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2025年大学四年级(生物工程)生物分离工程试题及答案

(考试时间:90分钟满分100分)班级______姓名______第I卷(选择题共30分)答题要求:每题只有一个正确答案,请将正确答案的序号填在括号内。(总共10题,每题3分,每题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的)1.以下哪种生物分离技术常用于从发酵液中分离蛋白质?()A.离子交换色谱B.萃取C.过滤D.结晶2.关于亲和色谱,下列说法错误的是()A.利用生物分子间特异性亲和力进行分离B.配基与目标分子的结合具有高度特异性C.洗脱条件较为温和D.适用于所有生物分子的分离3.在离心分离中,沉降系数与下列哪个因素无关?()A.颗粒大小B.颗粒形状C.介质密度D.离心转速4.超滤过程中,截留分子量的大小与()有关。A.膜材料B.操作压力C.温度D.料液浓度5.以下哪种物质可作为离子交换树脂的活性基团?()A.磺酸基B.羟基C.甲基D.苯基6.凝胶过滤色谱中,最先被洗脱出来的是()A.大分子物质B.小分子物质C.中等分子物质D.无法确定7.萃取操作中,分配系数越大,说明()A.溶质在萃取相中的浓度越低B.萃取效果越差C.溶质越易被萃取D.两相的互溶性越好8.蛋白质等生物大分子在等电点时的特点是()A.溶解度最大B.稳定性最好C.电荷为零D.最易沉淀9.以下哪种干燥方法适合对热敏感的生物制品?()A.热风干燥B.真空干燥C.喷雾干燥D.冷冻干燥10.在生物分离工程中,常用的吸附剂不包括()A.活性炭B.硅胶C.离子交换树脂D.氧化铝第II卷(非选择题共70分)二、填空题(每题3分,共15分)1.生物分离工程的主要任务是从发酵液等生物体系中分离、纯化目标产物,包括______、______、______等过程。2.离子交换色谱的操作步骤一般包括______、______、______、______。3.超滤膜的孔径大小通常用______来表示。4.亲和色谱的配基可以是______、______、______等。5.常用的蛋白质沉淀方法有______、______、______。三、判断题(每题2分,共10分)1.离心分离时,离心力越大,沉降速度越快,所以离心转速越高越好。()2.离子交换树脂的交联度越高,其交换容量越大。()3.凝胶过滤色谱中,柱子越长,分离效果越好。()4.在萃取过程中,溶剂的选择只需要考虑对溶质的溶解度。()5.冷冻干燥可以在低温下进行,所以不会对生物制品的活性造成影响。()四、简答题(每题10分,共30分)材料:在生物制药领域,需要从发酵液中分离一种特定的蛋白质。1.请简述离子交换色谱分离该蛋白质的原理及操作要点。2.若采用超滤技术对发酵液进行预处理,应如何选择超滤膜的截留分子量?3.如何利用亲和色谱进一步纯化该蛋白质?请说明亲和配基的选择及洗脱方法。五、综合分析题(共15分)材料:某生物工程公司计划生产一种新型生物酶制剂。发酵液中含有多种杂质和其他蛋白质。1.设计一个综合的生物分离流程,从发酵液中获得高纯度的目标生物酶制剂。(要求至少包含三种主要的分离技术,并简要说明各技术的作用)2.在分离过程中,如何保证目标生物酶制剂的活性不受损失?请提出至少三点措施。答案:一、选择题1.A2.D3.D4.A5.A6.A7.C8.C9.D10.C二、填空题1.细胞破碎、固液分离、初步纯化、高度纯化2.装柱、平衡、上样、洗脱、再生3.截留分子量4.抗体、抗原、辅酶5.盐析、有机溶剂沉淀、等电点沉淀三、判断题1.×2.×3.×4.×5.×四、简答题1.离子交换色谱原理:利用蛋白质在不同pH值下所带电荷不同,与离子交换树脂上的活性基团进行离子交换。操作要点:选择合适的离子交换树脂,控制pH值和离子强度进行上样、洗脱等操作。2.根据发酵液中杂质和其他蛋白质的分子量大小,选择略小于目标蛋白质分子量的截留分子量的超滤膜,以保证目标蛋白质能通过,杂质被截留。3.选择与目标蛋白质具有特异性亲和力的配基,如抗体等。将配基固定在载体上制成亲和色谱柱。上样后,目标蛋白质与配基特异性结合,其他杂质流出。采用温和的洗脱方法,如改变pH值、离子强度或加入竞争抑制剂等,使目标蛋白质从配基上解离下来。五、综合分析题1.流程:首先采用离心分离去除发酵液中的细胞碎片等固体杂质;然后用超滤技术进一步去除小分子杂质;接着通过离子交换色谱初步分离目标生物酶与其他蛋白质;最后用亲和色谱进行高度纯化。

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