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文档简介

2026届新高考生物冲刺复习

动物细胞工程情境1:(湖南高考真题改编)M基因编码的M蛋白在动物(物种A)的肝细胞中特异性表达。现设计实验,将外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。如何培养成纤维细胞?[任务一]阐明动物细胞培养的条件及过程活动1、阅读教材P43-44,完成下列问题,并归纳总结动物细胞培养的条件

1.如何保证充足的营养?

2.如何确保无菌、无毒的环境?

3.培养动物细胞时对温度、pH等有何种要求?

4.培养动物细胞需要何种气体环境?作用?

动物细胞培养:动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。考点一动物细胞培养技术营养:无菌、无毒的环境:温度、pH和渗透压:气体:营养:无菌、无毒的环境:温度、pH和渗透压:气体环境:[任务一]阐明动物细胞培养的条件及过程

动物细胞培养:动物细胞培养是指从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。活动1、阅读教材P43-44,并归纳总结动物细胞培养的条件

①对培养液和所有培养用具进行灭菌处理

②在无菌环境下进行操作

③定期更换培养液,以便清除代谢物严格配置而成的合成培养基+血清等天然成分95%空气和5%CO2(维持培养液pH)36.5±0.5℃、7.2-7.4考点一动物细胞培养技术活动2、阅读教材P44-45,思考并回答以下问题[任务一]阐明动物细胞培养的条件及过程1.为什么要将动物细胞分散成单个细胞培养?2.如何将动物细胞分散成单个细胞?3.当细胞培养一段时间之后,会出现细胞分裂受阻的现象,可能由什么原因引起的?4.可通过什么手段避免细胞分裂受阻?5.什么是原代培养、什么是传代培养?6.如何进行传代培养?考点一动物细胞培养技术可以用胃蛋白酶处理吗?不可以,pH不适宜。用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理,去掉组织间蛋白,将组织分散成单个细胞取动物组织制成细胞悬液一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,原因:细胞分化程度低,增殖能力强,容易培养。原因:a.从动物体取出的成块组织中,细胞与细胞靠在一起,彼此限制了生长和增殖;b.能使细胞与培养液充分接触,更易进行物质交换。保证细胞所需的营养物质的供应及有害产物的及时排出。考点一动物细胞培养技术除受以上因素影响外,还会发生接触抑制现象。体外培养的动物细胞悬浮生长类:会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。贴壁生长类:(大多数)需贴附于基质表面动物组织处理后的初次培养当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞通常会停止分裂增殖。取动物组织放入CO2培养箱中培养转入培养液进行原代培养考点一动物细胞培养技术制成细胞悬液取动物组织制成细胞悬液放入CO2培养箱中培养转入培养液进行原代培养放入CO2培养箱中培养传代培养分瓶后的细胞培养悬浮生长类:贴壁生长类:

直接用离心法收集重新用胰蛋白酶等处理,使之分散成单个细胞,然后再用离心法收集。考点一动物细胞培养技术[任务一]阐明动物细胞培养的条件及过程动物细胞培养的过程取动物组织分散成单个细胞原代培养传代培养培养液原代培养考点一动物细胞培养技术1.(《步步高》P318第1题)(2024·黑吉辽,14)从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养,在传代后的不同时间点检测细胞数目,结果如图。下列叙述正确的是()A.传代培养时,培养皿需密封防止污染B.选取①的细胞进行传代培养比②更合理C.直接用离心法收集细胞进行传代培养D.细胞增长进入平台期可能与细胞密度过

大有关D考点一动物细胞培养技术[任务二]简述干细胞的应用活动1、阅读教材P46-47,完成下面表格的填写种类胚胎干细胞成体干细胞诱导多能干细胞来源_________骨髓、脐带血等体细胞(如成纤维细胞等)特点能分化成任何一种细胞、组织或器官,甚至成为_____分化成__________能诱导分化成类似

的细胞应用分化成心肌细胞、神经元和造血干细胞等造血干细胞用于治疗白血病,神经干细胞用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病等治疗镰状细胞贫血、阿尔茨海默病、心血管疾病等早期胚胎个体特定的细胞或组织胚胎干细胞考点一动物细胞培养技术[任务二]简述干细胞的应用活动2、分析下列材料,解释干细胞发挥的作用

资料:阿尔茨海默病(AD)是一种起病隐匿的进行性发展的神经系统退行性疾病,是老年痴呆的主要类型。AD其中一个病理改变是神经细胞外以β-淀粉样蛋白(Aβ)为主沉积形成老年斑(Sp)

