2025年大肠菌群试题及答案

2025年大肠菌群试题及答案一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.下列哪一培养基被我国现行《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》（GB4789.32016）第一法（MPN法）规定为“初发酵”培养基？（）A.月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）B.伊红美蓝琼脂（EMB）C.结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）D.煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）答案：A2.在VRBA平板上，典型大肠菌群菌落的直径通常不小于：（）A.0.2mmB.0.3mmC.0.5mmD.1.0mm答案：C3.关于BGLB肉汤产气试验，下列叙述正确的是：（）A.凡产气即判定为大肠菌群阳性B.需48h内产气≥10%杜氏管高度方可判定阳性C.仅需观察颜色变化，无需观察产气D.杜氏管倒置无气泡即可报告阴性答案：B4.采用GB4789.3第二法（平板计数法）检测即食豆制品，若两个连续稀释度平板菌落数分别为85CFU和12CFU，且均满足计数要求，则最终报告值应：（）A.取85CFU报告B.取12CFU报告C.两稀释度菌落数乘以稀释倍数后求平均，再除以接种体积D.两稀释度菌落数乘以稀释倍数后求平均，再乘以稀释倍数答案：C5.下列哪种情况会导致MPN检索表查得结果偏高？（）A.初发酵阳性管数不变，复发酵阳性管数减少B.初发酵阳性管数不变，复发酵阳性管数增加C.初发酵阳性管数减少，复发酵阳性管数不变D.初发酵与复发酵阳性管数均减少答案：B6.若某样品经10⁻¹、10⁻²、10⁻³三个稀释度各接种3管LST，结果分别为320，则MPN检索表值为：（）A.9.3MPN/gB.15MPN/gC.93MPN/gD.150MPN/g答案：A7.关于VRBA培养基质量控制，下列哪项不符合GB4789.28要求？（）A.阳性对照菌为EscherichiacoliATCC25922B.阴性对照菌为EnterococcusfaecalisATCC29212C.倾注平板后无需倒置，可直接叠放D.培养温度为36℃±1℃，时间为18h–24h答案：C8.某实验室对巴氏杀菌乳进行大肠菌群检验，取样量为1mL，初发酵阳性管数为0，则报告单位应为：（）A.＜3MPN/mLB.＜0.3MPN/mLC.0MPN/mLD.＜30MPN/100mL答案：A9.下列哪项不是大肠菌群作为“指示菌”的理论依据？（）A.与肠道致病菌来源相同B.在外界存活时间略长于致病菌C.对消毒因子抵抗力强于芽孢杆菌D.检测方法简便、费用低答案：C10.若某样品经VRBA平板计数，10⁻¹稀释度平均菌落数为65，10⁻²稀释度为7，则样品中大肠菌群数为：（）A.650CFU/gB.700CFU/gC.6500CFU/gD.460CFU/g答案：D解析：按GB4789.3规则，两稀释度菌落数在30–300之间可计算加权平均：(65+7×10)/2×10=460CFU/g。11.关于杜氏管使用，下列操作错误的是：（）A.倒置管中不得有气泡B.灭菌后需检查是否进气C.可重复使用，但需经170℃干热2hD.产气量≥1mm气泡即判定阳性答案：D12.某实验室因停电导致培养箱温度降至30℃并持续6h，对大肠菌群结果的影响最可能是：（）A.假阴性B.假阳性C.无影响D.菌落变小答案：A13.采用MPN法时，若所有稀释度均为333，则应：（）A.报告＞1100MPN/gB.继续提高稀释度重做C.取最高稀释度报告D.报告“过多无法计数”答案：B14.下列哪种成分在LST肉汤中起“抑制革兰阳性菌”作用？（）A.胰蛋白胨B.氯化钠C.月桂基硫酸钠D.乳糖答案：C15.若VRBA平板出现“蔓延生长”导致无法计数，应：（）A.取5个代表菌落做复发酵B.报告“蔓延无法计数”C.用接种环分区划线后再培养D.降低稀释度重做答案：D16.关于大肠菌群定义，我国国家标准规定其“在36℃下培养能发酵乳糖产酸产气的需氧或兼性厌氧革兰阴性无芽孢杆菌”，其中“产酸”判定依据为：（）A.培养基pH降至4.0以下B.溴甲酚紫指示剂变黄C.溴甲酚紫指示剂变紫D.杜氏管出现气泡答案：B17.某即食沙拉样品经VRBA计数，10⁻¹稀释度平均菌落数为320，10⁻²为35，则最终报告值为：（）A.3200CFU/gB.3500CFU/gC.2800CFU/gD.1800CFU/g答案：C解析：320在30–300之外，35在30–300之内，故仅取35×100=3500；但GB要求两稀释度均有效时取加权平均，(320+35×10)/2×10=2800。