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文档简介
文冠果根腐病病原鉴定及根腐病防控药剂筛选研究摘要文冠果根腐病为我国近年新出现的根腐病害,新疆多个地区均有分布,该病主要为害文冠果树的根部组织,病部组织出现黑褐色腐烂症状,随病情恶化,腐烂病斑不断扩展,根的一些输导组织烂掉发黑,造成相应的上部植株枯萎死亡。该病已成为阻碍文冠果产业发展的重要因素之一。这四种病菌国内外均未见为害文冠果。目前针对文冠果根腐真菌防治措施单一,且效果不稳定。关键词:文冠果;根腐病;分离鉴定;生物学特性;室内药剂筛选目录 30806一、引言 129928二、文冠果根腐病病原菌生物学特性研究 127349(一)材料与方法 180171供试菌株 1295722供试培养基配制 1175683生物学测定方法 216413(二)结果与分析 2146951不同培养基对菌丝生长的影响 386352不同温度对菌丝生长的影响 5260713不同pH对菌丝生长的影响 729995(三)小结与讨论 931590三、文冠果根腐病防控药剂筛选 1113952(一)材料与方法 1173041供试菌株 11251782培养基 11121133供试药剂 116808412种杀菌剂对病原菌的抑菌效果 126643(二)结果与分析 1228988(三)小结与讨论 2024704四、结论 225069参考文献 23一、引言2019年6月份新疆阿克苏地区沙雅县发生文冠果根腐病,致使近20%文冠果苗木萎蔫,还导致周围少量成龄树死亡,严重地威胁着新疆文冠果产业健康地发展。目前,关于文冠果根腐病菌及其病原物还未完全弄清,对其危害程度如何认识?这种根腐病害有哪些主,次致病的病原菌?病害症状表现为什么样的特点?这种病原菌的主要生物学特性有哪些?病原物对寄主生理代谢有何影响?病原菌的生长条件和环境之间的关系是怎样的?该病原在不同寄主上表现出哪些差异?怎样有效地控制这种根腐病害的发生?这些学术研究在农业生产实践中又有其不可忽视的地位,也正是引发了大家开始有关这种根腐病的研究。国内外还未见到对文冠果根腐和病原菌的鉴定报道、生物学特性及药剂筛选的有关研究报告,本次研究就由以上的研究顺序进行,为深入认识文冠果根腐病的侵染规律和迅速蔓延的关键因子,并进行综合防控措施的制定打下基础。同时,由于病害是由多种病原微生物引起的一种毁灭性灾害,一旦发生将会给当地文冠果生产造成极大危害。二、文冠果根腐病病原菌生物学特性研究由于病害是由多种病原微生物引起的一种毁灭性灾害,一旦发生将会给当地文冠果生产造成极大危害。因此,研究文冠果根腐霉属真菌对该病的致病机制具有重要意义。通过对有关文献的检索,文冠果根腐病至今未见有确切报导。病原物种类较多,包括腐霉、青霉、丝核菌类等。本实验旨在从微观水平揭示文冠果根腐病菌与其寄主间互作机制。通过对不同碳源和温度的研究、3个方面,研究了不同pH在菌丝生长中的作用,并进行了生物学特性的研究,阐明了文冠果根腐病病原菌的生活习性和适宜的生长环境条件,希望能较好地解决文冠果根腐病和本区环境条件之间的内在联系,以及病害暴发蔓延的主要影响因素,对病害的有效防治提供了理论依据。(一)材料与方法1供试菌株供试菌株:XJ-PA、XJ-FP、XJ-FR、XF-FS,试验样品采自阿克苏地区沙雅县境内、通过对昌吉州木垒县及新疆林业科学院种植园文冠果根腐病根部病样及病株附近土壤样品进行分离提纯得到。2供试培养基配制供试培养基:培养基类型有PDA(马铃薯葡萄糖培养基),PSA(蔗糖培养基),OA(燕麦片琼胶培养基),PCA(平板计数琼脂),MA(麦芽糖琼脂培养基)等、胡萝卜培养基和CMA(玉米粉培养基)、WA(水琼脂培养基)等8种不同碳源的培养基,根据有关文献的配方,配制了不同碳源的培养基,现介绍如下:PSA培养基:制备方法与PDA相同,用等体积的葡萄糖代替蔗糖就可以了。OA培养基:燕麦片20g层,纱布四层过滤,琼脂17g层,用水补足到1000mL层;麦芽糖琼脂培养基(MA):麦芽糖20g、葡萄糖10g、琼脂粉20g,加蒸馏水,补足到1000mL;灭菌待用。玉米CMA粉培养基:玉米粉20g,琼脂粉20g,用水补足到1000mL;胡萝卜培养基:100g将胡萝剥皮切成丁,用水煮至胡萝卜丁变软,琼脂20g,加蒸馏水,补足到1000mL;灭菌待用。