔽物（如小屋、隧道）等，以刺激动物自然行为，减少压力。

***社会丰容：**对于社会性动物（如群居性啮齿类），在条件允许且不影响实验结果的前提下，进行合笼饲养，满足其社交需求。需考虑性别、个体性格匹配，避免攻击行为。

***感官丰容：**避免单调的环境刺激，可考虑提供不同质地的垫料、改变环境布局（在不过度干扰的前提下）等。

3.**兽医监控与管理**

***常规健康检查：**定期（如每周或每两周）由具备资质的兽医或受过培训的人员对动物进行健康检查，包括外观、行为、体重、呼吸、排泄物等。

***疾病监测与治疗：**建立动物疾病监测系统，及时发现异常。对患病动物进行诊断和治疗，必要时隔离或人道处理。

***安乐死：**确保安乐死操作由合格人员执行，使用人道、有效的安乐死方法，并记录执行情况。

***记录与报告：**详细记录动物健康状况、疾病发生与治疗情况、安乐死信息等，并按规定进行报告。

4.**伦理审查与持续改进**

***计划审查：**实验计划必须通过机构动物保护与伦理审查委员会（IACUC）的审查和批准后方可实施。审查应涵盖科学性、必要性以及动物福利保障措施的充分性。

***过程监督：**IACUC或指定机构定期对实验实施过程进行现场检查，确保实验活动符合计划要求和动物福利标准。

***年度/定期评估：**每年或在实验进行到关键节点时，对实验计划的有效性、动物福利保障措施的落实情况进行评估，总结经验教训。

***持续改进：**根据审查意见、监督结果、评估结论以及新的科学知识和动物福利理念，及时修订和完善实验计划，不断提升动物福利保障水平。

**二、实验操作规范**

（一）动物准备

1.**动物来源与验收**

*(1)选择信誉良好、具备相应资质（如ISO9001,ISO9031）的动物供应商。

*(2)获取供应商提供的动物健康证明、系谱资料、运输记录等文件。

*(3)动物抵达后，立即在指定检疫区进行健康检查，项目包括：

***外观检查：**评估精神状态、毛发光泽、眼睛、鼻子、口腔、皮肤、四肢、生殖器等有无异常。

***行为观察：**观察活动能力、姿势、呼吸、有无异常叫声等。

***体重测量：**记录每只动物的初始体重。

***基础生理指标（如适用）：**如体温、心率等。

*(4)记录检疫期间动物的健康状况和任何异常发现。只有符合健康标准的动物才能转入适应期。

2.**动物适应**

*(1)将通过检疫的动物转入实验室的适应饲养设施。

*(2)适应期通常持续1-2周（根据动物种类和供应商建议调整）。

*(3)适应期内，动物将生活在与实验环境条件（温度、湿度、光照、通风）一致的环境中，使用实验室常规饲料和水，以减少环境转换和饲料更换带来的应激。

*(4)每日观察动物行为和健康状况，记录体重变化。

3.**动物分组与标记**

*(1)适应期结束后，根据实验设计要求，使用随机化方法（如使用随机数字表、统计软件生成随机序列）将动物分配到不同实验组别和对照组。

*(2)进行个体标识，确保标识清晰、持久且不影响动物健康。常用方法包括：

***耳号钳打孔：**使用专用耳号钳在动物耳廓边缘打孔，并佩戴金属或塑料耳号牌。

***个体编号：**在每只动物身上做标记（如使用不易脱落的马克笔在尾巴特定位置做标记，或耳号牌上的编号）。

***其他（如适用）：**耳缘烙印（较少使用，注意应激和感染风险）、芯片植入（需评估操作创伤和适用性）。

*(3)详细记录每只动物的编号、分组、性别、出生日期/体重等信息，建立动物档案。

（二）实验操作

1.**手术操作规范**

*(1)**术前准备：**

