CAR-T 细胞质控专员岗位招聘考试试卷及答案

CAR-T细胞质控专员岗位招聘考试试卷及答案试题部分一、填空题（每题1分，共10分）1.CAR的核心信号传导域是______。2.分离PBMC常用的密度梯度介质是______。3.细胞活力检测常用的染料是______。4.CAR-T激活T细胞常用的刺激剂是______包被磁珠。5.细胞冻存保护剂常用______（浓度10%）。6.CAR-T产品需符合______（药品生产质量管理规范）要求。7.转染效率检测常用______技术。8.CAR-T靶点CD19主要针对______疾病。9.无菌检测合格标准是______。10.内毒素检测常用______法。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.CAR的核心功能域是（）A.CD3ζ链B.scFvC.跨膜区D.共刺激域2.分离PBMC的密度梯度介质是（）A.PBSB.Ficoll-PaqueC.RPMI1640D.DMSO3.活细胞台盼蓝染色结果为（）A.蓝色B.无色C.紫色D.红色4.CAR-T制备中病毒载体常用（）A.慢病毒B.腺病毒C.腺相关病毒D.逆转录病毒5.细胞活力质控合格标准一般≥（）A.70%B.80%C.90%D.95%6.CAR-T属于（）A.生物制品B.化学药品C.医疗器械D.中药7.细胞冻存降温速率一般为（）A.1℃/minB.5℃/minC.10℃/minD.常温8.支原体污染的检测方法不包括（）A.PCRB.培养法C.肉眼观察D.荧光染色9.CAR-T常见靶点BCMA针对（）A.骨髓瘤B.肺癌C.肝癌D.胃癌10.转染效率检测需测（）A.CAR阳性细胞比例B.T细胞纯度C.细胞大小D.培养基pH三、多项选择题（每题2分，共20分）1.CAR的组成部分包括（）A.scFvB.跨膜区C.共刺激域D.CD3ζ链2.CAR-T制备流程包括（）A.PBMC分离B.T细胞激活C.病毒转导D.细胞扩增3.细胞质控关键指标有（）A.细胞活力B.转染效率C.无菌性D.内毒素4.常用共刺激分子（）A.CD28B.4-1BBC.CD40LD.IL-2R5.细胞培养常用培养基（）A.RPMI1640B.DMEMC.IMDMD.PBS6.无菌检测方法（）A.薄膜过滤法B.直接接种法C.鲎试剂法D.PCR法7.CAR-T法规要求（）A.GMPB.IND申报C.BLA申报D.临床试验8.细胞冻存注意事项（）A.用DMSOB.缓慢降温C.快速解冻D.避免反复冻融9.细胞污染类型（）A.细菌B.真菌C.支原体D.病毒10.CAR-T不良反应（）A.CRSB.神经毒性C.过敏D.感染四、判断题（每题2分，共20分）1.scFv负责结合靶抗原（）2.密度梯度离心后，上层是红细胞（）3.死细胞台盼蓝染色呈无色（）4.CAR-T需符合GMP要求（）5.转染效率≥30%为合格（）6.内毒素检测用鲎试剂法（）7.CAR靶点只能是CD19（）8.细胞冻存DMSO浓度5%（）9.支原体污染肉眼可见（）10.细胞活力低会影响CAR-T疗效（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述CAR-T细胞活力检测的原理及注意事项。2.简述CAR-T转导环节的质控要点。3.简述CAR-T无菌检测的方法及合格标准。4.简述CRS与CAR-T质控的关联。六、讨论题（每题5分，共20分）1.若CAR-T培养中细胞活力持续＜85%，分析原因及改进措施。2.若转染效率＜50%，讨论影响因素及解决思路。答案部分一、填空题答案1.CD3ζ链2.Ficoll-Paque3.台盼蓝4.CD3/CD28抗体5.DMSO6.GMP7.流式细胞术8.B细胞淋巴瘤/白血病9.无菌生长10.鲎试剂二、单项选择题答案1.A2.B3.B4.A5.C6.A7.A8.C9.A10.A三、多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABCD4.AB5.ABC6.AB7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判断题答案1.√2.×3.×4.√5.√6.√7.×8.×9.×10.√五、简答题答案1.原理：台盼蓝无法透过活细胞完整细胞膜，死细胞因膜破损被染色。注意事项：①样本新鲜，避免长时间暴露；②染色3-5分钟，不过度染色；③计数3次取平均，区分单细胞；④若活力低，排查培养基、污染、温度。2.质控要点：①病毒载体：滴度≥1E8TU/mL，无菌/内毒素合格；②转导条件：MOI5-20，24-48小时；③检测：流式测CAR阳性率≥30%，活力≥80%；④操作：生物安全柜内，记录参数符合GMP追溯。3.方法：①薄膜过滤法（0.45μm滤膜）；②直接接种法（需氧/厌氧培养基）。合格标准：14天（需氧/厌氧）、7天（真菌）后无浑浊/菌落。4.关联：①细胞活力/数量：活力低影响增殖，过度增殖加重CRS；②转染效率：阳性率不足易引发不均免疫反应；③污染/内毒素：未检出则叠加感染风险；④纯度：杂细胞引发额外免疫反应。质控需严格控制这些指标。六、讨论题答案1.原因：①培养基过期/污染、pH异常；②离心转速过高、冻融不当；③培养箱温度/CO2波动；④初始PBMC活力低、激活不充分。改进：①每批次验证培养基；②优化离心（1500rpm×5min）、用程序降温盒；③稳定培养环境；④加强PBMC初始质控，增加中间检测点。2.影响因素：①病毒滴度不足、失活；②MOI不