2026年高考生物模拟试卷重点知识题型汇编-发酵工程

第1页（共1页）2026年高考生物模拟试卷重点知识题型问题与答案汇编——发酵工程一．选择题（共10小题）1．有学生探究检测大肠杆菌对抗生素的敏感性，实验操作规范。如图示37℃恒温箱中培养两天后所见结果。下列叙述中错误的是（）A．①②透明圈的大小差异可能与抗生素种类不同有关 B．②③透明圈的大小差异可能与同种抗生素的浓度不同有关 C．①②③透明圈的大小差异可能与培养基中N源含量不同有关 D．浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照2．下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是（）A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B．打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞 C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 D．最后应将平板倒置，放入培养箱中培养3．下列有关用平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌的叙述，正确的是（）①都需要用固体培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用菌落数来计数活菌．A．①② B．①③ C．②④ D．③④4．如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（）A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速沾取菌液后平板划线 C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D．步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数5．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（）A．①步骤使用的培养基已经灭菌并调节过pH B．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 C．操作③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理 D．图中操作结束后需在培养皿盖上标注菌种及接种日期等信息6．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（）A．操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置7．下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述中，错误的是（）A．常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌 B．平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数 C．稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散 D．用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏大8．下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是（）A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 C．在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者9．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、尿素、琼脂、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水10．下列哪种条件下，醋酸菌将葡萄汁中的糖分分解成醋酸（）A．氧气、糖源充足 B．氧气充足、缺少糖源 C．缺少氧气、糖源充足 D．氧气、糖源都缺少二．多选题（共5小题）（多选）11．下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（）A．与自然发酵相比，人工接种菌种不易被杂菌污染 B．较高温度和密闭环境有利于果醋的发酵 C．盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味 D．果酒、果醋和腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所都是细胞质基质（多选）12．下列关于高中生物学实验的原理、方法或选材的叙述，正确的是（）A．制作果醋时，通氧不足或温度过低会使发酵受影响 B．利用稀释涂布平板法对细菌计数时需借助于显微镜 C．用取样器取样法调查土壤小动物丰富度时，可以用目测估计法统计各种群的数量 D．利用二苯胺试剂鉴定细胞提取物，若产生蓝色变化即表明有RNA存在（多选）13．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）A．大肠杆菌 B．霉菌 C．放线菌 D．固氮细菌（多选）14．如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（）A．过程①、②和过程①、③总是同时进行 B．过程③和④都需要氧气的参与 C．制作果酒和果醋的连续过程中要保持温度恒定 D．可利用酸性重铬酸钾检测是否有酒精的产生（多选）15．钙果又名欧李，果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，利用其加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列有关叙述正确的是（）A．利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时，温度应控制在30～35℃ B．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧环境，不能拧松发酵瓶盖 C．传统制作钙果果酒、果醋时，应将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌 D．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的三．解答题（共5小题）16．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是．（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有和．分离纯化时应挑选出的菌落作为候选菌．（3）乳酸菌在﹣20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）．17．回答下列与细菌培养相关的问题。（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是。硝化细菌在没有碳源的培养基上（填“能够”或“不能”）生长，原因是。（2）用平板培养细菌时一般需要将平板（填“倒置”或“正置”）。（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是。（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。18．如图所示是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。（1）图中选择培养基应以为唯一氮源，鉴别培养基还需添加作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成色；（2）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191．