国家事业单位招聘2024中国科学院动物研究所国家干细胞资源库细胞资源技术主管岗位招聘1人公笔试历年参考题库典型考点附带答案详解(3卷合一)试卷2套

[国家事业单位招聘】2024中国科学院动物研究所国家干细胞资源库细胞资源技术主管岗位招聘1人公笔试历年参考题库典型考点附带答案详解(3卷合一)（第1套）一、单项选择题下列各题只有一个正确答案，请选出最恰当的选项（共25题）1、细胞培养过程中，最常用的平衡盐溶液是？A.PBS缓冲液B.生理盐水C.Hank's液D.RPMI-1640培养基2、干细胞最显著的生物学特性是？A.分化能力B.增殖能力C.自我更新和多向分化能力D.迁移能力3、细胞冻存时最常用的保护剂是？A.甘油B.二甲基亚砜C.蔗糖D.丙二醇4、细胞计数时通常使用的计数板是？A.血球计数板B.玻璃计数板C.塑料计数板D.金属计数板5、细胞培养箱的标准培养条件是？A.37℃，5%CO2B.25℃，3%CO2C.37℃，10%CO2D.4℃，5%CO26、在细胞培养过程中，CO2培养箱的标准CO2浓度通常设置为多少？A.1%B.5%C.10%D.20%7、以下哪种细胞器是植物细胞特有的结构？A.线粒体B.高尔基体C.叶绿体D.内质网8、PCR反应中，DNA变性温度通常设置为多少度？A.55°CB.72°CC.94°CD.37°C9、下列哪种培养基最适合哺乳动物细胞的体外培养？A.LB培养基B.DMEM培养基C.琼脂培养基D.麦康凯培养基10、在显微镜下观察细胞时，下列哪种染色方法常用于观察细胞核？A.伊红染色B.苏木精染色C.革兰氏染色D.革兰氏复染11、在细胞培养过程中，以下哪种培养基最适合干细胞的体外扩增？A.DMEM培养基B.RPMI-1640培养基C.ES细胞专用培养基D.MEM培养基12、细胞冻存时最常用的保护剂是？A.甘油B.二甲基亚砜(DMSO)C.乙醇D.丙二醇13、以下哪种检测方法最适合评估细胞活力？A.台盼蓝染色法B.HE染色法C.革兰氏染色法D.吉姆萨染色法14、细胞传代时，最常用的消化酶是？A.胰蛋白酶B.胶原酶C.弹性蛋白酶D.蛋白酶K15、干细胞的最基本特征是？A.分裂速度快B.具有自我更新和多向分化潜能C.体积小D.核质比高16、在细胞培养过程中，CO2培养箱的标准CO2浓度通常设定为多少？A.1%B.5%C.10%D.15%17、下列哪种细胞器具有双层膜结构？A.内质网B.高尔基体C.线粒体D.溶酶体18、PCR反应中DNA聚合酶的最适温度通常为多少摄氏度？A.37℃B.55℃C.72℃D.94℃19、细胞凋亡过程中起关键作用的酶类是？A.DNA聚合酶B.Caspase家族蛋白酶C.RNA聚合酶D.蛋白激酶20、原代细胞培养传代次数通常限制在多少代以内？A.5代B.10代C.20代D.50代21、在细胞培养过程中，为了维持培养基的pH值稳定，最常用的缓冲系统是？A.磷酸盐缓冲系统B.碳酸氢盐缓冲系统C.Tris缓冲系统D.HEPES缓冲系统22、干细胞具有自我更新和多向分化潜能的特点，其分化能力最强的是？A.多能干细胞B.全能干细胞C.单能干细胞D.亚全能干细胞23、细胞冻存时最常用的保护剂是？A.甘油B.二甲基亚砜C.丙二醇D.蔗糖24、流式细胞术检测细胞周期时，最常使用的DNA染料是？A.藻红蛋白B.异硫氰酸荧光素C.碘化丙啶D.德克萨斯红25、在无菌操作中，75%乙醇消毒的杀菌机制主要是？A.破坏细胞壁B.使蛋白质变性凝固C.抑制酶活性D.阻断DNA复制二、多项选择题下列各题有多个正确答案，请选出所有正确选项（共15题）26、细胞培养过程中，常用的抗生素组合包括：A.青霉素和链霉素B.庆大霉素和卡那霉素C.新霉素和制霉菌素D.万古霉素和氯霉素27、干细胞的特征性标志物包括：A.Oct4B.NanogC.Sox2D.CD4528、细胞冻存时常用的保护剂包括：A.二甲基亚砜(DMSO)B.