2025年感染病病原微生物检测技术专项训练试卷及答案

2025年感染病病原微生物检测技术专项训练试卷及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个最佳答案，请将正确选项字母填入括号内）1.在布鲁氏菌病暴发调查中，首选的初筛血清学方法是（）A.试管凝集试验（SAT）B.酶联免疫吸附试验（ELISA）C.补体结合试验（CFT）D.虎红平板凝集试验（RBPT）答案：D2.对疑似霍乱病例粪便进行快速初筛，WHO推荐的最适pH值培养基为（）A.pH6.8碱性蛋白胨水B.pH7.4营养肉汤C.pH8.6碱性蛋白胨水D.pH9.0硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂答案：C3.采用实时荧光PCR检测新冠病毒，对ORF1ab与N基因同时阳性但Ct值相差3.5循环，报告结果应判定为（）A.阴性B.可疑，需重复采样C.阳性D.无法判定答案：C4.在碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌的表型确证试验中，改良Hodge试验的指示菌为（）A.大肠埃希菌ATCC25922B.金黄色葡萄球菌ATCC25923C.铜绿假单胞菌ATCC27853D.肺炎链球菌ATCC49619答案：A5.对临床怀疑登革热患者，可检测NS1抗原的最佳采血时段为发病后（）A.0–1天B.1–7天C.7–14天D.14天后答案：B6.采用MALDITOFMS进行细菌鉴定时，用于校正基质峰的内标通常为（）A.细胞色素CB.大肠杆菌裂解液C.蛋白质校准标准Ⅰ（BTS）D.马心肌红蛋白答案：C7.结核分枝杆菌GeneXpertMTB/RIF检测中，探针A–E对应的基因区域为（）A.16SrRNAB.rpoB核心区间C.IS6110D.gyrA答案：B8.对艰难梭菌毒素检测，细胞毒中和试验使用的细胞系为（）A.VeroB.Hep2C.CHOD.McCoy答案：A9.在乙脑病毒分离培养时，最敏感的细胞系为（）A.C6/36B.BHK21C.MDCKD.VeroE6答案：A10.对流感嗜血杆菌进行卫星试验时，需交叉划线接种的细菌为（）A.金黄色葡萄球菌B.表皮葡萄球菌C.大肠埃希菌D.铜绿假单胞菌答案：A11.采用LAMP技术检测疟原虫，其引物设计针对的靶基因为（）A.18SrRNAB.cspC.msp1D.pfcrt答案：A12.对CRE菌株进行mCIM试验，培养基为（）A.麦康凯琼脂B.水解酪蛋白琼脂C.胰酪大豆胨肉汤D.硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂答案：B13.在寨卡病毒RTPCR检测中，可区分非洲与亚洲谱系的靶基因是（）A.3′UTRB.prMC.NS5D.E答案：B14.对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行表型筛查时，头孢西丁纸片扩散法的抑菌圈直径折点为（）A.≤21mmB.≤24mmC.≤27mmD.≤30mm答案：A15.采用宏基因组测序（mNGS）检测脑脊液病原体时，去除人源核酸最常用的探针库为（）A.rRNA探针B.HumanCot1C.CRISPR探针D.16S探针答案：B16.对鼠疫耶尔森菌进行噬菌体裂解试验，培养温度为（）A.25℃B.30℃C.35℃D.28℃答案：D17.在轮状病毒PAGE电泳分型中，A组特征性电泳型为（）A.4232B.2432C.3232D.2232答案：A18.对产碳青霉烯酶OXA48型菌株，最适表型确证试验为（）A.CarbaNPB.BlueCarbaC.mCIMD.EDTA协同试验答案：B19.采用胶体金免疫层析检测艰难梭菌谷氨酸脱氢酶（GDH），其标记抗体为（）A.兔多抗B.鼠单抗C.羊多抗D.鸡IgY答案：B20.