(2025年)病理学技术(师)专业知识题库附答案

(2025年)病理学技术(师)专业知识题库附答案一、单项选择题（每题2分，共40分）1.组织固定时，10%中性福尔马林的pH值应控制在A.5.0-5.5B.6.0-6.5C.7.0-7.4D.8.0-8.5答案：C2.石蜡切片制作中，脱水步骤的正确顺序是A.70%→80%→90%→95%→无水乙醇B.50%→70%→80%→95%→无水乙醇C.80%→90%→95%→无水乙醇（Ⅰ）→无水乙醇（Ⅱ）D.95%→无水乙醇（Ⅰ）→无水乙醇（Ⅱ）→80%→70%答案：C3.冰冻切片时，组织块与OCT包埋剂的温度差异应控制在A.≤5℃B.≤10℃C.≤15℃D.≤20℃答案：B4.HE染色中，苏木精染色后分化的目的是A.增强细胞核着色B.去除胞浆多余染料C.使细胞核与胞浆对比更清晰D.延长染色时间答案：C5.免疫组化实验中，内源性生物素干扰最常见于A.肝脏、肾脏B.皮肤、肌肉C.神经、脂肪D.血液、淋巴答案：A6.原位杂交技术中，探针标记常用的放射性核素是A.³²PB.¹³¹IC.⁴⁵CaD.⁵⁹Fe答案：A7.组织标本运送至病理科的时间要求，常温下不超过A.1小时B.2小时C.4小时D.6小时答案：C8.瑞氏染色时，血涂片过厚会导致A.细胞重叠，染色过深B.细胞皱缩，染色过浅C.背景模糊，核质不清D.胞浆颗粒显示不清答案：A9.电镜标本固定时，戊二醛的常用浓度是A.0.5%-1%B.1%-2%C.2.5%-4%D.5%-6%答案：C10.免疫荧光染色中，荧光素与抗体的结合比例（F/P比）最佳范围是A.1-2B.2-3C.3-4D.4-5答案：B11.分子病理中，DNA提取时，蛋白酶K的作用是A.裂解细胞膜B.降解RNAC.消化蛋白质D.沉淀DNA答案：C12.组织包埋时，石蜡熔点选择的依据是A.环境温度B.组织类型C.切片厚度D.染色方法答案：A（注：通常环境温度高时选择高熔点石蜡，反之选择低熔点）13.特殊染色中，Masson三色染色显示胶原纤维的颜色是A.红色B.蓝色C.绿色D.黄色答案：B14.细胞爬片固定时，若需保留抗原性，常用固定液是A.甲醇-冰醋酸（3:1）B.4%多聚甲醛C.95%乙醇D.10%中性福尔马林答案：B15.病理切片质量控制中，“空泡”现象最可能的原因是A.脱水不彻底B.包埋时石蜡温度过高C.切片刀不锋利D.烤片温度过低答案：A（注：脱水不彻底导致石蜡渗透不良，形成空泡）16.荧光原位杂交（FISH）中，变性步骤的温度一般为A.55-60℃B.65-70℃C.75-80℃D.85-90℃答案：D17.脱落细胞涂片制作时，“拉片法”适用于A.稀薄液体标本B.黏稠液体标本C.血性标本D.脓性标本答案：A18.免疫组化结果判读时，阳性对照缺失的主要影响是A.无法判断抗体活性B.无法排除内源性干扰C.无法确定染色强度D.无法区分特异性与非特异性染色答案：A19.组织芯片制作中，供体蜡块的取样孔径通常为A.0.6mmB.1.2mmC.1.8mmD.2.4mm答案：A20.数字病理切片扫描时，分辨率要求至少达到A.0.5μm/像素B.1.0μm/像素C.1.5μm/像素D.2.0μm/像素答案：A二、判断题（每题1分，共10分）1.组织固定时，固定液体积应至少为组织体积的5倍。（√）2.冰冻切片染色后无需封片可直接观察。（×，需用甘油或专用封片剂）3.HE染色中，伊红染色过深时可用75%乙醇分化。（×，应用稀盐酸乙醇或自来水冲洗）4.免疫组化中，血清封闭的目的是阻断非特异性蛋白结合。（√）5.分子病理实验中，RNA提取时需全程在4℃以下操作。（×，冰上操作即可，避免反复冻融）6.电镜标本脱水时，丙酮浓度梯度为30%→50%→70%→80%→90%→100%。（√）7.特殊染色中，PAS染色显示糖原需先经淀粉酶消化对照。