2024年基因工程题库及答案（附解析）

2024年基因工程题库及答案（附解析）一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1.第一个用于构建重组体的限制性核酸内切酶是：A、EcoRIB、EcoBC、EcoRIID、EcoRV正确答案：A答案解析：限制性核酸内切酶EcoRI是第一个被发现并用于构建重组体的，它能够识别特定的DNA序列并进行切割，为基因工程的发展奠定了基础。2.Sanger法测序需要：A、S1核酸酶B、末端核苷酸转移酶C、Klenow大片段D、反转录酶E、Klenow小片段正确答案：C答案解析：Sanger法测序需要利用DNA聚合酶来延伸引物并合成新的DNA链，Klenow大片段是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶裂解后产生的大片段，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，在Sanger法测序中发挥重要作用。3.以多聚C作模板加入无细胞合成体系时，新合成的多肽链是：A、多聚PheB、多聚TyrC、多聚ProD、多聚Ser正确答案：C4.为了使人类有经济价值的基因在大肠杆菌中高效表达，有时可以采用同步克隆表达受体菌tRNA基因的方法，其机理是：A、增强基因的转录B、纠正受体菌密码子的偏爱性C、启动mRNA的翻译D、稳定mRNA在核糖体上的定位正确答案：B答案解析：在大肠杆菌中，其对密码子存在偏爱性，这可能导致某些人类基因在其中表达时出现问题。同步克隆表达受体菌tRNA基因，可以补充受体菌中某些稀有tRNA，纠正受体菌密码子的偏爱性，从而使人类有经济价值的基因在大肠杆菌中高效表达。A选项增强基因转录不是该方法的主要机理；C选项启动mRNA翻译不是其目的；D选项稳定mRNA在核糖体上的定位也不是采用该方法的原因。5.在利用lacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是：A、诱导宿主的α肽合成B、诱导宿主的ω肽合成C、作为酶的作用底物D、作为显色反应的指示剂正确答案：A答案解析：IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的作用是诱导宿主细胞合成α肽，与载体上缺失α肽编码序列的lacZ基因形成互补，从而恢复β-半乳糖苷酶活性，用于蓝白筛选等。所以答案是A。6.由mRNA合成cDNA需要：A、TaqDNA聚合酶B、末端核苷酸转移酶C、Klenow大片段D、反转录酶E、Klenow小片段正确答案：D答案解析：反转录酶是以mRNA为模板合成cDNA的关键酶。它能以mRNA为模板，按照碱基互补配对原则，合成出与mRNA互补的cDNA单链，然后再通过其他反应进一步形成双链cDNA。TaqDNA聚合酶主要用于PCR反应；末端核苷酸转移酶可在DNA末端添加核苷酸；Klenow大片段是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶裂解后产生的大片段，主要用于DNA片段的补平、标记等；Klenow小片段一般不是用于从mRNA合成cDNA的主要工具酶。7.多克隆位点：A、含有许多拷贝的克隆化基因B、使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性C、含有许多拷贝的同一种限制酶位点D、使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性正确答案：B答案解析：多克隆位点是指载体上人工合成的含有多种限制酶识别序列的一段DNA序列，它使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性。选项A中含有许多拷贝的克隆化基因不符合多克隆位点的定义；选项C中含有许多拷贝的同一种限制酶位点错误，多克隆位点是多种限制酶位点；选项D中使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性也不正确，多克隆位点主要是关于限制酶选择的灵活性。8.限制性核酸内切酶切割后产生：A、3’-磷酸基末端和5’-羟基末端B、5’-磷酸基末端和3’-羟基末端，C、3’-磷酸基末端和5’-磷酸末端D、5’-羟基末端和3’-羟基末端E、3’-羟基末端和5’-羟基末端及磷酸正确答案：B答案解析：限制性核酸内切酶切割DNA后产生5’-磷酸基末端和3’-羟基末端。9.限制性核酸内切酶：A、可将单链DNA任意切断B、可将双链DNA序列特异切开C、可将两个DNA分子连接起来D、不受DNA甲基化影响正确答案：B答案解析：限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并在特定的位点将其切开，具有序列特异性，所以可将双链DNA序列特异切开。