生理学血液循环实验操作及习题

生理学血液循环实验操作及习题一、经典血液循环实验操作（一）蛙心灌流实验（斯氏法）实验目的观察蛙心节律性活动，分析离子、药物、温度等因素对心肌生理特性（自律性、收缩性）的影响，理解心肌活动的调控机制。实验原理蛙心离体后可在任氏液中维持节律性收缩，心肌活动受离子浓度、神经递质、温度等因素调控：如Ca²⁺促进心肌收缩（过量可致“钙僵”），K⁺过高抑制心肌；肾上腺素增强心肌收缩与心率，乙酰胆碱则起抑制作用。实验材料蟾蜍、蛙类手术器械、斯氏蛙心套管、灌流液（任氏液、高Ca²⁺/K⁺液、肾上腺素/乙酰胆碱溶液）、张力换能器、生物信号采集系统。操作步骤1.标本制备：破坏蟾蜍脑脊髓，仰卧固定。剪开胸部暴露心脏，在动脉圆锥下方剪口，将斯氏套管插入心室（液面随心跳升降为成功标志），结扎后游离心脏。2.记录装置连接：蛙心夹夹住心尖，通过丝线连张力换能器，采集心搏曲线（幅度、频率）。3.因素干预：依次更换灌流液（任氏液→高Ca²⁺液→冲洗→高K⁺液→冲洗→肾上腺素→冲洗→乙酰胆碱），观察心搏变化并记录；还可通过温水/冰水浴观察温度影响。结果分析与注意事项结果：高Ca²⁺使收缩增强（钙僵），高K⁺使心率减慢、收缩减弱；肾上腺素加快心率、增强收缩，乙酰胆碱反之；温度升高心率加快，降低则减慢。注意：脑脊髓破坏要彻底，套管插入勿损伤心肌，更换灌流液需排尽气泡并充分冲洗。（二）家兔动脉血压直接测量实验实验目的掌握动脉血压直接测量方法，分析神经（减压/迷走神经）、体液（肾上腺素/去甲肾上腺素）、机械刺激（夹闭颈总动脉）对血压的影响机制。实验原理动脉血压由心脏射血和外周阻力形成。减压神经为压力感受性反射的传入神经，迷走神经直接抑制心脏；肾上腺素兴奋α/β受体升高血压，去甲肾上腺素主要兴奋α受体升高舒张压。实验材料家兔、手术器械、动脉套管、压力换能器、20%乌拉坦、肝素、肾上腺素/去甲肾上腺素。操作步骤1.麻醉固定：耳缘静脉注射乌拉坦（5ml/kg），仰卧固定后分离颈部血管神经。2.动脉插管：分离颈总动脉，远心端结扎，近心端夹闭后剪口，插入充有肝素的动脉套管，连接换能器记录血压波形（收缩压、舒张压、脉压）。3.因素干预：夹闭对侧颈总动脉（10~20s）、电刺激减压/迷走神经、静脉注射肾上腺素/去甲肾上腺素，观察血压变化。结果分析与注意事项结果：夹闭颈总动脉→血压升高（减压反射减弱）；刺激减压神经→血压降低（传入冲动增加）；刺激迷走神经→血压降低（心率减慢）；肾上腺素使收缩压升高更明显，去甲肾上腺素使舒张压升高更明显。注意：麻醉剂量适中，动脉插管前充肝素防凝血，神经刺激避免短路。（三）蟾蜍肠系膜微循环观察实验目的观察微循环血流状态与血管类型（微动脉、毛细血管、微静脉），分析代谢、药物对微循环的调节作用。实验原理微循环是物质交换的场所，微动脉受神经体液调节，局部代谢产物（如CO₂、H⁺）或药物（肾上腺素、组胺）可改变血管舒缩与血流量。实验材料蟾蜍、显微镜、恒温灌流装置、肾上腺素/组胺溶液。操作步骤1.标本制备：破坏蟾蜍脑脊髓，拉出小肠袢，将肠系膜展开铺于载玻片（保持湿润）。2.显微镜观察：低倍镜下识别血管：微动脉（管径细、血流快、有搏动）、毛细血管（单行红细胞、血流慢）、微静脉（管径粗、血流慢、无搏动）。3.因素干预：滴加温热/冰生理盐水观察代谢影响，滴加肾上腺素/组胺观察药物作用。结果分析与注意事项结果：温热刺激使微动脉舒张（代谢产物增多），肾上腺素收缩微动脉（α受体兴奋），组胺舒张血管（通透性增加）。注意：肠系膜需持续保湿，操作轻柔避免牵拉，显微镜调焦缓慢。二、习题解析（一）选择题（单选）1.斯氏蛙心灌流中，高钾任氏液灌流后，蛙心活动变化为：A.心率加快，收缩增强B.心率减慢，收缩减弱C.心率先快后慢，收缩先强后弱D.心率不变，收缩增强答案：B解析：高K⁺抑制Ca²⁺内流（兴奋-收缩耦联关键），同时减慢自律细胞4期去极化，故心率减慢、收缩减弱。2.家兔夹闭颈总动脉后，血压变化的机制是：A.颈动脉窦压力感受器传入冲动减少B.颈动脉窦压力感受器传入冲动增加C.颈动脉体化学感受器传入冲动增加D.迷走神经兴奋答案：A解析：夹闭颈总动脉使颈动脉窦压力降低，减压反射减弱，交感神经兴奋增强，血压升高。（二）简答题1.简述肾上腺素、乙酰胆碱对蛙心活动的影响及机制。答案：肾上腺素：心率加快、收缩增强。机制为与心肌β₁受体结合，激活腺苷酸环化酶，cAMP增多，Ca²⁺内流增加，加速兴奋-收缩耦联，同时提高自律细胞4期去极化速度。乙酰胆碱：心率减慢、收缩减弱。机制为与心肌M受体结合，抑制腺苷酸环化酶，cAMP减少，K⁺外流增加（超极化），减慢4期去极化；同时抑制Ca²⁺内流，减弱收缩。2.刺激减压神经与迷走神经对血压的影响有何不同？答案：刺激减压神经：血压降低（反射性调节）。减压神经为压力感受性反射的传入神经，电刺激使传入冲动增加，中枢整合后心迷走兴奋、交感抑制，心输出量与外周阻力降低。刺激迷走神经：血压降低（直接作用心脏）。迷走神经为心迷走神经的传出神经