（√）8.细胞涂片固定应在细胞干燥后进行，避免细胞脱落。（×，应在细胞未干燥时固定）9.数字病理切片存储格式推荐使用TIFF或SVS。（√）10.组织芯片制作中，受体蜡块的孔间距应≥0.5mm。（√）三、简答题（每题8分，共40分）1.简述组织脱水不彻底的后果及预防措施。答：后果：①石蜡无法完全渗透，切片出现空泡或裂隙；②组织发脆，切片易碎裂；③染色时染料渗透不均，影响结果判读。预防措施：①根据组织类型调整脱水时间（如脂肪组织需延长）；②定期更换脱水剂，避免浓度降低；③脱水梯度设置合理（70%→80%→90%→95%→无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ）；④厚大组织需先修小至2-3mm厚度。2.列举HE染色中“核着色过浅”的可能原因及解决方法。答：可能原因及解决方法：①苏木精老化：更换新鲜苏木精液；②染色时间不足：延长苏木精染色时间（3-5分钟）；③分化过度：减少盐酸乙醇分化时间（5-10秒）；④返蓝不充分：延长自来水冲洗或氨水浸泡时间（至切片变蓝）；⑤组织固定不当（如甲醛固定不足）：确保固定液体积≥组织5倍，固定时间6-24小时。3.免疫组化实验中，“背景着色深”的常见原因及处理措施。答：常见原因及处理：①非特异性蛋白结合：增加血清封闭时间（30分钟）或使用BSA封闭；②内源性过氧化物酶残留：用3%过氧化氢孵育10分钟（需排除红细胞干扰）；③一抗浓度过高：梯度稀释优化抗体浓度；④洗涤不充分：增加PBS洗涤次数（3次，每次5分钟）；⑤孵育温度过高：4℃过夜或37℃1小时（避免室温过久）；⑥组织坏死或自溶：规范标本固定流程，缩短取材时间。4.简述RNA提取的关键步骤及质量控制指标。答：关键步骤：①组织匀浆：使用Trizol裂解液快速匀浆（避免RNA酶污染）；②分层：加入氯仿离心，取上清（避免接触中间层）；③沉淀：异丙醇沉淀RNA，75%乙醇洗涤；④溶解：DEPC水溶解RNA（65℃助溶）。质量控制指标：①浓度（Nanodrop测A260，1OD=40μg/mL）；②纯度（A260/A280≥1.8，A260/A230≥2.0）；③完整性（琼脂糖凝胶电泳观察28S、18S条带，28S/18S≈2:1）。5.病理技术质量控制中，“切片质量”的评价标准包括哪些？答：评价标准：①厚度均匀（3-5μm），无皱褶、裂隙；②组织无收缩、变形（固定充分）；③染色对比清晰（核浆分明，红蓝适度）；④无刀痕、颤痕（刀片锋利，切片机稳定）；⑤封片无气泡、溢胶（中性树胶量适中，盖玻片轻压）；⑥标签清晰（与申请单信息一致）。四、案例分析题（10分）某医院病理科收到一例乳腺癌手术标本，体积约5cm×4cm×3cm，临床要求行HE染色及ER、PR、HER2免疫组化检测。请描述从标本接收到出片的完整技术流程。答：完整流程：①标本接收：核对信息（姓名、ID、部位），测量体积并记录，4℃暂存≤2小时；②取材：沿最大切面切开，选取肿瘤中心及边缘组织（2-3mm厚），每块≤2cm×1.5cm，标记“肿瘤”“切缘”；③固定：10%中性福尔马林（体积≥组织5倍），固定6-24小时（避免过久影响抗原）；④脱水：70%（2h）→80%（2h）→90%（2h）→95%（2h）→无水乙醇Ⅰ（1h）→无水乙醇Ⅱ（1h）；⑤透明：二甲苯Ⅰ（30min）→二甲苯Ⅱ（30min）（避免过度透明致组织变脆）；⑥包埋：石蜡（熔点56-58℃，环境温度25℃），定向包埋（肿瘤面朝下）；⑦切片：厚度4μm，展片水温45℃，捞片至载玻片（防脱片处理）；⑧烤片：60℃烤片2小时（促进贴附）；⑨HE染色：脱蜡（二甲苯2×5min）→梯度乙醇复水→苏木精染色3min→盐酸乙醇分化5秒→自来水返蓝10min→伊红染色1min→梯度乙醇脱水→二甲苯透明→中性树胶封片；⑩免疫