甘油C.丙二醇D.乙二醇29、细胞计数时需要考虑的因素包括：A.细胞活率B.细胞大小C.细胞形态D.细胞密度30、细胞传代培养的操作要点包括：A.选择合适的消化酶B.控制消化时间C.确保无菌操作D.调整适宜的细胞密度31、细胞培养过程中需要严格控制的环境因素包括哪些？A.温度B.pH值C.湿度D.气体环境E.光照强度32、干细胞的基本特征包括哪些？A.自我更新能力B.多向分化潜能C.无限增殖能力D.特异性标记蛋白表达E.遗传稳定性33、细胞冻存技术中常用的保护剂包括哪些？A.二甲基亚砜(DMSO)B.甘油C.丙二醇D.蔗糖E.葡萄糖34、细胞计数时需要考虑的因素包括哪些？A.细胞存活率B.细胞聚集情况C.细胞大小差异D.细胞周期分布E.细胞形态35、无菌操作技术的基本要求包括哪些？A.操作前手部消毒B.使用无菌器具C.在生物安全柜内操作D.避免交叉污染E.定期检测无菌状态36、细胞培养过程中，以下哪些因素会影响细胞的生长状态？A.培养基的pH值B.二氧化碳浓度C.培养箱温度D.细胞传代次数37、干细胞的主要特征包括哪些？A.自我更新能力B.多向分化潜能C.无限增殖能力D.特定的表面标记物38、以下哪些技术属于细胞生物学研究的常用方法？A.流式细胞术B.免疫荧光染色C.实时荧光定量PCRD.蛋白质印迹法39、细胞冻存的关键技术要点包括哪些？A.使用冻存保护剂B.控制降温速率C.选择合适的冻存容器D.维持液氮储存温度40、实验室生物安全管理的基本原则包括哪些？A.个人防护措施B.实验室物理隔离C.废物处理规范D.人员培训制度三、判断题判断下列说法是否正确（共10题）41、细胞培养过程中，CO2浓度通常维持在5%左右以维持培养基的pH值稳定。A.正确B.错误42、干细胞具有自我更新和多向分化潜能两个核心特征。A.正确B.错误43、液氮冷冻保存细胞时，降温速度越快越有利于细胞存活。A.正确B.错误44、无菌操作技术是细胞培养实验成功的关键要素之一。A.正确B.错误45、细胞传代培养过程中，胰酶消化时间越长对细胞越有利。A.正确B.错误46、细胞培养过程中，CO2浓度通常维持在5%左右以维持培养基的pH值稳定。A.正确B.错误47、干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能。A.正确B.错误48、PCR反应中引物的设计长度通常在18-30个碱基之间。A.正确B.错误49、哺乳动物细胞的最适培养温度一般为37℃。A.正确B.错误50、细胞冻存时通常使用DMSO作为冷冻保护剂。A.正确B.错误

参考答案及解析1.【参考答案】A【解析】PBS（磷酸盐缓冲盐水）是最常用的平衡盐溶液，具有稳定的pH值和渗透压，广泛用于细胞洗涤、稀释等操作，是细胞培养的基础试剂。2.【参考答案】C【解析】干细胞的两个核心特征是自我更新（无限增殖）和多向分化（能分化为多种细胞类型），这是干细胞区别于其他细胞的根本特性。3.【参考答案】B【解析】DMSO（二甲基亚砜）是细胞冻存的经典保护剂，能渗透细胞膜，降低冰晶形成对细胞的损伤，保护细胞在冷冻过程中不受损害。4.【参考答案】A【解析】血球计数板是标准的细胞计数工具，具有精确的刻度和容积，适用于各种悬浮细胞的计数，是细胞生物学实验的基本设备。5.【参考答案】A【解析】人体细胞培养的标准条件是37℃恒温，5%CO2浓度维持培养基pH值，湿度95%以上，模拟人体生理环境确保细胞正常生长。6.【参考答案】B【解析】CO2培养箱中CO2的主要作用是维持培养液的pH值稳定。细胞培养液中通常含有碳酸氢钠缓冲系统，需要5%的CO2浓度来维持pH在7.2-7.4之间，这是细胞生长的最佳pH范围。7.【参考答案】C【解析】叶绿体是植物细胞特有的细胞器，含有叶绿素，是进行光合作用的场所。动物细胞和大多数微生物细胞都不含有叶绿体，而线粒体、高尔基体和内质网在各种真核细胞中都存在。