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文档简介
研考点·重点难点探究悟高考·真题演练固考基·双基体系优化目录ONTENTSC课时作业第十二单元生物技术实践第1讲微生物的培养与应用固考基·双基体系优化研考点·重点难点探究考点研析营养要素来源功能碳源无机碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物①构成细胞物质和一些代谢产物②既是碳源又是能源(有机碳源)有机碳源糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等营养要素来源功能氮源无机氮源无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等合成含氮的代谢产物有机氮源牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物生长因子维生素、氨基酸、碱基①酶和核酸的组成成分②参与代谢过程中的酶促反应培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定,_________,菌种保藏半固体培养基观察微生物的运动、_____、鉴定活菌计数分类种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些_________依据某些微生物对某些物质的_________或抗性而设计从众多微生物中____所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种_______或化学药品产生特定的_____或其他变化_____不同种类的微生物用伊红—美蓝培养基鉴别大肠杆菌化学物质特殊需求分离指示剂颜色鉴别条件结果常用方法应用范围消毒较为_____的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体
的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦拭双手,用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的______,包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器温和有害微生物比较项目
平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面
划线①一系列的__________;②涂布平板法操作注意事项每次划线前后均需_____接种环______要足够高,为确保实验成功可以增加稀释度菌体获取在具有显著的__________的菌落中挑取菌体从适宜稀释度的____上的菌落中挑取菌体优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落,又能对微生物计数缺点不能对微生物计数操作复杂,需要涂布多个平板连续梯度稀释灼烧稀释度菌落特征平板第一次操作每次划线之间划线结束目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,使每次划线菌种数目减少杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者针对训练考点研析比较项目土壤中分解尿素的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离方法利用以
为唯一氮源的选择培养基进行选择培养利用富含
的选择培养基进行选择培养原理只有分解尿素的细菌能够合成
,才能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长因为培养基中含有丰富的纤维素,因此能够分解纤维素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖鉴别在培养基中加入
指示剂,指示剂变红说明菌落中的菌体为分解尿素的细菌_______染色法,周围出现_______的菌落为分解纤维素的微生物的菌落尿素纤维素脲酶酚红刚果红透明圈比较项目间接计数法(稀释涂布平板法)直接计数法(显微计数法)原理当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的
活菌,通过统计平板上的
,就能推测出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量一个菌落数比较项目间接计数法(稀释涂布平板法)直接计数法(显微计数法)公式每克样品中的菌落数=(C÷V)×MC:某稀释度下平板上生长的平均菌落数;V:涂布平板时所用的稀释液的体积(mL);M:稀释倍数每毫升原液所含细菌数:每小格平均细菌数×400×104×稀释倍数缺点当两个或多个菌体连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活结果比实际值偏小比实际值偏大比较项目对照重复目的排除非测试因素对实验结果的影响排除偶然因素对实验结果的影响实例空白对照:确定培养基制作是否合格同一稀释度涂布至少3个平板针对训练组别平板数统计的菌落数取平均值甲组两个250和220235乙组三个160、240和110170丙组四个280、200、340和16024
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