对诺如病毒GⅡ型实时RTPCR，常用内参为（）A.MS2噬菌体B.鼠诺如病毒C.猫杯状病毒D.牛诺如病毒答案：A21.对耳念珠菌进行快速鉴定，其MALDITOFMS特征峰为（）A.2427m/zB.2514m/zC.2709m/zD.3186m/z答案：B22.采用环丝氨酸头孢西丁果糖琼脂（CCFA）培养艰难梭菌时，需厌氧培养（）A.12hB.24hC.48hD.72h答案：C23.对耐多药结核（MDRTB）进行表型药敏试验，培养基推荐为（）A.罗氏培养基B.米氏7H10琼脂C.米氏7H9肉汤D.Ogawa培养基答案：C24.对寨卡病毒进行IgM抗体检测，需排除交叉反应的病毒为（）A.登革病毒B.西尼罗病毒C.黄热病毒D.以上均是答案：D25.对产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）进行stx2基因亚型鉴定，最常用的方法是（）A.普通PCR+测序B.实时PCR高分辨率熔解曲线C.环介导等温扩增D.微阵列芯片答案：A26.对耐万古霉素肠球菌（VRE）进行表型确证，其MIC折点为（）A.≥8mg/LB.≥16mg/LC.≥32mg/LD.≥64mg/L答案：C27.对鹦鹉热衣原体进行实时PCR，其靶基因为（）A.ompAB.16SrRNAC.pmpgeneD.MOMP答案：B28.对炭疽芽孢杆菌进行串珠试验，培养基需添加（）A.青霉素（0.5IU/mL）B.多粘菌素C.万古霉素D.头孢曲松答案：A29.对狂犬病毒进行小鼠颅内接种分离，观察期为（）A.3天B.7天C.14天D.28天答案：D30.对流感B型病毒进行系鉴定（Yamagata/Victoria），最佳靶片段为（）A.HA1B.HA5C.NAD.NS1答案：A二、配伍题（每题1分，共10分。每题由A–E五个选项与①–⑤五个描述配伍，将正确字母填入括号内，可重复）A.16SrRNA基因B.rpoB基因C.hsp65基因D.gyrB基因E.ITS区①用于分枝杆菌属快速鉴定（）②用于不动杆菌属种间鉴别（）③用于棒状杆菌属种间鉴别（）④用于金黄色葡萄球菌种水平确认（）⑤用于真菌种水平鉴定（）答案：①C②D③B④A⑤E三、填空题（每空1分，共20分）31.实时荧光PCR中，TaqMan探针5′端标记的荧光基团常用________，3′端标记的淬灭基团常用________。答案：FAM，BHQ132.对耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌进行表型确证，推荐联合使用________与________两种抑制剂。答案：EDTA，Dipicolinicacid33.结核分枝杆菌GeneXpert检测中，若rpoB探针全部缺失突变，则报告为________耐药。答案：利福平34.对肠道病毒进行血清型鉴定，金标准方法为________中和试验。答案：微量细胞35.对耐甲氧西林葡萄球菌进行mecA基因检测，其靶片段大小为________bp。答案：31036.对耐万古霉素金黄色葡萄球菌（VRSA）进行表型确证，其耐药基因为________。答案：vanA37.对乙型肝炎病毒进行基因分型，最常用的区段为________基因。答案：S38.对疟原虫进行LAMP检测，其反应温度为________℃。答案：6339.对耐多药铜绿假单胞菌进行外排泵表型检测，常用抑制剂为________。答案：PAβN40.对耐克拉霉素幽门螺杆菌进行耐药基因检测，其23SrRNA突变位点为________。答案：A2143G四、判断题（每题1分，共10分。正确打“√”，错误打“×”）41.对耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌，CarbaNP试验阳性即可判定为产KPC酶。（）答案：×42.对狂犬病毒进行RTPCR检测时，可取唾液、脑脊液及颈后皮肤活检标本。（）答案：√43.