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文档简介

2026年生物技术公司招聘:免疫检验技师面试题集一、单选题(每题2分,共20题)1.在ELISA检测中,若样本出现假阴性结果,可能的原因是?A.抗体浓度过高B.样本中存在干扰物质C.底物反应时间过长D.洗涤不彻底2.以下哪种方法不属于免疫印迹技术?A.WesternBlotB.SouthernBlotC.NorthernBlotD.ELISA3.流式细胞术(FCM)最常用于检测哪种指标?A.酶活性B.细胞表面标记物C.DNA含量D.蛋白质定量4.以下哪种试剂常用于免疫荧光染色?A.HRP标记的二抗B.FITC标记的一抗C.ABTS底物D.DAB显色剂5.间接ELISA与直接ELISA的主要区别在于?A.使用的抗体类型B.检测灵敏度C.操作步骤D.仪器要求6.以下哪种方法适用于检测细胞因子?A.RIAB.SPAC.ELISPOTD.EIA7.在免疫组化(IHC)实验中,若背景染色过强,可能的原因是?A.抗体稀释比例不当B.温育时间过长C.样本固定不充分D.封闭不彻底8.以下哪种技术常用于检测病原体抗原?A.PCRB.SPAC.CLIAD.RIA9.以下哪种方法适用于半定量检测?A.ELISAB.WesternBlotC.qPCRD.RIA10.以下哪种缓冲液常用于WesternBlot的转移过程?A.TBSTB.TBSC.Tris-GlycineD.PBS二、多选题(每题3分,共10题)1.WesternBlot实验中,可能影响结果的因素包括?A.蛋白质上样量不均B.电泳电压过高C.抗体稀释比例不当D.转膜不充分2.流式细胞术(FCM)的常用荧光标记物包括?A.PEB.APCC.FITCD.Cy53.ELISA检测中,可能引起假阳性结果的干扰物质包括?A.免疫复合物B.过氧化物酶C.脂肪酸D.糖类4.免疫荧光染色中,提高信噪比的方法包括?A.优化抗体稀释比例B.使用封闭血清C.减少孵育时间D.使用抗荧光淬灭封片剂5.以下哪些技术属于基于抗原抗体反应?A.ELISAB.SPAC.RIAD.PCR6.细胞因子检测的常用方法包括?A.ELISPOTB.ELISAC.LuminexD.WesternBlot7.免疫组化(IHC)实验中,可能影响结果的步骤包括?A.样本固定B.抗体孵育C.脱水处理D.封闭条件8.以下哪些因素会影响ELISA检测的灵敏度?A.抗体质量B.底物浓度C.洗涤次数D.温育时间9.流式细胞术(FCM)的常用分析方法包括?A.门选分选B.表面标记物检测C.DNA含量分析D.细胞凋亡检测10.免疫印迹技术(Blotting)的常见问题包括?A.蛋白质条带弥散B.条带缺失C.背景过高D.抗体非特异性结合三、判断题(每题1分,共10题)1.ELISA检测中,酶标板的洗涤次数越多,结果越准确。(×)2.WesternBlot适用于检测多份样本的同一蛋白。(√)3.流式细胞术(FCM)需要使用荧光显微镜进行观察。(×)4.免疫荧光染色时,可以使用多克隆抗体和单克隆抗体混合使用。(√)5.CLIA检测通常比ELISA更灵敏。(√)6.IHC实验中,抗体孵育温度越高,结果越清晰。(×)7.PCR检测可以直接用于检测细胞因子。(×)8.SPA(固相酶免疫吸附试验)属于非竞争性结合技术。(√)9.细胞因子ELISPOT检测适用于高通量筛选。(×)10.RIA(放射免疫测定)因放射性污染问题逐渐被淘汰。(√)四、简答题(每题5分,共5题)1.简述ELISA检测的原理及其主要步骤。2.流式细胞术(FCM)在免疫检验中有哪些应用场景?3.免疫组化(IHC)实验中,如何减少非特异性染色?4.WesternBlot实验中,如何提高蛋白条带的分辨率?5.在免疫检验中,如何避免假阳性和假阴性结果?五、论述题(每题10分,共2题)1.比较ELISA和WesternBlot在检测蛋白质表达方面的优缺点。2.阐述流式细胞术(FCM)在细胞免疫学中的应用及其技术要点。答案与解析一、单选题答案与解析1.B-解析:假阴性可能由样本中存在高浓度干扰物质(如抗体、补体等)竞争结合检测抗体,导致信号减弱。