该过程采取的接种方法是，每克土壤样品中的细菌数量为×108个，与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较；（3）现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码，终止密码有UAG、UGA和UAA，突变基因转录的mRNA中，终止密码为，突变基因表达的蛋白含个氨基酸。19．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：（1）细菌生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、四类。该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为。（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是。（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。20．【生物﹣﹣选修I：生物技术实践】回答下列关于腐乳制作的问题：（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品．多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为和；其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和．（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制生长．（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤．卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的．

2026年高考生物模拟试卷重点知识题型问题与答案汇编——一．选择题（共10小题）题号12345678910答案CDBCDABCAA二．多选题（共5小题）题号1112131415答案BDACBCDBDAD一．选择题（共10小题）1．有学生探究检测大肠杆菌对抗生素的敏感性，实验操作规范。如图示37℃恒温箱中培养两天后所见结果。下列叙述中错误的是（）A．①②透明圈的大小差异可能与抗生素种类不同有关 B．②③透明圈的大小差异可能与同种抗生素的浓度不同有关 C．①②③透明圈的大小差异可能与培养基中N源含量不同有关 D．浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用．【答案】C【分析】抑菌圈的大小可以表示大肠杆菌对抗生素的敏感性的大小，抑菌圈越大说明大肠杆菌对该种抗生素越敏感，否则越不敏感。图中②的抑菌圈最大，大肠杆菌对该种抗生素最敏感。据此分析作答。【解答】解：A、抑菌圈的大小与抗生素的种类和浓度有关，故①②透明圈的大小差异可能与抗生素种类不同有关，A正确；B、由A选项可知B正确；C、大肠杆菌为异养生物，同一平板的培养基中的含氮量是相同的，C错误；D、图中浸有无菌水的圆纸片在本实验中作为空白对照，D正确。故选：C。【点评】题主要考查微生物的微生物的培养等相关知识，意在强化学生对微生物培养的相关知识的理解与运用。2．下列在微生物的实验室培养过程中，关于平板划线操作的叙述正确的是（）A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B．打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞好棉塞 C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 D．最后应将平板倒置，放入培养箱中培养【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【答案】D【分析】平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；在数次划线后培养，可以分离由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的子细胞群为菌落．转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌再进行划线；等待平板冷却凝固后需要倒过来放置，目的是防止培养皿内壁上出现的冷凝水污染培养基．【解答】解：A、使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中还需灭菌，因为接种环会感染细菌，故A错误。B、打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后还需通过火焰灭菌，再塞上棉塞；故B错误。C、将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，还需盖上培养皿盖，防止空气中杂菌混入，故C错误。D、最后将平板倒置，防止盖子水滴落引起污染，有利培养基水蒸发；故D正确。故选：D。【点评】本题考查平板划线操作的相关知识，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构．3．下列有关用平板划线法和稀释涂布平板法纯化培养大肠杆菌的叙述，正确的是（）①都需要用固体培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用菌落数来计数活菌．A．①② B．①③ C．②④ D．③④【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】B【分析】分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．筛选或分类微生物时需要使用固体培养基进行平板划线法或稀释涂布平板法接种，其中稀释涂布平板法还可以用来进行微生物的计数．【解答】解：①平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落，所以都需要用固体培养基，①正确；②稀释涂布平板法不需要使用接种针进行接种，②错误；③为防止杂菌污染，操作时都需要在火焰旁进行接种，③正确；④平板划线法不能用于计数活菌，只能用于分离菌种；稀释涂布平板法可以用来计数活菌，④错误。故选：B。【点评】本题主要考查平板划线法和稀释涂布平板法的操作过程，意在强化学生对两种接种方式的理解与运用．4．如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是（）A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速沾取菌液后平板划线 C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 D．步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【答案】C【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。【解答】解：A、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A错误；B、步骤②接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以沾取菌液后平板划线，B错误；C、步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C正确；D、步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行分离得到纯种，D错误。故选：C。【点评】本题考查微生物的培养和纯化，解题的关键是能识别图示所代表的过程，仔细分析答题。5．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正确的是（）A．①步骤使用的培养基已经灭菌并调节过pH B．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 C．