8.【参考答案】C【解析】PCR反应包括三个步骤：变性、退火和延伸。DNA变性是指双链DNA在高温下分离成单链的过程，需要94-98°C的高温来破坏氢键，使DNA双螺旋结构解离。9.【参考答案】B【解析】DMEM（Dulbecco'sModifiedEagleMedium）是专门设计用于哺乳动物细胞培养的培养基，含有丰富的氨基酸、维生素和营养成分。其他培养基主要用于细菌培养或其他特定用途。10.【参考答案】B【解析】苏木精是碱性染料，能够与细胞核中的酸性物质DNA、RNA结合，使细胞核呈现蓝色或紫色。伊红染细胞质，革兰氏染色主要用于区分细菌类型，苏木精-伊红染色（HE染色）是最常用的组织学染色方法。11.【参考答案】C【解析】干细胞培养需要特殊的培养基来维持其未分化状态和自我更新能力。ES细胞专用培养基含有白血病抑制因子(LIF)等关键成分，能够有效维持干细胞的多能性，促进体外扩增。12.【参考答案】B【解析】二甲基亚砜是最常用的细胞冻存保护剂，能够渗透细胞膜，降低冰点，减少冰晶形成，有效保护细胞在冷冻过程中不受损伤，提高复苏后细胞存活率。13.【参考答案】A【解析】台盼蓝染色法基于活细胞膜的完整性，活细胞排斥染料不着色，死细胞膜受损可被染成蓝色，是评估细胞活力的标准方法，操作简便且结果直观。14.【参考答案】A【解析】胰蛋白酶能够分解细胞间的连接蛋白，使贴壁细胞脱离培养皿表面，是细胞传代的标准消化酶，浓度和作用时间需严格控制以避免损伤细胞。15.【参考答案】B【解析】干细胞的基本特征是自我更新能力（无限增殖）和多向分化潜能（可分化为多种细胞类型），这是干细胞生物学的核心概念，也是其临床应用的基础。16.【参考答案】B【解析】细胞培养需要维持适宜的pH环境，CO2培养箱中CO2浓度通常设定为5%，与培养基中碳酸氢钠缓冲系统配合，维持培养液pH在7.2-7.4之间，为细胞生长提供最佳环境条件。17.【参考答案】C【解析】线粒体具有独特的双层膜结构，外膜光滑，内膜向内折叠形成嵴，含有自己的DNA和核糖体，是细胞进行有氧呼吸和ATP合成的主要场所。18.【参考答案】C【解析】PCR反应中的DNA延伸步骤需要DNA聚合酶催化合成新链，Taq酶的最适温度为72℃，此温度下酶活性最强，能高效完成DNA链的延伸合成。19.【参考答案】B【解析】Caspase家族蛋白酶是细胞凋亡过程中的核心执行分子，通过级联反应激活，负责切割特定蛋白质底物，导致细胞结构解体和凋亡特征性改变。20.【参考答案】B【解析】原代细胞保持了较多的体内特性，但传代过程中会逐渐老化和转化，为保证细胞生物学特性稳定，原代细胞培养通常在10代以内使用，超过此范围细胞可能失去原有特征。21.【参考答案】B【解析】碳酸氢盐缓冲系统是细胞培养中最常用的缓冲系统，它与CO2形成缓冲对，能够有效维持培养基pH值在7.2-7.4之间。该系统具有生理相容性好、缓冲能力强的特点，是大多数细胞培养基的标准配置。22.【参考答案】B【解析】根据分化潜能大小排序：全能干细胞>多能干细胞>亚全能干细胞>单能干细胞。全能干细胞具有发育成完整个体的潜能，包括胚胎干细胞和受精卵，分化能力最强。23.【参考答案】B【解析】二甲基亚砜（DMSO）是细胞冻存中最常用的渗透性保护剂，能够穿透细胞膜，降低冰晶形成对细胞的机械损伤，有效保护细胞在冷冻过程中的活性，冻存浓度通常为5-10%。24.【参考答案】C【解析】碘化丙啶（PI）是核酸特异性染料，能嵌入DNA双螺旋结构，荧光强度与DNA含量成正比，通过检测不同DNA含量的细胞比例，可分析G0/G1、S、G2/M期细胞分布。25.【参考答案】B【解析】乙醇通过脱水作用使菌体蛋白质脱水、变性、凝固，破坏微生物的结构和功能。75%浓度效果最佳，浓度过高会过快使表面蛋白凝固形成保护膜，影响渗透效果。26.