2026年生物实验技术操作判断题库

2026年生物实验技术操作判断题库一、分子生物学实验技术（共10题，每题2分）1.PCR扩增反应体系中，引物二聚体过多会导致特异性扩增降低。正确/错误2.凝胶电泳分离DNA时，DNA片段越小，迁移速度越快。正确/错误3.限制性内切酶识别和切割DNA序列具有特异性，不同酶的识别位点可能重叠。正确/错误4.RT-PCR技术可用于检测基因表达水平，但无法区分转录本丰度差异。正确/错误5.基因芯片技术可以同时检测成千上万个基因的表达，但成本较高。正确/错误6.荧光定量PCR通过荧光信号累积曲线计算起始模板量，无需标准曲线。正确/错误7.DNA测序中，Sanger测序法适用于大规模测序项目。正确/错误8.CRISPR-Cas9技术通过单链向导RNA（gRNA）识别靶向序列进行基因编辑。正确/错误9.亚克隆是将PCR产物插入到载体中，通常使用EcoRI和HindIII双酶切。正确/错误10.蛋白质印迹（WesternBlot）检测目标蛋白时，一抗和二抗需使用不同物种来源。正确/错误二、细胞培养与遗传转化实验技术（共10题，每题2分）11.动物细胞培养需在无菌环境下进行，常用胰蛋白酶消化贴壁细胞。正确/错误12.植物组织培养中，愈伤组织分化需要光照和暗培养交替进行。正确/错误13.基因枪转化法适用于植物，但效率低于农杆菌介导转化。正确/错误14.显微注射技术可将外源DNA直接导入动物细胞核，操作复杂但成功率低。正确/错误15.干细胞培养需添加抑制因子（如CHIR99021）促进自我更新。正确/错误16.细胞凋亡过程中，线粒体膜电位降低，Caspase活性增强。正确/错误17.流式细胞术可检测细胞周期，但无法区分凋亡细胞和坏死细胞。正确/错误18.细胞融合技术中，电融合比化学融合的效率更高。正确/错误19.转染试剂（如Lipofectamine）需根据细胞类型选择最佳浓度。正确/错误20.基因编辑后，脱靶效应可能发生在非靶向位点，需通过测序验证。正确/错误三、生物化学实验技术（共10题，每题2分）21.酶动力学实验中，米氏常数（Km）表示酶与底物亲和力，Km越小亲和力越强。正确/错误22.比色法测定蛋白质浓度时，Bradford法比Lowry法更灵敏。正确/错误23.琼脂糖凝胶电泳分离蛋白质时，分子量越小迁移速度越快。正确/错误24.高效液相色谱（HPLC）可分离复杂混合物，但无法检测无紫外吸收物质。正确/错误25.氨基酸测序通过Edman降解法逐步测定多肽序列，但只能检测C端氨基酸。正确/错误26.核磁共振（NMR）谱可用于蛋白质结构解析，但耗时较长。正确/错误27.质谱（MS）通过离子化效率区分同分异构体，但灵敏度受基质影响。正确/错误28.酶联免疫吸附试验（ELISA）中，TMB显色法比HRP显色法稳定性更高。正确/错误29.糖化反应中，晚期糖基化终末产物（AGEs）的形成需加热促进。正确/错误30.乳酸脱氢酶（LDH）释放实验可检测细胞损伤，但无法区分凋亡和坏死。正确/错误四、微生物学实验技术（共10题，每题2分）31.平板划线法分离纯培养时，第4区划线应呈点状分布。正确/错误32.革兰氏染色中，染料脱色后紫色菌为革兰氏阴性，红色菌为阳性。正确/错误33.显微镜计数法测定菌液浓度时，需使用血球计数板和显微镜。正确/错误34.抗生素敏感性试验中，纸片扩散法比琼脂稀释法更常用。正确/错误35.微生物基因组测序中，Illumina平台适用于宏基因组分析。正确/错误36.选择性培养基（如MAC）可抑制肠道菌群生长，富集目标细菌。正确/错误37.菌落杂交技术需用放射性或荧光标记探针检测特定DNA片段。正确/错误38.发酵工程中，厌氧培养需使用厌氧罐并排除氧气。正确/错误39.噬菌体治疗中，溶原性噬菌体可整合宿主基因组。正确/错误40.微生物菌种保藏需定期转种，冷冻干燥法优于超低温冷冻。正确/错误五、免疫学实验技术（共10题，每题2分）41.间接ELISA中，一抗为特异性抗体，二抗为酶标抗体。正确/错误42.流式细胞术检测细胞表面标志物时，需使用荧光标记抗体。正确/错误43.免疫印迹（WesternBlot）中，蛋白转移后需封闭非特异性位点。正确/错误44.单克隆抗体生产需通过杂交瘤技术筛选阳性细胞。