操作③到④的过程中，每次接种前后都需要对接种环进行灼烧处理 D．图中操作结束后需在培养皿盖上标注菌种及接种日期等信息【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【专题】模式图；正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】D【分析】由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤。【解答】解：A、①步骤表示倒平板，在倒平板之前已经灭菌并调节过pH，A正确；B、①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确；C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，C正确；D、图中操作结束后需在培养皿底标注菌种及接种日期等信息，D错误。故选：D。【点评】本题考查微生物的培养和纯化，要求考生识记培养基制备的基本过程，掌握平板划线法的过程，明确每次划线之前和之后均需要灼烧灭菌，再结合所学知识准确判断各项。6．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，叙述错误的是（）A．操作顺序为计算、称量、熔化、倒平板、灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板 D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置【考点】培养基的配制．【答案】A【分析】用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分为制备培养基和纯化大肠杆菌两个阶段进行，其中制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。【解答】解：A、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，A错误；B、将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热，B正确；C、待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，C正确；D、待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿低在上，D正确。故选：A。【点评】本题考查微生物的分离和培养，重点考查制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程，要求考生掌握培养基的制备步骤及相关的操作，相关知识点只需考生识记即可，属于考纲识记层次的考查。此类试题需要考生具有扎实的基础知识，学会构建知识网络结构。7．下列有关微生物分离、纯化及计数的叙述中，错误的是（）A．常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌 B．平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散并计数 C．稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散 D．用血细胞计数板计数微生物时，实验结果往往偏大【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的数量测定；微生物的纯培养．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】B【分析】两种纯化细菌的方法的比较优点缺点适用范围平板划线分离法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧，兼性厌氧【解答】解：A、纤维素是纤维素分解菌的碳源，因此常用富含纤维素的培养基富集培养纤维素分解菌，A正确；B、平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但不能用于微生物的计数，B错误；C、稀释涂布平板法通过系列梯度稀释可将微生物分散并计数，C正确；D、用血细胞计数板计数微生物时，会将死的微生物计数在内，导致实验结果往往偏大，D正确。故选：B。【点评】本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法和平板划线法功能的区别，掌握微生物计数的方法，再结合所学知识准确判断。8．下列有关平板划线操作的叙述，不正确的是（）A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 C．在第二次划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 D．划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【答案】C【分析】平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落。【解答】解：A、接种前先要用火焰灼烧接种环，目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物，A正确；B、每次划线结束，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，B正确；C、在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于上一次划线的末端，C错误；D、划线结束后，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者，D正确。故选：C。【点评】平板划线法是实验室常用的接种方法，注意的细节较多，但关键只有一个就是防止杂菌污染，考生需要紧紧围绕这个关键作答。9．下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是（）A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、尿素、琼脂、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4•7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【答案】A【分析】筛选目的微生物时，需要使用选择培养基。选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。选择出分解尿素的细菌的培养基需要使用尿素为唯一氮源的选择培养基。尿素分解菌是异养型的细菌。【解答】解：A、该培养基配方有尿素分解菌生活必须的营养物质，且尿素是唯一的氮源，属于选择培养基，A正确；B、该培养基的配方缺少氮源，尿素分解菌是异养微生物，不能生活在该培养基上，B错误；C、尿素分解菌是异养型的细菌，该培养基的配方缺少碳源，尿素分解菌不能在该培养基上生存，C错误；D、该培养基是普通的牛肉膏蛋白胨培养基，大多数细菌都能够在该培养基上生存，没有选择作用，不能筛选出尿素分解菌，D错误。故选：A。【点评】本题主要考查选择培养基的配方要求，意在强化学生对选择培养基的理解与运用。10．下列哪种条件下，醋酸菌将葡萄汁中的糖分分解成醋酸（）A．氧气、糖源充足 B．氧气充足、缺少糖源 C．缺少氧气、糖源充足 D．氧气、糖源都缺少【考点】果酒、果醋的制作．【答案】A【分析】1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。2、果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。（1）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。（2）当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【解答】解：A、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，A正确；B、当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B错误；C、醋酸菌是嗜氧菌，缺少氧气时，醋酸菌不能进行发酵，C错误；D、醋酸菌是嗜氧菌，缺少氧气时，醋酸菌不能进行发酵，D错误。