微生物检验技师技能竞赛题库与答案

2026年微生物检验技师技能竞赛题库与答案一、单选题（每题1分，共20题）1.在无菌操作过程中，以下哪项措施最能有效防止微生物污染？A.操作人员洗手次数不足B.环境空气流通不畅C.使用超净工作台或生物安全柜D.培养基灭菌后未冷却即使用2.稀释倍数为10⁻³时，每毫升原液接种100毫升培养基，接种后的菌液浓度约为多少？A.10³CFU/mLB.10⁶CFU/mLC.10⁹CFU/mLD.10⁻⁶CFU/mL3.细菌培养时，哪项现象提示培养基可能被污染？A.培养皿底部有菌落B.培养基出现浑浊C.菌落形态与目标菌株一致D.培养皿边缘有散在菌落4.革兰染色中，阳性菌和阴性菌最主要的区别在于：A.细胞大小不同B.细胞壁厚度不同C.细胞核形态不同D.荚膜的有无5.肠道致病性大肠埃希菌（EPEC）的主要致病因子是：A.H抗原B.O抗原C.K抗原D.鞭毛蛋白6.需氧培养时，厌氧菌通常无法生长的原因是：A.培养基营养不足B.缺乏氧气C.培养温度过高D.培养时间过长7.真菌培养时，最常用的温箱温度是：A.30℃B.37℃C.45℃D.56℃8.沙门氏菌属与志贺氏菌属的主要区别在于：A.血清型不同B.培养温度要求不同C.致病机制不同D.生化反应不同9.细菌耐药性产生的主要机制是：A.环境污染B.患者免疫力下降C.细菌基因突变D.药物使用不规范10.快速鉴定金黄色葡萄球菌的方法是：A.靛基质试验B.协同试验C.硫化氢试验D.靛红试验11.培养基pH值通常调节在多少范围最适宜细菌生长？A.4.0-5.0B.6.5-7.5C.8.0-9.0D.10.0-11.012.耐热芽孢最适的灭菌温度是：A.100℃B.121℃C.150℃D.180℃13.细菌菌落形态特征中，"M"型菌落通常提示：A.铜绿假单胞菌B.金黄色葡萄球菌C.大肠埃希菌D.变形杆菌14.痰液标本培养时，若出现少量杂菌生长，可能的原因是：A.标本采集不规范B.培养基污染C.患者自身菌群污染D.以上都是15.霉菌培养最适宜的湿度是：A.30%-40%B.50%-60%C.70%-80%D.90%-100%16.细菌的生化鉴定依据是：A.细胞形态B.生化反应谱C.API鉴定卡D.药敏试验结果17.环境微生物监测中，常用哪种方法评估空气洁净度？A.平板菌落计数B.显微镜直接计数C.流式细胞术D.电镜观察18.细菌DNA的提取通常需要使用：A.蛋白酶KB.胰蛋白酶C.RNA酶D.脱氧核糖核酸酶19.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的主要特征是：A.对青霉素敏感B.对万古霉素敏感C.对甲氧西林耐药D.无毒力20.实验室废弃物处理中，含病原微生物的培养基应如何处理？A.直接丢弃B.高压蒸汽灭菌后丢弃C.浓硫酸酸化后丢弃D.漂白处理后丢弃二、多选题（每题2分，共10题）1.细菌培养过程中，以下哪些因素会影响生长速度？A.温度B.pH值C.营养物质D.氧气供应2.革兰染色步骤包括：A.初染B.媒染C.复染D.脱色3.真菌检验中，常用的显微镜检查方法包括：A.暗视野显微镜B.相差显微镜C.荧光显微镜D.光学显微镜4.细菌耐药性传播途径包括：A.患者间传播B.环境污染C.医务人员交叉感染D.动物源性传播5.常见的细菌培养基包括：A.血琼脂平板B.麦康凯琼脂平板C.中国蓝琼脂平板D.沙氏葡萄糖琼脂平板6.细菌菌落形态特征包括：A.大小B.形状C.颜色D.突起7.环境微生物监测中，常用的采样方法包括：A.沉降法B.擦拭法C.灌洗法D.活性炭吸附法8.细菌鉴定常用的方法包括：A.生化试验B.API鉴定系统C.基因测序D.药敏试验9.实验室生物安全等级包括：A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-410.细菌耐药性防控措施包括：A.规范用药B.加强监测C.消毒隔离D.疫苗接种三、判断题（每题1分，共10题）1.细菌培养时，厌氧罐内需通入无氧气体（如氮气+氢气+CO₂）。2.革兰染色阳性菌的细胞壁较厚，能保留结晶紫染料。3.大肠埃希菌是人体正常菌群，无致病性。4.真菌的培养温度通常比细菌高。5.耐热芽孢可在121℃下被完全灭活。6.细菌的生化反应谱具有种属特异性。7.环境微生物监测中，空气采样通常使用直径9cm的培养皿。8.