*(a)检查并准备手术器械：确保所有器械（手术刀、剪、镊、缝合针线、止血钳、引流管等）清洁、锐利、完好，必要时进行灭菌处理（如高压蒸汽灭菌）。

*(b)准备麻醉药物：检查麻醉药物种类、剂量、有效期，配制好所需浓度。

*(c)准备无菌用品：铺好无菌手术巾、准备无菌手术区域。

*(d)选择合适的麻醉方法：根据手术类型、动物种类和体重，选择合适的全身麻醉（如吸入性麻醉剂、注射麻醉剂）或局部麻醉，并确定麻醉剂量和监测指标。

*(e)手术人员准备：穿戴无菌手术衣、手套，必要时佩戴护目镜或面罩。

*(2)**麻醉与保定：**

*(a)按照预定方案实施麻醉，密切监测动物呼吸、心跳等生命体征。

*(b)使用合适的保定器械固定动物，确保操作者有足够的操作空间，同时尽量减少动物的挣扎和痛苦。避免压迫重要脏器。

*(3)**手术过程：**

*(a)常规消毒：使用合适的消毒剂（如碘伏）彻底消毒手术区域皮肤，范围要足够大。

*(b)铺巾：铺无菌手术巾，暴露手术区域。

*(c)切开：使用无菌手术刀沿预定切口线切开皮肤、皮下组织。

*(d)分离：根据需要，分离肌肉、脂肪等组织，暴露手术目标。

*(e)操作：执行预定的手术步骤（如植入装置、组织取材、造模操作等），操作轻柔、精准，减少组织损伤。

*(f)止血：彻底止血，防止术后出血和感染。

*(g)缝合：用无菌缝线缝合切口，多层缝合（皮肤、皮下）可减少疤痕。必要时放置引流管。

*(4)**术后处理：**

*(a)缝合伤口：确认麻醉效果消退，动物恢复平稳后，移除手术器械，整理伤口。

*(b)术后镇痛：对于预计术后疼痛明显的操作，应按时或根据需要给予镇痛药物。

*(c)术后监护：将动物置于温暖、安静的环境中恢复，密切观察呼吸、循环、伤口情况。

*(d)伤口护理：术后按规定更换敷料（如有），观察伤口愈合情况，预防感染。

2.**给药操作规范**

*(1)**给药途径：**根据药物性质、实验目的和动物生理特点，选择合适的给药途径，如：

***经口给药：**灌胃（胃管法）、自由饮用（需防止污染）、胶囊灌服。

***注射给药：**静脉注射、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射。需明确注射部位、进针角度、深度。

***经皮给药：**透皮吸收贴剂、涂抹。

***吸入给药（如适用）。**

***其他途径（如适用）。**

*(2)**剂量计算：**精确计算每只动物或每组的给药剂量，考虑动物体重、药物浓度、溶剂体积等因素。

*(3)**药物配制：**按照说明书或标准操作规程配制药物溶液，注意浓度准确，溶媒选择合适。

*(4)**给药工具：**使用清洁、合适的给药工具（如胃管、注射器、针头、灌胃针等），必要时进行灭菌处理。

*(5)**给药实施：**

*(a)根据所选途径，规范操作，确保药物准确送达目标部位。例如，灌胃时避免进入气管，注射时避免刺破血管或神经。

*(b)记录给药时间、动物编号、药物名称、剂量、浓度、给药途径等信息。

*(6)**给药频率与周期：**严格按照实验计划规定的频率和时间表给药。

3.**样本采集规范**

*(1)**血液样本采集：**

*(a)常用方法：尾静脉采血、眼眶静脉丛采血、心脏采血、股动脉采血。

*(b)采血前准备：选择合适的采血管（含抗凝剂或促凝剂）、注射器、止血钳（如需）、酒精棉球。

*(c)采血操作：根据不同部位，采用正确的保定方法和进针角度。注意止血，尾静脉采血后需压迫止血。

*(d)样本标记与处理：立即标记采血管，混匀（促凝管）。根据需要，立即或短暂离心分离血浆/血细胞。记录采血量、动物编号。