故选：A。【点评】本题考查果酒和果醋的制作，要求考生识记果酒和果醋制作的相关知识，尤其是果醋制作的原理、醋酸菌的特点，能根据题干要求选出正确的答案，属于考纲识记层次的考查。二．多选题（共5小题）（多选）11．下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（）A．与自然发酵相比，人工接种菌种不易被杂菌污染 B．较高温度和密闭环境有利于果醋的发酵 C．盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味 D．果酒、果醋和腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所都是细胞质基质【考点】果酒、果醋的制作．【答案】BD【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性．2、醋酸菌好氧性细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃．3、豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪，都是大分子有机化合物，难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳．【解答】解：A、与自然发酵相比，人工接种过程中利用了严格的灭菌措施，可以防止其它杂菌污染，且发酵获得的产品品质更好，A正确；B、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，而醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜温菌，因此果醋发酵温度较高，且发酵过程要特别注意氧气供应，B错误；C、腐乳制作过程中，添加的料酒、香辛料和盐等均具有调节腐乳风味的作用，所以盐的用量、酒的种类和用量、温度等均会影响腐乳风味，C正确；D、参与果酒制作的酵母菌是兼性厌氧型真核生物，参与果醋制作的醋酸菌是需氧型原核生物，参与腐乳制作的毛霉是需氧型真核生物，所以果酒制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质或线粒体、果醋制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是细胞质基质，而腐乳制作的微生物细胞呼吸产生CO2的场所是线粒体，D错误。故选：BD。【点评】本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作，要求考生识记参与果酒制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒制作的流程；识记腐乳制作的流程及相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项．（多选）12．下列关于高中生物学实验的原理、方法或选材的叙述，正确的是（）A．制作果醋时，通氧不足或温度过低会使发酵受影响 B．利用稀释涂布平板法对细菌计数时需借助于显微镜 C．用取样器取样法调查土壤小动物丰富度时，可以用目测估计法统计各种群的数量 D．利用二苯胺试剂鉴定细胞提取物，若产生蓝色变化即表明有RNA存在【考点】果酒、果醋的制作；微生物的选择培养和计数；微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；DNA的粗提取与鉴定；土壤中动物类群丰富度的研究．【答案】AC【分析】1、醋酸菌的代谢类型为异养需氧型，其生存的适宜温度为30～35℃．2、调查土壤动物丰富度采用取样器取样法，观察肉眼难识别的小动物使用放大镜；统计土壤动物丰富度的方法：记名计算法和目测估计法．3、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色．【解答】解：A、醋酸菌是嗜氧菌，也是嗜温菌，因此制作果醋时，通氧不足或温度过低会使发酵受影响，A正确；B、利用稀释涂布平板法对细菌计数时，通过肉眼即可数出菌落数，不需借助于显微镜，B错误；C、土壤小动物丰富度很大时，可以用目测估计法统计，C正确；D、利用二苯胺试剂鉴定细胞提取物，若产生蓝色变化即表明有DNA存在，D错误。故选：AC。【点评】本题综合考查果酒和果醋的制作、微生物的培养和分离、调查土壤小动物丰富度、DNA的粗提取和鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理，实验选择的材料是否合适，实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．（多选）13．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）A．大肠杆菌 B．霉菌 C．放线菌 D．固氮细菌【考点】选择培养基．【答案】BCD【分析】选择培养基的原理是：不同微生物在代谢过程中所需要的营养物质和环境不同。有的适于酸性环境，有的适于碱性环境；不同微生物对某些化学药品的抵抗力不同。利用这些特点，我们便可配制出适于某些微生物生长而抑制其他微生物的选择培养基。例如从土壤中分离放线菌时，可在培养基中加入10%的酚数滴，抑制细菌和真菌的生长；如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐。【解答】解：A、大肠杆菌需要氮源、青霉素抑制大肠杆菌生长、酚也是抑制细菌的生长，A错误；B、霉菌是真菌，在培养基中加入青霉素后，青霉素可以抑制细菌和放线菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培养基可以选择出霉菌，B正确；C、培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌，所以可以筛选放线菌，C正确；D、固氮菌的氮源氮气，在培养基中不需要氮源，所以缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但是固氮细菌可以生长，D正确。故选：BCD。【点评】本题的知识点是培养基对微生物的选择作用，加青霉素、苯酚、不含氮源的培养基都会对微生物的选择作用，主要考查学生对选择培养基的选择作用的理解和应用能力。（多选）14．如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是（）A．过程①、②和过程①、③总是同时进行 B．过程③和④都需要氧气的参与 C．制作果酒和果醋的连续过程中要保持温度恒定 D．可利用酸性重铬酸钾检测是否有酒精的产生【考点】果酒、果醋的制作．【答案】BD【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→酶6CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O6→酶2CO2+2C2H5OH+2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．3、分析题图：过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，过程④是果醋制作．【解答】解：A、在无氧环境中，酵母菌只能进行过程①②，在氧气充足的环境中，酵母菌只进行过程①③，A错误；B、过程③表示有氧呼吸的第二和第三阶段，该过程需用氧气的参与，过程④表示果醋发酵，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此该果醋也需要氧气的参与，B正确；C、过程③所需的最适温度为18～25℃，过程④所需的最适温度为30～35℃，因此制作果酒和果醋的连续过程中不能保持温度恒定，C错误；D、酒精可用酸性重铬酸钾溶液鉴定，颜色由橙色变成灰绿色，D正确。故选：BD。【点评】本题结合图解，考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理及条件，能准确判断图中各过程的含义、发生在场所及条件等知识，再结合所学的知识准确判断各选项．