【参考答案】A、B【解析】青霉素和链霉素是细胞培养中最经典的抗生素组合，用于预防细菌污染。庆大霉素和卡那霉素也是常用的抗生素组合，具有广谱抗菌作用。其他选项中的组合在细胞培养中使用较少。27.【参考答案】A、B、C【解析】Oct4、Nanog和Sox2是维持干细胞多能性的关键转录因子，是干细胞的特征性标志物。CD45是造血细胞表面标志物，不是干细胞特异性标志物。28.【参考答案】A、B【解析】DMSO和甘油是细胞冻存中最常用的保护剂，能够防止细胞在冷冻过程中因冰晶形成而受损。丙二醇和乙二醇在细胞冻存中应用较少。29.【参考答案】A、B、C、D【解析】细胞计数时需要综合考虑细胞活率(死活细胞比例)、细胞大小(影响计数准确性)、细胞形态(判断细胞状态)和细胞密度(决定实验用量)等所有因素。30.【参考答案】A、B、C、D【解析】传代培养需要选择合适的消化酶(如胰酶)并控制消化时间避免细胞损伤，严格执行无菌操作防止污染，同时调整适宜的细胞密度保证细胞正常生长。31.【参考答案】ABCD【解析】细胞培养需要模拟体内环境，温度一般控制在37℃，pH值维持在7.2-7.4，湿度保持在95%以上，气体环境需要CO2浓度调节pH值。光照强度对细胞培养影响较小。32.【参考答案】ABD【解析】干细胞具有自我更新和多向分化两大基本特征，同时表达特异性标记蛋白。并非所有干细胞都具有无限增殖能力，遗传稳定性也是相对的。33.【参考答案】ABD【解析】DMSO是最常用的细胞冻存保护剂，甘油主要用于细菌保存，蔗糖作为渗透性保护剂可防止细胞脱水。葡萄糖和丙二醇不是常规细胞冻存保护剂。34.【参考答案】ABCE【解析】细胞计数时需评估存活率，避免细胞聚集影响准确性，考虑细胞大小差异，观察细胞形态判断状态。细胞周期分布虽重要但不直接影响计数操作。35.【参考答案】ABCDE【解析】无菌操作要求手部消毒，使用无菌器具，生物安全柜提供无菌环境，避免交叉污染，定期检测确保无菌状态，五项均是无菌操作的基本要求。36.【参考答案】ABCD【解析】细胞培养需要严格控制环境条件，pH值影响酶活性和细胞膜稳定性，CO2浓度维持培养基缓冲系统，温度影响细胞代谢速率，传代次数过多会导致细胞衰老和功能退化。37.【参考答案】ABD【解析】干细胞具备自我更新和多向分化两大核心特征，通过不对称分裂维持干细胞池稳定，能分化为多种功能细胞，同时具有特定表面标记便于识别分离。38.【参考答案】ABCD【解析】流式细胞术用于细胞分选和分析，免疫荧光观察蛋白定位，qPCR检测基因表达，Westernblot验证蛋白表达，均为细胞生物学研究的基础技术。39.【参考答案】ABCD【解析】冻存保护剂防止冰晶损伤细胞，控制降温避免细胞内外渗透压失衡，专用冻存管保证密封性，-196℃液氮环境维持细胞代谢静止状态。40.【参考答案】ABCD【解析】生物安全需要多层面防护，个人防护避免直接接触，实验室设施提供物理屏障，废弃物无害化处理防止污染扩散，人员培训确保安全操作规范执行。41.【参考答案】A【解析】细胞培养需要在适宜的pH条件下进行，通常使用CO2/HCO3-缓冲系统。5%CO2浓度能够维持培养基pH在7.2-7.4之间，为细胞生长提供稳定的环境条件。42.【参考答案】A【解析】干细胞的定义包含两个基本特征：自我更新能力，即能够不断增殖产生与自身相同的细胞；多向分化潜能，即能够分化为多种不同类型的成熟细胞，这是干细胞研究的基础。43.【参考答案】B【解析】冷冻保存需要控制降温速度，通常采用程序降温法。过快降温会产生细胞内冰晶损伤，过慢降温则会导致细胞脱水。适宜的降温速度（1-3°C/分钟）可避免冰晶形成，保护细胞膜结构完整。44.【参考答案】A【解析】细胞培养环境必须保持无菌状态，任何微生物污染都会导致培养失败。无菌操作包括使用无菌器具、在生物安全柜中操作、严格手部消毒等措施，是细胞培养实验的基本要求。45.