2025年肠杆菌科库及答案

2025年肠杆菌科库及答案1.肠杆菌科细菌的基本生物学特性包括哪些核心要点？肠杆菌科细菌均为革兰阴性杆菌，无芽胞，多数菌株具有周鞭毛（如大肠埃希菌），部分菌株有荚膜（如肺炎克雷伯菌）或菌毛；代谢类型为兼性厌氧，氧化酶试验阴性（与弧菌科、非发酵菌鉴别关键）；能发酵葡萄糖产酸或产酸产气（伤寒沙门菌例外，仅产酸），触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐；DNAG+C含量为38%-60%，种属间通过16SrRNA基因序列差异区分。2.埃希菌属与克雷伯菌属的主要鉴别依据是什么？鉴别要点包括：①动力试验：埃希菌属（如大肠埃希菌）有周鞭毛，36℃培养动力阳性；克雷伯菌属（如肺炎克雷伯菌）无鞭毛，动力阴性。②脲酶试验：克雷伯菌属脲酶阳性（4小时内显色），埃希菌属脲酶阴性（或延迟阳性）。③黏液型菌落：克雷伯菌属在血平板上常形成大而黏稠、易拉丝的菌落，埃希菌属菌落较湿润但无拉丝现象。④V-P试验：克雷伯菌属V-P试验阳性（产乙酰甲基甲醇），埃希菌属通常阴性。3.肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）的致病机制分为哪几个阶段？ETEC致病分三阶段：①黏附定植：通过菌毛黏附素（如CFA/I、CFA/II）与小肠黏膜上皮细胞表面受体（如GM1神经节苷脂）结合，避免被肠蠕动清除。②毒素分泌：定植后产生热不稳定毒素（LT）和/或热稳定毒素（ST）。LT为A-B亚单位毒素，A亚单位激活肠黏膜细胞腺苷酸环化酶，使cAMP水平升高；ST通过激活鸟苷酸环化酶增加cGMP水平。③液体分泌亢进：cAMP/cGMP升高导致肠黏膜细胞主动分泌Cl⁻、HCO₃⁻并抑制Na⁺吸收，最终引起水样腹泻。4.2025年全球肠杆菌科细菌耐药监测显示，产ESBL菌株的主要流行基因型有哪些变化？2025年监测数据显示，CTX-M型ESBL（尤其是CTX-M-15、CTX-M-14）仍为全球优势基因型（占比约78%），在亚洲和欧洲部分地区，CTX-M-27型因质粒传播加速，占比升至12%；SHV型（如SHV-12）在拉丁美洲流行率维持在15%-20%；TEM型（如TEM-52）因克拉维酸抑制效果下降，在北美部分社区获得性感染中检出率回升至8%。值得注意的是，新型ESBL如OXA-172（兼具部分碳青霉烯酶活性）在东南亚医院环境中出现局部暴发。5.实验室鉴定肠杆菌科细菌时，常规生化反应组合应包含哪些项目？常规生化反应需覆盖：①糖发酵试验：葡萄糖（产酸/产气）、乳糖（区分致病菌与非致病菌，如沙门菌属不发酵乳糖）、甘露醇、蔗糖。②氨基酸代谢试验：靛基质（吲哚）试验（大肠埃希菌阳性，产气肠杆菌阴性）、甲基红（MR）试验（大肠埃希菌阳性，克雷伯菌属阴性）、V-P试验（克雷伯菌属阳性）。③酶类试验：脲酶（克雷伯菌属阳性）、苯丙氨酸脱氨酶（变形杆菌属阳性）。④其他：枸橼酸盐利用试验（产气肠杆菌阳性，大肠埃希菌阴性）、硫化氢产生（沙门菌属、变形杆菌属阳性）。6.碳青霉烯耐药肠杆菌科（CRE）的主要耐药机制有哪些？CRE耐药机制包括：①碳青霉烯酶产生：A类（如KPC-2、KPC-3）、B类（金属酶，如NDM-1、IMP-4）、D类（如OXA-48、OXA-181）β-内酰胺酶，其中B类酶可水解所有β-内酰胺类抗生素（除单环类）。②外膜蛋白缺失：主要为孔蛋白（如OmpC、OmpF）表达下调或缺失，减少碳青霉烯类进入胞内。③主动外排系统激活：如AcrAB-TolC系统过度表达，将胞内药物泵出。临床分离株中，85%以上CRE由碳青霉烯酶介导耐药，其中NDM型在印度次大陆占比超60%，KPC型在北美占比约55%。7.2025年针对产KPC型CRE感染的治疗推荐方案是什么？2025年《多重耐药革兰阴性菌感染治疗指南》推荐：①血流感染或重症感染：首选头孢他啶/阿维巴坦（2g/0.5gq8h）联合美罗培南（1gq8h），或亚胺培南/西司他丁/雷利巴坦（0.5g/0.5g/0.25gq6h）单药治疗（适用于MIC≤4μg/mL）。②尿路感染：若菌株对替加环素敏感（MIC≤2μg/mL），可选用替加环素（首剂100mg，维持50mgq12h）；或根据药敏使用磷霉素氨丁三醇（3gq24h，仅适用于下尿路感染）。