PCA:去皮马铃薯20g、胡萝卜去皮20g,加水煮至土豆胡萝卜软,琼脂13g,加入蒸馏水,补足到1000mL;再将马铃薯切片放入模具中加热融化成糊状并加入适量的葡萄糖或蔗糖等糖进行均匀混合后冷却即为成品。灭菌待用。WA水琼脂培养基:琼脂粉18g,加蒸馏水补足到1000mL;无菌纱布过滤取上清。灭菌待用。3生物学测定方法将菌龄分别为1d和5d的供试菌株进行培养,使用5mm灭菌打孔器,将靠近菌落边缘尺寸均一的菌饼打出来,将其接种到每个处理供试培养基上,在25°C下恒温培养(除温度试验外)24h、5d后,用十字交叉法检测每个处理菌落直径,每处理反复进行三次。1.不同培养基在病原菌生长过程中的作用供试菌株分别于PDA培养基中25°C下培养1d和5d,采用灭菌内径5mm的打孔器,将菌饼打到菌落边缘,然后将5mm菌饼菌丝面接种到PDA,PSA,OA,PCA,WA,MA、胡萝卜培养基与CMA培养基的混合。2.不同温度下病原菌的生长情况供试菌株接种于PDA平板中心,分别置于5°C、10°C、15°C、20°C、22°C、25°C、28°C、30°C、35°C、40°C恒温培养。3.不同pH对菌丝发育的影响用HCl(1mol·L-1)和NaOH(1mol·L-1)溶液调整PDA培养基的pH值,使培养基的配制值分别为pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0。(二)结果与分析1不同培养基对菌丝生长的影响不同种类的植物对真菌的代谢反应存在一定差异。生长速率由低到高的顺序是PDA,CMA,PCA,OA,PSA、胡萝卜培养基、WA、MA。对其进行形态学观察表明,各培养条件下不同种类瓜果腐霉菌菌株形态结构基本相同,但是在某些方面有明显差异。其中以PDA表面的生长速率为最大,菌落大而密集,菌丝长得健壮、长势最佳;MA培养基中生长速度最慢、菌落最少,菌丝较疏,但在WA培养基中菌落直径比较长,但是菌丝长势最疏,呈透明状。不同浓度的葡萄糖对胡萝卜试管苗培养效果影响不大,且都达到了显着水平,但是高浓度葡萄糖会使幼苗出现畸形和死亡现象,低浓度时没有明显差异。(图2.1)。芳香镰孢菌:PDA中病原菌XJ-FR的生长情况最好,与PSA没有明显的区别,且增长最缓慢者是WA,且菌丝生长最为稀疏;同时对几种植物病原真菌也有一定抗性。(图2.3)茄腐镰刀菌:病原菌XJ-FS以PSA生长最佳,但此病原菌与CMA,PCA,OA,胡萝卜相比,PSA,PDA的生长速率没有显着性差异、MA的差别不大,WA时增长最慢,且菌丝最稀疏;(图2-1)图2.1文冠果根腐瓜果腐霉菌在不同碳源培养基上培养1d后的菌落直径大小比对结果注:图中不同小写字母代表在p<0.05水平具有统计学意义图2.2层出镰刀菌在不同碳源培养基上培养5d后的菌落直径大小比对结果注:图中不同小写字母代表在p<0.05水平具有统计学意义图2.3芳香镰孢菌在不同碳源培养基上培养5d后的菌落直径大小比对结果注:图中不同小写字母代表在p<0.05水平具有统计学意义图2.4茄腐镰刀菌在不同碳源培养基上培养5d后的菌落直径大小比对结果注:图中不同小写字母代表在p<0.05水平具有统计学意义2不同温度对菌丝生长的影响不同种类的植物对真菌的代谢反应存在一定差异。故病原菌最适温度为35±1°C。(图2.5)菌株对碳源、氮源和无机盐的利用能力较强。此病原菌在25±1°C范围内最适宜生长,菌落直径高达6.9cm,特别是22-28°C以内生长最好,温度高于或低于25°C时,菌丝受到不同程度的抑制。因此可以将其作为一种新型生物杀菌剂应用于蔬菜病害防治中。(图2.6)芳香镰孢菌XJ-FR:病原菌XJ-FR在PDA培养基培养5d后,菌丝10~35°C内都能生长,在10-28°C的气温区间,菌落直径随着温度的上升而增大,并在28-35°C的温度区间,菌落直径随温度上升而降低。通过对病菌进行生理生化特性研究表明,该病原菌属于高温高湿条件下产生抗病性的真菌。病原菌最适宜的生长温度是28°C,菌落直径达7.4cm,在22-28°C范围内菌丝生长最旺盛,当气温低于或高于28°C时,菌丝均受到一定的抑制。同时发现菌株对几种常用杀菌剂具有一定抗药性,说明了菌株的抗性可能与环境条件有关。