间充质干细胞可以在骨髓和脐带血中分离,在特定的条件下分化成神经细胞和胶质细胞等。研究人员将磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的特异性抑制剂D609诱导间充质干细胞分化为神经元样细胞,并将诱导后的细胞植入AD小鼠模型中,观察到移植后的小鼠β-淀粉样蛋白沉积减少和记忆力增强。干细胞的作用?用于治疗神经系统退行性和神经组织损伤疾病若某病人未保留脐带血,也无法从骨髓当中获得间充质干细胞,可以通过怎样的方式获取间充质干细胞呢?考点一动物细胞培养技术有着自我更新能力及分化潜能的干细胞,与组织、器官的发育、再生和修复等密切相关,因而在医学上有着广泛的应用。[任务二]简述干细胞的应用活动3、阅读教材P46以及图2-14,构建获得诱导多能干细胞的流程图取该病人的体细胞(如成纤维细胞、已分化的T细胞、B细胞等)iPS细胞所需细胞(例如神经细胞)转入相关转化因子细胞发生转化转入相关物质细胞发生分化讨论:不违背伦理道德的前提下,应用iPS细胞进行医学治疗的优点?①获取胚胎干细胞需从胚胎中获取,涉及伦理问题;iPS的诱导过程无须破坏胚胎。②iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞,将它移植回病人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应考点一动物细胞培养技术2、(2023·海南卷)某团队通过多代细胞培养,将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除,获得XO胚胎干细胞,再经过一系列处理,使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是(

)A.营养供应充足时,传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制B.获得XO胚胎于细胞的过程发生了染色体数目变异C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化D.若某濒危哺乳动物仅存雄性个体,可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育A科学思维:若某濒危哺乳动物仅存雄性个体,实验室中只保存了该物种雄性个体的胚胎干细胞,想利用该技术进行繁育,请写出具体操作流程。

去除胚胎干细胞的Y染色体,得到XO胚胎干细胞→转变为有功能的卵母细胞→经减数分裂,得到含X染色体的卵细胞→与雄性个体产生的精子进行体外受精→早期胚胎发育→胚胎移植得到新个体。考点一动物细胞培养技术情境:(湖南高考真题改编)获得的这批克隆动物易感染某种病原体X,为了能够高效治疗此类疾病,可通过注射抗病原体X的抗体。为了快速获得大量抗X抗体,研究人员制备针对该病原体X的单克隆抗体。如何获得既能大量增殖,又能产生抗体的细胞呢?[任务一]阐明动物细胞融合的过程活动1、阅读教材P48,完成关于动物细胞融合技术的相关问题

1.动物细胞融合技术的原理?2.动物细胞融合的常用方法?3.动物细胞融合技术的意义?4.动物细胞融合技术的常见应用?

动物细胞融合技术:使两个或多个细胞结合形成一个细胞的技术。考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体[任务二]阐明动物细胞融合的过程活动2、现有克隆动物A的骨髓瘤细胞、B淋巴细胞等实验材料,构建动物细胞融合的流程图(只考虑两两细胞融合)取克隆动物A的骨髓瘤细胞取克隆动物A的B淋巴细胞诱导融合骨髓瘤细胞+骨髓瘤细胞

融合细胞B淋巴细胞+B淋巴细胞

融合细胞骨髓瘤细胞+B淋巴细胞

融合细胞实际操作中如何①获得分泌特定抗X抗体的B淋巴细胞?

②如何筛选特定的杂交瘤细胞?考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体[任务三]概述单克隆抗体的制备过程活动1、阅读教材P49,思考并完成以下问题

1.如何获得分泌特定抗体的B淋巴细胞?2.如何进行第一次筛选,其目的是?3.如何进行第二次筛选,其目的是?4.如何获得大量特定的杂交瘤细胞?考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体[任务三]概述单克隆抗体的制备过程活动2、分析下列资料,阐明第一次筛选中使用特定培养基的原理:B淋巴细胞及同型融合细胞骨髓瘤细胞及同型融合细胞杂交瘤细胞1.细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基蝶呤阻断。2.淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但不能分裂增殖。

3.鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,但能不断分裂增殖。筛选出杂交瘤细胞方法?不能无限增殖,死亡不能无限增殖,死亡能无限增殖,生长培养基中加入氨基蝶呤考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体[任务三]概述单克隆抗体的制备过程活动3、分析下列资料,阐明第二次筛选的原理:

将经过第一次筛选之后的杂交瘤细胞进行培养并稀释之后,将培养液滴入96孔板的每个孔中,每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞。

出现什么结果表明获得了能分泌特定抗体的杂交瘤细胞?抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体[任务三]概述单克隆抗体的制备过程分泌所需抗体的杂交瘤细胞体外培养注射小鼠腹腔内增殖诱导融合单克隆抗体获取特定抗原多种B淋巴细胞注射小鼠骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞多种融合细胞未融合细胞抗体检测克隆化培养多次筛选选择培养基进行筛选(第一次筛选)(第二次筛选)单抗优点:灵敏度高、特异性强、可大量制备准确地识别抗原的细微差异与特定抗原发生特异性结合考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体4、科学家利用现代生物技术将小鼠单克隆抗体上结合抗原的区域“嫁接”到人的抗体上,获得的人鼠嵌合抗体引起的免疫副作用显著降低。制备人鼠嵌合抗体需要从根本上改造(

