合成生物胶原蛋白研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

合成生物胶原蛋白研发工程师岗位招聘考试试卷及答案合成生物胶原蛋白研发工程师岗位招聘考试试卷一、填空题（共10题，每题1分，共10分）1.胶原蛋白按结构可分为______型（如Ⅰ型、Ⅱ型等），皮肤中主要含______型。2.合成生物胶原蛋白常用表达系统包括______、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞等。3.胶原蛋白特征氨基酸是______，其羟化需要______酶参与。4.基因工程中，目的基因与载体连接的关键酶是______和______。5.重组胶原蛋白纯度检测常用______电泳（SDS）和HPLC。6.胶原蛋白功能包括细胞黏附、______、组织修复等。7.发酵核心参数包括温度、pH、______、溶氧量等。8.胶原蛋白二级结构主要为______螺旋，由三个α链组成。9.重组胶原蛋白活性检测常通过______实验（如细胞增殖）验证。10.表达载体需包含启动子、终止子、______等元件。二、单项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.最适合生产高活性重组胶原蛋白的表达系统是？A.大肠杆菌B.毕赤酵母C.哺乳动物细胞D.植物细胞2.脯氨酰羟化酶的作用是？A.促进基因转录B.使脯氨酸羟化C.催化交联D.降解胶原蛋白3.重组胶原蛋白分子量检测常用？A.紫外分光光度法B.质谱（MS）C.考马斯亮蓝法D.ELISA4.最常用于医用敷料的胶原蛋白是？A.Ⅰ型B.Ⅱ型C.Ⅲ型D.Ⅳ型5.发酵溶氧量不足会导致？A.菌体生长加快B.胶原蛋白产量下降C.纯度升高D.酶活性增强6.目的基因获取方法不包括？A.PCR扩增B.人工合成C.基因组文库筛选D.物理诱变7.不属于胶原蛋白交联方式的是？A.戊二醛交联B.热交联C.酶交联D.盐交联8.重组胶原蛋白免疫原性检测常用？A.SDSB.WesternBlotC.动物免疫实验D.HPLC9.最常用于表达重组胶原蛋白的哺乳动物细胞是？A.CHO细胞B.HEK293细胞C.大肠杆菌D.酵母10.下游纯化不包括的步骤是？A.细胞破碎B.亲和层析C.基因克隆D.离子交换层析三、多项选择题（共10题，每题2分，共20分）1.合成生物胶原蛋白的优势包括？A.来源稳定B.无动物源病原体风险C.可定制修饰D.产量高2.胶原蛋白表达需要的关键酶包括？A.脯氨酰羟化酶B.赖氨酸羟化酶C.转谷氨酰胺酶D.限制酶3.重组胶原蛋白应用领域包括？A.医用敷料B.化妆品C.组织工程支架D.食品添加剂4.哺乳动物表达系统的优点是？A.翻译后修饰完善B.产量高C.成本低D.活性高5.胶原蛋白检测方法包括？A.SDSB.ELISAC.细胞黏附实验D.质谱6.表达载体的元件包括？A.启动子B.终止子C.标记基因D.复制原点7.发酵影响产量的因素包括？A.温度B.pHC.溶氧量D.诱导剂浓度8.胶原蛋白结构特点包括？A.每3个残基含1个甘氨酸B.含羟脯氨酸/羟赖氨酸C.三股螺旋D.分子量均匀9.纯化策略包括？A.His-tag亲和层析B.离子交换层析C.凝胶过滤D.疏水层析10.研发关键步骤包括？A.基因设计合成B.载体构建C.工程菌/细胞构建D.发酵纯化四、判断题（共10题，每题2分，共20分）1.大肠杆菌可生产完整三股螺旋胶原蛋白。（）2.脯氨酰羟化酶是正确折叠的必要条件。（）3.重组胶原蛋白免疫原性比动物源低。（）4.毕赤酵母产量比哺乳动物细胞高。（）5.胶原蛋白二级结构是α-螺旋。（）6.转谷氨酰胺酶可提高胶原蛋白稳定性。（）7.启动子的作用是终止转录。（）8.考马斯亮蓝法可检测纯度。（）9.医用敷料主要用于止血和伤口愈合。（）10.合成胶原蛋白无需病毒检测。（）五、简答题（共4题，每题5分，共20分）1.简述合成生物胶原蛋白与动物源的主要区别。2.简述重组胶原蛋白表达载体构建的主要步骤。3.简述发酵生产的关键控制参数及作用。4.简述重组胶原蛋白的主要检测项目及方法。六、讨论题（共2题，每题5分，共10分）1.讨论如何提高重组胶原蛋白的表达产量？2.讨论合成生物胶原蛋白在组织工程中的应用前景及挑战？参考答案一、填空题答案1.纤维；Ⅰ2.大肠杆菌3.甘氨酸；脯氨酰羟化酶4.限制酶；DNA连接酶5.十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶6.支架作用（或保湿、抗氧化）7.搅拌速率（或转速）8.三股9.细胞生物学10.标记基因（或复制原点）二、单项选择题答案1.C2.B3.B4.A5.B6.D7.D8.C9.A10.C三、多项选择题答案1.ABCD2.ABC3.ABCD4.AD5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABCD四、判断题答案1.×2.√3.√4.√5.×6.√7.×8.√9.√10.×五、简答题答案1.区别：①来源：重组依赖基因工程表达，无动物组织；动物源来自猪/牛等。②安全性：重组无病原体风险，免疫原性低；动物源可能带病原体。③定制性：重组可修饰序列优化功能；动物源序列固定。④产量：重组可规模化发酵，稳定；动物源受原料限制。2.构建步骤：①获取目的基因（PCR/人工合成）；②选择载体（匹配表达系统）；③酶切连接（相同限制酶切割+DNA连接酶）；④转化鉴定（导入感受态细胞，标记基因筛选+测序验证）。3.关键参数：①温度：影响生长/酶活性（如大肠杆菌37℃）；②pH：维持细胞环境（6.0-7.5）；③溶氧量：好氧发酵需充足，否则抑制合成；④诱导剂：如毕赤酵母甲醇诱导，浓度需适宜；⑤搅拌速率：平衡溶氧与剪切力。4.检测项目：①纯度：SDS、HPLC；②分子量：质谱、SDS；③结构：圆二色谱（三股螺旋）；④活性：细胞黏附/增殖实验；⑤安全性：免疫实验、内毒素检测；⑥含量：ELISA、考马斯亮蓝法。六、讨论题答案1.提高产量策略：①表达系统优化：选毕赤酵母/CHO细胞，敲除宿主蛋白酶基因；②载体优化：用强启动子（如AOX1）、密码子偏好性匹配；③发酵工艺：流加发酵减少副产物，控制温度/pH/溶氧；④折叠优化：共表达脯氨酰羟化酶；⑤纯化优化：高效层析组合减少损失。例如毕赤酵母密码子优化+甲醇流加