(图2.7)图2.5不同温度条件下瓜果腐霉菌在PDA上菌落的生长情况图2.6不同温度条件下层出镰刀菌在PDA上菌落的生长情况图2.7不同温度条件下芳香镰孢菌在PDA上菌落的生长情况图2.8不同温度条件下茄腐镰刀菌在PDA上菌落的生长情况3不同pH对菌丝生长的影响试验结果表明:基于PDA的培养基,培养XJ-PA菌株1d后,从图3中可以看出,此病原菌可在pH值4~11范围内生长,pH值6~8之间比较适宜菌丝的生长,最适宜的pH值是8,菌落直径可达5.7cm,而当pH值为3时,菌丝不会生长。随着温度的升高,病菌孢子萌发率和产孢能力下降,并伴随着菌丝干重减少,最终导致其不能继续侵染寄主。当pH高于8时,由于pH升高菌丝生长逐渐下降。由此可知,病菌适宜于弱碱性环境中生长偏酸或偏碱的生长均能得到不同程度的遏制(图2.9)。层出镰刀菌XJ-FP:病原菌XJ-FP以PDA培养基培养5d后,从图4中可以看出,此病原菌能在pH值4~11范围内生长,pH值6-9以内是生长的最佳时期,最适宜的pH值是8,菌落直径6.8cm左右,pH值为10-11时,菌落直径大致相同,从而表明,此病原菌在8过酸过碱环境中,最适生长pH均不宜。(图2.10)芳香镰孢菌XJ-FR:病原菌XJ-FR在PDA培养基培养5d后,菌丝pH值以5-11为宜,其中pH值处于6-8以内是生长的最佳时期,当pH值为7.0时,生长达到最佳,菌落直径6.8cm,在pH值小于6于情况下,对该种病原菌生长有严重的影响,pH值为7-11时,菌落直径随pH值增大而减小较慢,所以,病原菌最适宜的生长环境是中性的,酸性条件都不宜此病原菌生长。(图2.11)茄腐镰刀菌XJ-FS:病原菌XJ-FS在PDA培养基培养5d后,菌丝pH值以4-11为宜,其中pH值处于6-9以内是生长的最佳时期,当pH值为7.0时,生长达到最佳,菌落直径6.8cm,而pH在6与7时,菌落直径无显着差异,在pH值低于6时,对该种病原菌生长有严重影响,所以,病原菌最适宜的生长环境是中性的,酸性条件和碱性条件都不适用于此病原菌。(图2.12)图2.9不同pH条件下文冠果根腐瓜果腐霉病菌菌落生长情况图2.10不同pH条件下文冠果根腐层出镰刀菌菌落生长情况图2.11不同pH条件下文冠果根腐芳香镰孢菌菌落生长情况图2.12不同pH条件下文冠果根腐茄腐镰刀菌菌落生长情况(三)小结与讨论温度太高和太低都对这四种病原菌不利,且瓜果腐霉菌和层出镰刀菌适宜在弱碱性土壤生存,但芳香镰孢菌,茄腐镰刀菌则适合于中性土壤上存活。相同的试验结果显示这四种病原菌具有较强的环境适应力,生存条件的要求不高,能在各种pH的土壤中存活,适宜的温度范围较广,能利用土壤的碳源养分存活,这些特点正是这一病原菌在文冠果园普遍发生的根本原因,且难于防治的重要因素。但光照对于瓜果腐霉菌的生长并没有明显的影响,所以这个试验并没有针对光照的影响来做试验。综上所述,本试验通过测定瓜果腐霉属真菌的形态特征及生理生化指标并结合其致病机理来初步探讨了该菌的致病性。另外在对该病生物学特性进行研究时,仅对不同的碳源和温度、不同pH三个方面所做的试验,没有对氮源及该病原菌致死温度做过有效试验。综上所述,该试验所得到的结论可以作为指导生产实际的依据,但需要进一步完善以提高其科学性。这项研究都是在房间里完成的,环境条件得到控制,并且田间受到温度,湿度的影响、雨水和其他因素,药剂防治可稍有不同。另外,在该试验中未发现有新菌株出现。因此,氮源,致死温度的试验将成为进一步研究的热点。上个世纪80年代以来,自新疆进行文冠果的引种与栽培后,文冠果产量的“千花一果”,“根腐病危害”等问题,至今没有从根本上解决。因此,准确地识别并掌握文冠果根腐菌种类及其生物学特征对有效控制根腐病害具有重要意义。有鉴于此,该课题根据新疆文冠果产量受根腐病严重危害的实际情况,进行文冠果根腐病发病病原类型精准鉴定等研究基础,对病原菌的生物学特性进行了研究,为科学防治文冠果根腐病提供了理论依据。三、文冠果根腐病防控药剂筛选目前,我国还未见有关文冠果根腐病发生与危害方面的文献,该病是一种土传病害,蔓延于土壤,能在土壤里生存数年,所以很难预防和治疗,对文冠果繁殖和生长有严重影响,针对该病开展了病原菌的分离鉴定和生物学特性的研究,但是并不能清楚地认识到该病的主要防治对策,为此,该章在前人研究的基础上,进行了室内药剂筛选试验,旨为该类文冠果根腐病提供有效的防治药剂筛选,提供了一种可供选择的农药,以防治该病。