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文档简介

2025年免疫组化试题(有答案)一、选择题(每题2分,共30分)1.以下关于单克隆抗体和多克隆抗体的描述,错误的是:A.单克隆抗体特异性高,交叉反应少B.多克隆抗体可识别同一抗原的多个表位C.单克隆抗体在组织固定不当时易丢失抗原D.多克隆抗体更适用于检测变性抗原2.乳腺癌组织中检测到ER(+)、PR(-)、HER2(2+),需进一步确认HER2状态时,首选的检测方法是:A.FISH检测HER2基因扩增B.换用不同克隆号的HER2抗体重新染色C.检测Ki-67增殖指数D.行CK5/6和EGFR染色3.胃黏膜活检标本中见异型细胞,怀疑为印戒细胞癌,最具诊断价值的标志物组合是:A.CDX2(+)、CK7(-)、CK20(+)B.突触素(Syn)(+)、嗜铬素A(CgA)(+)C.波形蛋白(Vimentin)(+)、S-100(-)D.黏蛋白-1(MUC1)(-)、钙黏蛋白(E-cadherin)(+)4.淋巴结活检显示小淋巴细胞浸润,CD3(+)、CD20(-)、CD5(+)、CD23(+),最可能的诊断是:A.套细胞淋巴瘤(MCL)B.慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(CLL/SLL)C.滤泡性淋巴瘤(FL)D.弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)5.关于免疫组化中DAB显色的描述,正确的是:A.显色时间越长,阳性信号越强,结果越准确B.显色液需现用现配,避免接触金属离子C.终止显色后无需水洗,直接脱水封片D.DAB显色产物可被酒精溶解,需快速脱水6.软组织肿瘤中,CD34(+)、DOG1(+)、SMA(-)、S-100(-)最支持的诊断是:A.平滑肌瘤B.神经鞘瘤C.胃肠道间质瘤(GIST)D.孤立性纤维性肿瘤(SFT)7.肺穿刺标本中见异型细胞,CK7(+)、CK20(-)、TTF-1(+)、NapsinA(+),最可能的组织学类型是:A.肺鳞癌B.肺腺癌C.小细胞肺癌D.大细胞神经内分泌癌8.以下哪种情况会导致免疫组化出现假阴性结果?A.抗原修复过度导致表位破坏B.一抗浓度过高C.二抗与组织内源性生物素结合D.显色时间过长9.鉴别肝母细胞瘤与肝细胞癌时,最有价值的标志物是:A.AFP(甲胎蛋白)B.Glypican-3(磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3)C.HepPar-1(肝细胞抗原)D.β-catenin(β-连环蛋白)10.浆细胞肿瘤中,CD138(+)、CD38(+)、MUM1(+)、CD20(-),需进一步排除的是:A.反应性浆细胞增生B.多发性骨髓瘤C.浆母细胞淋巴瘤D.边缘区淋巴瘤11.皮肤黑色素瘤与色素性基底细胞癌鉴别时,关键标志物是:A.HMB-45(+)、Melan-A(+)B.CK(+)、EMA(+)C.CD34(+)、SMA(+)D.Desmin(+)、MyoD1(+)12.子宫内膜样腺癌与卵巢转移性子宫内膜样癌鉴别时,首选的标志物是:A.ER(+)、PR(+)B.PAX8(+)、WT1(-)C.CA125(+)、CEA(-)D.vimentin(+)、CK7(+)13.神经内分泌肿瘤(NET)分级中,Ki-67增殖指数的计数区域应选择:A.肿瘤坏死区周围B.肿瘤细胞最密集、增殖最活跃的“热点区”C.肿瘤与正常组织交界区D.随机选取3个高倍视野14.以下哪项不属于免疫组化质量控制的内容?A.使用已知阳性的组织作为阳性对照B.用PBS代替一抗作为阴性对照C.定期校准显微镜光源强度D.记录抗体的克隆号、浓度及孵育时间15.肾细胞癌中,CD10(+)、RCC(+)、PAX8(+)、CK7(-),最可能的亚型是:A.透明细胞肾细胞癌B.乳头状肾细胞癌C.嫌色细胞肾细胞癌D.集合管癌二、简答题(每题8分,共40分)1.简述免疫组化中抗原修复的原理及常用方法。2.列举5种上皮源性肿瘤的特异性标志物,并说明其适用范围。3.简述淋巴瘤免疫组化诊断中B细胞和T细胞的核心标志物组合及意义。4.分析免疫组化结果时,如何区分“真阳性”与“非特异性染色”?5.软组织肉瘤诊断中,如何通过免疫组化鉴别横纹肌肉瘤与平滑肌肉瘤?三、案例分析题(每题15分,共30分)案例1:患者男性,65岁,因“咳嗽、痰中带血1月”就诊,胸部CT示右肺上叶3cm肿块,边界不清。支气管镜活检病理:异型细胞呈腺管样排列,核大深染,可见核仁。免疫组化结果:CK7(+,细胞膜/胞质)、CK20(-)、TTF-1(+,胞核)、NapsinA(+,胞质)、p40(-)、Ki-67(约30%+)。问题:(1)该病例最可能的诊断是什么?(2)列举支持诊断的关键标志物及依据。(3)需与哪些疾病鉴别?对应的鉴别标志物是什么?案例2:患者女性,42岁,发现左大腿包块2月,大小约5cm×4cm,质硬,活动度差。