生物检测岗位考试题库及答案

生物检测岗位考试题库及答案一、单选题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.在实时荧光定量PCR中，用于消除引物二聚体干扰的常用荧光探针类型是（）A.SYBRGreenIB.TaqManC.EvaGreenD.LUXprimer答案：B2.对同一批次ELISA试剂盒进行灵敏度验证时，若阳性对照OD值低于说明书下限，首先应排查（）A.酶标仪波长设置B.洗板机针孔堵塞C.底物溶液失效D.封板膜粘性不足答案：C3.采用二代测序平台检测FFPE样本的突变频率时，最易导致假阳性的环节是（）A.片段化后末端修复B.文库PCR富集C.桥式扩增D.碱基识别算法答案：B4.在微生物限度检查中，若供试品对细菌有中度抑菌活性，首选的中和剂为（）A.卵磷脂吐温80B.硫代硫酸钠C.组氨酸卵磷脂D.聚山梨酯20答案：A5.对血清中HBVDNA进行定量时，若内标Ct值较历史均值升高1.5个循环，提示（）A.提取效率下降B.扩增体系抑制C.标准品降解D.探针荧光淬灭答案：A6.采用HPLCMS/MS进行药代动力学分析时，为降低基质效应，通常选择（）A.梯度洗脱B.氘代内标C.柱后补偿D.源内裂解答案：B7.在细胞培养支原体检测中，PCR法与指示细胞法结果不一致，应优先采用（）A.重复PCRB.荧光染色法C.16SrRNA测序D.盲传三代答案：C8.对新型冠状病毒抗原检测试剂进行临床性能评价时，计算阳性符合率的参照方法是（）A.病毒分离培养B.数字PCRC.高通量测序D.实时荧光RTPCR答案：D9.在真菌βD葡聚糖检测中，若空白对照出现阳性信号，最可能污染环节是（）A.采样试管B.蒸馏水系统C.移液器枪头D.操作者手套答案：B10.采用流式细胞术进行CD34+干细胞计数时，ISAGE方案要求至少获取（）A.30000个有核细胞B.75000个CD34+事件C.100000个活细胞D.150000个总事件答案：B11.对血液筛查NAT试剂进行批间精密度验证时，通常采用（）A.2×2×2设计B.3×3×3设计C.5×5×5设计D.10×10×10设计答案：B12.在数字PCR中，若微滴发生器的油相出现乳化失败，首先应调整（）A.油相粘度B.水相pHC.表面活性剂浓度D.温度控制答案：C13.采用MALDITOFMS进行细菌鉴定时，若得分值<1.7，下一步应（）A.重复点靶B.增加甲酸提取C.换用生化鉴定D.16S测序确认答案：B14.在CART细胞拷贝数检测中，为避免基因组重复序列干扰，首选的qPCR策略是（）A.外显子内含子跨接B.质粒标准曲线C.数字PCR绝对定量D.相对ΔΔCt法答案：A15.对疫苗效力ELISA检测进行系统适用性试验时，要求CV值不超过（）A.5%B.10%C.15%D.20%答案：B16.在微生物质谱鉴定中，若大肠杆菌被误判为志贺菌，最可能原因是（）A.数据库缺失B.蛋白指纹重叠C.样品量不足D.靶板污染答案：B17.采用ddPCR进行EGFRL858R突变检测时，若突变型微滴数<3，应报告为（）A.未检出B.低于LODC.0拷贝/μLD.阴性答案：B18.在无菌检查中，若硫乙醇酸盐培养基出现浑浊但镜检无微生物，应首先考虑（）A.培养基氧化层B.碳酸钙沉淀C.温度波动D.光照影响答案：A19.对HPV分型试剂进行交叉反应验证时，需纳入的最低近源型别数为（）A.3B.5C.7D.10答案：C20.在NGS建库过程中，使用磁珠进行片段筛选时，若目标片段为300bp，最佳磁珠比例为（）A.0.6×B.0.8×C.1.0×D.1.2×答案：B21.采用qPCR进行转基因大豆检测时，若内参基因Ct>30，提示（）A.DNA降解B.抑制剂存在C.取样误差D.引物二聚体答案：A22.在细胞STR鉴定中，若两个样本的匹配度为85%，应判定为（）A.同一来源B.高度相关C.不同来源D.需进一步验证答案：D23.对血液筛查HBsAg试剂进行灵敏度验证时，WHO标准品浓度为（）A.0.5IU/mLB.1.0IU/mLC.2.0IU/mLD.5.0IU/mL答案：B24.在微生物限度检查中，若R2A琼脂计数结果显著高于TSA，原因可能是（）A.培养基营养差异B.培养温度不同C.pH范围差异D.培养时间差异答案：A25.采用ELISPOT检测IFNγ时，若背景斑点>10/孔，应优先（）A.降低包被抗体浓度B.增加洗板次数C.更换血清批次D.降低细胞密度答案：B26.在病毒滴度TCID50测定中，若出现跳孔现象，应首先考虑（）A.加样误差B.病毒聚集C.细胞状态差异D.培养箱CO2波动答案：A27.对qPCR探针进行HPLC纯化时，若主峰前出现小峰，提示（）A.脱盐不完全B.短片段缺失C.荧光基团脱落D.氧化副产物答案：D28.在CART细胞检测中，若载体拷贝数>5copies/细胞，需警惕（）A.插入突变B.细胞凋亡C.表达沉默D.免疫原性答案：A29.采用NGS进行肿瘤突变负荷（TMB）分析时，若覆盖度<100×，将导致（）A.灵敏度下降B.特异性下降C.假阳性升高D.假阴性升高答案：D30.在支原体PCR检测中，若内参条带缺失，应首先检查（）A.