同时,通过田间小区药效试验进一步确定其对植物生长发育的具体作用机制,从而制定科学合理的化学防治方案,达到经济合理地使用化学农药来保护作物健康生长,降低农产品中有害微生物含量的目的。(一)材料与方法1供试菌株供试菌株XJ-PA、XJ-FP、XJ-FR、XF-FS由新疆阿克苏地区沙雅县、昌吉州木垒县与新疆林业科学院种植园文冠果病样品与土壤,通过新的分离纯化后得到,并且通过本实验室的精确鉴定得到。2培养基含药PDA培养基:将不同浓度药剂与熔化并冷却至40℃的PDA培养基按1∶9比例(总体积10mL)配制成含药培养基。3供试药剂依据相关文献记载,结合当前农林生产种防治作物根腐类的常用药剂,筛选出12种供试药剂,详细药剂相关内容见表3-1。表3-1供试药剂名称、剂型及生产厂家药剂剂型生产厂家FungicidesDosageformsManufacturers2×109CFU/g枯草芽孢杆菌粉剂山东万事达农化有限公司50%腐霉•福美双(福美双:40%;腐霉利:10%)可湿性粉剂成都科利隆有限公司30%噁霉灵水剂山东恒利达生物科技有限公司80%代森锰锌可湿性粉剂河北双吉化工有限公司722g/L霜霉威盐酸盐水剂拜耳作物科学(中国)有限公司30%甲霜•噁霉灵(噁霉灵:24%;甲霜灵:6%)水剂中农立华(天津)农用化学品有限公司500g/L甲基硫菌灵悬浮剂江苏丰山集团股份有限公司37%苯醚甲环唑水分散立剂成都西部爱地作物科学有限公司21%过氧乙酸水剂河北海虹生化有限公司50%氯溴异氰尿酸粉剂河北上瑞化有限公司47%春雷•王铜可湿性粉剂江西禾益化工股份有限公司45%戊唑•咪鲜胺水乳剂江苏景宏生物科技有限公司412种杀菌剂对病原菌的抑菌效果将菌株XJ-PA、XJ-FP、XJ-FR、将XF-FS置于PDA培养基中培养24h,5d后,用5mm口径无菌打孔器打菌落。对其进行形态观察和生理生化鉴定后筛选出适合于制备高效液相色谱检测试剂盒的细菌菌种,再利用该菌种建立了快速测定土壤中拟杆菌属微生物含量的方法。对每一种供试药剂,分别按推荐的使用浓度进行了试验,采用稀释的方法,由高到低各设八个药剂浓度梯度。将该方法制备出的不同浓度药剂培养基放入装有灭菌水的烧杯中进行摇瓶发酵实验。倒入一次性培养皿内,培养皿直径为9cm,当培养基平板固化以后,把菌饼的生长面向下放在培养基的中心。在相同时间内取出菌块进行镜检和计数,然后统计每块菌饼上的菌数,最后计算出每一菌株的平均抑制率。每处理反复进行三次。在相同时间内采集菌株进行形态学观察和生理生化试验测定其抗药性。在25°C恒温培养,培养时间分别为24h和5d,用十字交叉法[19]测定菌落直径,并用公式(3-1)算出了不同浓度药剂对菌丝生长抑菌率。QUOTE菌落生长抑制=空白对照平均日生长直径—药剂处理平均日生长直径空白对照平均日生长直径×100%(二)结果与分析从表3-2中可以看出12种剂对病原菌XJ-PA毒力的大小有显着差别,30%甲霜•噁霉灵的毒力最高,EC50值1.2599mg/L,其次为50%腐霉•福美双,EC50值为8.1564mg/L;在不同浓度下,各菌株的致病力有一定差别,但总体趋势一致,即随着药剂浓度的增加其致病力逐渐增大。2×109CFU/g枯草芽孢杆菌毒力最小,EC50值为4107.327mg/L。通过以上实验结果可以看出,不同药剂对表单孢菌的致病力有一定差别。其余九种药剂毒力由小变大依次排列:37%苯醚甲环唑,500g/L甲基硫菌灵,21%过氧乙酸,47%春雷•王铜,50%氯溴异氰尿酸,30%噁霉灵,45%戊唑•咪鲜胺,722g/L霜霉威盐酸盐,80%代森锰锌。通过比较不同农药处理下黄瓜植株和土壤中病菌数量变化,表明各品种间抗病性表现不一。