高考生物一轮总复习-实验技能-实验总攻略

实验总攻略攻略实验中常用器材和药品的作用1.常用器材和药品的作用器材或药品作用滤纸过滤或纸层析纱布或尼龙布过滤(DNA的提取)NaOH用于吸收CO2或改变溶液的pHCa(OH)2(澄清石灰水)鉴定CO2(变浑浊)溴麝香草酚蓝水溶液鉴定CO2(由蓝变绿再变黄)HCl解离或改变溶液的pHNaHCO3提供CO2NaCl配制生理盐水(0.9%)及其他不同浓度的盐溶液，可用于动物细胞观察或用于提取DNA器材或药品作用酒精用于消毒处理，提纯DNA，叶片脱色或配制解离液重铬酸钾酸性条件下，鉴定酒精(由橙色变灰绿色)无水乙醇提取叶绿体中的色素二氧化硅使绿色叶片研磨充分碳酸钙防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏秋水仙素抑制纺锤体的形成龙胆紫溶液或

醋酸洋红液染色体染色健那绿线粒体染色(呈蓝绿色)斐林试剂鉴定可溶性还原糖(加热呈砖红色)碘液鉴定淀粉(呈蓝色)（续表）器材或药品作用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ鉴定脂肪(呈橘黄色或红色)双缩脲试剂鉴定蛋白质(呈紫色)二苯胺试剂鉴定DNA(加热呈蓝色)甲基绿、吡罗红染色DNA(呈绿色)、RNA(呈红色)蔗糖配制蔗糖溶液，用于测定植物细胞的细胞液浓度或观察质壁分离实验

硝酸钾溶液(0.05g·mL－1)观察质壁分离和自动复原柠檬酸钠血液抗凝剂亚甲基蓝用于活体染色或检测污水中的需氧型细菌CaCl2增强细菌细胞壁的通透性胰蛋白酶分解蛋白质，使组织细胞分散（续表）实验名称作用

观察DNA和RNA在细胞中

的分布①改变膜的通透性，加速染色剂进入细胞②使染色质中的DNA与蛋白质分离，有助于DNA与染色剂结合观察根尖细胞有丝分裂，低温诱

导染色体加倍质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按1∶1混合成解离液，使组织中的细胞相互分离开来2.盐酸在生物实验中的作用浓度作用实验50%酒精脂肪鉴定中洗去多余浮色检测生物组织中的脂肪75%酒精用于杀菌消毒微生物的实验室培养

无水乙醇(或95%酒精)提取叶绿体中的色素绿叶中光合色素的提取与分离95%酒精与浓盐酸(质量分数15%)按1∶1混合成解离液，使组织中的细胞相互分离开来观察根尖细胞有丝分裂，低温诱导植物染色体数目的变化95%酒精脱色鉴定光合作用产物——淀粉3.酒精在生物实验中的作用颜色有关实验红①还原糖＋斐林试剂(水浴加热)→砖红色沉淀②脂肪＋苏丹Ⅳ染液→红色③RNA＋吡罗红溶液→红色④叶绿素a和叶绿素b→主要吸收红光和蓝紫光黄①脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色②胡萝卜素→橙黄色，叶黄素→黄色③CO2＋溴麝香草酚蓝水溶液→由蓝变绿再变黄与颜色有关的实验颜色有关实验绿①DNA＋甲基绿溶液→绿色②线粒体＋健那绿染液→蓝绿色③酒精＋橙色的重铬酸钾溶液(在酸性条件下)→灰绿色④叶绿素a→蓝绿色，叶绿素b→黄绿色蓝淀粉＋碘液→蓝色紫①染色体(质)＋龙胆紫溶液→紫色②蛋白质＋双缩脲试剂→紫色③类胡萝卜素→主要吸收蓝紫光（续表）[典例](2014年四川卷)下列有关实验方法或检测试剂的叙述，正确的是()

A．用改良苯酚品红染色观察低温诱导的植物染色体数目变化 B．用健那绿和吡罗红染色观察DNA和RNA在细胞中的分布 C．用纸层析法提取菠菜绿叶中的色素和鉴定胡萝卜素提取粗品 D．用标志重捕法调查田鼠种群密度及农田土壤小动物的丰富度