对耳念珠菌进行VITEK2Compact鉴定时，易误报为希木龙念珠菌。（）答案：√44.对诺如病毒进行环境拭子检测时，无需处理抑制物即可直接提取RNA。（）答案：×45.对炭疽芽孢杆菌进行γ噬菌体裂解试验时，需在42℃培养。（）答案：×46.对登革病毒进行IgG抗体检测时，单份血清IgG阳性即可确诊急性感染。（）答案：×47.对流感H5N1病毒进行鸡胚分离时，需使用SPF级9–11日龄鸡胚。（）答案：√48.对产志贺毒素大肠埃希菌进行stx2f亚型检测时，可用冷增菌提高检出率。（）答案：√49.对耐多药结核进行全基因组测序时，异烟肼耐药主要与katGS315T突变相关。（）答案：√50.对耐万古霉素肠球菌进行vanC型基因检测时，其表型仍为万古霉素敏感。（）答案：×五、简答题（每题6分，共30分）51.简述实时荧光PCR检测新冠病毒ORF1ab与N基因双靶标结果不一致时的处理流程。答案：1.复核提取与扩增过程，排除操作误差；2.重新提取同一样本RNA，重复双靶标PCR；3.若仍不一致，采用第三方试剂盒验证；4.同时采集新样本，进行双平台平行检测；5.结合流行病学、临床表现综合判定；6.按国家卫健委流程上报可疑结果。52.简述MALDITOFMS鉴定耳念珠菌时避免误报为希木龙念珠菌的关键技术要点。答案：1.使用新鲜培养24–48h菌落，避免过度培养；2.采用70%甲酸乙腈提取法，提高蛋白释放；3.使用BrukerBiotyper软件升级至最新数据库，含耳念珠菌参考谱；4.设置≥2.0分阈值，低于此值需补充分子鉴定；5.对可疑峰图进行人工比对，重点查看2514m/z峰；6.必要时采用ITS测序确证。53.简述对CRE菌株进行mCIM与eCIM联合试验区分金属酶与丝氨酸酶的操作步骤。答案：1.挑取过夜菌落制备0.5McF菌悬液；2.取10μL加入2mL胰酪胨肉汤，混匀；3.浸入美罗培南纸片（10μg），35℃孵育4h；4.取0.5McF指示菌大肠杆菌ATCC25922涂布MH琼脂；5.将纸片贴于平板中央，35℃孵育18–20h；6.测量抑菌圈，mCIM≥16mm为阴性，≤15mm为阳性；7.eCIM加EDTA后重复，若抑菌圈增大≥5mm判定为金属酶，否则为丝氨酸酶。54.简述对艰难梭菌进行细胞毒中和试验的质控要求。答案：1.每批次设阳性毒素A/B标准品；2.设阴性对照（培养基上清）；3.设细胞对照（仅细胞+培养基）；4.设抗毒素中和对照（毒素+抗毒素）；5.使用Vero细胞，浓度1×10^5/mL，培养48h；6.细胞病变≥80%判为阳性；7.记录毒素滴度，报告≥10^2稀释度为阳性阈值。55.简述对耐多药结核进行全基因组测序预测乙胺丁醇耐药的数据库与算法。答案：1.使用TBProfiler数据库，含embB306、406、497位点；2.采用PhyResSE算法，覆盖embA、embC启动子区；3.设置≥10×深度，≥90%一致性；4.对embB306突变赋予高权重（OR>10）；5.结合表型MIC≥5mg/L验证；6.输出VCF文件，人工复核Indel；7.最终报告按WHO分级（高/低/不确定）。六、案例分析题（每题10分，共20分）56.患者男，35岁，发热咳嗽3周，CT示双肺上叶空洞。痰涂片抗酸染色阳性，GeneXpertMTB/RIF检出MTB且rpoB探针E缺失。传统比例法药敏：利福平耐药、异烟肼敏感。问题：（1）该患者是否可以确诊为耐多药结核？（2）下一步应补充哪些检测？（3）GeneXpert探针E缺失的分子机制是什么？答案：（1）不能，MDR需同时耐利福平与异烟肼，本例异烟肼敏感；（2）应加做异烟肼、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、链霉素比例法或MIC法；同时行katG、inhA测序；（3）探针E对应rpoB531位点，缺失突变提示531TCG→TTG（Ser→Leu），导致探针无法结合。57.新生儿