18.下列哪项不属于大肠菌群平板计数法“证实试验”步骤？（）A.从VRBA挑取10个菌落转种BGLBB.36℃培养24h–48hC.观察产气D.计算阳性率答案：A解析：GB4789.3规定挑取“不少于5个”而非“10个”。19.若BGLB证实试验阳性率为4/5，则平板计数结果应乘以：（）A.0.8B.1.0C.1.25D.无需修正答案：A20.关于冷冻饮品采样，下列说法正确的是：（）A.需待样品自然融化后立即检测B.可于–18℃保存72hC.需45℃水浴快速融化D.融化后超过6h不得检测答案：A21.下列哪项不是VRBA培养基组分？（）A.胆盐B.结晶紫C.中性红D.月桂基硫酸钠答案：D22.若某样品初发酵为210，复发酵为100，则最终MPN为：（）A.6.1MPN/gB.9.3MPN/gC.15MPN/gD.30MPN/g答案：A23.关于“最大可能数”概念，下列描述正确的是：（）A.是绝对数值B.是概率估计值C.与接种体积无关D.与稀释倍数无关答案：B24.某实验室用9管法（10mL、1mL、0.1mL各3管）测定矿泉水，结果分别为300，则MPN/100mL为：（）A.23B.39C.78D.230答案：B25.若VRBA平板菌落颜色为“紫红色周围有沉淀环”，则提示：（）A.典型大肠菌群B.非典型大肠菌群C.革兰阳性菌D.酵母污染答案：A26.下列哪种样品需采用“预enrichment”再测定大肠菌群？（）A.巴氏杀菌乳B.婴幼儿配方奶粉C.饮用纯净水D.新鲜蔬菜答案：B27.关于结果报告，下列哪项符合GB4789.3要求？（）A.平板计数法结果保留两位有效数字B.MPN法结果取整数C.结果以CFU/100mL报告D.结果以科学计数法保留三位答案：A28.若某样品经VRBA计数为1.8×10³CFU/g，证实试验阳性率80%，则最终报告值为：（）A.1.4×10³CFU/gB.1.8×10³CFU/gC.2.2×10³CFU/gD.1.8×10³×0.8答案：B解析：GB规定阳性率≥50%时不修正，直接报告。29.下列哪项操作会导致“假阳性”？（）A.灭菌锅冷空气未排尽B.培养基储存于2℃–8℃超过1周C.取样时酒精火焰灭菌不充分D.杜氏管进气答案：D30.关于实验室内部质量控制，下列哪项频次符合《食品微生物检验质量控制指南》？（）A.每季度进行一次阳性对照B.每批培养基做阴性对照C.每年进行一次人员比对D.每半年进行一次设备校准答案：B二、多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）31.下列哪些属于大肠菌群MPN法“初发酵”产气后必须进行的步骤？（）A.混匀后观察杜氏管气泡B.用接种环转种BGLBC.用接种针穿刺EMBD.36℃培养24h–48hE.记录产气管数答案：A、B、D、E32.关于VRBA平板计数法，下列哪些情况需重做？（）A.平板菌落数＜10B.平板菌落数＞300C.蔓延生长覆盖50%平板D.证实试验阳性率＜10%E.培养时间超过26h答案：B、C、D33.下列哪些因素会影响MPN结果准确性？（）A.接种量误差B.培养基pH漂移C.杜氏管气泡体积D.样品均质时间E.培养箱温度分布答案：A、B、D、E34.关于大肠菌群生化鉴定，下列哪些试验可用于区分克雷伯菌属与埃希菌属？（）A.吲哚试验B.甲基红试验C.VP试验D.枸橼酸盐利用E.氧化酶答案：C、D35.下列哪些样品在GB299212021中被规定“大肠菌群不得检出/25g”？（）A.婴幼儿罐装食品B.即食生制动物性水产品C.巴氏杀菌乳D.熟制坚果E.冷冻饮品答案：A、B36.关于培养基灭菌，下列哪些条件符合GB4789.28？（）A.LST121℃15minB.VRBA121℃15minC.BGLB115℃20minD.EMB100℃30minE.灭菌后于2℃–8℃保存14d答案：A、B、C37.下列哪些操作可降低“假阴性”风险？（）A.均质袋使用无菌滤网B.样品匀浆后调节pH至7.0–7.5C.培养基添加复苏剂（如丙酮酸钠）D.采用双层倾注法E.延长初发酵至48h答案：A、B、C、E38.关于结果单位换算，下列哪些表述正确？（）A.1MPN/100mL=0.01MPN/mLB.450MPN/100g=4.5MPN/gC.3.0×10²CFU/g=300CFU/gD.0.3MPN/g=30MPN/100gE.1CFU/g=1MPN/g答案：A、B、C、D39.下列哪些属于实验室生物安全二级要求？（）A.使用生物安全柜处理样品B.废弃物121℃30min灭菌C.穿戴N95口罩D.实验室门口贴生物危害标识E.安装紫外灯，每日30min空气消毒答案：A、B、D、E40.