(表3-2)表3-212种杀菌剂对文冠果根腐病菌瓜果腐霉菌(XJ-PA)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)2×109CFU/g枯草芽孢杆菌90mg/L21.91Y=0.472x+3.3174107.3270.91475mg/L20.6965mg/L18.2450mg/L17.9940mg/L17.0150%腐霉•福美双(福美双:40%;腐霉利:10%)10mg/L66.71Y=1.869x+3.3198.15640.9318mg/L40.025mg/L32.193mg/L17.262mg/L16.2830%噁霉灵100mg/L54.49Y=0.502x+4.08972.40370.93550mg/L48.8330mg/L43.9410mg/L36.845mg/L27.0580%代森锰锌15mg/L69.4Y=1.396x+3.6399.79750.87610mg/L655mg/L9.911mg/L7.710.5mg/L5.26722g/L霜霉威盐酸盐40mg/L55.2Y=0.220x+4.78012.66860.98220mg/L51.2910mg/L49.575mg/L44.681mg/L40.7630%甲霜•噁霉灵(噁霉灵:24%;甲霜灵:6%)20mg/L87.03Y=0.883x+4.9341.25990.98910mg/L77.725mg/L65.481mg/L49.080.5mg/L43.69续表3-212种杀菌剂对文冠果根腐病瓜果腐霉菌(XJ-PA)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)500g/L甲基硫菌灵800mg/L44.18Y=1.580x-0.1111774.65490.787700mg/L20.44600mg/L20.69500mg/L18.24400mg/L16.7737%苯醚甲环唑60mg/L6.73Y=0.527x+3.1453654.330.93150mg/L5.5140mg/L5.2630mg/L3.0620mg/L2.8221%过氧乙酸400mg/L57.4Y=1.673x+0.986258.6970.981300mg/L55.2200mg/L49.8100mg/L23.950mg/L9.950%氯溴异氰尿酸200mg/L74.08Y=1.584x+1.696125.92910.898150mg/L63.08100mg/L33.2550mg/L10.7610mg/L6.647%春雷•王铜500mg/L90.95Y=2.751x-1.432221.95960.977400mg/L72.13300mg/L55.48100mg/L11.9850mg/L4.5645%戊•唑咪鲜胺70mg/L72.1Y=2.075x+1.77636.696660.99950mg/L61.8630mg/L41.0320mg/L29.310mg/L11.8表3-310种杀菌剂对文冠果根腐病病菌层出镰刀菌(XJ-FP)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)80%乙蒜素10mg/L32.53Y=0.965x+3.45342.31830.86230mg/L41.4550mg/L51.8180mg/L69.35100mg/L73.0150%腐霉•福美双(福美双:40%;腐霉利:10%)10mg/L55.42Y=0.458x+4.7184.62450.95750mg/L76.39200mg/L78.31400mg/L80.72800mg/L85.5421%辛菌胺醋酸盐500mg/L31.08Y=0.575x+2.9683742.980.875800mg/L35.421000mg/L37.591500mg/L43.612000mg/L46.9930%噁霉灵10mg/L46.99Y=0.659x+4.21117.04370.92350mg/L58.5590mg/L61.93120mg/L70.6180mg/L79.7680%代森锰锌5mg/L27.23Y=0.852x+3.78528.35190.98610mg/L36.1450mg/L53.98100mg/L64.58200mg/L80续表3-310种杀菌剂对文冠果根腐病病菌层出镰刀菌(XJ-FP)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)30%甲霜•噁霉灵(噁霉灵:24%;甲霜灵:6%)100mg/L64.1Y=1.083x+3.20810.149240.98200mg/L73.25300mg/L82.65400mg/L83.