【参考答案】B【解析】胰酶消化需要精确控制时间，过度消化会损伤细胞膜表面蛋白和细胞连接，影响细胞活性和后续贴壁。通常根据细胞类型选择适宜的胰酶浓度和消化时间，以达到最佳解离效果。46.【参考答案】A【解析】细胞培养需要CO2环境维持pH稳定，5%CO2浓度能与培养基中的碳酸氢钠缓冲系统配合，维持pH在7.2-7.4之间，确保细胞正常生长。47.【参考答案】A【解析】干细胞的两个核心特征是自我更新（能不断分裂产生相同子代细胞）和多向分化（能分化成多种不同功能细胞类型），这是干细胞生物学的基础概念。48.【参考答案】A【解析】PCR引物长度在此范围内的原因是：过短特异性差，过长延伸温度过高且成本增加。该长度能保证特异性结合和有效扩增。49.【参考答案】A【解析】37℃接近哺乳动物正常体温，此时细胞代谢酶活性最佳，细胞增殖和功能维持处于最适状态，是标准细胞培养条件之一。50.【参考答案】A【解析】DMSO能渗透细胞膜，在冷冻过程中防止细胞内形成有害冰晶，减少细胞损伤，是目前最常用的细胞冷冻保护剂，浓度一般为10%。

[国家事业单位招聘】2024中国科学院动物研究所国家干细胞资源库细胞资源技术主管岗位招聘1人公笔试历年参考题库典型考点附带答案详解(3卷合一)（第2套）一、单项选择题下列各题只有一个正确答案，请选出最恰当的选项（共25题）1、在细胞培养过程中，以下哪种气体组合最有利于哺乳动物细胞的生长？A.95%氧气+5%二氧化碳B.95%氮气+5%二氧化碳C.95%空气+5%二氧化碳D.100%空气2、胚胎干细胞具有以下哪种特征？A.只能分化为特定类型的细胞B.具有发育成完整个体的全能性C.仅能分化为外胚层来源的细胞D.不能进行自我更新3、细胞冷冻保存时最常用的保护剂是？A.甘油B.二甲基亚砜（DMSO）C.乙醇D.甲醇4、以下哪种技术可以实现基因的精确编辑？A.PCR技术B.基因测序C.CRISPR-Cas9技术D.凝胶电泳5、干细胞的基本特性不包括以下哪项？A.自我更新能力B.多向分化潜能C.无限增殖能力D.特定功能执行6、在细胞培养过程中，CO2培养箱的标准CO2浓度通常设置为多少？A.3%B.5%C.8%D.10%7、以下哪种显微镜最适合观察活细胞的动态过程？A.透射电子显微镜B.扫描电子显微镜C.倒置相差显微镜D.荧光显微镜8、细胞冻存时最常用的保护剂是什么？A.甘油B.二甲基亚砜(DMSO)C.乙醇D.丙二醇9、在无菌操作中，75%酒精的主要作用机制是什么？A.破坏细胞壁B.使蛋白质变性凝固C.抑制DNA复制D.阻断能量代谢10、细胞传代时，胰酶消化的适宜温度通常是？A.4℃B.25℃C.37℃D.42℃11、在细胞培养过程中，CO2培养箱的标准温度设置通常为多少度？A.25℃B.37℃C.42℃D.30℃12、以下哪种细胞器被称为细胞的"动力工厂"？A.内质网B.高尔基体C.线粒体D.溶酶体13、细胞凋亡过程中，DNA断裂的特点是断裂片段呈现什么规律？A.随机长度片段B.180-200bp及其倍数片段C.50bp片段D.1000bp片段14、在干细胞研究中，胚胎干细胞的典型表面标志物包括以下哪些？A.CD34和CD45B.SSEA-4和TRA-1-60C.CD14和CD11bD.CD4和CD815、细胞传代时，胰酶消化细胞的主要作用是什么？A.杀死细胞B.分解细胞间连接和细胞外基质C.促进细胞分裂D.提供营养16、下列哪种细胞具有最强的分化潜能？A.成体干细胞B.胚胎干细胞C.造血干细胞D.间充质干细胞17、细胞培养过程中，CO₂培养箱的主要作用是什么？A.提供氧气B.维持pH值稳定C.控制温度D.防止污染18、下列哪种方法最适合长期保存干细胞活性？A.4℃冷藏保存B.-20℃冷冻保存C.液氮超低温保存D.常温保存19、干细胞的自我更新能力指的是什么？A.分化为多种细胞类型B.无限增殖的能力C.保持干细胞特性的分裂D.