*(e)频率与数量：根据实验需求确定采血时间和频率，注意避免因频繁采血对动物造成过度应激或影响实验结果。

*(2)**组织样本采集：**

*(a)常用方法：手术切除（如肿瘤、器官）、活检（针吸或切割活检）、处死后的器官获取。

*(b)采前准备：准备手术器械、组织固定液（如4%多聚甲醛）、冰生理盐水（用于器官速冻）、编号标签、组织镊、培养皿等。

*(c)采血操作：无菌操作，快速获取所需组织。对于需要特定处理的组织（如用于原位杂交、免疫组化），需按特定方法固定或处理。

*(d)标记与处理：立即对组织进行标记，并根据后续实验需求，将其放入相应固定液、RNAlater溶液或立即放入预冷的等渗盐水中。

*(e)标本信息：记录组织名称、来源部位、动物编号、获取时间、固定液等信息。

*(3)**尿液样本采集：**

*(a)常用方法：代谢笼收集、导尿管插入法、膀胱穿刺法。

*(b)采集操作：根据方法准备相应器材（代谢笼、导尿管、注射器、膀胱穿刺针等）。

*(c)样本处理：收集尿液后，立即标记。如需分析特定成分，可能需要立即离心或分装。

*(d)频率：根据实验要求确定采集频率。

4.**数据记录规范**

*(1)**记录工具：**使用标准化的实验记录表格（纸质或电子版），确保信息完整、清晰、可追溯。

*(2)**记录内容：**记录所有预定的观察指标，以及实验过程中出现的任何重要事件和异常情况。包括：

*动物基本信息（编号、分组、性别、体重）。

*给药/处理信息（时间、剂量、途径）。

*观察指标数据（时间点、数值、评分）。

*动物健康状况和行为变化（食欲、饮水、精神状态、活动量、有无异常体征）。

*体重变化。

*手术/采样相关记录。

*任何偏离计划的操作及原因。

*实验人员姓名和日期。

*(3)**记录要求：**

*及时、准确、客观、完整。

*使用统一、规范的术语和单位。

*书写工整，避免涂改（如需修改，应划线签名注明）。

*电子记录应定期备份。

（三）实验结束与人道终点处理

1.**实验结束判定依据：**

*(1)达到预定的实验观察周期。

*(2)实验目的已完全实现，获得足够的数据支持结论。

*(3)动物出现严重、难以恢复的健康问题或并发症，继续实验可能对其造成无法接受的痛苦（需结合实验设计和伦理要求判断）。

*(4)实验结果明显偏离预期，且无法解释，继续进行意义不大。

2.**人道终点处理（安乐死）：**

*(1)**安乐死原则：**动物安乐死必须由经过培训并具备资质的人员执行，使用人道、有效的安乐死方法，确保动物在尽可能短的时间内失去意识并完全无痛致死。

*(2)**方法选择：**常用的人道安乐死方法包括：

***过量麻醉：**使用安全有效的麻醉剂（如异氟烷吸入、巴比妥类药物注射），剂量超过致死剂量，导致快速、无痛死亡。需确保麻醉设备正常运行（如吸入性麻醉剂）。

***快速窒息：**如使用特定比例的二氧化碳（CO2）环境，使动物逐渐窒息死亡。需使用符合标准的CO2安乐死设备，并确保操作符合动物福利要求（如避免过度应激）。

***物理方法（如适用且符合条件）：**如电击（需特定设备和技术）。

*(3)**操作规程：**

*(a)选择合适的安乐死方法，并准备好相应设备或药物。

*(b)将动物置于安静、不易受惊扰的环境中。

*(c)按照选定方法的操作步骤，平稳、快速地实施安乐死。

*(d)确认动物已无生命体征（如呼吸停止、心跳消失、对刺激无反应）。

*(4)**记录：**详细记录安乐死日期、时间、动物编号、安乐死方法、执行人员等信息。

3.**动物尸体处理：**

