检验科凝血功能检查操作规范

演讲人：日期:检验科凝血功能检查操作规范目录CATALOGUE01操作前准备02样本采集规范03检测项目执行04质量控制要求05结果分析与报告06生物安全与维护PART01操作前准备仪器设备校准与状态确认010203全自动凝血分析仪校准按照制造商提供的标准操作流程进行多点校准，包括机械臂运动轨迹、光学检测系统灵敏度及温控模块稳定性测试，确保仪器在检测范围内线性误差小于5%。质控品运行验证使用国际标准化组织（ISO）认证的三水平质控品（正常值、临界值、异常值）进行日间精密度测试，要求CV值控制在3%以内，并记录Levey-Jennings质控图。环境参数监测实验室需维持恒温（22-25℃）、恒湿（40-60%RH）环境，每日使用温湿度记录仪监测并保存数据，避免环境波动影响凝血因子活性。检查试剂瓶密封性及外观无沉淀、变色，确保含钙离子浓度稳定在25mmol/L±10%，并核对批号与仪器预设参数匹配。试剂耗材合规性与有效期核查凝血酶原时间（PT）试剂验证确认比浊法专用比色杯透光率≥90%，避免因耗材透光性差异导致吸光度读数偏差，影响Clauss法结果准确性。纤维蛋白原检测耗材兼容性对冻干试剂如活化部分凝血活酶时间（APTT）试剂，需查验运输全程温度记录是否维持在-20℃至-25℃，防止因温度波动导致磷脂微粒结构破坏。冷链运输记录审查抗凝剂浓度与比例验证枸橼酸钠比例标准化严格按1:9比例（抗凝剂:全血）采集静脉血，使用定量移液器验证抗凝剂装量误差≤1%，避免因比例失调导致钙离子螯合不完全。抗凝剂批次间一致性测试每批新到货枸橼酸钠需与当前批次平行检测20例临床样本，要求PT、APTT结果差异不超过±2秒，确保不同批次间检测可比性。肝素污染排除程序对疑似肝素污染样本（如APTT异常延长），采用甲苯胺蓝中和试验或肝素酶处理法进行干扰排除，并在报告中注明修正后的检测数值。PART02样本采集规范采用同心圆法消毒穿刺部位，使用75%酒精棉片由内向外擦拭两次，确保消毒范围直径大于5cm，避免污染。止血带绑扎时间不超过1分钟，压力适中，以能触摸到动脉搏动为宜，避免因长时间压迫导致血液浓缩或溶血。针头与皮肤呈15-30度角进针，见回血后降低角度再进针2mm，确保针尖完全进入血管腔，减少组织损伤和样本污染风险。拔针后立即用无菌棉签按压穿刺点5-10分钟，避免淤血或血肿形成，同时检查穿刺部位有无异常出血或肿胀。静脉穿刺标准操作流程穿刺部位消毒止血带使用穿刺角度控制拔针后处理真空采血管选择与混匀要求采血管类型选择凝血功能检测必须使用枸橼酸钠抗凝管（蓝帽管），抗凝剂与血液比例为1:9，确保抗凝效果准确，避免假性结果偏差。02040301采血量准确性严格保证采血量达到标记线，血量不足会导致抗凝剂比例过高，延长凝血时间；血量过多则可能抗凝不充分，影响检测结果。混匀手法规范采血后立即轻柔颠倒混匀8-10次，避免剧烈摇晃导致溶血或抗凝剂分布不均，混匀角度控制在180度以内。特殊患者处理对于高凝状态或红细胞压积异常患者，需根据公式调整抗凝剂用量，并备注在申请单上以供实验室参考。标本标识双人核对原则标识内容完整性标本标签需包含患者姓名、性别、住院号/门诊号、采集时间及采血者签名，字迹清晰且无法擦除，避免信息缺失或模糊。01双人核对流程采血者与另一名医护人员需同步核对患者腕带信息、申请单及试管标签，确认三者完全一致后方可送检，并记录核对人员姓名。异常情况处理发现标识错误或信息不符时，立即作废标本并重新采集，同时在不良事件系统中登记，分析原因并制定改进措施。信息化辅助核对推荐使用条码扫描系统进行电子化核对，扫描患者腕带与试管条码自动匹配，降低人工核对差错率，提高工作效率。020304PART03检测项目执行PT/APTT标准检测程序样本采集与处理使用枸橼酸钠抗凝真空采血管采集静脉血，严格按1:9比例抗凝，避免凝血或溶血。离心后2小时内完成检测，血浆分离后需避免反复冻融。试剂与仪器校准每批次检测前需进行试剂复温及仪器校准，确保PT/APTT试剂与配套质控品匹配，并记录校准曲线参数。检测流程控制采用双孔复测机制，结果差异超过5%需重新检测。同时监测室内质控值，确保结果在允许范围内。结果报告与审核结合患者临床信息（如抗凝药物使用史）综合分析结果，异常值需重复检测并备注可能干扰因素（如高脂血症或溶血）。FIB/TT特殊项目操作要点采用Clauss法，确保血浆稀释比例准确，避免纤维蛋白原浓度过高导致的钩状效应。检测时需同步运行正常和异常质控血浆。纤维蛋白原（FIB）检测严格控制反应温度（37±0.5℃），避免肝素污染或纤维蛋白降解产物（FDPs）干扰。若TT延长，需加做甲苯胺蓝纠正试验。冻干试剂复溶后需标注开瓶时间，避免反复冻融导致活性下降，影响检测准确性。凝血酶时间（TT）检测对于黄疸、脂血或溶血样本，需离心后评估干扰程度，必要时采用稀释或过滤预处理。