（多选）15．钙果又名欧李，果实中含有多种对人体有益的矿物质元素，利用其加工成果汁、果酒、果醋等产品。下列有关叙述正确的是（）A．利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时，温度应控制在30～35℃ B．在钙果果酒发酵期间，为保持无氧环境，不能拧松发酵瓶盖 C．传统制作钙果果酒、果醋时，应将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌 D．钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的【考点】果酒、果醋的制作．【专题】实验原理；实验材料与实验步骤；正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】AD【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。【解答】解：A、醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，故利用醋酸菌进行钙果果醋发酵时，温度应控制在适宜其生长的温度范围，A正确；B、在钙果果酒发酵期间，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，在发酵过程需要保持无氧环境，但需要根据发酵进程适时拧松瓶盖放气，B错误；C、传统制作钙果果酒、果醋时，利用的是果汁中带有的野生型酵母菌，若将原料钙果果汁进行高压蒸汽灭菌，会杀死酵母菌，C错误；D、钙果果酒的颜色是钙果果皮和果肉中的色素进入发酵液形成的，D正确。故选：AD。【点评】本题考查果酒和果醋的制作，要求考生识记制作果酒和果醋的原理和过程，意在考查考生运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力。三．解答题（共5小题）16．某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸菌能溶解培养基中的碳酸钙．回答下列问题：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落．（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离．分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．（3）乳酸菌在﹣20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）．【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；制作泡菜．【专题】微生物的分离、培养和应用；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】见试题解答内容【分析】（1）泡菜的制作原理泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸．（2）测定亚硝酸盐含量的原理在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量．（3）泡菜的制作（2）亚硝酸盐含量的测定操作过程【解答】解：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落．（2）在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．（3）乳酸菌在﹣20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的甘油．故答案为：（1）无菌水泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落（2）中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸利于乳酸菌的识别和分离在平板上有透明圈（3）甘油【点评】本题主要以泡菜的制作为前提，考查微生物应用的相关知识，意在考查考生把握知识间内在联系的能力．17．回答下列与细菌培养相关的问题。（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是蛋白胨（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同。硝化细菌在没有碳源的培养基上能够（填“能够”或“不能”）生长，原因是硝化细菌可以利用空气中的二氧化碳作为碳源。（2）用平板培养细菌时一般需要将平板倒置（填“倒置”或“正置”）。（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征。（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过灭菌处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；无菌技术常用的消毒和灭菌方法；微生物的纯培养．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。2、常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，使用对象主要有接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等；【解答】解：（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是蛋白胨，由于不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同，故制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，硝化细菌属于自养生物，可以利用空气中的二氧化碳作为碳源，故在没有碳源的培养基上能够生长。（2）用平板培养细菌时一般需要将平板倒置，防止冷凝水倒流污染培养基。（3）由于在一定的培养条件下，不同微生物表现出各自稳定的菌落特征不同，故可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物。（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过灭菌处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物，防止污染环境。故答案为：（1）蛋白胨不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同能够硝化细菌可以利用空气中的二氧化碳作为碳源（2）倒置（3）在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征（4）灭菌【点评】本题主要考查微生物的分离和培养的相关知识，意在考查考生对培养基的成分、微生物的培养过程及菌落的特征的记忆与理解，难度不大。18．如图所示是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。（1）图中选择培养基应以尿素为唯一氮源，鉴别培养基还需添加酚红作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成红色；（2）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191．该过程采取的接种方法是稀释涂布平板法，每克土壤样品中的细菌数量为1.75×108个，与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较少；（3）现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码，终止密码有UAG、UGA和UAA，突变基因转录的mRNA中，终止密码为UGA，突变基因表达的蛋白含115个氨基酸。【考点】微生物的数量测定；选择培养基．