[解析]改良苯酚品红染液是对染色体进行染色的优良试剂。健那绿染液是对活细胞中线粒体进行染色的专一性染料。观察DNA和RNA在细胞中的分布用甲基绿和吡罗红染色。纸层析法是对叶绿体中色素进行分离的方法。标志重捕法是用来调查活动能力较强，活动范围较大的动物种群密度的方法，土壤小动物丰富度的调查用取样器取样法。[答案]A选项实验目的试剂预期的实验结果A观察根尖分生组织细胞的有丝分裂醋酸洋红染色体被染成紫红色B检测植物组织中的脂肪双缩脲试剂脂肪颗粒被染成红色C检测植物组织中的葡萄糖甲基绿葡萄糖与甲基绿作用，生成绿色沉淀D观察DNA和RNA在细胞中的分布斐林试剂、

吡罗红斐林试剂将DNA染成绿色，吡罗红将RNA染成红色►攻略对应练1．下表是根据实验目的所需选用的试剂与预期的实验结果，正确的是()

解析：脂肪用苏丹Ⅲ反应呈橘黄色，与苏丹Ⅳ反应呈红色；蛋白质与双缩脲试剂发生显色反应呈紫色；葡萄糖属于还原性糖，与斐林试剂在加热条件下反应生成砖红色沉淀；DNA与甲基绿发生显色反应呈绿色，RNA与吡罗红发生显色反应呈红色。答案：A2．(2017年河北武邑期末)下列有关实验操作的叙述中，正确的是()

A．用双缩脲试剂对苹果匀浆进行检测，可出现紫色反应 B．进行酵母菌计数时，将培养液滴于计数室，然后盖上盖玻片 C．观察细胞中的线粒体，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干后再染色 D．制作生态缸时，放置的植物和动物的种类及数量越多生态缸越稳定

解析：苹果匀浆中含有蛋白质，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应，A正确；利用血细胞计数板进行酵母菌计数时，应先放置盖玻片，在盖玻片的边缘滴加培养液，待培养液从边缘处自行渗入计数室，吸去多余培养液，再进行计数，B错误；观察细胞中的线粒体，要求细胞保持其生物活性，因此不能将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干，C错误；制作生态缸时，因生物生存的空间有限，要使该人工微生态系统正常运转，在设计时，要考虑系统内的各种生物之间应有营养上的联系，而且种类和数量搭配应合理，而不是放置的植物和动物的种类及数量越多生态缸越稳定，D错误。答案：A3．(2015年天津二模)下列试剂在两个实验中的作用相同的是()

A．盐酸在“观察植物细胞有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目的变化”中的作用

B．酒精在“土壤中小动物类群丰富度的研究”和“检测生物组织中的脂肪”中的作用

C．CuSO4

在“检测生物组织中的还原糖”和“检测生物组织中的蛋白质”中的作用

D．蒸馏水在“提取纯净的动物细胞膜”和“探索生长素类似物促进插条生根的最适浓度”中的作用白质”的实验中用于提供Cu2+；蒸馏水在“提取纯净的动物细

解析：盐酸在“观察植物细胞有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目的变化”两个实验中均用于配制解离液，使组织细胞分离开；在“土壤中小动物类群丰富度的研究”实验中70%的酒精用作防腐剂，而在“检测生物组织中的脂肪”实验中50%的酒精用于洗去浮色；CuSO4

在“检测生物组织中的还原糖”实验中用于配制斐林试剂，而在“检测生物组织中的蛋胞膜”实验中用于使细胞吸水涨破，在“探索生长素类似物促进插条生根的最适浓度”的实验中用于调节生长素类似物的浓度。答案：A原则实例避免实验现象

受干扰当用染色剂染色或有颜色反应的实验，一般选择的材料颜色浅或无色，以免因材料颜色影响显色或影响观察，如还原糖的鉴定要选用无色材料等材料来源广泛

及处理方便如鸡血来源广泛，用来提取DNA时，可用渗透原理使红细胞破裂材料的选择与处理方法

攻略1．材料的选择临时装片将材料在载玻片水滴中展平→放盖玻片时应倾斜一定角度，一侧先接触水滴，再轻轻盖上，防止气泡产生→对材料染色或改变溶液浓度→观察。如“观察植物细胞的质壁分离和复原”等研磨、过滤适用于从生物组织中提取物质如酶、色素等，研磨时要先将生物材料切碎，然后加入二氧化硅(使研磨更充分)、提取液及其他必要物质，充分研磨之后，通常要进行过滤，以除去渣滓，常用的过滤器有滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等恒温一般用水浴或恒温箱2.材料的处理方法纸层析包括制备滤纸条、画滤液细线、层析分离植物叶片生成

