基因治疗载体制备设备运维技师（初级）考试试卷及答案

基因治疗载体制备设备运维技师（初级）考试试卷及答案一、填空题（10题，1分/题）1.基因治疗常用病毒载体包括慢病毒、______、腺相关病毒（AAV）等。2.离心设备的核心运维部件是______。3.生物安全柜操作时，手臂进出需避免扰动______。4.慢病毒浓缩常用______离心或超滤法。5.层析柱填料选择依据载体的______（如大小、电荷）。6.关键设备校准周期一般不超过______个月。7.无菌操作时用______擦拭超净工作台表面。8.设备运维记录需包含设备编号、______、操作内容。9.慢病毒转染试剂类型包括脂质体类和______类。10.适用于基因治疗载体操作的生物安全柜是______级。二、单项选择题（10题，2分/题）1.离心机转子未及时清洁最可能导致（）A.转速不稳B.转子腐蚀C.平衡失效D.电机烧毁2.细胞培养适宜CO₂浓度为（）A.3%B.5%C.7%D.10%3.不属于层析系统常见故障的是（）A.压力异常B.流速不稳C.转子不平衡D.峰形异常4.生物安全柜使用前无需检查（）A.风速B.过滤器完整性C.电源电压D.转子转速5.设备运维“一尘不染”指（）A.表面无灰B.无残留试剂C.无微生物污染D.以上都是6.慢病毒载体不具备的特点是（）A.整合基因组B.感染分裂细胞C.滴度高D.无免疫原性7.病毒灭活对照常用试剂是（）A.蛋白酶KB.胰酶C.青霉素D.链霉素8.离心机平衡时管重差不超过（）A.0.1gB.0.5gC.1.0gD.2.0g9.超净台紫外线消毒时间为（）A.10-15minB.20-30minC.30-45minD.45-60min10.设备故障记录保存期限至少（）A.1年B.2年C.3年D.5年三、多项选择题（10题，2分/题，多选/少选/错选不得分）1.设备运维基本要求包括（）A.定期清洁B.按时校准C.记录完整D.故障及时处理2.慢病毒制备常见污染类型（）A.细菌B.真菌C.支原体D.内毒素3.离心机转子维护要点（）A.用后清洁干燥B.避免碰撞C.检查腐蚀D.高温灭菌4.生物安全柜维护内容（）A.过滤器更换B.风速校准C.紫外灯检查D.台面清洁5.载体制备关键控制点（）A.无菌环境B.试剂纯度C.设备性能D.操作规范6.病毒浓缩方法（）A.超速离心B.超滤C.沉淀法D.层析法7.运维记录包含（）A.日期B.操作人员C.设备状态D.处理措施8.慢病毒转染影响因素（）A.细胞密度B.试剂用量C.病毒滴度D.培养温度9.个人防护装备（）A.防护服B.手套C.护目镜D.口罩10.层析压力过高原因（）A.填料堵塞B.流速过快C.样品浓度高D.管道堵塞四、判断题（10题，2分/题，√/×）1.慢病毒仅感染分裂细胞（）2.离心机使用前需检查转子平衡（）3.生物安全柜过滤器每半年换一次即可（）4.载体制备试剂无需无菌处理（）5.超净台可替代生物安全柜操作病毒（）6.校准记录需操作人员签字（）7.病毒滴度越高转染效率一定越高（）8.转子可长期浸泡水中保存（）9.生物安全柜禁止物品放风口（）10.故障处理后无需验证即可使用（）五、简答题（4题，5分/题）1.简述离心机日常维护步骤。2.生物安全柜使用前检查哪些关键项目？3.慢病毒制备常见污染类型及简单判断方法？4.设备校准的重要性是什么？六、讨论题（2题，5分/题，约200字）1.如何制定基因治疗载体制备设备的日常运维计划？2.慢病毒制备中离心机突然故障，对产品质量有何影响？如何应对？---答案部分一、填空题答案1.腺病毒2.转子3.气流4.超速5.理化性质6.6（或12）7.75%酒精8.运维日期9.阳离子聚合物10.II（B2）二、单项选择题答案1.B2.B3.C4.D5.D6.D7.A8.B9.B10.C三、多项选择题答案1.ABCD2.ABCD3.ABC4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD四、判断题答案1.×2.√3.×4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.×五、简答题答案1.①用后清洁转子（蒸馏水冲洗+干燥）；②检查转子腐蚀/划痕；③确认管重差≤0.5g；④清理腔室；⑤每月检查电机、校准转速。2.①风速（II级柜0.45-0.55m/s）；②HEPA过滤器完整性（烟雾测试）；③紫外灯工作状态；④电源/照明；⑤75%酒精擦拭台面。3.污染类型：细菌（培养基浑浊）、真菌（霉斑）、支原体（细胞生长慢/变形）。判断：观察培养基状态、细胞形态，必要时做微生物检测。4.①保证设备性能稳定，数据准确；②符合工艺要求，避免产品不合格；③满足GMP可追溯；④降低故障风险。六、讨论题答案1.按设备类型制定：①每日：清洁表面，检查生物安全柜风速、离心机电源；②每周：校准转速/pH，清洁内部；③每月：检查转子/过滤器，记录数据；④每半年：全面校准，换耗材；⑤建立台账，明确职责