【专题】图文信息类简答题；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】1、鉴定分解尿素的细菌：细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够产生脲酶，并分解尿素。2、mRNA是以DNA的一条链为模板转录形成的，翻译过程中，mRNA中每3个碱基决定一个氨基酸，所以经翻译合成的蛋白质分子中氨基酸的数目是mRNA碱基数目的13，是DNA（基因）中碱基数目的16．即DNA（或基因）中碱基数：mRNA上碱基数：氨基酸个数＝6：3：【解答】解：（1）脲酶能够催化尿素分解为氨，故图中选择培养基应以尿素为唯一氮源，鉴别培养基还需添加酚红作指示剂。由于尿素被脲酶分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，从而使酚红指示剂变红。（2）用于计数细菌菌落数的常用方法是稀释涂布平板法，统计的菌落数应介于30～300之间，故选择细菌菌落数为156、178和191的平板计数。每克该土壤样品中的菌落数对应的应该是每毫升菌液中的细菌数目，所以每克该土壤样品中的菌落数为（156+178+191）÷3÷0.1×105＝1.75×108．由于两个或多个细菌连接在一起时，往往统计的是一个菌落，所以用此计数方法测得的细菌数较少。（3）密码子是由三个相邻的碱基组成，271个碱基和后面2个碱基一起共构成91个密码子，插入的70个核苷酸和后面2个碱基一起共构成24个密码子，后面是UGA，为终止密码，表示翻译结束，所以表达的蛋白质含有115个氨基酸。故答案为：（1）尿素酚红红（2）稀释涂布平板法1.75少（3）UGA115【点评】本题考查微生物的分离和转录、翻译的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。19．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：（1）细菌生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源和无机盐四类。该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37．据此可得出每升水样中的活菌数为3.8×107。（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。（3）示意图A和B中，B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【专题】实验性简答题；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】分析图解：图中细菌的分离的方法为①表示平板划线法，②表示稀释涂布平板法。①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【解答】解：（1）微生物培养过程中需要的营养物质主要有碳源、氮源、水、无机盐等。微生物培养过程应该进行无菌操作，配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌，可以将灭菌后的空白平板进行培养以检测培养基灭菌是否彻底；由题意知1ml水样中的菌落数是（39+38+37）÷3÷0.1×100＝3.8×104个，每升水样中的活菌数为3.8×104×103＝3.8×107。（2）对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是；将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。（3）分析题图可知，A培养皿采用的接种方法是平板划线法，B培养皿采用的接种方法是稀释涂布平板法。（4）由题意可知，振荡培养比静置培养的细菌生长速度快，由此可以说明该细菌是需氧菌，由于振荡培养提高了培养液中溶解氧的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，细菌生长速度加快。故答案为：（1）氮源和无机盐检测培养基平板灭菌是否合格3.8×107（2）灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落（3）B（4）溶解氧营养物质【点评】本题主要考查培养基的制作和微生物的接种方法，意在强化学生对实验室的微生物的培养的相关知识的理解与掌握。20．【生物﹣﹣选修I：生物技术实践】回答下列关于腐乳制作的问题：（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品．多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是毛霉，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为肽和氨基酸；其产生的脂肪酶能将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸．（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制微生物生长．（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配制而成的卤汤．卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的风味．【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【答案】见试题解答内容【分析】实验原理：（1）参与豆腐发酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉．（2）毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝．（3）毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸．实验步骤：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制【解答】解：（1）发酵过程中起作用的微生物有多种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸．（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物的生长．（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）．故答案为：（1）毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（2）微生物（3）风味【点评】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均为课本上理解识记内容，难度不大．

考点卡片1．土壤中动物类群丰富度的研究【知识点的认识】一、实验前的准备1、实验目的使每位小组成员通过调查样本中小动物的种类和数量来推测某一区域内土壤动物的丰富度，能从种群的组成上描述群落的实验目的使小组成员通过调查样本中小动物的种类和数量来推测某一区域内土壤小动物的结构特征，并从中可以感受到采样地点真实的环境情况，并使小组成员建立，群落与环境之间相互联系的观念．2、实验原理：土壤是无数小动物的家园，常见的小动物有蜘蛛、鼠妇、蜈蚣、马陆、蚯蚓以及多种多样得昆虫等．大多数土壤动物身体微小，不适于用“样方法”或“标志重捕法”进行调查，在这类研究时，常采用取样器取样的方法，即用一定规格的捕捉器（如采集罐、吸虫器等）进行取样，通过调查样本中小动物的种类和数量来推测某一区域内土壤动物的丰富度．3、实验方法：实验采用取样器取样的方法进行研究，在丰富度统计时采用有两种统计法：记名计算法、目测估计法．实验材料和用具：自制取样器、铲子、塑料袋、诱虫器或吸虫器（装有酒精的试管、漏斗、漏底花盆，底铺金属网、灯）、标签、瓷盘、解剖针、放大镜、镊子（包着纱布或棉花的镊子）、试管、70%酒精、显微镜、解剖镜（实体镜）、载（盖）玻片、土壤动物分类图谱（或实习手册）等．