37500mg/L86.02500g/L氯溴10mg/L13.01Y=0.595x+3.240990.75520.94850mg/L17.35100mg/L27.23150mg/L31.57200mg/L36.8737%苯醚甲环唑50mg/L11.81Y=1.807x+0.939181.91910.941100mg/L32.16150mg/L40.24200mg/L54.94250mg/L55.945%戊•唑咪鲜胺0.05mg/L59.28Y=0.538x+5.9420.01950.9840.1mg/L65.540.3mg/L71.080.5mg/L77.351mg/L83.37500g/L甲基硫菌灵5mg/L19.04Y=1.293x+3.08031.79780.95410mg/L22.8925mg/L37.8350mg/L55.42100mg/L80表3-410种杀菌剂对文冠果根腐病病菌芳香镰孢菌(XJ-FR)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)80%乙蒜素30mg/L46.37Y=1.125x+3.22139.94130.98240mg/L50.0950mg/L52.0880mg/L61.76100mg/L68.7221%辛菌胺醋酸盐700mg/L24.02Y=0.917x+1.8073211.0870.929800mg/L30.73900mg/L33.461500mg/L36.442000mg/L43.3921%过氧乙酸4500mg/L18.06Y=3.035x-6.9809010.070.9965000mg/L21.045500mg/L26.516000mg/L29.736500mg/L33.2130%噁霉灵90mg/L48.85Y=1.163x+2.661107.30270.96120mg/L49.1150mg/L57.54180mg/L60.77210mg/L6380%代森锰锌800mg/L56.8Y=0.864x+2.650544.06170.8961000mg/L59.031500mg/L63.52000mg/L64.252500mg/L74.67续表3-410种杀菌剂对文冠果根腐病病菌芳香镰孢菌(XJ-FR)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)30%甲霜•噁霉灵(噁霉灵:24%;甲霜灵:6%)200mg/L59.03Y=1.617x+1.544141.66670.985300mg/L68.96400mg/L78.9500mg/L81.38600mg/L82.8750%氯溴异氰尿酸10mg/L6.39Y=1.596x+1.636132.41280.88850mg/L10.86100mg/L32.22150mg/L60.32160mg/L70.250%腐霉•福美双200mg/L69.71Y=0.568x+4.20028.06980.988400mg/L72.69600mg/L78.4800mg/L79.141000mg/L80.88500g/L甲基硫菌灵15mg/L58.54Y=1.237x+3.9996.72180.93220mg/L74.6730mg/L83.6150mg/L85.35100mg/L90.8145%戊•唑咪鲜胺0.05mg/L77.90Y=0.485x+5.8200.02270.9540.1mg/L73.930.3mg/L69.710.5mg/L66.731mg/L53.32表3-510种杀菌剂对文冠果根腐病病菌茄腐镰刀菌(XJ-FS)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)80%乙蒜素20mg/L8.63Y=3.262x-0.78460.26620.91130mg/L9.5240mg/L18.1550mg/L49.460mg/L53.5750%腐霉•福美双(福美双:40%;腐霉利:10%)5mg/L20.66Y=0.934x+3.68427.11380.98810mg/L39.3450mg/L61.9100mg/L67.87150mg/L75.0221%辛菌胺醋酸盐600mg/L21.31Y=1.896X-0.8881