③需注意：产KPC菌株常合并对氟喹诺酮类、氨基糖苷类耐药，经验性治疗需避免单药使用这些药物。8.沙门菌属的血清学分型依据是什么？主要抗原包括哪些？沙门菌属血清学分型基于O抗原（菌体抗原，脂多糖核心多糖侧链）、H抗原（鞭毛抗原，蛋白质）和Vi抗原（荚膜抗原，仅部分菌株如伤寒沙门菌具有）。O抗原为分组依据（如A组O2、B组O4、D组O9），H抗原分第1相（特异性，如a、b、d）和第2相（非特异性，如1、2、3），用于定种（如伤寒沙门菌O9+Hd+Vi）。2025年新发现的O抗原变异株（如O55型）已被纳入WHO沙门菌血清学分型数据库。9.肠杆菌科细菌引起的医院感染中，最常见的感染类型及高危因素有哪些？医院感染类型前三位为：①尿路感染（占45%），主要与导尿管留置相关；②肺炎（占30%），多见于机械通气患者；③血流感染（占18%），与中心静脉导管、手术切口感染相关。高危因素包括：入住ICU（尤其是≥7天）、使用广谱抗生素（如三代头孢≥5天）、免疫抑制状态（如化疗、激素治疗）、高龄（≥65岁）、侵入性操作（如血液透析）。2025年数据显示，ICU内肠杆菌科医院感染发病率较2020年上升12%，与CRE定植率增加直接相关。10.简述MALDI-TOFMS在肠杆菌科鉴定中的技术优势及局限性。优势：①快速：从菌落制备到出结果仅需5-10分钟（传统生化鉴定需4-24小时）；②准确率高：对常见种（如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌）的种水平鉴定准确率>95%；③成本低：单次鉴定成本约为传统方法的1/3；④可同时检测少量混合菌（如2种菌的混合样本）。局限性：①无法区分近缘种（如肺炎克雷伯菌与臭鼻克雷伯菌）；②对变异菌株（如缺失主要核糖体蛋白的突变株）可能误判；③数据库需定期更新（2025年主流数据库已包含1800+肠杆菌科菌株图谱）；④无法直接提供药敏信息（需结合其他方法）。11.肠致病性大肠埃希菌（EPEC）的特征性病变是什么？其分子机制如何？EPEC引起的特征性病变为“黏附-脱落”（A/E）损伤：细菌黏附肠黏膜上皮细胞后，导致局部微绒毛破坏、细胞骨架重排，最终形成紧密黏附的杯状结构。分子机制：①Bfp菌毛（bundle-formingpili）介导初始黏附；②Ⅲ型分泌系统（T3SS）将效应蛋白Tir（translocatedintiminreceptor）注入宿主细胞，Tir插入细胞膜后与细菌表面的Intimin蛋白结合，触发宿主细胞内信号通路（如酪氨酸磷酸化），招募肌动蛋白等细胞骨架蛋白，形成A/E损伤。12.2025年新型β-内酰胺酶抑制剂复方制剂有哪些？针对肠杆菌科的覆盖范围如何？2025年新获批的复方制剂包括：①头孢地尔/阿维巴坦（Cefiderocol/Avibactam）：对产金属酶（如NDM）的CRE有效（因头孢地尔通过铁载体通路进入胞内，不受金属酶影响）；②美罗培南/法硼巴坦（Meropenem/Vaborbactam）：增强对KPC型CRE的活性（法硼巴坦抑制A类和C类β-内酰胺酶）；③替比培南/西司他丁（Tebipenem/Cilastatin）：口服碳青霉烯类，对产ESBL肠杆菌科引起的尿路感染有效（西司他丁抑制肾小管二肽酶，提高尿药浓度）。这些药物对传统耐药机制（如ESBL、AmpC酶）的覆盖度>90%，但对OXA-48型CRE的敏感性仍需结合药敏结果。13.变形杆菌属的主要致病特点及实验室鉴定注意事项有哪些？致病特点：①迁徙生长现象：在普通琼脂平板上呈扩散性生长（因周鞭毛活跃），易污染其他菌落；②产尿素酶：分解尿素产氨，导致尿液pH升高，易形成磷酸铵镁结石（与复杂性尿路感染相关）；③部分菌株（如奇异变形杆菌）可产生溶血素和蛋白酶，增强组织侵袭力。实验室鉴定注意：①需使用含0.1%石碳酸或4%琼脂的培养基抑制迁徙生长；②苯丙氨酸脱氨酶试验阳性（与其他肠杆菌科鉴别关键）；③硫化氢试验阳性（TSI培养基底层变黑）；④脲酶试验强阳性（1小时内显色）。14.肠杆菌科细菌的毒力岛（PAI）通常携带哪些功能基因？其水平转移机制是什么？