关于“不确定度”评定，下列哪些分量需计入？（）A.移液器校准误差B.培养基批间差异C.重复性试验标准差D.培养箱温度波动E.人员读数偏差答案：A、B、C、D、E三、判断题（每题1分，共10分。正确请填“√”，错误填“×”）41.大肠菌群MPN法结果只能以整数报告。（）答案：×解析：GB4789.3允许保留两位有效数字，如9.3。42.VRBA平板计数法无需做证实试验即可直接报告。（）答案：×43.若样品为酸性，需用无菌1mol/LNaOH调pH至6.5–7.5后方可检测。（）答案：√44.杜氏管产气≥10%即判定初发酵阳性。（）答案：√45.冷冻饮品可于–18℃保存48h后检测，对结果无影响。（）答案：×解析：GB规定不得超过24h。46.同一批次培养基可做一次阴性对照即可覆盖该批次所有样品。（）答案：√47.若VRBA平板菌落数在30–300之间，但阳性率为0，则报告“＜30CFU/g”。（）答案：×解析：应报告“0CFU/g”或“未检出”。48.MPN法接种量越大，检出限越低。（）答案：√49.采用9管法时，若10mL组3管全部产气，可直接报告＞1100MPN/100mL。（）答案：×解析：需继续稀释。50.实验室可通过参加FAPAS能力验证来评估大肠菌群检测能力。（）答案：√四、填空题（每空1分，共20分）51.我国现行大肠菌群国家标准编号为________，实施日期为________年________月________日。答案：GB4789.32016，2017，6，2352.MPN法初发酵培养基为________肉汤，指示剂为________，产酸后颜色由________变为________。答案：月桂基硫酸盐胰蛋白胨，溴甲酚紫，紫，黄53.VRBA平板典型菌落呈________色，直径不小于________mm，周围有________沉淀。答案：紫红，0.5，胆盐54.平板计数法结果需乘以________率进行修正，若该率低于________%，则结果不可信，需重做。答案：证实，1055.9管法接种量分别为________mL、________mL、________mL，对应稀释度为________、________、________。答案：10，1，0.1，原液，10⁻¹，10⁻²56.若样品为粉末状，需按________比例加入________℃无菌磷酸盐缓冲液，均质时间不少于________s。答案：1:9，45，6057.结果报告时，平板计数法以________位有效数字表示，MPN法以________位有效数字表示。答案：两，两58.实验室应每________月对培养基进行一次批间质量控制，阳性对照菌株为________，阴性对照菌株为________。答案：批，EscherichiacoliATCC25922，EnterococcusfaecalisATCC2921259.若样品经均质后pH为5.2，需用________调节至________，再用________验证pH。答案：1mol/LNaOH，7.0±0.2，pH计60.冷冻饮品采样后若不能及时检测，应于________℃保存，且不得超过________h。答案：2–8，6五、简答题（每题6分，共30分）61.简述MPN法初发酵阳性后，复发酵试验的操作流程及注意事项。答案：（1）用接种环从产气管中取一环培养物，转种于BGLB肉汤管，杜氏管倒置无气泡；（2）36℃±1℃培养24h–48h；（3）观察杜氏管产气，若产气量≥10%为阳性；（4）注意事项：①转种时避免带入LST乳糖，防止延续产气；②若48h仍不产气可判阴性；③每批次需同步做阳性、阴性对照；④记录管数用于查MPN表。62.简述VRBA平板计数法“证实试验”步骤及结果计算方式。答案：（1）从VRBA平板挑取不少于5个典型或可疑菌落，分别转种BGLB；（2）36℃培养24h–48h，记录产气管数；（3）计算阳性率=产气管数/接种管数；（4）结果=平板菌落数×稀释倍数×阳性率；（5）若阳性率＜10%，结果不可信，需重做；（6）最终报告保留两位有效数字。63.列举导致MPN法“假阴性”的5种常见原因，并给出纠正措施。答案：（1）样品含抑菌物质→稀释或中和剂处理；（2）pH过低→调pH至7.0–7.5；（3）培养基失效→每批做阳性对照；（4）杜氏管进气→灭菌后检查；（5）培养温度偏低→校准培养箱，每日记录。64.说明“不确定度”在大肠菌群检测中的意义，并给出评定步骤。答案：意义：量化结果可信区间，满足ISO/IEC17025要求。步骤：（1）识别分量：取样、稀释、培养、读数；（2）A类评定：重复试验得标准差；（3）B类评定：移液器、培养基、温度误差；（4）合成标准不确定度；（5）乘以包含因子k=2得扩展不确定度；（6）报告结果：如（460±92）CFU/g。65.某实验室对即食熟肉制品进行