*(1)**安乐死后的检查：**在执行安乐死操作后，应由经验丰富的实验人员或兽医快速检查动物死亡原因（如有必要，可在符合生物安全要求的前提下进行剖检）。

*(2)**暂存：**将已安乐死的动物尸体在指定的、符合生物安全要求的暂存设施（如冷库、解剖台）中妥善放置。

*(3)**处置方式：**根据实验室规定和相关环保要求，对动物尸体进行最终处置。常见方式包括：

***高温高压灭菌（焚化）：**这是目前最常用且推荐的方式，能有效杀灭病原体，减少环境污染。

***化学处理（如适用）：**使用特定化学试剂进行灭活处理（需考虑环保影响）。

***深埋（特定条件下）：**需符合环保法规要求，防止地下水污染。

*(4)**记录与交接：**记录动物尸体处置方式、日期，并按照规定进行交接（如与有资质的废物处理公司交接）。

4.**样本最终处理：**

*(1)对于实验采集的样本（血液、组织、尿液等），根据实验目的和后续分析要求，进行最终的保存、处理或销毁。

*(2)如需长期保存，确保样本储存条件（如-80°C冷冻）符合要求。

*(3)如样本不再需要，需按照实验室规定和生物安全要求进行灭活处理或安全销毁。

**三、动物福利保障**

（一）饲养环境

1.**设施标准与维护**

*(1)**环境参数控制：**严格遵守国家或行业标准（如GB/T35899《实验动物环境及设施》）关于温度（21±3°C）、湿度（40-70%）、通风（换气次数≥15次/小时，氨气浓度<5ppm）、光照（12小时明暗交替，光照强度适宜）的要求。配备自动监控系统，并定期（如每月）校准。

*(2)**设施类型：**根据动物种类选择合适的饲养设施，如屏障系统（isolator）或隔离系统（isolator），或普通通风负压动物房（conventionalroom）。屏障系统提供更高的生物安全防护和动物福利水平。

*(3)**笼具选择：**使用符合动物行为学和生理学需求的笼具，提供足够的活动空间（参考NRC指南或类似标准）。例如，小鼠推荐笼体尺寸不小于2500cm³，大鼠不小于4800cm³。考虑提供适当的巢箱或筑巢材料。

*(4)**垫料管理：**使用吸水性、透气性好、无尘的垫料。根据动物需求和实验要求选择合适的垫料类型（如木屑、纸浆）。定期（如每周或每2-3天）更换垫料，保持笼具清洁干燥，减少垫料粉尘和氨气积累。

*(5)**设施维护：**定期检查和维护通风系统、温控系统、光照系统、供水供电系统等，确保其正常运行。及时维修或更换损坏的设施设备。

2.**清洁卫生**

*(1)**清洁频率：**制定严格的笼具清洁消毒程序，包括：

*每日清洁：清理粪便、污物，检查垫料湿度。

*定期彻底清洁：每周或根据需要，移出动物，彻底清洗笼具内壁、底部、食水容器等，然后干燥。

*消毒：使用合适的消毒剂（如含氯消毒剂、季铵盐类消毒剂）对笼具进行消毒，确保消毒效果。注意消毒剂的浓度、作用时间及安全性。

*(2)**卫生工具：**使用专用、清洁的清洁工具，避免交叉污染。工具定期清洗消毒。

*(3)**人员规范：**清洁人员需接受培训，了解清洁流程和消毒要求，穿戴适当的个人防护装备（PPE）。

3.**丰容措施**

*(1)**物理丰容：**根据动物种类和行为习性，提供多样化的丰容物品：

***啮齿类：**啃咬物（木块、无尘纸）、筑巢材料（木屑、棉花）、运动器械（跑轮、转轮）、遮蔽物（小屋、隧道）、不同质地的垫料。

***其他动物（如适用）：**根据需要提供沙浴（如犬）、攀爬架（如猴）、探索玩具等。

*(2)**丰容物品管理：**定期更换或补充丰容物品，保持其清洁，避免成为病原体传播媒介。观察丰容物品对动物行为的影响，及时调整。

*(3)**丰容