淀粉的鉴定包括植物的饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘细胞破裂动物细胞可用蒸馏水涨破、搅拌、研磨等方法，植物细胞常用研磨细胞分散解离液、压片(观察根尖有丝分裂)、酶解法(胰蛋白酶处理动物细胞)离心将材料分层，以便于观察或提取（续表)[典例](2014年山东卷)下列有关实验操作的描述，正确的是()

A．鉴定待测样液中的蛋白质时，先加NaOH溶液，振荡后再加CuSO4溶液 B．制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色 C．低温诱导染色体加倍实验中，将大蒜根尖制成装片后再进行低温处理 D．探究温度对酶活性的影响时，将酶与底物溶液在室温下混合后于不同温度下保温

[解析]鉴定蛋白质的试剂为双缩脲试剂，该试剂使用时应先加NaOH溶液，再加CuSO4

溶液，A正确；制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片的正确顺序是解离→漂洗→染色→制片，B错误；低温诱导染色体加倍实验中，应首先对大蒜根尖低温处理，诱导分生区细胞染色体加倍，再制作装片，C错误；探究温度对酶活性的影响时，不同组的酶和底物混合前应先保温到实验温度，若在室温下混合后再在不同温度下保温，则达到实验温度时，反应可能已发生，D错误。[答案]A►攻略对应练4．(2017年河北辛集模拟)关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定实验，下列叙述正确的是()

A．还原糖、DNA的鉴定通常分别使用双缩脲试剂，二苯胺试剂 B．鉴定还原糖、蛋白质和DNA都需要进行水浴加热 C．二苯胺试剂和用于配制斐林试剂的NaOH溶液都呈无色 D．脂肪、蛋白质鉴定时分别可见橘黄色颗粒、砖红色沉淀

解析：还原糖鉴定试剂是斐林试剂，DNA鉴定试剂是二苯胺试剂，A错误；鉴定还原糖和DNA需进行水浴加热，蛋白质鉴定不需进行水浴加热，B错误；二苯胺试剂和用于配制斐林试剂的NaOH溶液都呈无色，C正确；脂肪鉴定时可见橘黄色(或红色)颗粒，蛋白质鉴定时呈紫色，D错误。答案：C5．某校生物兴趣小组进行了生物组织中还原糖检测的实验(如下图)，下列叙述正确的是()A．在实验材料选择方面，用苹果比用植物叶片的效果要好B．在制备生物组织样液时，加入石英砂的主要目的是促进还原糖的溶解C．用于该实验检测的斐林试剂也可用于检测蛋白质，只是添加试剂的顺序不同

D．由于斐林试剂不稳定，在使用斐林试剂时要先加0.1g/mL的NaOH溶液，后加入0.05g/mL的CuSO4

溶液

解析：苹果果肉的颜色比植物叶片的浅，且含大量还原糖，所以在检测还原糖的实验材料选择方面，用苹果比用植物叶片的效果要好；在制备生物组织样液时，加入石英砂的主要目的是使研磨充分；斐林试剂和双缩脲试剂中NaOH和CuSO4

的添加顺序不同，且两种试剂使用的CuSO4

溶液的浓度也不同；在使用斐林试剂时应将等量NaOH和CuSO4

溶液混匀后加到组织样液中。

答案：A6．下列有关实验材料与方法的叙述，恰当的是()

A．用标志重捕法调查土壤小动物的丰富度 B．以人成熟的红细胞为材料提取DNA C．用低温处理洋葱根尖，观察染色体变异 D．以洋葱鳞片叶为材料观察叶绿体

解析：调查土壤小动物的丰富度用取样器取样法；人成熟的红细胞没有细胞核，不能作为提取DNA的材料；根尖分生区细胞分裂旺盛，在低温下可诱导其染色体数目变异；洋葱鳞片叶没有叶绿体。

答案：C攻略实验的基本原则

1．变量与单一变量原则 (1)变量的种类：实验变量(自变量)、反应变量(因变量)、无关变量(控制变量)、额外变量(干扰变量)。 (2)处理变量的目的及关键：目的在于操纵自变量，获得因变量；关键在于控制无关变量，减少干扰变量。 (3)单一变量原则：①确保“单一变量”的实验观测，即不论有几个实验变量，都应做到一个实验变量对应观测一个反应变量；②确保“单一变量”的操作规范，即实验中尽可能避免无关变量的干扰。2．对照与实验对照原则