A.小鼠单克隆抗体

B.抗体合成基因

C.人体特异性抗体

D.编码抗体的mRNAB单克隆抗体的发展历程:单克隆抗体的发展历程:考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体单克隆抗体的发展历程:单克隆抗体的发展历程:双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合,目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体5、(2022山东卷,2分)如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。下列说法错误的是()DA.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞一个B淋巴细胞只能分泌一种抗体考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体

C考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体【素材】单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。单克隆抗体的应用:

(1)作为诊断试剂(放射性同位素与单克隆抗体结合诊断病变位置)。

(2)用于治疗疾病和运载药物。单克隆抗体的应用:考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体单克隆抗体的应用:1.图中ADC的抗体和药物的作用分别是__________________________________________________________________。(2)ADC能被细胞吞噬与细胞表面具有__________有关,体现了细胞膜具有____________功能。癌细胞在药物的作用下引起_________。(3)ADC在临床上用于治疗癌症或其他疾病,相较普通药物治疗,其具有_________________的优点。[素材]抗体—药物偶联物(ADC),通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合,实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC通常由抗体、接头和药物(如细胞毒素)三部分组成,它的作用机制如下图所示。抗体能与肿瘤细胞表面受体结合,起靶向作用;药物发挥治疗作用,如杀伤肿瘤细胞胞间信息交流细胞凋亡疗效高,毒副作用小药物:细胞毒素化学药物抗癌药物等特异性受体考点二动物细胞融合技术和单克隆抗体情境:M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验,将外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A,流程如图所示。什么是核移植技术?

考点三

动物细胞核移植技术和克隆动物[任务一]阐明动物体细胞核移植的原理活动1、阅读教材P52-53,思考并回答下列问题

1.动物体细胞核移植技术的理论基础(原理)是什么?2.克隆动物属于有性生殖还是无性繁殖?3.为什么体细胞核移植较胚胎细胞核移植更困难?4.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?

动物体细胞核移植技术:是指将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。

为使核移植的胚胎的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的核遗传物质去掉或将其破坏。

考点三

动物细胞核移植技术和克隆动物[任务一]阐明动物体细胞核移植的原理活动2、阅读资料,思考为什么选取去核的卵母细胞作为受体细胞?资料:体细胞克隆的供体细胞是高度分化的体细胞,具有高度特异的DNA修饰和组蛋白修饰,以此来维持体细胞的细胞特性。由于克隆胚胎的发育依赖于体细胞的细胞核,所以当供体细胞核被放置到成熟的去核卵母细胞中时,供体细胞核必须经过重编程,抹去分化状态的细胞记忆,激活对早期胚胎发育具有重要作用的基因,如多能性基因、抑制与分化相关的基因,从而使得体细胞获得发育的全能性。

而激活因子在MⅡ期的卵母细胞中含量较高。

考点三

动物细胞核移植技术和克隆动物[任务二]阐明动物体细胞核移植的过程活动1、参照教材P53的图2-18,构建获取克隆动物A的过程,并思考下列问题。采集卵母细胞,在体外培养到MⅡ期从供体高产奶牛身上取体细胞显微操作去核对体细胞进行培养去核的卵母细胞供体细胞电融合法将供体细胞注入去核的卵母细胞重构胚

用物理或化学方法激活早期胚胎将胚胎移入受体(代孕)母牛体内生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛早期胚胎培养动物细胞培养胚胎移植动物细胞融合动物细胞核移植技术

考点三

动物细胞核移植技术和克隆动物[任务二]阐明动物体细胞核移植的过程活动1、参照教材P53的图2-18,构建获取克隆动物A的过程,并思考下列问题。1.如何将供体细胞细胞核移植到去核的卵母细胞中?这种方式的优点是?2.你认为用上述体细胞核移植技术培育的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?3.根据克隆动物A的产生过程,其有几个亲本?探究克隆动物A的性状表现与这几个亲本的关系并分析原因。

考点三

动物细胞核移植技术和克隆动物[任务二]阐明动物体细胞核移植的过程活动1、参照教材P53的图2-18,构建获取克隆动物A的过程,并思考下列问题。1.如何将供体细胞细胞核移植到去核的卵母细胞中?这种方式的优点是?显微操作去核:梯度离心、紫外光短时间照射、化学物质处理

P54旁栏使DNA变性失活,达到去核的目的。没有刺破卵母细胞膜,对卵母细胞伤害小。

考点三

动物细胞核移植技术和克隆动物[任务二]阐明动物体细胞核移植的过程活动2、阅读教材53页,并结合构建的获取克隆动物A的流程图,思考并完成以下问题2.你认为用上述体细胞核移植技术培育的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?动物的发育及一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系,克隆动物所生活的环境与核供体动物生活的环境不会完全相同克隆动物遗传物质细胞核的DNA全部来自于供体动物的细

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