细菌耐药性产生与抗生素滥用无关。9.MRSA对万古霉素敏感，属于相对低毒菌株。10.实验室废弃物处理时，含病原微生物的培养基可直接倒入下水道。四、简答题（每题5分，共4题）1.简述革兰染色的原理及其临床意义。2.简述真菌检验的基本步骤。3.简述细菌耐药性产生的主要原因。4.简述实验室生物安全的基本原则。五、论述题（每题10分，共2题）1.试述肠道致病性大肠埃希菌的检验流程及临床意义。2.试述医院环境中微生物污染的防控措施。答案与解析一、单选题答案与解析1.C解析：超净工作台或生物安全柜能提供无菌操作环境，有效防止微生物污染。2.A解析：稀释10⁻³后接种100mL，原液菌数为10³CFU/mL×10³=10⁶CFU/mL，但实际接种体积为100mL，因此菌液浓度约为10³CFU/mL。3.B解析：培养基出现浑浊提示有大量微生物生长，可能是污染。4.B解析：革兰阳性菌细胞壁较厚，含大量肽聚糖，能保留结晶紫染料；阴性菌细胞壁较薄，易被脱色。5.D解析：EPEC的致病因子是致病性岛（EIEC），产生鞭毛蛋白吸附宿主细胞。6.B解析：厌氧菌需在无氧环境下生长，氧气会抑制其代谢。7.B解析：大多数真菌在37℃下生长良好，但部分真菌需更高温度（如酵母菌）。8.D解析：沙门氏菌属氧化酶阴性，志贺氏菌属氧化酶阳性。9.C解析：细菌通过基因突变或质粒传递耐药基因。10.B解析：协同试验（金葡菌与S.aureus产生溶血环）可快速鉴定金黄色葡萄球菌。11.B解析：细菌最适pH6.5-7.5，过高或过低会抑制生长。12.B解析：121℃高压蒸汽灭菌可杀灭耐热芽孢。13.A解析："M"型菌落（迁徙生长）是铜绿假单胞菌典型特征。14.D解析：杂菌可能源于标本、培养基或操作污染。15.C解析：霉菌生长需高湿度（70%-80%）。16.B解析：生化反应谱是细菌鉴定的核心依据。17.A解析：平板菌落计数是评估空气洁净度常用方法。18.A解析：蛋白酶K可降解蛋白质，保护DNA。19.C解析：MRSA对甲氧西林耐药，但万古霉素敏感。20.B解析：高压蒸汽灭菌后丢弃可防止环境污染。二、多选题答案与解析1.A,B,C,D解析：温度、pH、营养、氧气均影响细菌生长。2.A,B,C,D解析：革兰染色包括初染、媒染、复染、脱色四步。3.A,B,C,D解析：四种显微镜均可用于真菌观察。4.A,B,C,D解析：耐药性可通过多种途径传播。5.A,B,C,D解析：均为常用培养基。6.A,B,C,D解析：菌落特征包括大小、形状、颜色、突起等。7.A,B,C,D解析：均为常用采样方法。8.A,B,C,D解析：均为细菌鉴定方法。9.A,B,C,D解析：生物安全等级从BSL-1到BSL-4。10.A,B,C,D解析：均为耐药性防控措施。三、判断题答案与解析1.√解析：厌氧罐需通入无氧气体以维持环境。2.√解析：革兰阳性菌细胞壁厚，不易脱色。3.×解析：部分大肠埃希菌可致病（如EPEC）。4.×解析：真菌生长温度通常比细菌低。5.√解析：121℃可灭活耐热芽孢。6.√解析：生化反应谱具有种属特异性。7.√解析：9cm培养皿是标准空气采样皿。8.×解析：抗生素滥用会诱导耐药性产生。9.×解析：MRSA虽敏感，但仍具高致病性。10.×解析：应高压灭菌后处理，不可随意丢弃。四、简答题答案与解析1.革兰染色的原理及临床意义原理：革兰染色利用细菌细胞壁厚度差异，通过结晶紫-碘复合物和脱色剂作用，将细菌分为革兰阳性（保留紫色）和阴性（变红色）。临床意义：帮助初步鉴定细菌，指导抗生素选择（如G⁺菌对青霉素敏感，G⁻菌对头孢菌素敏感）。2.真菌检验的基本步骤①标本采集与处理（如离心、过滤）；②直接镜检（观察菌丝、孢子）；③培养分离（沙氏葡萄糖琼脂）；④形态学鉴定（菌落形态、显微结构）；⑤必要时做分子生物学鉴定（如PCR）。3.细菌耐药性产生的主要原因①滥用抗生素（诱导耐药基因表达）；②耐药基因转移（质粒、转座子）；③细菌进化（自然选择）；④环境污染（耐药菌富集）。4.实验室生物安全的基本原则①防护分级（BSL-1至BSL-4）；②个人防护（手套、口罩、实验服）；③环境控制（通风、消毒）；④废弃物处理（灭菌后丢弃）；⑤人员培训（操作规范）。五、论述题答案与解析1.肠道致病性大肠埃希菌的检验流程及临床意义检验流程：①标本采集（粪便、肛拭子）；②直接镜检（WBC、RBC）；③增菌培养（TSI、麦康凯）；④