修复组织损伤20、间充质干细胞主要来源于哪个组织？A.骨髓B.血液C.神经组织D.肌肉组织21、在细胞培养过程中，维持细胞正常生长所需的最适pH值范围通常为？A.6.0-6.5B.6.8-7.2C.7.2-7.4D.7.6-8.022、干细胞具有自我更新和多向分化潜能，下列哪种干细胞分化能力最为广泛？A.造血干细胞B.间充质干细胞C.胚胎干细胞D.神经干细胞23、细胞冻存过程中最重要的保护剂成分是？A.葡萄糖B.氯化钠C.二甲基亚砜D.氨基酸24、流式细胞术检测细胞周期时，通常使用的DNA染料是？A.台盼蓝B.碘化丙啶C.考马斯亮蓝D.甲基绿25、体外培养的细胞传代时，常用的消化试剂是？A.胰蛋白酶B.胶原酶C.蛋白酶KD.纤维素酶二、多项选择题下列各题有多个正确答案，请选出所有正确选项（共15题）26、在细胞培养过程中，以下哪些因素会影响细胞的生长状态？A.培养基的pH值和渗透压B.培养箱内的CO2浓度C.细胞传代的频率和密度D.培养皿的品牌型号E.环境温度的稳定性27、干细胞的基本特性包括哪些方面？A.自我更新能力B.多向分化潜能C.无限增殖特性D.特定的表面标志物表达E.不对称分裂能力28、细胞冷冻保存的关键技术要点包括：A.使用合适的冷冻保护剂B.采用程序降温方式C.选择适当的冻存温度D.快速冷冻避免冰晶形成E.确定合理的冻存细胞密度29、以下哪些方法可以用于细胞活力检测？A.台盼蓝染色法B.MTT比色法C.流式细胞术检测D.细胞计数板直接计数E.乳酸脱氢酶释放法30、细胞资源库的质量控制体系应包含哪些要素？A.细胞来源的可追溯性记录B.定期的无菌检测程序C.细胞功能特性的验证D.储存条件的实时监控E.操作人员的资质认证31、细胞培养过程中，以下哪些因素会影响细胞的生长状态？A.培养基的pH值B.培养箱的CO2浓度C.细胞传代的频率D.培养皿的材质E.环境温度的稳定性32、干细胞的主要特征包括哪些？A.具有自我更新能力B.能够分化为多种细胞类型C.无限增殖的特性D.具有特定的形态特征E.可维持基因组稳定性33、细胞冻存技术的关键要素有哪些？A.冷冻保护剂的使用B.冷冻速率的控制C.液氮的储存温度D.细胞活力的检测E.培养基成分的优化34、细胞污染的常见类型包括哪些？A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染E.细胞交叉污染35、细胞计数和活力检测的常用方法包括哪些？A.台盼蓝染色法B.细胞计数板计数C.MTT法D.流式细胞术E.光学显微镜观察36、细胞培养过程中，以下哪些因素会影响细胞的生长状态？A.培养基的pH值B.二氧化碳浓度C.培养箱湿度D.细胞传代次数E.培养皿材质37、干细胞的基本特性包括哪些方面？A.自我更新能力B.多向分化潜能C.无限增殖特性D.特定表型标记E.免疫原性较低38、细胞冻存技术的关键要素有哪些？A.冷冻保护剂的选择B.降温速率控制C.液氮储存温度D.细胞活力检测E.复苏时的升温速度39、以下哪些技术可用于细胞鉴定和分析？A.流式细胞术B.免疫荧光染色C.实时荧光定量PCRD.细胞计数E.细胞形态学观察40、细胞培养污染的主要类型包括哪些？A.细菌污染B.真菌污染C.支原体污染D.病毒污染E.细胞交叉污染三、判断题判断下列说法是否正确（共10题）41、细胞培养过程中，CO2浓度通常维持在5%左右以维持培养基的pH值稳定。A.正确B.错误42、干细胞具有自我更新和多向分化潜能两个基本特征。A.正确B.错误43、PCR技术需要DNA模板、引物、DNA聚合酶和dNTPs四种基本组分。A.正确B.错误44、细胞冻存时通常使用DMSO作为冷冻保护剂，浓度为10%。A.正确B.错误45、荧光显微镜观察时，激发光波长通常比发射光波长短。A.正确B.错误46、DNA双螺旋结构中，腺嘌呤与胸腺嘧啶之间形成三个氢键。A.正确B.错误47、细胞凋亡是一种程序性细胞死亡过程，通常伴随着炎症反应。A.正确B.错误48、蛋白质的二级结构主要包括α螺旋和β折叠两种形式。A.正确B.错误49、线粒体是细胞内唯一含有DNA的细胞器。A.正确B.错误50、酶的活性中心通常具有特定的空间结构，对底物具有高度专一性。A.正确B.错误