310.4040.941900mg/L44.921000mg/L45.571500mg/L51.152000mg/L63.2830%噁霉灵50mg/L25.9Y=0.683x+3.213446.15680.987120mg/L32.79150mg/L38.03180mg/L39.67210mg/L40.9880%代森锰锌1mg/L3.93Y=1.207x+3.10438.86520.90510mg/L14.115mg/L18.0320mg/L40.9850mg/L70.49续表3-510种杀菌剂对文冠果根腐病病菌茄腐镰刀菌(XJ-FS)毒力测定结果供试药剂浓度Concentration抑制率Inhabitedpercent(%)回归方程EC50相关系数(R)CorrelationcoefficientFungicidesToxicityregressiveequations(mg/L)30%甲霜•噁霉灵(噁霉灵:24%;甲霜灵:6%)200mg/L38.36Y=1.272x+1.758368.5610.958300mg/L42.95400mg/L53.77500mg/L53.11600mg/L62.9537%苯醚甲环唑50mg/L17.05Y=0.534x+3.1992600.0470.929100mg/L24.92150mg/L22.95200mg/L26.56250mg/L30.3645%戊•唑咪鲜胺0.01mg/L8.52Y=0.926x+0.5440.27350.9950.1mg/L35.410.3mg/L55.410.5mg/L60.661mg/L65.57500g/L甲基硫菌灵1mg/L4.26Y=0.839x+3.215142.7150.8825mg/L10.1620mg/L11.830mg/L25.950mg/L51.4850%氯溴异氰尿酸10mg/L1.31Y=1.280x+1.426645.4220.91550mg/L1.97100mg/L14.1150mg/L26.23200mg/L29.84(三)小结与讨论本文通过田间试验对比分析不同药剂对根癌病发病程度及产量的影响。因此,这四种药剂可以为田间药剂防控试验提供选择。综上所述,本课题通过田间试验,从多个角度综合评价了几种药剂的田间防治效果,最终确定了最佳施药时期及用药剂量。该试验所用药剂都是农业生产上常用杀菌剂,认为化学助剂加入药剂产品、填充剂的加入等因素对试验结果有一定的影响,若将该试验筛选药剂用于生产实践,它在田间实际需要的浓度及防治效果,需要进一步的有关研究来加以证实。同时,本研究还根据目前国内外关于根腐病的研究进展,提出了相应的防治建议。在以后以控制这种文冠果根腐病为目标,可以通过这一试验的有关成果,根据田间防效的做法,使用利于预防和治疗、传播产生的途径,在实际田间生产上有效应对。目前,有关可疑文冠果根腐病主要靠药剂处理,土壤处理等、造林地的选定,苗木的处理、栽植深度的选择及其他方法,且用化学药剂治疗起效迅速、使用方便,成本低廉。最后,经食物链的生物富集作用向人类转移,在人体内聚集到一定的浓度就会产生危害,让身体健康大打折扣。所以采用微生物菌剂替代化学肥料及杀虫剂成为了当今研究热点之一,其中芽孢杆菌作为一种新型微生物菌剂,可以有效抑制多种植物病害的发生,提高农作物产量与品质。目前,在人类日益关注视频安全的今天,今后病虫害防治工作,对环境无污染,控制植物病虫害,不危害人类,安全可靠,无残留、特异性高等优点,有利于生态环境的保护、达到农业曾产增效的目的,兼具生态效益和经济效益的生物农药、诱导植物产生抗性等相关的研究工作。四、结论本次试验通过对有关文献的检索,对生产中常用药剂12种进行了筛选,文冠果根腐病病原菌室内药剂试验筛选,试验结果表明,供试12种药剂防治文冠果根腐病的病原菌瓜果腐霉菌(Pythiumaphanidermatum)、茄腐镰刀菌(Fusariumsolani)、层出镰刀菌(Fusariumproliferatum)和芳香镰孢菌(Fusariumredolens),都具毒力作用,但是不同的杀菌剂相应的毒力也不相同。根据试验结果及各菌株生理生化反应特点,结合实验室
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