2025年11月基因工程试题库及答案

2025年11月基因工程试题库及答案一、单选题（共30题，每题1分，共30分）1.PCR反应体系与双脱氧末端终止法测序体系不同的是缺少：A、模板B、引物C、DNA聚合酶D、ddNTPE、缓冲液正确答案：D答案解析：PCR反应体系中需要模板、引物、DNA聚合酶、缓冲液等成分来扩增特定DNA片段。而双脱氧末端终止法测序体系是利用ddNTP（双脱氧核苷酸）随机终止DNA链的延伸来进行测序，在PCR反应体系中不需要ddNTP，所以PCR反应体系与双脱氧末端终止法测序体系不同的是缺少ddNTP。2.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有不恰当的是：A、由作用于同一DNA序列的两种酶构成B、这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶C、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰D、不同的宿主系统具有不同的限制—修饰系统正确答案：B答案解析：宿主控制的限制修饰现象由作用于同一DNA序列的两种酶构成，修饰酶主要通过甲基化作用对DNA进行修饰，且不同的宿主系统具有不同的限制—修饰系统。这一系统中的核酸酶主要是Ⅰ类和Ⅲ类限制性内切核酸酶，并非Ⅱ类限制性内切核酸酶，所以选项B不恰当。3.质粒DNA和外源DNA各用两种限制性内切酶切开，经连接转化后获得重组子。下列各组重组子中有可能含有两种相反基因极性的是：A、ApaI/ClaIB、BamHI/BglIIC、BclI/SmaID、HindIII/KpnI正确答案：B4.第一个由重组大肠杆菌生产的人类蛋白（多肽）药物是：A、白细胞介素B、干扰素C、胰岛素D、生长激素正确答案：C答案解析：胰岛素是第一个由重组大肠杆菌生产的人类蛋白（多肽）药物。胰岛素是一种蛋白质激素，对调节血糖水平至关重要。通过基因工程技术，将胰岛素基因导入大肠杆菌中，使其能够表达并生产胰岛素，为糖尿病患者提供了有效的治疗药物。生长激素、干扰素、白细胞介素等虽然也是重要的蛋白质药物，但不是第一个由重组大肠杆菌生产的。5.在质粒提取的步骤里，异戊醇的作用是：A、使蛋白质脱水B、使DNA脱水C、减少气泡，有助于相的稳定D、帮助DNA进入水相正确答案：C答案解析：异戊醇的作用主要是减少气泡，有助于相的稳定。在质粒提取过程中，加入异戊醇可以降低表面张力，使离心过程中产生的气泡减少，从而使有机相和水相之间的界面更加清晰、稳定，有利于后续的分层等操作，便于更好地分离出质粒DNA等物质。6.下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?A、用限制酶消化DNAB、DNA与载体的连接C、用凝胶电泳分离DNA片段D、DNA片段转移至硝酸纤维素膜上正确答案：B答案解析：Southern印迹法的主要步骤包括：用限制酶消化DNA，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，接着将DNA片段转移至硝酸纤维素膜上，后续还有杂交等步骤。而DNA与载体的连接是基因克隆中构建重组DNA分子的步骤，不是Southern印迹法的步骤。7.下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的：A、从特定组织或细胞中提取mRNAB、将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中，C、用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD、用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA正确答案：B答案解析：建立cDNA文库是从特定组织或细胞中提取mRNA（A选项正确），然后用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNA（C选项正确），再用DNA聚合酶以单股DNA为模板合成双链DNA（D选项正确），而不是将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后克隆到噬菌体或质粒中，B选项错误。8.在分子生物学上“分子克隆”主要是指：A、DNA的大量复制B、DNA的大量转录C、DNA的大量剪切D、RNA的大量剪切E、RNA的大量反转录正确答案：A答案解析：分子克隆是指将特定DNA片段通过重组DNA技术插入到载体中，然后导入宿主细胞进行大量复制，从而获得大量相同DNA分子的过程。所以主要是指DNA的大量复制。9.在重组体中切出插入片段最常用的方法：A、以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B、用其它限制性酶将其切出C、用S1核酸酶将其切出D、用DNA酶将其切出E、用多种限制性核酸内切酶将其切出正确答案：A答案解析：以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出，因为该酶在重组时用于构建重组体，此时用它可特异性地识别并切割连接部位，从而切出插入片段，是最常用的方法。