它不能将单链DNA任意切断，A错误；将两个DNA分子连接起来的是DNA连接酶，C错误；限制性核酸内切酶受DNA甲基化影响，D错误。10.常用的标记物没有：A、NTPB、生物素C、荧光素D、地高辛E、放射性核素正确答案：A答案解析：常用的标记物有生物素、荧光素、地高辛、放射性核素等，NTP一般不是标记物。11.在cDNA技术中，所形成的发夹环可用：A、限制性内切核酸酶切除B、用3′→5′外切核酸酶切除C、用S1核酸酶切除D、用5′→3′外切核酸酶切除正确答案：C答案解析：发夹环是由mRNA反转录形成cDNA的过程中，两条互补的DNA链在末端形成的。S1核酸酶具有特异性降解单链DNA的能力，所以可以用S1核酸酶切除发夹环。而限制性内切核酸酶是识别特定序列并切割双链DNA；3′→5′外切核酸酶主要是从核酸链的3′端开始逐个切除核苷酸；5′→3′外切核酸酶是从5′端开始切除，它们都不适合用于切除发夹环。12.在质粒提取的步骤里，异戊醇的作用是：A、使蛋白质脱水B、使DNA脱水C、帮助DNA进入水相D、减少气泡，有助于相的稳定正确答案：D答案解析：异戊醇可以减少气泡，有助于相的稳定。在质粒提取过程中，加入异戊醇能降低分子表面张力，使离心时形成的界面更清晰，减少气泡对分层的影响，利于后续操作的顺利进行。13.促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：A、人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定B、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化C、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用正确答案：B答案解析：促红细胞生成素是一种糖蛋白，其合成过程需要在内质网和高尔基体等细胞器中进行糖基化修饰。大肠杆菌是原核生物，没有内质网和高尔基体等细胞器，无法对人的促红细胞生成素进行糖基化修饰，导致生产出的促红细胞生成素不具有生物活性，所以不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生成素。14.EcoRⅠ切割DNA双链产生：A、平端B、5’突出粘端C、3’突出粘端D、钝性末端E、配伍末端正确答案：B答案解析：EcoRⅠ切割DNA双链产生5’突出粘端。其识别序列为5’-GAATTC-3’，切割位点在G和A之间，切割后形成5’突出的粘性末端。15.下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?A、用限制酶消化DNAB、DNA与载体的连接C、用凝胶电泳分离DNA片段D、DNA片段转移至硝酸纤维素膜上正确答案：B答案解析：Southern印迹法的主要步骤包括：用限制酶消化DNA，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，接着将DNA片段转移至硝酸纤维素膜上，后续还有杂交等步骤。而DNA与载体的连接是基因克隆中构建重组DNA分子的步骤，不是Southern印迹法的步骤。16.下列四个DNA片段中含有回文结构的是：A、GAAACTGCTTTGACB、GAAACTGGAAACTGC、GAAACTGGTCAAAGD、GAAACTGCAGTTTC正确答案：D答案解析：选项D中，DNA片段为>GAAACTGCAGTTTC，从中间向两边看，碱基序列呈对称分布，即ACTG与CAGT互补，符合回文结构的特点。而选项A、B、C中的序列都不具备这样的对称互补特征。17.Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了下面哪种酶的活性？A、5′→3′合成酶B、3′→5′外切酶C、5′→3′外切酶D、转移酶正确答案：C答案解析：Klenow酶是DNA聚合酶I大片段，DNA聚合酶I具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性，Klenow酶是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶切割后产生的大片段，它保留了5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，但丧失了5′→3′外切酶活性。18.下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?A、甘油含量过高B、反应体系中含有有机溶剂C、含有非Mg2＋的二价阳离子D、酶切反应时酶浓度过低正确答案：D答案解析：星号活性是指在非理想的反应条件下，限制酶切割产生的非特异性条带。甘油含量过高、反应体系中含有有机溶剂、含有非Mg2＋的二价阳离子等都可能导致星号活性，而酶切反应时酶浓度过低主要影响酶切效率，一般不会直接导致星号活性。