4、需了解的实验中的关键概念与知识：（1）取样器取样：即用一定规格的捕捉器（如采集罐、吸虫器等）进行取样，通过调查样本中小动物的种类和数量来推测某一区域内土壤动物的丰富度．（2）丰富度统计方法：①记名计算法．②目测估计法．记名计算法：指在一定面积样地中，直接数出各种群个体数（用于个体较大，种群数量有限得群落；目测估计法：按预先确定的多度等级来估计单位面积上个体数量的多少．等级划分和表示方法：非常多、多、较多、较少、少、很少等．（3）土壤：土壤是岩石圈表面的疏松表层，是陆生植物生活的基质和陆生动物生活的基底．土壤不仅为植物提供必需的营养和水分，而且也是土壤动物赖以生存的栖息场所．土壤的形成从开始就与生物的活动密不可分，所以土壤中总是含有多种多样的生物，如细菌、真菌、放线菌、藻类、原生动物、扁形动物、轮形动物、线形动物、环节动物、软体动物和各种节肢动物等．土壤无论对植物来说还是对土壤动物来说都是重要的生态因子．越靠近土壤表层，动物的种类越丰富．土壤动物是最重要的土壤消费者和分解者．可见，土壤是生物和非生物环境的一个极为复杂的复合体，土壤的概念总是包括生活在土壤里的大量生物．生物的活动促进了土壤的形成，而众多类型的生物又生活在土壤之中．【命题方向】某同学欲在已经弃耕一年的菜地中开展土壤小动物丰富度调查，下列有关说法正确的是（）A.对土壤中活动能力强的小动物应用标记重捕法调查B.随着土层的加深，生物类群会逐渐减少C.人类活动不会影响土壤小动物的分布及数量D.取样深度不同，土壤中的生物种类也不同，这体现了群落的水平结构分析：1、许多土壤动物有较强的活动能力，而且身体微小，因此不适于用样方法进行调查。在进行这类研究时，常用取样器取样的方法进行采集、调查，常用的统计物种相对数量的方法有两种：一是记名计算法；二是目测估计法。2、群落的空间结构包括垂直结构和水平结构等。在垂直方向上，大多数群落都具有明显的分层现象；植物的垂直分层为动物创造了多种多样的栖息空间和食物条件，因此，动物也有分层现象。在水平方向上，不同地段往往分布着不同的种群，同一地段上种群密度也有差别，它们常呈镶嵌分布。解答：A、对土壤中活动能力强的小动物应用取样器取样法调查丰富度，A错误；B、随着土层的加深，小动物的生存环境恶化，生物类群会逐渐减少，B正确；C、人类活动会影响土壤小动物的分布及数量，C错误；D、取样深度不同，土壤中的生物种类也不同，这是垂直方向上的结构，体现了群落的垂直结构，D错误。故选：B。点评：本题考查估算种群密度的方法、土壤中动物类群丰富度的研究，要求考生识记估算种群密度的方法及适用范围；识记调查土壤动物类群丰富度的方法，能结合所学的知识准确判断各选项。【解题思路点拨】许多土壤动物有较强的活动能力，而且身体微小，因此不适于用样方法进行调查。在进行这类研究时，常用取样器取样的方法进行采集、调查，常用的统计物种相对数量的方法有两种：一是记名计算法；二是目测估计法。2．制作泡菜【知识点的认识】泡菜的制作及亚硝酸盐含量的测定1、原理（1）泡菜的制作原理泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸．（2）测定亚硝酸盐含量的原理在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量．2、流程（1）泡菜的制作（2）亚硝酸盐含量的测定操作过程3、实验分析（1）乳酸菌的种类分析乳酸菌属原核生物，它是能通过发酵将糖类转化成乳酸的细菌的总称，常见的有乳酸杆菌和乳酸链球菌，所以乳酸菌不是一个种群，而是一类生物．（2）泡菜在腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化①发酵初期：以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌的活动为主，同时还有一部分硝酸盐还原菌活动．该时期利用了氧气，产生了厌氧环境，乳酸菌才开始活动．此时乳酸菌和乳酸的量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加．②发酵中期：由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强．此时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累．由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降．所以在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势（如图所示）．③发酵后期：由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制．乳酸菌数量下降，而硝酸盐还原菌完全被抑制．提醒放置时间长的蔬菜中的硝酸盐易被滋生的硝酸还原菌还原成亚硝酸盐．3．果酒、果醋的制作【知识点的认识】（1）利用酵母菌制作果酒的原理是：在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O6+6O2→酶6CO2+12H2O+在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O6→酶2CO2+2C2H5OH+（2）利用醋酸菌制作果醋的原理当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。C6H12O6+2O2→酶CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+C2H5OH+O2→酶CH3COOH（醋酸）+H2O+（提示：在变酸的酒的表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的）【命题方向】下列关于果酒、果醋制作的叙述，错误的是（）A．糖源不足时乙醇可以作为果醋发酵的底物B．酵母菌和醋酸杆菌都属于异养型微生物C．乙醇发酵后期可向培养液中加入无菌水进行适当稀释再制作果醋D．在变酸的果酒表面观察到的菌膜是酵母菌在液面大量繁殖形成的分析：1、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。解答：A、当缺少糖源时和有氧条件下，醋酸菌可将乙醇（酒精）氧化成醋酸，故糖源不足时乙醇可以作为果醋发酵的底物，A正确；B、酵母菌和醋酸杆菌都属于异养型微生物，需要利用现成的有机物维持生命活动，B正确；C、乙醇发酵后期就大量的二氧化碳和酒精，可向培养液中加入无菌水进行适当稀释再制作果醋，醋酸菌可将乙醇氧化成醋酸，C正确；D、在变酸的果酒表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，D错误。故选：D。点评：本题考查传统发酵技术的相关知识，要求考生识记果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作原理等知识，意在考查考生的识记和分析能力。【解题思路点拨】掌握果酒、果醋的制作的相关知识是解题的关键。4．培养基的配制【知识点的认识】培养基一般包括：水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。如牛肉膏提供碳源、磷酸盐和维生素等，蛋白胨提供氮源和维生素等。【命题方向】下表是培养某微生物的培养基的配方，回答下列问题。组分牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5g10g5g20g1000mL（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行处理。（2）在配制培养基时，除考虑营养条件外，还要考虑、和渗透压等条件。（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行（填“消毒”或“灭菌”）；操作者的双手需进行清洗和；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质，还能损伤DNA的结构。（4）分离纯化微生物最常使用的接种方法是和。（5）在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。分析：培养基的概念及营养构成（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。