参考答案及解析1.【参考答案】C【解析】哺乳动物细胞培养通常需要5%的二氧化碳来维持培养基的pH值，其余95%使用空气即可提供充足的氧气供细胞代谢使用。纯氧气会导致氧化应激，纯氮气缺乏氧气支持细胞生长。2.【参考答案】B【解析】胚胎干细胞具有全能性，能够分化为体内所有类型的细胞，并且具有无限的自我更新能力，这是胚胎干细胞区别于其他类型干细胞的重要特征。3.【参考答案】B【解析】二甲基亚砜是最常用的细胞冷冻保护剂，能够渗透细胞膜，降低细胞内外的渗透压差，减少冰晶形成对细胞的损伤，有效保护细胞在冷冻过程中的活性。4.【参考答案】C【解析】CRISPR-Cas9技术是目前最精确的基因编辑工具，能够特异性地识别并切割目标DNA序列，实现基因的敲除、插入或替换，具有高效、精准的特点。5.【参考答案】D【解析】干细胞具有自我更新和多向分化两个基本特性，但其主要功能是维持和修复组织，而不是执行特定的生理功能，执行特定功能是分化后成熟细胞的特征。6.【参考答案】B【解析】细胞培养需要维持适宜的pH环境，CO2培养箱通过提供5%的CO2浓度与培养基中的碳酸氢钠缓冲系统配合，维持培养液pH在7.2-7.4之间，这是大多数细胞生长的最适pH范围。7.【参考答案】C【解析】倒置相差显微镜能够直接观察未染色的活细胞，具有良好的对比度，可实时监测细胞形态变化、分裂过程等动态现象，且对细胞损伤较小，是活细胞观察的首选设备。8.【参考答案】B【解析】DMSO是细胞冻存的标准化保护剂，能有效防止细胞内形成冰晶造成损伤，提高细胞复苏后的存活率，通常使用浓度为10%。其渗透性强，能快速进出细胞膜。9.【参考答案】B【解析】75%酒精通过使微生物蛋白质变性凝固，破坏其酶系统和细胞结构，导致微生物死亡。此浓度杀菌效果最佳，过高浓度会使菌体表面蛋白质快速凝固形成保护膜，反而影响杀菌效果。10.【参考答案】C【解析】37℃是细胞培养的标准温度，此温度下胰酶活性最强，能够有效消化细胞间的连接蛋白，使细胞从培养瓶壁上脱落。同时保持细胞活力，避免低温影响消化效率或高温损伤细胞。11.【参考答案】B【解析】细胞培养需要模拟人体生理环境，37℃是人体正常体温，也是大多数哺乳动物细胞生长的最适温度。CO2培养箱维持37℃恒温环境，有利于细胞正常代谢和增殖。12.【参考答案】C【解析】线粒体是细胞内进行氧化磷酸化的主要场所，负责ATP的合成，为细胞提供能量。由于其在能量代谢中的核心作用，被称为细胞的"动力工厂"。13.【参考答案】B【解析】细胞凋亡时，DNA被核酸内切酶切割成180-200bp及其倍数的片段，形成梯状条带，这是凋亡的典型生化特征。14.【参考答案】B【解析】SSEA-4和TRA-1-60是胚胎干细胞的特异性表面标志物，用于鉴定干细胞的多能性状态。15.【参考答案】B【解析】胰酶能够分解细胞间的蛋白质连接和细胞外基质成分，使贴壁细胞分散，便于传代操作。16.【参考答案】B【解析】胚胎干细胞来源于早期胚胎的内细胞团，具有全能性，能够分化为体内所有类型的细胞，包括胚外组织。而成体干细胞只能分化为特定类型的细胞，分化潜能有限。因此胚胎干细胞具有最强的分化潜能。17.【参考答案】B【解析】CO₂培养箱通过提供5%的CO₂浓度，与培养基中的碳酸氢钠缓冲系统共同作用，维持培养环境的pH值在7.2-7.4之间。虽然培养箱也能控制温度，但其主要功能是维持pH稳定，为细胞生长提供适宜的酸碱环境。18.【参考答案】C【解析】液氮保存温度可达-196℃，能有效停止细胞内所有生化反应，最大程度保持干细胞的生物活性和增殖能力。