19.在分子生物学上“分子克隆”主要是指：A、DNA的大量复制B、DNA的大量转录C、DNA的大量剪切D、RNA的大量剪切E、RNA的大量反转录正确答案：A答案解析：分子克隆是指将特定DNA片段通过重组DNA技术插入到载体中，然后导入宿主细胞进行大量复制，从而获得大量相同DNA分子的过程。所以主要是指DNA的大量复制。20.cDNA文库包括该种生物的：A、某些蛋白质的结构基因B、所有蛋白质的结构基因C、所有结构基因D、内含子和调控区正确答案：A答案解析：cDNA文库是由mRNA反转录形成的DNA片段构建的，它只包含该种生物的某些蛋白质的结构基因，因为mRNA是由结构基因转录而来且经过了加工，不包含内含子等，所以不是所有结构基因及所有蛋白质的结构基因，也不包含内含子和调控区。21.下列哪个不是Southern印迹的步骤：A、用限制性核酸内切酶消化DNAB、DNA与载体连接，C、用凝胶电泳分离DNA片段D、DNA片段转移至硝酸纤维膜上E、用一个标记的探针与膜杂交正确答案：B答案解析：Southern印迹的主要步骤包括：用限制性核酸内切酶消化DNA；用凝胶电泳分离DNA片段；将DNA片段转移至硝酸纤维膜上；用一个标记的探针与膜杂交等。而DNA与载体连接是基因克隆等过程中的步骤，不是Southern印迹的步骤。22.原位杂交具有以下特点：A、不需要从组织和细胞中提取核酸B、反映出组织细胞的相互关系及功能状态C、可完整保护组织与细胞形态D、对靶序列有很高的灵敏度E、以上均是正确答案：E答案解析：原位杂交不需要从组织和细胞中提取核酸，能直接在组织和细胞中进行核酸检测；可完整保护组织与细胞形态；对靶序列有很高的灵敏度，还能反映出组织细胞的相互关系及功能状态。所以以上特点均正确，答案选E。23.多克隆位点：A、含有许多拷贝的克隆化基因B、使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性C、含有许多拷贝的同一种限制酶位点D、使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性正确答案：B答案解析：多克隆位点是指载体上人工合成的含有多种限制酶识别序列的一段DNA序列，它可以被多种限制酶识别和切割，从而使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性。多克隆位点并不含有许多拷贝的克隆化基因，也不是含有许多拷贝的同一种限制酶位点，它主要是关于限制酶切割位点的设置以方便不同基因的克隆，而不是对克隆所用生物种类的选择具有灵活性。24.PCR的特点不包括：A、时间短，只需数小时B、扩增产物量大C、只需微量模板D、用途非常广泛E、底物必须标记正确答案：E答案解析：PCR技术具有时间短（只需数小时）、扩增产物量大、只需微量模板、用途非常广泛等特点。而底物标记并不是PCR技术的特点。25.DNA的结构对转化的影响很大，一般说来，转化效率最高的是：A、完整的线性双链DNAB、单链线性DNAC、完整的环状双链DNAD、开口的双链环状DNA正确答案：A26.第一个由重组大肠杆菌生产的人类蛋白（多肽）药物是：A、白细胞介素B、干扰素C、生长激素D、胰岛素正确答案：D答案解析：胰岛素是第一个由重组大肠杆菌生产的人类蛋白（多肽）药物。胰岛素是一种蛋白质激素，对调节血糖水平至关重要。通过基因工程技术，将胰岛素基因导入大肠杆菌中，使其能够表达并生产胰岛素，为糖尿病患者提供了有效的治疗药物。生长激素、干扰素、白细胞介素等虽然也是重要的蛋白质药物，但不是第一个由重组大肠杆菌生产的。27.由mRNA合成cDNA需要：A、Klenow小片段B、DNA连接酶C、Klenow大片段D、反转录酶E、碱性磷酸酶正确答案：D答案解析：反转录酶是以mRNA为模板合成cDNA的关键酶，它能催化以mRNA为模板合成互补DNA链的反应。Klenow小片段、Klenow大片段主要用于DNA的合成等其他相关反应，DNA连接酶用于连接DNA片段，碱性磷酸酶用于去除核酸末端的磷酸基团等，均不是由mRNA合成cDNA直接需要的酶。28.正常出现肽链终止是因为：A、一个与链终止三联体相应tRNA不能带氨基酸B、不具有与链终止三联体相应的反tRNAC、mRNA在链终止三联体处停止合成D、以上均不正确正确答案：B答案解析：终止密码子没有相应的tRNA能够携带氨基酸与之对应，当mRNA上出现终止密码子时，就会导致肽链合成终止，所以正常出现肽链终止是因为不具有与链终止三联体相应的反tRNA。29.PCR退火温度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正确答案：E答案解析：PCR退火温度一般在55℃-65℃之间，所以大于55℃符合要求，其他选项温度过高不符合退火温度范围。30.