MRI提示软组织占位,边界不清。手术切除标本病理:梭形细胞呈束状排列,核分裂象约5/10HPF。免疫组化结果:CD34(+,胞膜)、DOG1(+,胞膜/胞质)、SMA(-)、S-100(-)、Ki-67(约5%+)。问题:(1)该病例最可能的诊断是什么?(2)说明各标志物的诊断意义。(3)若需明确危险度分级,还需检测哪些指标?答案一、选择题1.D(多克隆抗体因识别多个表位,对变性抗原的检测能力较弱;单克隆抗体仅识别单一表位,固定不当时易丢失)2.A(HER22+需通过FISH确认基因扩增,不能仅依赖IHC)3.A(印戒细胞癌多为胃来源,CDX2(肠型分化)、CK20(+)、CK7(-)支持胃肠道原发)4.B(CLL/SLL特征为T细胞标记CD3(+)为背景T细胞,B细胞标记CD20(-)(弱表达)、CD5(+)、CD23(+))5.B(DAB需避光、现配,金属离子可加速氧化;显色时间需严格控制,过长会导致背景过深;终止后需充分水洗;DAB产物不溶于酒精)6.C(GIST典型标记为CD34、DOG1阳性,SMA(平滑肌)、S-100(神经源性)阴性)7.B(肺腺癌特征性标记:CK7(+)、CK20(-)、TTF-1(+)、NapsinA(+))8.A(抗原修复过度破坏表位导致假阴性;一抗浓度过高会导致假阳性;内源性生物素可致假阳性;显色过长致背景深)9.D(肝母细胞瘤常伴β-catenin核阳性,肝细胞癌多为胞质阳性)10.A(反应性浆细胞增生CD20可部分阳性,而肿瘤性浆细胞CD20(-),需结合临床及克隆性检测)11.A(黑色素瘤HMB-45、Melan-A阳性;基底细胞癌CK、EMA阳性)12.B(PAX8为苗勒管来源标记,WT1在卵巢上皮性肿瘤中可阳性,子宫内膜癌WT1(-))13.B(Ki-67计数需选择增殖最活跃的“热点区”,避免坏死或退变区域)14.C(显微镜校准属于设备维护,非IHC质量控制内容)15.A(透明细胞肾癌CD10、RCC、PAX8阳性,CK7(-);乳头状肾癌CK7常(+))二、简答题1.抗原修复原理:组织固定(如甲醛)会导致蛋白质交联,掩盖抗原表位,通过物理或化学方法打断交联,暴露表位。常用方法:①热修复(最常用):高压蒸汽、微波、水浴加热(pH6.0柠檬酸盐缓冲液或pH9.0EDTA缓冲液);②酶消化修复(胃蛋白酶、胰酶):适用于热修复后仍阴性的标本(如某些病毒抗原)。2.上皮源性肿瘤特异性标志物:①CK(细胞角蛋白):广谱上皮标记,CK7/CK20组合可鉴别原发部位(如CK7+、CK20-多见于肺/乳腺,CK7-、CK20+多见于结直肠);②EMA(上皮膜抗原):腺样上皮及间皮来源肿瘤(如胸腺瘤、间皮瘤);③p63:鳞状上皮及肌上皮标记(鳞癌、尿路上皮癌);④TTF-1:肺腺癌及甲状腺滤泡上皮癌;⑤NapsinA:肺腺癌(特异性高于TTF-1)。3.B细胞核心标志物:CD20(成熟B细胞)、CD79a(胞质标记,前B细胞至成熟B细胞)、PAX5(核标记,B细胞谱系特异性);T细胞核心标志物:CD3(胞膜/胞质,T细胞谱系)、CD4/CD8(辅助/细胞毒性T细胞亚群)、CD5(部分T细胞及CLL/SLL)。意义:通过谱系标记确定B/T细胞来源,结合CD10(滤泡中心)、BCL-2(抗凋亡,FL特征)、CyclinD1(MCL)等进行分型。4.区分方法:①定位特异性:真阳性信号与抗原分布一致(如膜/核/胞质),非特异性染色多为弥漫性或颗粒状;②对照验证:阳性对照应阳性,阴性对照(PBS替代一抗)应阴性;③强度与背景:真阳性信号强于背景,非特异性染色背景深且均匀;④重复实验:更换抗体克隆号或检测方法(如FISH)验证。5.横纹肌肉瘤与平滑肌肉瘤鉴别:①横纹肌肉瘤:Desmin(+,胞质)、MyoD1(+,核)、Myogenin(+,核,特异性更高);②平滑肌肉瘤:SMA(平滑肌肌动蛋白,胞质)、Calponin(胞质)、h-Caldesmon(胞质);③共同标记:Vimentin(+),但横纹肌肉瘤MyoD1/Myogenin阳性可排除平滑肌肉瘤。三、案例分析题案例1:(1)诊断:肺腺癌(非小细胞肺癌,腺泡型可能)。(2)支持依据:CK7(+)提示上皮来源,CK20(-)排除胃肠道转移;TTF-1(+)(肺腺癌及甲状腺癌标记,但结合CK20(-)排除甲状腺)、NapsinA(+)(肺腺癌特异性标记);p40(-)排除鳞癌。(3)需鉴别疾病及标志物:①肺鳞癌:p40(+)、p63(+)、CK5/6(+);②大细胞癌:缺乏腺/鳞分化标记(TTF-1、NapsinA、p40均(-));③转移性腺癌(如乳腺癌):GCDFP-15(+)、ER/PR(+)、mammaglobin(+)。案例2:(1)诊断:胃肠道间质瘤(GIST,低危险度)。(2)标志物意义:CD34(+)(GIST、SFT等间叶肿瘤标记)、DOG1(+)

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