宠物干细胞培养技术员岗位招聘考试试卷及答案

宠物干细胞培养技术员岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.宠物干细胞按分化潜能可分为全能干细胞、____干细胞和单能干细胞。（多能）2.干细胞培养常用基础培养基是达尔伯克改良伊格尔氏培养基，简称____。（DMEM）3.培养箱CO₂浓度通常维持____%左右，稳定培养基pH。（5）4.宠物干细胞常用组织来源包括骨髓、脂肪、____等。（脐带/胎盘）5.干细胞冻存保护剂组合是胎牛血清（FBS）和____。（DMSO）6.细胞培养需定期检测____，避免微生物污染。（支原体/细菌/真菌）7.宠物间充质干细胞（MSC）不表达____（如CD34）。（造血干细胞标志物）8.细胞培养容器常用材质是____，具良好贴壁性。（聚苯乙烯/塑料）9.干细胞传代常用消化酶是____（含EDTA）。（胰蛋白酶）10.宠物干细胞培养温度维持____℃（模拟动物体温）。（37）二、单项选择题（每题2分，共20分）1.宠物组织来源干细胞中分化潜能最广的是？A.骨髓MSCB.脂肪MSCC.胚胎干细胞D.皮肤干细胞（C）2.干细胞培养中CO₂的主要作用是？A.提供营养B.调节pHC.杀菌D.促进增殖（B）3.提示细胞培养污染的情况是？A.贴壁率80%B.培养基变黄C.培养基浑浊D.细胞呈梭形（C）4.宠物干细胞冻存正确步骤是？A.直接-80℃冻存B.4℃1h后-20℃C.程序降温盒后液氮D.室温后液氮（C）5.MSC的典型形态是？A.圆形悬浮B.梭形贴壁C.多角形贴壁D.长条形悬浮（B）6.用于支原体检测的试剂是？A.台盼蓝B.DAPIC.革兰氏染色D.青霉素（B）7.血清在干细胞培养中不具备的作用是？A.提供生长因子B.调节渗透压C.杀菌D.提供营养（C）8.细胞传代最佳时机是汇合度达到？A.50%B.70-80%C.100%D.30%（B）9.可分化为骨、软骨、脂肪细胞的是？A.MSCB.造血干细胞C.神经干细胞D.胚胎干细胞（A）10.细胞培养箱湿度应维持在？A.40-50%B.60-70%C.80-90%D.95%以上（D）三、多项选择题（每题2分，共20分，多选/少选不得分）1.宠物干细胞培养关键条件包括？A.温度B.CO₂浓度C.湿度D.无菌环境（ABCD）2.宠物干细胞常用组织来源有？A.骨髓B.脂肪组织C.脐带血D.皮肤（ABCD）3.细胞培养污染类型包括？A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染（ABCD）4.MSC鉴定指标包括？A.CD29+、CD44+B.成骨/成脂分化C.贴壁生长D.悬浮生长（ABC）5.干细胞冻存注意事项有？A.程序降温盒B.避免反复冻融C.冻存管密封D.快速升温复苏（ABC）6.培养基常用添加剂有？A.FBSB.谷氨酰胺C.青霉素-链霉素D.生长因子（ABCD）7.宠物干细胞应用方向包括？A.组织修复B.免疫调节C.疾病模型D.药物筛选（ABCD）8.细胞传代步骤包括？A.弃旧培养基B.胰酶消化C.离心收集D.分装新瓶（ABCD）9.无菌操作核心要求有？A.超净台紫外线消毒B.戴口罩手套C.试剂瓶口火焰灭菌D.避免交叉污染（ABCD）10.胚胎干细胞特点包括？A.全能性B.无限增殖C.分化所有组织D.贴壁生长（ABC）四、判断题（每题2分，共20分，√/×）1.宠物干细胞培养必须无菌环境。（√）2.干细胞冻存DMSO浓度通常10%。（√）3.培养基变黄说明代谢旺盛，无需处理。（×）4.MSC可分化为造血细胞。（×）5.培养箱温度维持37℃。（√）6.支原体污染可肉眼观察。（×）7.传代消化时间越长越好。（×）8.脂肪干细胞分离需胶原酶消化。（√）9.血清可直接加冷冻培养基。（×）10.胚胎干细胞使用不受伦理限制。（×）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述宠物MSC主要分离步骤答案：①获取组织（脂肪/骨髓）；②脂肪剪碎离心去油脂，骨髓稀释过滤；③37℃胶原酶消化1-2h；④离心收集细胞沉淀；⑤重悬接种培养瓶；⑥贴壁后换液去除未贴壁细胞，获得MSC。2.细胞培养常见污染及判断方法答案：常见污染：细菌（培养基浑浊、pH骤变）、真菌（白色/黑色菌丝）、支原体（细胞生长慢、形态异常）。判断：细菌肉眼见浑浊，真菌见菌落，支原体需PCR或DAPI染色检测。3.干细胞冻存与复苏关键注意事项答案：冻存：程序降温盒（-1℃/min），冻存液10%DMSO+90%血清，冻存管密封。复苏：37℃水浴快速升温（1-2min），立即离心去冻存液，重悬接种，避免反复冻融。4.无菌操作核心要点答案：①超净台提前30min紫外线消毒；②穿无菌服、戴口罩手套；③试剂瓶口火焰灭菌；④避免触碰无菌区域；⑤不同细胞株分开操作；⑥培养箱定期清洁。六、讨论题（每题5分，共10分）1.如何提高宠物干细胞存活率？答案：①严格无菌，定期检测支原体；②优化培养基（选宠物适配型，加合适血清/生长因子）；③稳定37℃、5%CO₂、95%湿度；④传代控制消化时间（避免过度），复苏快速升温；⑤冻存用程序降温，避免反复冻融；⑥定期检测活性，淘汰老化细胞。2.宠物干细胞应用的伦理与安全问题答案：①