下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A、在细胞分裂时恒定地传给DNAB、携带有某些抗生素抗性基因C、小型环状双链DNAD、具有自我复制功能E、获得目的基因正确答案：D答案解析：质粒DNA作为克隆载体必须具有自我复制功能，这样才能在宿主细胞中稳定存在并大量扩增，以携带目的基因进行后续操作。选项A，能在细胞分裂时恒定传给子代细胞不是质粒作为克隆载体最关键特性；选项B，携带有某些抗生素抗性基因可用于筛选，但不是最核心特性；选项C，小型环状双链DNA是质粒的结构特点，不是作为克隆载体的关键特性；选项E，获得目的基因不是质粒作为克隆载体本身的特性，而是克隆载体的用途。31.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：A、化学合成法B、基因组文库法C、cDNA文库法D、PCRE、差异显示法正确答案：D答案解析：PCR技术可以在已知序列信息的情况下，特异性地扩增出目的基因，是获取目的基因较为方便快捷的方法。化学合成法适合合成已知序列且较短的基因；基因组文库法和cDNA文库法需要构建文库并筛选，相对繁琐；差异显示法主要用于分析基因表达差异，不是获取目的基因的直接方法。32.目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是：A、质粒DNAB、噬菌体DNAC、病毒DNAD、线粒体DNA正确答案：C33.重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶：A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA连接酶D、RNA连接酶E、限制性内切正确答案：C答案解析：DNA连接酶能够催化双链DNA片段互补末端之间的磷酸二酯键形成，从而实现目的基因与载体DNA的拼接。DNA聚合酶主要用于DNA复制等过程；RNA聚合酶用于转录合成RNA；RNA连接酶在重组DNA技术中一般较少使用；限制性内切酶是用于切割DNA的，产生粘性末端或平末端，为后续的拼接做准备，但它本身不能直接实现拼接。34.DNA被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列那一项原因不太可能？A、酶失活B、蛋白质（如BSA）同DNA结合C、酶切条件不合适D、酶切反应时酶浓度过低正确答案：A35.下列哪一种不是产生星号活性的主要原因？A、甘油含量过高B、反应体系含有机溶剂C、含有非镁离子的二价阳离子D、酶切反应时酶浓度过低正确答案：D答案解析：星号活性是指在非标准反应条件下，限制酶切割与识别序列相似但不完全相同的DNA序列的现象。甘油含量过高、反应体系含有机溶剂、含有非镁离子的二价阳离子等都可能导致星号活性。而酶切反应时酶浓度过低一般不会直接导致星号活性的产生，主要影响酶切效率和完全程度。36.促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用B、人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定C、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感正确答案：C答案解析：促红细胞生长素是一种糖蛋白，而大肠杆菌属于原核生物，细胞中没有内质网和高尔基体等细胞器，不能对蛋白质进行糖基化修饰，所以不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素。选项A中促红细胞生长素对大肠杆菌无毒性作用；选项B中基因在大肠杆菌中可以稳定存在；选项D与不能生产促红细胞生长素的原因无关。37.经电泳分离后将蛋白质转移到尼龙膜上的技术是：A、Eastern杂交B、菌落原位杂交C、Northern杂交D、斑点杂交正确答案：A38.下列哪项不是探针的特点：A、要加以标记B、应是双链DNAC、只与靶核酸序列杂交D、探针长度可以是几十个碱基E、高灵敏度正确答案：B答案解析：探针可以是双链DNA，也可以是单链DNA、RNA等，所以应是双链DNA不是探针的特点。其他选项：探针要加以标记以便于检测；只与靶核酸序列杂交以实现特异性检测；探针长度可以是几十个碱基；具有高灵敏度都是探针的特点。39.多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A、平行末端B、3’-突出末端C、5’-突出末端D、粘性末端E、缺口末端正确答案：D答案解析：多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为粘性末端，即双链DNA被酶切后，产生的两个末端的碱基序列互补，能够通过碱基配对重新结合，形成类似粘性的结构。40.探针的种类包括：A、基因组DNA探针B、cDNA探针C、寡核苷酸探针D、RNA探针E、以上均是正确答案：E答案解析：探针的种类包括基因组DNA探针、cDNA探针、寡核苷酸探针、R