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文档简介

丙肝病原学与实验室检测

病原学实验室检测HCV病原学黄病毒科(Flaviviridae)丙型肝炎病毒属有包膜,直径50nm单股正链RNA(9.6kb)3000氨基酸组成的多聚蛋白HCV基因组结构及病毒蛋白HCV病毒的基因结构及免疫诊断资源core

E1

E2NS2

NS3

NS4

NS5

各种基因产物作为免疫诊断的特异性:

NS3>core>NS4>NS5

HCV免疫诊断抗原的策略NS3+coreNS3+core+NS4NS3+core+NS4+NS5

(第三代EIA试剂)结合囊泡融合与病毒释放RNA复制正链负链翻译与多肽链加工脱壳与膜融合病毒装配与成熟胞饮作用HCV生活周期DavisGLetal.SeminLiverDis.1999;19(suppl1):103-112.国际上公认的HCV传播途径血液传播经破损的皮肤和黏膜传播母婴传播性接触传播一些国家HCV流行状况及

主要传播危险因素国家主要危险因素成人HCV感染率印度38-75%输血1-1.9%注射器重复使用医源性日本30%输血1-1.9%污染注射器静脉注射青少年静脉吸毒韩国39.7-45.7%输血1.30%内窥镜检查史针灸泰国46.7%静脉吸毒2.80%32.2%纹身18.8%输血越南输血2-2.9%静脉吸毒纹身HCV感染的自然史20位患者20%痊愈100位HCV急性感染80位患者80%持续感染24位患者30%稳定,慢性,无进展28位患者28位患者56位患者接受抗病毒治疗持久性应答(50%)肝脏疾病终末期,肝细胞癌,肝脏移植,死亡治疗失败(50%)30%呈严重进展40%有不同程度的进展32位患者24位患者HCV感染的血清学症状±暴露后时间滴度抗-HCVALT正常01234561234年月HCV-RNAHCV核心抗原症状±暴露后时间滴度抗-HCVALT正常01234561234年月HCV-RNAHCV核心抗原急性感染痊愈急性感染进展为慢性感染11血清抗-HCV检测能够帮助我们初步判断是否感染(过)HCV但不能确定感染状态急/慢性HCV感染患者丙肝抗体假阴性问题HCV窗口期—TRANSFUSIONVolume40,February2000全球丙肝策略:治疗作为预防丙肝能够治愈,但大多数患者没有得到治疗丙肝治疗药物发展迅速:普通干扰素+利巴韦林(48周)长效干扰素(聚乙二醇干扰素)+利巴韦林(48周)长效干扰素+利巴韦林+蛋白酶抑制剂(Boceprevir波西普韦/Telaprevir特拉普韦)(24周)HCVNS5A复制复合体抑制剂Daclatasvir(12周)HCVRNA聚合酶抑制剂Sofosbuvi(12周)HCV检测方法《丙型肝炎病毒实验室检测技术规范》常用的HCV检测方法HCV抗体检测HCV抗原检测HCV核酸检测HCV基因型检测HCV抗体检测抗HCV检测的目的可用于诊断、血液筛查和流行病学监测等以诊断为目的的检测是为了确定个体HCV感染状况以血液筛查为目的的检测是为了防止经血传播HCV,包括献血员筛查和原料血浆筛查。以流行病监测为目的的检测是为了了解人群HCV感染率及其变化趋势※血清抗-HCV检测能够帮助我们初步判断是否感染(过)

HCV但不能确定感染状态HCVBlot3.0183+质控带

(血清加样)核抗原带NS3-1NS3-2NS4NS51+质控带(试剂加样)GST质控带HCV蛋白确证试剂包含HCV蛋白血清质控带血清转换期样本注:1,2,3为阳性样本4为阴性样本HCV抗原检测HCV抗原检测的目的HCV血清阳转前的早期急性丙型肝炎辅助诊断,尤其有助于HCV感染窗口期、抗HCV检测结果不确定或HCV阳性母亲所生婴儿是否罹患丙型肝炎的辅助诊断。免疫受损或先天性免疫缺陷群体如HIV感染者、长期透析的肾病患者、器官移植者等HCV感染的筛查。抗HCV阳性感染者的病毒血症分析。HCV感染者治疗前后病毒血症追踪分析。20丙肝病毒核心抗原(HCV-Core)检测HCV抗原检测结果解释HCV核酸检测HCV核酸检测的目的HCVRNA定性检测可用于血液筛查领域。可使用单份样品或多份样品集合的方法,对献血者血液及单采血浆站的原料血浆进行核酸检测,降低输血残余风险度。HCVRNA定性检测可用于对HCV抗体阴性的高危人群样品进行核酸检测,及时发现窗口期感染。HCVRNA定量检测主要作为抗病毒治疗疗效的判断指标。HCV核酸定量检测用于临床治疗策略及结果报告HCV基因型检测HCV分为6个基因型中国以1b和2a基因型常见,1b型对IFN应答差基因6型主要见于香港和澳门HCV的检测策略和流程按检测的目的HCV感染疫情报告(监测)HCV血液筛查HCV临床诊断HCV感染疫情报告的检测流程HCV血液筛查检测流程HCV核酸定性检测用于血液筛查策略及结果报告HCV临床诊断筛查检测流程HCV临床诊断补充

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