B选项用其它限制性酶不一定能准确切出插入片段；C选项S1核酸酶主要用于去除单链核酸等特定用途，不是切插入片段常用方法；D选项DNA酶会随机切割DNA，不能准确切出插入片段；E选项用多种限制性核酸内切酶增加了操作复杂性且不一定能精准切出，所以最常用的是A选项。10.经电泳后将DNA转移至硝酸纤维素膜上的技术是：A、Southern杂交B、斑点杂交C、Western杂交D、Eastern杂交正确答案：A答案解析：Southern杂交是将DNA经电泳分离后转移至硝酸纤维素膜或尼龙膜上，然后与标记的核酸探针进行杂交，以检测特定DNA片段的技术。斑点杂交是将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素膜或尼龙膜上进行杂交。Western杂交是用于检测蛋白质的技术。Eastern杂交主要用于分析蛋白质的糖基化等修饰。所以经电泳后将DNA转移至硝酸纤维素膜上的技术是Southern杂交。11.PCR的特点不包括：A、时间短，只需数小时B、扩增产物量大C、只需微量模板D、用途非常广泛E、底物必须标记正确答案：E答案解析：PCR技术具有时间短（只需数小时）、扩增产物量大、只需微量模板、用途非常广泛等特点。而底物标记并不是PCR技术的特点。12.天然PstI限制性内切酶的来源是：A、BacillusamyloliquefaciensB、EscherichiacoliC、HaemophilusInfluenzaeD、Provisenciastuartii正确答案：D答案解析：天然PstI限制性内切酶来源于普罗威登斯菌（Provisenciastuartii）。选项A中Bacillusamyloliquefaciens是嗜淀粉芽孢杆菌；选项B中Escherichiacoli是大肠杆菌；选项C中HaemophilusInfluenzae是流感嗜血杆菌，均不符合。13.Southern印迹的DNA探针杂交：A、只与序列完全相同的RNA片段B、可与任何含有相同序列的DNA片段C、可与任何含有互补序列的DNA片段D、可与用某些限制性核酸内切酶切DNA片段E、只与含有互补序列RNA片段正确答案：C答案解析：Southern印迹的DNA探针杂交原理是利用核酸分子碱基互补配对原则，探针可与任何含有互补序列的DNA片段进行杂交。14.tRNA的反密码子GCC对应的密码子是：A、5’-GGC-3’B、5’-TGC-3’C、5’-GCA-3’D、5’-CGT-3’正确答案：A15.基因工程菌中重组质粒的丢失机制是：A、重组质粒渗透至细胞外B、重组质粒被细胞内核酸酶降解C、重组质粒在细胞分裂时不均匀分配D、重组质粒杀死受体细胞正确答案：C答案解析：重组质粒在细胞分裂时不均匀分配会导致部分子代细胞中不含有重组质粒，从而造成重组质粒的丢失。选项A中重组质粒一般不会轻易渗透至细胞外；选项B中如果被细胞内核酸酶降解那就不是丢失而是被破坏了；选项D重组质粒通常不会杀死受体细胞，所以ABD均不符合。16.PCR反应过程中，引物延伸所需温度一般是：A、95℃B、82℃C、72℃D、62℃E、55℃正确答案：C答案解析：引物延伸温度一般为72℃左右，在该温度下，DNA聚合酶具有较高的活性，能够以引物为起始点，沿着模板链合成新的DNA链。17.哪一个载体更适用于150kBDNA片段的克隆？A、质粒B、λ载体C、BACD、YAC正确答案：C18.多克隆位点：A、含有许多拷贝的克隆化基因B、使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性C、含有许多拷贝的同一种限制酶位点D、使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性正确答案：B答案解析：多克隆位点是指载体上人工合成的含有多种限制酶识别序列的一段DNA序列，它可以被多种限制酶识别和切割，从而使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性。多克隆位点并不含有许多拷贝的克隆化基因，也不是含有许多拷贝的同一种限制酶位点，它主要是关于限制酶切割位点的设置以方便不同基因的克隆，而不是对克隆所用生物种类的选择具有灵活性。19.探针的种类包括：A、基因组DNA探针B、cDNA探针C、寡核苷酸探针D、RNA探针E、以上均是正确答案：E答案解析：探针的种类包括基因组DNA探针、cDNA探针、寡核苷酸探针、RNA探针等，所以以上选项均正确，答案为E。20.PCR反应过程中，模板DNA变性所需温度一般是：A、95℃B、85℃C、75℃D、65℃E、55℃正确答案：A答案解析：PCR反应中模板DNA变性是使双链DNA解链为单链，一般需要较高温度，通常大于95℃才能充分变性，以保证后续引物能与单链模板特异性结合进行扩增反应。21.