特殊样本处理01020403试剂稳定性管理适用于科研或低通量检测，灵敏度高但操作复杂，需严格控温孵育并设置双波长读数以减少背景干扰。ELISA法用于急诊场景，需定期验证与中心实验室结果的一致性，避免因样本类型（如全血与血浆）差异导致偏差。快速检测（POCT）01020304适用于全自动凝血分析仪，需注意钩状效应风险，高浓度样本需稀释后复测。试剂需与仪器品牌匹配，避免交叉反应。免疫比浊法新批号试剂或仪器更新后需进行精密度、线性范围及参考区间验证，确保与既往检测系统可比性。方法学验证D-二聚体检测方法选择PART04质量控制要求室内质控品操作频次常规检测项目每日质控凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）等关键项目需在每批次检测前、中、后分别运行质控品，确保仪器稳定性与试剂有效性。新批号质控品验证更换质控品批号时需连续检测至少3次，评估均值与标准差是否符合实验室预设范围，排除批间差异影响。特殊项目周期性质控纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体等低频检测项目每周至少运行2次质控，结合临床需求调整频次。Westgard规则应用场景1₂₅规则用于识别随机误差，当同一质控品连续两次结果超出±2SD范围时触发警告，需检查试剂污染或仪器加样系统异常。4₁₅规则比较不同浓度质控品差异，当高、低值质控结果差值超过4SD时，可能存在样本交叉污染或质控品复溶错误。针对系统误差监测，若连续4次质控结果偏向均值同一侧（+1SD或-1SD），提示校准漂移或光源衰减，需重新校准或维护设备。R₄₅规则失控结果追溯流程即时复测与比对失控后立即重复检测原质控品，同时开新瓶质控品平行测试，排除偶然误差或质控品变质因素。01仪器与试剂排查检查凝血仪电极清洁度、温控系统状态，验证试剂储存条件及有效期，必要时更换试剂批次重新校准。02记录与上报详细记录失控现象、处理步骤及纠正措施，形成书面报告提交质量主管审核，并追溯同期患者样本是否受影响。03PART05结果分析与报告危急值标准设定建立分级报告制度，对于危及生命的异常结果（如PT延长超过正常值3倍），要求检验人员立即电话通知临床医生并记录，后续补发书面报告。分级报告流程电子系统预警功能通过实验室信息管理系统（LIS）自动识别危急值，触发弹窗提醒和短信推送，确保临床科室在最短时间内获取关键信息。依据临床指南和实验室标准操作规程（SOP），明确凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）等项目的危急值阈值，确保检测结果超出范围时能及时预警。危急值判定及报告时限结果异常复核机制仪器自动复检规则配置凝血分析仪对异常结果（如APTT>150秒）自动执行重复检测，排除偶然误差，同时标记结果供人工复核。人工复核步骤检验人员需核对标本状态（如溶血、脂血）、质控数据及历史结果，必要时重新采集标本复测，并填写《异常结果复核记录表》存档备查。跨平台验证流程对疑难异常结果采用不同方法学（如光学法与磁珠法）或设备进行比对验证，确保结果准确性。报告单审核双签制度初级审核内容由第一审核人核对患者信息、检测项目完整性、仪器状态及质控数据，确保无技术性错误，对可疑结果提出复核意见。电子签名追溯系统采用生物识别或数字证书实现双电子签名，系统自动记录审核人员、时间及操作日志，满足质量管理体系可追溯性要求。第二审核人（通常为主管技师）需重点审查异常结果与临床诊断的符合性，确认危急值处理流程合规性，并在报告单电子签名栏签署。高级审核要求PART06生物安全与维护感染性废物管理所有接触患者血液、体液的耗材（如采血管、棉签、手套等）必须投入专用黄色医疗废物袋，密封后标注“感染性废物”并移交专业机构处理，严禁与生活垃圾混放。化学性废物处置废弃的凝血试剂、校准品等含有毒化学成分的液体需倒入防漏容器，贴“化学危害”标签，由资质单位进行无害化处理，避免环境污染。锐器盒使用标准采血针、玻片等尖锐物品须立即放入防刺穿锐器盒，容量达3/4时封闭转运，确保操作人员免受针刺伤风险。医疗废物分类处理规范仪器日/周维护操作卡每日维护流程开机后执行光电比浊仪光路校准，检查凝血分析仪液路压力值是否在120-150kPa范围内，清洁样本针外壁残留血渍，并记录试剂冷藏温度（2-8℃）。1每周维护重点拆卸凝血仪反应杯转盘进行超声清洗，更换离子水滤芯，验证PT/APTT检测通道的重复性（CV值需<5%），校准纤维蛋白原测量线性范围（1.5-7.0g/L）。2故障预警机制当仪器出现吸样异常或温度波动超过±0.5℃时，立即暂停检测，参照SOP手册排查液路堵塞或温控模块故障，并上报设备科备案。3职业暴露应急处理预案化学品灼