2.D-解析:ELISA属于基于抗原抗体反应的检测方法,而Southern/NorthernBlot用于核酸检测,WesternBlot用于蛋白质检测。3.B-解析:FCM主要用于细胞表面标记物、细胞内荧光标记物及细胞状态的检测,如细胞周期、凋亡等。4.B-解析:FITC(异硫氰酸荧光素)是常用的荧光标记物,适用于免疫荧光染色。5.A-解析:间接ELISA使用二抗结合酶,而直接ELISA直接使用酶标记的一抗,操作步骤不同。6.C-解析:ELISPOT和ELISPOT技术适用于检测细胞因子分泌,尤其适用于少量样本。7.A-解析:抗体浓度过高会导致非特异性结合,使背景染色增强。8.C-解析:CLIA(化学发光免疫分析)灵敏度高,适用于病原体抗原检测。9.A-解析:ELISA可通过标准曲线进行半定量检测。10.C-解析:Tris-Glycine缓冲液(pH8.3)常用于WesternBlot的转移过程。二、多选题答案与解析1.A,B,C,D-解析:蛋白上样量不均、电泳电压过高、抗体稀释比例不当、转膜不充分都会影响结果。2.A,B,C,D-解析:PE、APC、FITC、Cy5均为常用荧光标记物。3.A,B,C-解析:免疫复合物、过氧化物酶、高脂血症等可干扰ELISA结果。4.A,B,D-解析:优化抗体稀释比例、封闭血清、抗荧光淬灭封片剂可提高信噪比。5.A,B,C-解析:ELISA、SPA、RIA基于抗原抗体反应,PCR基于核酸扩增。6.A,B,C-解析:ELISPOT、ELISA、Luminex是常用方法,WesternBlot较少用于细胞因子检测。7.A,B,D-解析:样本固定、抗体孵育、封闭条件都会影响IHC结果。8.A,B,C,D-解析:抗体质量、底物浓度、洗涤次数、温育时间均影响灵敏度。9.A,B,C,D-解析:门选分选、表面标记物检测、DNA含量分析、细胞凋亡检测是FCM常用分析。10.A,B,C,D-解析:蛋白条带弥散、条带缺失、背景过高、非特异性结合是常见问题。三、判断题答案与解析1.×-解析:洗涤次数过多会导致结合蛋白流失,反而影响结果。2.√-解析:WesternBlot可同时检测多份样本的蛋白表达。3.×-解析:FCM使用流式细胞仪,无需荧光显微镜。4.√-解析:混合使用可提高检测范围,但需注意交叉反应。5.√-解析:CLIA灵敏度高,比ELISA更适合低浓度检测。6.×-解析:温度过高易导致抗体变性,降低结合效率。7.×-解析:PCR检测核酸,需通过ELISA或WesternBlot验证蛋白表达。8.√-解析:SPA利用酶标记的抗体结合抗原,属于非竞争性结合。9.×-解析:ELISPOT适用于少量样本,高通量筛选需用ELISA或阵列技术。10.√-解析:RIA存在放射性污染问题,逐渐被CLIA等替代。四、简答题答案与解析1.ELISA检测原理及步骤-原理:基于抗原抗体特异性结合,通过酶标记的抗体或抗原与底物反应产生信号。-步骤:①包被(抗原或抗体固定于固相载体);②封闭(阻断非特异性结合);③孵育样本(与待测物结合);④孵育酶标二抗(若为间接法);⑤加底物显色;⑥终止反应,测定吸光度。2.FCM在免疫检验中的应用-细胞表面标记物检测(如CD3+T细胞);细胞内荧光染色(如凋亡标记物);细胞周期分析;免疫分群;药物筛选等。3.减少IHC非特异性染色的方法-优化抗体稀释比例;使用正常血清封闭;使用同型对照抗体;优化抗原修复条件;减少孵育时间;使用抗荧光淬灭封片剂。4.提高WesternBlot蛋白条带分辨率的方法-优化凝胶浓度(如梯度凝胶);调整电泳电压;使用预染Marker;优化转膜条件;减少样本上样量;使用高效抗体。5.避免假阳性和假阴性结果的方法-使用阴性对照和阳性对照;优化抗体浓度和孵育条件;避免交叉污染;使用内参蛋白校正;重复实验验证。五、论述题答案与解析1.ELISA与WesternBlot的优缺点比较-ELISA:操作简单、快速、成本较低,适用于高通量筛选,但灵敏度相对较低,难以检测修饰蛋白或寡聚蛋白。-WesternBlot:灵敏度更高,可检测蛋白

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