(1)对照：对照组通常指在自然状态下或已知影响因素所造成的结果的一组实验；而实验组通常指某种自变量的改变对实验结果的影响未知，需要人为探索的一组实验。对照组能帮助人们排除无关变量所造成的实验误差，与实验组对照有助于得出真实可信的结果或结论。(2)实验对照

①空白对照：设置两组实验，其中施加实验变量(要研究的因素)处理的为实验组，常态或未施加实验变量处理的为对照组。自变量为实验变量的有无。一般验证性实验采取空白对照。

②相互对照：设置三组以上的实验，每一组既作为实验组，同时又是其他组的对照。自变量为实验变量的不同量度(或类别)。一般探究“××最适(佳)条件”的实验采用相互对照。 ③自身对照：实验组、对照组在同一实验对象上进行，即实验处理前的为对照组，处理后的为实验组，自变量为实验变量的处理与否，如“植物细胞质壁分离与复原”实验。 ④条件对照：增设了与实验变量无关的一组实验。常结合空白对照进行，具有反证或加强作用。3．等量原则：对照实验设置的正确与否，关键就在于如何尽量去保证“其他条件的完全相等”。

[典例]为验证甲状腺激素能促进蝌蚪发育，将27只同种、同时孵化且大小相同的蝌蚪，随机均分为3组，饲养的水、饲料和温度等培养条件相同且适宜。甲组加入甲状腺激素，乙组加入甲状腺激素抑制剂，丙组不加入药剂。饲养一段时间后，观察其生长情况。 (1)请根据实验“单一变量”原则回答下列问题。①本实验中同种蝌蚪和相同饲养条件属于()②甲组加入的甲状腺激素是()③甲组的变化和结果是()A．自变量B．因变量C．额外变量D．无关变量(2)本实验的关键步骤是(A．定时喂食C．定时观察

)B．定时换水D．用药量合理

(3)实验中选取同种、同时孵化的大小相同的蝌蚪来做实验，其目的是_________________________________________。

[解析]单一变量原则：控制其他因素不变，只改变其中一个因素(要研究的因素)，观察其对实验结果的影响。遵循单一变量原则，对实验结果进行科学的分析，增强实验结果的可信度与说服力。自变量是指实验中要研究和控制的因素或条件。因变量是指实验中由于实验变量而引起的变化和结果。无关变量是指实验中除实验变量以外的影响实验现象或结果的因素或条件。[答案](1)①D②A③B(2)D(3)排除无关变量对实验结果的影响►攻略对应练7．下列有关实验设计的叙述中，正确的有()①实验材料的数量、温度和时间都可能是实验的变量②各种实验中都必须设置空白对照组，确保单一变量③数据测④探究实验设计量应力求精确，因而需要多次测量求平均值中，实验结果可能与提出的假设不一致A．一项B．两项C．三项D．四项

解析：①③④三项是正确的；对照有多种，有些实验可以是自身对照。

答案：C8．(2015年湖南长沙二模)下列对有关实验中变量的叙述，正确的是()

A．在探究温度对酶活性影响的实验中，温度和pH是自变量 B．在模拟探究细胞大小与物质运输关系的实验中，正方体琼脂块的体积是无关变量 C．在探究植物生长调节剂对扦插枝条生根作用的实验中，插条生根数是因变量 D．在探究酵母菌呼吸方式的实验中，酒精是无关变量

解析：在探究温度对酶活性影响的实验中，温度是自变量，pH是无关变量，A错误；在模拟探究细胞大小与物质运输关系的实验中，正方体琼脂块的体积模拟的是细胞大小，属于自变量，B错误；在探究植物生长调节剂对扦插枝条生根作用的实验中，插条生根数是因变量，C正确；在探究酵母菌呼吸方式的实验中，可根据是否产生酒精判断呼吸方式，因此酒精是因变量，D错误。答案：C攻略高中生物实验分类

分类一、观察类(使用光学显微镜) 1．显微镜的相关知识

(1)观察：高倍镜使用要诀——先低后高，找移转调。

低找：先在低倍镜下找到图像，并调节至清晰。移：将观察对象移到视野中央。

高转：转动转换器，换上高倍镜。调：调节细准焦螺旋及光圈，使图像清晰。(2)放大倍数与镜头长度及细胞数目的关系归纳①物像放大倍数＝目镜的放大倍数×物镜的放大倍数。②目镜越短，放大倍数越大；物镜越短，放大倍数越小，与玻片距离越远。