经电泳分离后将RNA转移到硝酸纤维素膜上的技术是：A、SouthernBlottingB、NorthernBlottingC、WesternBlottingD、DotBlottingE、insituhybridization正确答案：B答案解析：NorthernBlotting是将经电泳分离后的RNA转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的技术，用于检测特定RNA分子的表达情况等。SouthernBlotting是用于DNA的相关技术；WesternBlotting是用于蛋白质的技术；DotBlotting是一种简单的将核酸或蛋白质直接点在膜上进行检测的方法；insituhybridization是原位杂交技术，用于在细胞或组织水平检测核酸。22.下列哪个不是Northern印迹的步骤：A、从细胞和组织中提取RNAB、用凝胶电泳分离RNAC、将RNA转移到支持物上D、用探针进行杂交E、将RNA反转录合成DNA，正确答案：E答案解析：Northern印迹主要包括从细胞和组织中提取RNA、用凝胶电泳分离RNA、将RNA转移到支持物上、用探针进行杂交等步骤。而将RNA反转录合成DNA是反转录PCR等技术的步骤，不是Northern印迹的步骤。23.下列哪项不是探针的特点：A、要加以标记B、应是双链DNAC、只与靶核酸序列杂交D、探针长度可以是几十个碱基E、高灵敏度正确答案：B答案解析：探针可以是双链DNA，也可以是单链DNA、RNA等，所以应是双链DNA不是探针的特点。其他选项：探针要加以标记以便于检测；只与靶核酸序列杂交以实现特异性检测；探针长度可以是几十个碱基；具有高灵敏度都是探针的特点。24.PCR实验的特异性主要取决于：A、DNA聚合酶的种类B、反应体系中模板DNA的量C、引物序列的结构和长度D、四种dNTP的浓度E、循环周期的次数正确答案：C答案解析：引物是PCR特异性的关键因素，引物序列的结构和长度决定了引物与模板DNA结合的特异性，进而影响PCR反应的特异性。DNA聚合酶种类主要影响反应效率等；模板DNA量影响扩增产物量；四种dNTP浓度影响反应进行；循环周期次数影响产物数量，但都不如引物序列对特异性影响大。25.Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了下面哪种酶的活性？A、5′→3′合成酶B、3′→5′外切酶C、5′→3′外切酶D、转移酶正确答案：C答案解析：Klenow酶是DNA聚合酶I大片段，DNA聚合酶I具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性，Klenow酶是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶切割后产生的大片段，它保留了5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，但丧失了5′→3′外切酶活性。26.DNA的结构对转化的影响很大，一般说来，转化效率最高的是：A、完整的线性双链DNAB、单链线性DNAC、完整的环状双链DNAD、开口的双链环状DNA正确答案：A27.最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A、营养互补筛选B、抗药性筛选C、免疫化学筛选D、PCR筛选E、分子杂交筛选正确答案：B答案解析：最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是抗药性筛选。一般构建重组质粒时会带有某种抗生素抗性基因，将重组质粒导入细菌后，在含有该抗生素的培养基上培养，能生长的细菌就可能含有重组质粒，以此来筛选出含重组质粒的细菌。营养互补筛选一般用于特定营养缺陷型菌株等情况；免疫化学筛选常用于检测蛋白质表达等；PCR筛选和分子杂交筛选也可用于检测，但不是最常用的筛选含重组质粒细菌的方法。28.在基因工程中通常所用的质粒存在于：A、细菌染色体B、酵母染色体C、细菌染色体外D、酵母染色体外E、病毒DNA外正确答案：C答案解析：质粒是细菌染色体外能够自主复制的小型环状双链DNA分子，存在于细菌染色体外。A选项细菌染色体错误；B选项酵母染色体外一般是酵母人工染色体等，不是质粒；D选项同理酵母染色体外不是质粒；E选项病毒DNA外也不正确，质粒存在于细菌中而非病毒相关。29.下列哪一种酶作用时需要引物？A、限制酶B、末端转移酶C、反转录酶D、DNA连接酶正确答案：C答案解析：反转录酶以RNA为模板合成DNA时需要引物，此引物通常是一段RNA序列。限制酶识别特定序列并切割DNA，不需要引物；末端转移酶是在DNA末端添加核苷酸，不需要引物；DNA连接酶连接DNA片段，不需要引物。30.下列哪个不是Southern印迹的步骤：A、用限制性核酸内切酶消化DNAB、DNA与载体连接，C、用凝胶电泳分离DNA片段D、DNA片段转移至硝酸纤维膜上E、用一个标记的探针与膜杂交正确答案：B答案解析：Southern印迹的主要步骤包括：用限制性核酸内切酶消化DNA；用凝胶电泳分离DNA片段；将DNA片段转移至硝酸纤维膜上；用一个标记的探针与膜杂交等。而DNA与载体连接是基因克隆等过程中的步骤，不是Southern印迹的步骤。二、判断题（共10题，