常规冷冻保存温度过高，无法有效阻止细胞损伤；冷藏和常温保存会加速细胞代谢和老化，不适合长期保存。19.【参考答案】C【解析】干细胞的自我更新是指干细胞通过不对称分裂，产生一个干细胞和一个分化细胞的过程，保持干细胞群体数量的稳定。这不同于单纯的无限增殖，而是维持干细胞干性特征的分裂方式，是干细胞维持组织稳态的基础。20.【参考答案】A【解析】间充质干细胞最早从骨髓中分离获得，是骨髓基质细胞的重要组成部分。骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能，能分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等中胚层来源的细胞类型，是再生医学研究的重要细胞来源。21.【参考答案】C【解析】细胞培养需要维持生理性的pH环境，人体细胞最适pH值为7.2-7.4，此范围内细胞代谢酶活性最高，细胞形态和功能保持正常。过酸或过碱都会影响细胞膜通透性、酶活性和蛋白质结构。22.【参考答案】C【解析】根据分化潜能从高到低排列：全能干细胞>多能干细胞>专能干细胞。胚胎干细胞来源于早期胚胎，具有发育成完整个体的潜能，可分化为三个胚层的所有细胞类型，分化能力最广泛。23.【参考答案】C【解析】二甲基亚砜（DMSO）是细胞冻存的常用保护剂，能够渗透细胞膜，降低冰点，减少细胞内冰晶形成，防止细胞膜损伤。通常使用浓度为5-10%，配合血清或蛋白质使用效果更佳。24.【参考答案】B【解析】碘化丙啶（PI）是核酸结合染料，能嵌入DNA双螺旋结构，荧光强度与DNA含量成正比，可区分G0/G1、S、G2/M期细胞。台盼蓝用于活死细胞检测，考马斯亮蓝用于蛋白检测。25.【参考答案】A【解析】胰蛋白酶能够消化细胞外基质和细胞间连接蛋白，使贴壁细胞从培养皿表面脱落，适用于大多数贴壁细胞的传代。使用时需用血清终止消化，避免过度消化损伤细胞膜。26.【参考答案】ABCE【解析】培养基的pH值和渗透压直接影响细胞的生理活动；CO2浓度影响培养基pH值；传代频率和密度影响细胞接触抑制和营养状况；环境温度稳定对细胞正常代谢至关重要。27.【参考答案】ABDE【解析】干细胞具有自我更新和多向分化两大基本特性；通过不对称分裂维持干细胞池稳定；具有特定表面标志物用于识别；并非所有干细胞都无限增殖。28.【参考答案】ABCE【解析】冷冻保护剂减少冰晶损伤；程序降温避免细胞内冰晶形成；-196℃液氮温度适于长期保存；合理的细胞密度保证复苏活力。29.【参考答案】ABCE【解析】台盼蓝染色区分死活细胞；MTT法检测细胞代谢活性；流式细胞术可定性定量分析；LDH释放检测细胞膜完整性；直接计数不能区分细胞活力。30.【参考答案】ABCDE【解析】可追溯性确保安全性；无菌检测保证纯度；功能验证维持有效性；条件监控保障稳定性；人员资质确保操作规范性，构成完整质量控制体系。31.【参考答案】ABCE【解析】培养基pH值直接影响细胞代谢，通常维持在7.2-7.4；CO2浓度调节pH值和细胞呼吸；传代频率过低会导致细胞老化，过高影响生长；温度波动影响酶活性。培养皿材质虽有影响，但非主要因素。32.【参考答案】ABE【解析】干细胞核心特征是自我更新和多向分化潜能；需要维持基因组稳定避免突变；并非所有干细胞都无限增殖；形态特征因类型而异，不具特异性。33.【参考答案】ABC【解析】冷冻保护剂防止冰晶损伤；冷冻速率影响细胞存活率，通常1°C/分钟；液氮-196°C提供稳定低温；细胞冻存前需检测活力保证质量；培养基优化属于培养环节。34.【参考答案】ABCDE【解析】细菌污染最常见，产生浑浊；真菌形成菌落；支原体难检测但影响实验；病毒污染具传染性；细胞交叉污染导致细胞系混淆。均需严格无菌操作预防。35.【参考答案】ABCD【解析】台盼蓝区分死活细胞；计数板精确计数；MTT检测细胞代谢活性；流式细胞