③低倍镜下的视野中，细胞数多、细胞体积小、视野明亮；高倍镜下的视野中，细胞数少、细胞体积大、视野较暗。④放大倍数的变化与视野中细胞数量变化的关系第一种情况：一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野成反比的规律计算。

第二种情况：圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。(3)视野中污点的位置判断污点的位置只有三种可能——在载玻片的标本上、在目镜上、在物镜上。判断方法如下①移动玻片：污点随载玻片的移动而移动，则其位于载玻片的标本上。②换目镜：污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则其位于目镜上。③换物镜：污点不随载玻片移动，换目镜后不消失，但换物镜后消失，则其位于物镜上。实验名称实验材料染色实验一般程序用显微镜观察多种多样的细胞口腔上皮细胞等碘液染口腔上皮细胞取材→(染色→)制片→显微镜观察→结论观察DNA和RNA在细胞中的分布口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶内表皮细胞等甲基绿使DNA呈绿色，

吡罗红使RNA呈红色观察线粒体和叶绿体口腔上皮细胞(线粒体)，藓类叶、黑藻叶(叶绿体)等1%健那绿使线粒体呈蓝绿色，叶绿体不需要染色观察植物细胞的质壁分离和复原紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞(液泡颜色深)不需要染色观察细胞的有丝分裂和减数分裂洋葱根尖细胞(有丝分裂)、蝗虫精母细胞(减数分裂)龙胆紫溶液(紫色)或醋酸洋红液(红色)生物组织中脂肪的鉴定花生种子苏丹Ⅲ(橘黄色)或苏丹Ⅳ(红色)低温诱导染色体加倍洋葱根尖细胞改良苯酚品红染液2．实验归类3.观察类实验操作流程模板

[典例](2014年江苏卷)在“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验中，对紫色洋葱鳞片叶外表皮临时装片进行了三次观察(如下图所示)。下列有关叙述正确的是()

A．第一次观察时容易看到紫色大液泡和较大的无色细胞质基质区域 B．第二次观察时可以发现细胞质壁分离首先发生在细胞的角隅处C．吸水纸的主要作用是吸除滴管滴加的多余液体，以免污染镜头

D．为了节约实验时间，通常可以省略第一次显微观察步骤

[解析]第一次观察时由于未滴入蔗糖溶液，细胞还没有发生质壁分离，只能看到紫色大液泡；第二次观察时滴入少量的蔗糖溶液，细胞开始发生质壁分离，可以发现细胞质壁分离首先发生在细胞的角隅处；吸水纸的主要作用是吸引蔗糖溶液从盖玻片的一侧流到另一侧，使全部洋葱鳞片叶浸润在蔗糖溶液中；第一次显微镜观察是为了获得实验前的现象，以便于与实验中的现象变化作对比，因此不可省略。[答案]B►攻略对应练9．(2014年山东卷改编)下列有关实验操作的描述，正确的是()

A．鉴定待测样液中的蛋白质时，先加NaOH溶液，振荡后再加CuSO4溶液 B．制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后直接用龙胆紫溶液染色 C．在光镜的高倍镜下观察新鲜菠菜叶装片，可见叶绿体的结构 D．探究温度对酶活性的影响时，将酶与底物溶液在室温下混合后于不同温度下保温

解析：制作细胞的有丝分裂装片时，洋葱根尖解离后应先进行漂洗，然后再进行染色。光学显微镜下只能观察到叶绿体的形状，不能看到其结构。探究温度对酶活性的影响时，应先将酶与底物分别于不同温度下保温一段时间再混合，如果先在室温下混合，会导致酶与底物发生反应，使温度梯度的设置失去意义。

答案：A10．(2015年广东湛江调研改编)下列说法正确的是()

A．观察细胞的质壁分离及复原，所用的最佳材料是洋葱鳞片叶的内表皮 B．观察DNA和RNA在细胞中的分布，常用的理想材料是洋葱鳞片叶的外表皮 C．观察植物细胞的有丝分裂，观察部位应是洋葱的根尖分生区 D．观察低温诱导植物染色体数目的变化，观察部位应是洋葱的鳞片叶外表皮

答案：C11．(2015年安徽卷)下图是某同学在观察洋葱根尖细胞有丝分裂时拍摄的显微照片。下列叙述正确的是()A．甲细胞中每条染色体的着丝点排列在细胞板上B．乙细胞中染色体被平均分配，移向细胞两极C．甲和乙细胞中的染色体数目相等，DNA含量相同D．统计图中处于分裂期的细胞数可计算细胞周期的长短