PAI携带的功能基因包括：①黏附相关基因（如eae编码Intimin，bfp编码Bfp菌毛）；②毒素基因（如stx编码志贺毒素，hly编码溶血素）；③分泌系统基因（如esc编码T3SS）；④铁获取系统基因（如ybt编码耶尔森菌铁载体）；⑤调控基因（如ler调控毒力基因表达）。水平转移机制主要通过噬菌体（转导）、质粒（接合）或整合子（转化）介导，其中接合转移是肠杆菌科PAI扩散的主要方式（如大肠埃希菌的pO157质粒可通过性菌毛转移至其他菌株）。15.2025年社区获得性肠杆菌科感染的流行病学特点有哪些变化？变化包括：①耐药谱变迁：产ESBL大肠埃希菌在社区尿路感染中的检出率从2020年的18%升至2025年的27%，其中CTX-M-15型占比超60%；②血清型分布：肺炎克雷伯菌社区获得性肝脓肿的优势血清型从K1/K2型转变为ST11型（携带rmpA2毒力基因及blaCTX-M-15）；③易感人群扩展：既往健康的年轻人（18-35岁）因外卖饮食增加（交叉污染风险），感染率较5年前上升15%；④病原体谱变化：阴沟肠杆菌（现归为肠杆菌属）在社区皮肤软组织感染中的检出率升至8%（原<2%），与抗生素自我药疗导致的菌群失调相关。16.实验室检测产碳青霉烯酶肠杆菌科（CPE）的表型方法有哪些？各自的优缺点是什么？表型方法包括：①改良Hodge试验（MHT）：利用美罗培南纸片诱导碳青霉烯酶产生，观察大肠埃希菌ATCC25922的抑菌圈变形（阳性提示产碳青霉烯酶）。优点：操作简单，成本低；缺点：灵敏度低（对金属酶不敏感），需24小时观察。②CarbaNP试验：检测细菌裂解液是否水解亚胺培南（产酸使指示剂变色）。优点：2小时内出结果，对A类、B类、D类酶均敏感；缺点：需严格无菌操作，污染可能导致假阳性。③显色培养基（如CHROMagarKPC）：通过颜色反应区分产KPC、NDM等酶的菌株。优点：可同时筛查多种CPE；缺点：特异性受接种量影响（需5-10个菌落），对混合感染可能漏检。2025年推荐MHT联合CarbaNP试验作为基层实验室的初筛组合。17.耶尔森菌属（肠杆菌科）的主要致病种及临床特征是什么？主要致病种为小肠结肠炎耶尔森菌（Y.enterocolitica）和假结核耶尔森菌（Y.pseudotuberculosis）。小肠结肠炎耶尔森菌：①经粪-口传播（污染食物/水），好发于冬季；②临床表现为急性胃肠炎（发热、腹痛、腹泻）、肠系膜淋巴结炎（易误诊为阑尾炎），免疫低下者可引发败血症。假结核耶尔森菌：①主要感染动物（如啮齿类），人类通过接触感染；②临床表现为发热、结节性红斑（与超抗原激活T细胞相关）、肝脾脓肿，儿童多见。2025年监测显示，小肠结肠炎耶尔森菌O:3血清型在欧洲的感染率较2020年上升20%，与生奶消费增加相关。18.肠杆菌科细菌的生物被膜形成对感染治疗的影响是什么？目前有哪些针对性干预策略？生物被膜影响：①细菌被包裹在胞外多糖基质中，减少抗生素渗透（如碳青霉烯类在生物被膜中的浓度仅为游离菌的1/10）；②被膜内细菌代谢活性降低，对抗生素（如β-内酰胺类，作用于活跃分裂细胞）敏感性下降；③诱导耐药基因水平转移（被膜内细菌密度高，接合频率增加）。干预策略：①新型抗生素：如达托霉素（破坏生物被膜基质）、奥马环素（穿透被膜能力强）；②酶类药物：如DNA酶（降解被膜中的eDNA）、藻酸酶（分解铜绿假单胞菌被膜，但对肠杆菌科效果有限）；③噬菌体疗法：筛选能裂解被膜菌的噬菌体（如针对大肠埃希菌的φEcoM-GJ1）；④物理方法：如低频超声破坏被膜结构（已在尿路感染动物模型中验证有效）。19.2025年肠杆菌科细菌的全基因组测序（WGS）在感染控制中的应用有哪些进展？进展包括：①爆发追踪：通过单核苷酸多态性（SNP）分析，48小时内可确定医院内CRE爆发的传播链（传统脉冲场凝胶电泳需5-7天）；②耐药基因预测：WGS可同时检测blaKPC、blaNDM、qnr（喹诺酮耐药）、rmt（氨基糖苷耐药）等基因，指导精准治疗；③毒力评估：分析毒力岛（如PAI-1、PAI-2）和毒力基因（如stx、eae）的携带情况，判断菌株致病力（如ST131型大肠埃希菌的WGS可提示是否为高毒力克隆）；④公共卫生监测：全球WGS数据库（如EnteroBase）已收录超100万株肠杆菌科序列，支持跨区域耐药/毒力趋势分析。20.针对肠杆菌科细菌的疫苗研发现状及2025年突破点是什么？现状：目前无获