引物浓度B.DNA聚合酶活性C.样本DNA质量D.电泳缓冲液答案：C二、配伍题（每题2分，共20分。每组试题先列出A、B、C、D四个备选答案，后列出若干题干，每题选出一个最佳答案，每个备选答案可重复选用）A.数字PCRB.荧光原位杂交C.二代测序D.流式细胞术31.检测外周血BCRABL1融合基因MR4.5级别，首选（）答案：A32.确认HER2基因扩增状态，金标准为（）答案：B33.同时筛查肺癌EGFR、ALK、ROS1、MET、KRAS突变，首选（）答案：C34.监测CD19CART细胞体内存续水平，首选（）答案：D35.检测FFPE样本EGFRT790M突变丰度0.05%，首选（）答案：A36.分析急性白血病免疫表型，首选（）答案：D37.检测染色体17p缺失，首选（）答案：B38.进行肿瘤突变负荷评估，首选（）答案：C39.监测移植后供受体嵌合率，首选（）答案：A40.检测循环肿瘤细胞PDL1表达，首选（）答案：D三、判断题（每题1分，共10分。正确打“√”，错误打“×”）41.在qPCR中，Ct值与起始模板量呈线性反比关系。（）答案：×42.采用EDTA抗凝血浆进行HBVDNA检测，结果可能低于血清。（）答案：√43.在ELISA中，TMB显色后终止液为硫酸，可提高吸光度稳定性。（）答案：√44.数字PCR无需标准曲线即可实现绝对定量。（）答案：√45.采用16SrRNA测序进行菌种鉴定时，V3V4区比V1V2区具有更高分辨率。（）答案：√46.在流式细胞术中，FITC与PE荧光补偿系数可设为负值。（）答案：×47.支原体污染可导致细胞增殖加快。（）答案：×48.采用NGS进行ctDNA检测时，UMI技术可降低背景错误率。（）答案：√49.在无菌检查中，若培养14天无微生物生长，即可判定无菌。（）答案：√50.采用ddPCR进行融合基因检测时，野生型微滴数为0即可报告阳性。（）答案：×四、填空题（每空1分，共20分）51.在实时荧光定量PCR中，用于校正不同样本间RNA上样量的内参基因通常选择________或________。答案：GAPDH；βactin52.根据《中国药典》2020版，无菌检查的培养时间不少于________天，环境洁净度应为________级。答案：14；A53.数字PCR的微滴生成率应控制在________%以上，微滴直径通常为________μm。答案：85；12054.在ELISA中，封闭液常用________浓度为________的BSA或脱脂奶粉。答案：15%；37℃55.采用NGS进行ctDNA检测时，背景错误率主要由________和________引入。答案：PCR扩增错误；测序平台错误56.流式细胞术进行细胞周期分析时，常用染料为________，其最大激发波长为________nm。答案：PI；53557.在微生物限度检查中，若供试品为油剂，应加入________作为乳化剂，培养温度为________℃。答案：吐温80；303558.支原体PCR检测的靶基因通常为________，产物长度约为________bp。答案：16SrRNA；27059.采用HPLCMS/MS进行定量时，内标应选择________，以消除________效应。答案：氘代类似物；基质60.在CART细胞拷贝数检测中，若标准曲线R²<________，应重新建立曲线，灵敏度通常要求达到________copies/μgDNA。答案：0.99；10五、简答题（每题10分，共30分）61.简述实时荧光定量PCR中引物二聚体产生的原因及优化策略。答案：原因：引物3′端互补、退火温度过低、引物浓度过高、镁离子浓度过高、循环数过多。优化：1.重新设计引物，避免3′端互补，使用PrimerBLAST验证；2.提高退火温度25℃；3.降低引物浓度至100200nM；4.优化镁离子浓度，梯度测试1.53.0mM；5.采用热启动Taq酶，减少非特异扩增；6.使用探针法替代SYBRGreenI；7.熔解曲线分析确认，若72℃以下出现峰，提示二聚体；8.采用UDG酶防污染，减少非特异积累；9.增加模板量，降低引物相对比例；10.使用touchdownPCR策略，前10个循环每循环降低0.5℃。62.描述数字PCR与实时荧光定量PCR在检测低丰度突变时的技术差异及各自优势。答案：差异：1.定量原理：qPCR依赖标准曲线相对定量，ddPCR为终点绝对定量；2.灵敏度：ddPCR可达0.01%，qPCR约1%；3.精密度：ddPCRCV<5%，qPCRCV>10%；4.抑制耐受：ddPCR对抑制剂耐受高10倍；5.标准品：ddPCR无需标准品，避免标准品误差；6.成本：ddPCR试剂成本高35倍；7.通量：qPCR可96孔同时，ddPCR通常18样本；8.数据解读：ddPCR直接计数微滴，qPCR需标准曲线插值；9.动态范围：ddPCR5logs，qPCR7logs；10.操作复杂度：ddPCR需微滴生成，步骤多。优势：ddPCR适合低丰度、绝对定量、无标准品场景；qPCR适合高通量、动态范围宽、成本敏感场景。63.阐述NGS建库过程中接头二聚体形成机制及控制措施。答案：机制：1.接头浓度过高，自身退火；2.插入片段不足，优先连接接头；3.T4