解析：根据图示可知：甲细胞处于有丝分裂中期，乙细胞处于有丝分裂后期。甲细胞的每条染色体的着丝点排列在赤道板而不是细胞板上，A错误；乙细胞中的染色体被平均分配，移向细胞的两极，B正确；乙细胞中的染色体是甲细胞中的2倍，DNA含量相同，C错误；细胞周期包括分裂间期和分裂期，统计图中处于分裂期的细胞数不可计算细胞周期的长短，只可计算分裂期所用时间在细胞周期中的比例，D错误。答案：B实验名称鉴定对象试剂颜色生物材料备注淀粉的

鉴定淀粉碘液蓝色脱色的

叶片—还原糖的鉴定还原糖斐林试剂砖红色

沉淀苹果或梨的匀浆等甲乙液现混现用、水浴加热脂肪的

鉴定脂肪苏丹Ⅲ (或Ⅳ)

染液橘黄(或

红)色花生种子切片需用高倍

镜观察蛋白质的鉴定蛋白质双缩脲

试剂紫色豆浆、稀

蛋清等先加A液，后加B液，

摇匀后使用分类二、鉴别类1．实验归类实验名称鉴定对象试剂颜色生物材料备注尿糖的

检测葡萄糖葡萄糖

试纸有色水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”—叶绿体中色素的提取和分离四种色素提取液：无水乙醇分离液：层析液胡萝卜素：橙黄色，叶黄素：黄色，叶绿素a：蓝绿色，叶绿素b：黄绿色新鲜的绿叶(如菠菜叶)加入二氧化硅是为了研磨得更充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏（续表）2.鉴定类实验的操作流程模板[典例]还原糖、脂肪、蛋白质和DNA四种有机物的鉴定实验中，选材或操作错误的是()

A．用斐林试剂检测苹果浆中的还原糖 B．向花生种子匀浆中滴加苏丹Ⅲ染液检测脂肪 C．双缩脲试剂A液与B液先混合摇匀后检测豆浆中的蛋白质 D．提取含DNA的滤液可用香蕉加入一定的洗涤剂和食盐进行研磨

[解析]苹果颜色接近白色，可以用于还原糖的鉴定材料；用花生种子匀浆检测脂肪可向匀浆中滴加苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液；用双缩脲剂检测蛋白质时先滴加A液再滴加B液；提取含DNA的滤液可用香蕉加入一定的洗涤剂和食盐进行研磨。[答案]C►攻略对应练12．下列关于生物研究中常用的方法，错误的是()

A．脂肪鉴定时，用苏丹Ⅲ染液处理后，用清水洗去浮色后观察 B．研究细胞器结构和种类，可采用差速离心法和显微镜观察法 C．研究光合作用过程中碳元素的传递，可采用14C标记示踪法 D．样方法调查蒲公英种群密度时最好随机取样

解析：脂肪鉴定时，用苏丹Ⅲ染液处理后，用50%的酒精洗去浮色后观察。

答案：A13．下面有关生物实验中实验原理、方法或结果的叙述中，正确的是()

A．西瓜汁中含有丰富的葡萄糖和果糖，可用作还原糖鉴定的替代材料 B．油脂鉴定时，可观察到在细胞中已被苏丹Ⅳ染液染成橘黄色的圆形小颗粒 C．双缩脲试剂B液为0.01g/mLCuSO4

溶液 D．鉴定还原糖时，要先加入斐林试剂，摇匀后再沸水浴

解析：西瓜细胞的液泡中含有色素，不适合用作还原糖鉴定的实验材料；油脂被苏丹Ⅳ染液染成红色；鉴定还原糖实验时，加入斐林试剂后，应将试管放入盛有50℃～65℃温水的大烧杯中水浴加热2min。答案：C

14．研究人员从一种野生植物的贮藏根中提取出一种化学物质，有人认为是一种能促使葡萄糖分解的酶，有人认为是一种能促使蔗糖分解的酶。对此，研究人员设计并做了一些相关实验。(1)要鉴定此物质的化学本质是蛋白质还是RNA，可分别选用________试剂和________染液。