解答：（1）培养基的类型很多，但培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。牛肉膏和蛋白胨能提供碳源和氮源。培养基配制完成后，一般还要调节pH并对培养基进行灭菌处理。（2）在微生物培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度、渗透压等条件。（3）灭菌是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，所以对培养基和培养皿进行灭菌；消毒是用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，操作者的双手需要进行清洗和消毒，紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构。（4）分离纯化微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法获得单菌落。对接种针或涂布器常用灼烧灭菌法进行。（5）培养微生物时，在接种前需要检测培养基是否被污染．对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生。故答案为：（1）氮源牛肉膏灭菌（2）温度酸碱度（3）灭菌消毒变性（4）平板划线法稀释涂布平板法（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生点评：本题考查微生物与培养基的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。【解题思路点拨】掌握培养基配制的相关知识是解题的关键。5．无菌技术常用的消毒和灭菌方法【知识点的认识】1、微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵。2、实验室常用的灭菌方法：（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。【命题方向】无菌技术是微生物培养中的关键技术之一，内容主要包括消毒和灭菌。下列关于无菌技术的叙述，错误的是（）A．生物消毒法可以杀死物体内部包括芽孢和孢子在内的所有微生物B．常用的消毒方法主要包括煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒等C．常用的灭菌方法主要包括干热灭菌、湿热灭菌、灼烧灭菌等D．为避免周围环境中微生物的污染，消毒灭菌后的操作应在超净工作台进行分析：1、微生物培养过程中要进行无菌操作，关键就在于防止外来杂菌的入侵。2、实验室常用的灭菌方法：（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。解答：A、杀死物体内部包括芽孢和孢子在内的所有微生物属于灭菌，消毒只能杀死物体表面或内部的部分微生物，不包括芽孢和孢子，A错误；B、常用的消毒方法主要包括煮沸消毒、化学药物（酒精等）消毒、紫外线消毒、巴氏消毒法等，B正确；C、常用的灭菌方法主要包括干热灭菌、湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）、灼烧灭菌等，C正确；D、为避免周围环境中微生物的污染，消毒灭菌后的操作应在超净工作台进行，超净工作台使用前可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，D正确。故选：A。点评：本题考查消毒灭菌的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。【解题思路点拨】掌握无菌技术、常用的消毒和灭菌方法的相关知识是解题的关键。6．微生物的纯培养【知识点的认识】（1）由单一个体繁殖所获得的微生物群体，称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养。微生物的纯培养步骤有配置培养基、灭菌、接种、分离、培养等。（2）微生物常见的接种的方法：A、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。B、稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。【命题方向】下列有关微生物的纯培养、分离及计数的叙述，正确的是（）A．培养基配方中都含有碳源、氮源、水、无机盐及琼脂等成分B．用纤维素为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌C．用稀释涂布平板法统计的样品活菌数目往往与实际数目多D．平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但不宜用于计数分析：微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。（2）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。解答：A、培养基配方中一般都含有碳源、氮源、水、无机盐等成分，琼脂是制作固体培养基所需要的凝固剂，A错误；B、用纤维素为唯一碳源的培养基可以选择分离出纤维素分解菌，用尿素为唯一氮源的培养基可以选择分离出尿素分解菌，B错误；C、利用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以统计结果比活菌实际数目低，C错误；D、平板划线法通过连续划线将聚集的菌种分散，但平板划线法不能对微生物进行计数，D正确。故选：D。点评：本题主要考查的是培养基的配制、微生物的纯培养以及微生物的数量测定的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。【解题思路点拨】掌握微生物的纯培养的相关知识是解题的关键。7．微生物的选择培养和计数8．选择培养基【知识点的认识】培养基按照用途可分为类型和作用选择培养基和鉴别培养基。选择培养基是指只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。【命题方向】下列关于微生物的选择培养的叙述，错误的是（）A.用纤维素作为唯一碳源的选择培养基分离获得纤维素分解菌B.用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离获得尿素分解菌C.用缺少有机碳源的选择培养基分离获得自养型微生物D.用含有青霉素的选择培养基分离获得酵母菌和细菌分析：生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为选择培养基。培养基一般都含有水、碳原、氮源和无机盐等营养物质。牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。解答：A、筛选纤维素分解菌需以纤维素作为唯一的碳源，A正确；B、筛选尿素分解菌需以尿素作为唯一氮源，B正确；C、自养型微生物可以自身合成有机物，比如一些微生物可以利用光合作用，利用大气中的二氧化碳合成有机物，对于这类微生物的培养，培养基中可以不加有机碳源，利用空气中的二氧化碳即可。故用缺少有机碳源的选择培养基分离获得自养型微生物，C正确；D、青霉素是一种抗生素，抑制细菌的生长和增殖，对真核细胞不起作用，酵母菌可以在含有青霉素的选择培养基分离出来，但细菌不可分离出来，D错误。故选：D。点评：本题考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的种类及功能，能结合所学的知识准确判断各选项。【解题思路点拨】分清选择培养基和鉴别培养基的特点，针对题干具体分析，不要混淆。9．微生物的选择培养（稀释涂布平板法）【知识点的认识】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：1．分离菌株的思路（1）自然界中目的菌株的筛选①依据：根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。（2）实验室中目的菌株的筛选①原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发