(2)要确定此物质是催化葡萄糖分解的酶还是催化蔗糖分解的酶，研究人员设计了如上图所示的实验过程，请分析可能的实验结果。在水浴加热后，若两支试管均出现砖红色沉淀，说明________________________________，若两支试管均不出现砖红色沉淀，则说明_____________________________。 (3)若以上实验完成后，已经确定其为催化葡萄糖分解的酶，化学本质是蛋白质，需要确定其催化作用的最适温度，设计实验的基本思路是先确定____________，再参照上图中甲试管的处理方法进行实验。实验结束后，再选择其中砖红色沉淀最少的两支试管所对应的温度，设置________________，重复进行实验。答案：(1)双缩脲吡罗红该物质是能催化葡萄

(2)该物质是能催化蔗糖分解的酶糖分解的酶(3)系列等温度梯度更小的温度梯度课题调查对象统计方法计算公式(方法)调查人群中

的遗传病遗传病发病率在普通人群中统计

发病率＝

患病人数 ×100%被调查人数遗传病遗

传方式在患者家系中调查绘制、分析遗传系谱图分类三、调查类1．调查类实验课题调查对象统计方法计算公式(方法)种群密度的

取样调查动物(活动

能力强)标志重

捕法初次捕获个体数

＝

总数(N)重捕中标记个体数

重捕个体数植物或活动能力弱

的动物样方法

所取各样方的种群密度平均值土壤中小动物类群丰富

度的研究土壤中的

小动物取样器取样法记名计算法、目测估计法（续表）2.调查类实验一般操作流程模板[典例](2012年海南卷)某小组用样方法调查草地中某种双子叶植物的种群密度。下列做法错误的是()

A．随机取样 B．选择植物生长茂盛处取样 C．根据调查数据估算该种群密度 D．根据地段的形状确定取样方法

[解析]用样方法进行调查一定要随机取样，A

正确、B错误；根据调查数据取平均数可估算该种群的种群密度，C正确；根据地段的不同可因地制宜采用不同的取样方法，如五点取样法和等距取样法等，D正确。

[答案]B项目捕获数/只标记数/只雌性个体数雄性个体数初捕50502822重捕50103218►攻略对应练

15．某研究机构对某区域的一种田鼠进行了调查，所调查样方的总面积为2hm2(1hm2＝10000m2)。统计所捕获的鼠数量、性别等，进行标记后放归；3日后进行重捕与调查。所得到的调查数据如下表：以下是某同学对数据的分析结果，你认为正确的是()

A．此调查方法可以用来调查土壤中小动物物种的丰富度 B．田鼠在被捕捉过一次后更难捕捉，统计的种群密度比实际低 C．综合两次捕获情况，该田鼠种群的性别比例(♀/)约为7∶2 D．该地区田鼠的平均种群密度约为125只/hm2

答案：D♂选项实验名称相关内容A调查人群中遗传病的遗传方式最好选择群体中发病率较高的单基因遗传病B调查植物的种群密度随机选取相同大小的样方，统计种群密度平均值C设计并制作小生态瓶将少量多种生物放入密闭的广口瓶中，一定要在直射、强光下D土壤动物类群丰富度的调查取样时尽量不要破坏环境，操作时注意安全16.下列有关实验的内容，错误的一组是()

解析：在制作小生态瓶时，将少量多种生物放入密闭的广口瓶中，并将其置于较强的散射光条件下培养。

答案：C分类四、探究类(对照型实验)1．生物实验中的变量(1)变量的种类

①实验变量(自变量)与反应变量(因变量)。实验变量是指实验中由实验者操纵的因素或条件，而反应变量是指由实验变量引起的变化结果，二者之间是前因后果的关系。实验的目的就在于获得和解释前因与后果。

②无关变量与额外变量。无关变量是指实验中除实验变量外的影响实验结果与现象的因素或条件，由无关变量引起的变化结果就叫额外变量。它们之间也是前因后果的关系，但对实验变量与反应变量的获得起干扰作用。(2)变量的控制

控制变量法是指控制其他因素不变，集中研究其中一个因素的变化，保证实验不受干扰或将干扰因素降低到最低程度。通过实验控制，尽量减小实验误差，以取得较为精确的实验结果。 ①操纵实验变量的方法：设法给研究对象施加干扰，造成研究对象的变化，从而使研究对象在被干扰状态中反映出某种现象和属性。

②检测反应变量的方法：根据实验原理和实验条件确定观察、测量的指标和方法。具体包括观察特异性的颜色变化、沉淀反应；观察形态结构、生理变化；测量生长发育速度；测量生化反应速度等。

③控制无关变量的方法(平衡控制)：排除因实验对象的个体差异带来的影响；设法创造稳定的相同的条件进行对照，以抵消或排除这些因素对实验对象的干扰；设法提供适宜条件，以排除不利环境条件对实验对象的影响；重复实验，排除偶然因素的干扰，减小实验误差。

不论一个实验有几个实验变量，都应确定一个实验变量，观测一个反应变量，这就是单一变量原则，它是处理实验中的复杂关系的准则之一。2．相关变量实验名称自变量因变量控制无关变量实验一般程序比较过氧化氢酶和Fe3＋的催化效率催化剂的种类(过氧化氢酶和Fe3＋)催化效率的高低(用点燃但无火焰的卫生香燃烧的猛烈程度或气泡产生的速度表示)试管等用具的洁净度、环境温度、相同材料的量、各种试剂的量、反应时间等分组编号→设置对照→条件处理→观察比较→得出结论实验名称自变量因变量控制无关变

量实验一般程序探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用反应物的种类(淀粉和蔗糖)淀粉酶能将淀粉水解(处理后加斐林试剂，水浴加热出现砖红色沉淀)，但不能水解蔗糖(处理后加斐林试剂并水浴加热，无砖红色沉淀出现)淀粉与蔗糖溶液的量、水浴的温度与处理时间、斐林试剂的使用量与加热时间、操作程序等分组编号→设置对照→条件处理→观察比较→

得出结论（续表）实验名称自变量因变量控制无关变量实验一般程序pH对(淀粉)酶活性的影响不同pH

的溶液加碘液后溶液颜色的变化试管的洁净度、淀粉溶液的量、不同pH的处理时间、操作程序、碘液的加入量等分组编号→设置对照→条件处理→观察比较→

得出结论温度对(淀粉)酶活性的影响温度(60℃热水、沸水、冰块)加碘液后溶液颜色的变化试管的洁净度、淀粉溶液的量、不同温度的处理时间、操作的程序、碘液的加入量等（续表）实验名称自变量因变量控制无关变量实验一般程序植物向性运动的实验设计和观察①向光性：是否有单侧光照(黑暗、单侧光照、均匀光照)②向地性：幼苗的不同空间位置①幼苗的弯曲状况②根的弯曲方向①幼苗的种类及生长状况、环境温度、培养条件、露出的部位、装置的合理性等②萌发种子的种类及萌发状况、环境温度、培养条件等分组编号→设置对照→条件处理→观察比较→

得出结论（续表）实验名称自变量因变量控制无关变量实验一般程序探究生长素类似物对植物生长发育的影响不同浓度的生长素或生长素类似物①扦插枝条的生根状况②果实发育的状况实验材料的选择、处理时间等分组编号→设置对照→条件处理→观察比较→

得出结论低温诱导染色体加倍常温与低温染色体的数目低温处理时间、材料的选择、操作程序等（续表）3.实验条件的控制方法(1)增加水中氧气：泵入空气、吹气或放入绿色植物。(2)减少水中氧气：容器密封、油膜覆盖或用凉开水。(3)除去容器中CO2：NaOH溶液或KOH溶液。(4)除去叶片中原有淀粉：置于黑暗环境一昼夜。(5)除去叶片中叶绿素：酒精，水浴加热。(6)除去光合作用对呼吸作用的干扰：给植株遮光。(7)得到单色光：棱镜色散或彩色薄膜滤光。(8)防止血液凝固：加入柠檬酸钠。(9)各种细胞器的提取：细胞匀浆离心。4．实验结果的表示方法(1)光合速率：O2

释放量、CO2吸收量或淀粉产生量。(2)呼吸速率：O2

吸收量、CO2释放量或淀粉减少量。(3)原子转移途径：放射性同位素示踪法。(4)细胞液浓度大小：质壁分离。(5)细胞是否死亡：质壁分离、亚甲基蓝溶液染色。(6)甲状腺激素的作用：动物耗氧量、发育速度等。(7)生长激素的作用：生长速度(体重变化、身高变化)。(8)胰岛素的作用：动物活动状态。[典例]下列关于生物实验的说法，不正确的是()

A．在探究影响酶活性的因素时，温度、酸碱度、使用试剂的量等都是自变量 B．探究酵母菌种群数量变化时，不需再设置对照组 C．用斐林试剂模拟尿糖检测时，应该设计正常人尿液的对照实验 D．换高倍镜后，不能调节粗准焦螺旋

[解析]在探究影响酶活性的因素时，只有一个自变量，如探究温度对酶活性影响时，温度是自