正确/错误45.ELISPOT技术可检测细胞因子分泌，但无法区分活细胞和死细胞。正确/错误46.免疫荧光染色中，DAPI染料可用于细胞核复染。正确/错误47.抗体效价滴定需通过系列稀释法确定最佳工作浓度。正确/错误48.细胞因子芯片可同时检测多种细胞因子，但交叉反应可能干扰结果。正确/错误49.补体依赖细胞毒试验（CDC）需检测抗体与补体结合活性。正确/错误50.免疫磁珠分选技术可富集目标细胞，但可能导致细胞活性下降。正确/错误答案与解析一、分子生物学实验技术（答案与解析）1.正确解析：引物二聚体是引物自身或引物间非特异性结合产物，会竞争模板，降低特异性扩增效率。2.正确解析：电泳时，分子尺寸越小，受电场力影响越大，迁移速度越快。3.正确解析：不同限制性内切酶识别位点不同，但可能存在重叠序列，导致切割位点相互影响。4.错误解析：RT-PCR可区分转录本丰度差异，通过比较Ct值可量化表达水平。5.正确解析：基因芯片技术成本较高，但可高通量检测基因表达。6.正确解析：荧光定量PCR通过实时监测荧光信号累积计算模板量，无需标准曲线（但可用标准曲线校准）。7.错误解析：Sanger测序法适用于小规模测序，高通量测序常用NGS技术。8.正确解析：CRISPR-Cas9通过gRNA识别靶向DNA序列，Cas9蛋白切割DNA。9.正确解析：EcoRI和HindIII是常用双酶切位点，可避免载体自身环化。10.正确解析：一抗和二抗需使用不同物种来源（如兔抗鼠、羊抗兔），避免交叉反应。二、细胞培养与遗传转化实验技术（答案与解析）11.正确解析：胰蛋白酶消化可松解贴壁细胞，但需避免过度消化导致细胞损伤。12.正确解析：愈伤组织分化需光照（营养生长）和暗培养（诱导分化）交替。13.错误解析：农杆菌介导转化效率高于基因枪，但基因枪适用于非转化材料（如木质部）。14.正确解析：显微注射操作复杂，成功率低于电穿孔等现代技术，但适用性广。15.正确解析：CHIR99021等抑制剂可抑制Notch信号，促进干细胞自我更新。16.正确解析：凋亡时线粒体膜电位降低，释放Caspase激活因子。17.错误解析：流式细胞术通过凋亡标记（如AnnexinV）和PI染色区分凋亡与坏死。18.正确解析：电融合利用电场穿孔细胞膜，效率高于化学方法（如聚乙二醇）。19.正确解析：不同细胞对转染试剂敏感度不同，需优化浓度。20.正确解析：脱靶效应是基因编辑风险，需通过测序验证编辑准确性。三、生物化学实验技术（答案与解析）21.正确解析：Km反映酶与底物亲和力，Km越小亲和力越强。22.错误解析：Bradford法灵敏度高，但Lowry法更准确测定碱性蛋白。23.错误解析：琼脂糖电泳分离蛋白质时，分子量越大迁移速度越快（因分子筛效应）。24.错误解析：HPLC可检测无紫外吸收物质，通过荧光、质谱等检测器。25.正确解析：Edman降解法逐个切除C端氨基酸，测定序列。26.正确解析：NMR解析蛋白质结构耗时，但无需纯化。27.正确解析：质谱通过离子化效率区分分子，基质效应需优化条件。28.错误解析：TMB显色法稳定性高，HRP显色法灵敏度更高。29.正确解析：糖化反应需加热促进美拉德反应和AGEs形成。30.错误解析：LDH释放区分坏死（膜破裂）和凋亡（线粒体损伤）。四、微生物学实验技术（答案与解析）31.正确解析：平板划线法第4区应呈点状，确保单菌落分离。32.正确解析：革兰氏染色区分细胞壁结构，阴性菌脱色后呈红色。33.正确解析：血球计数板和显微镜是显微镜计数法必需工具。34.正确解析：纸片扩散法操作简便，临床常用；琼脂稀释法精确。35.错误解析：Illumina平台适用于全基因组测序，宏基因组用454或IonTorrent。36.正确解析：MAC培养基抑制革兰氏阴性菌，富集肠杆菌科。37.正确解析：菌落杂交需标记探针杂交目标DNA片段。38.正确解析：厌氧培养需排除氧气，厌氧罐可维持无氧环境。39.正确解析：溶原性噬菌体整合宿主基因组，形成prophage。40.错误解析：冷冻干燥法长期保藏优于超低温冷冻（-80℃）。五、免疫学实验技术（答案与解析）41.正确解析：间接ELISA通过二抗放大信号，一抗特异性结合目标抗原。42.正确解析：流式细胞术需荧光抗体标记表面标志物。43.正确解析：封闭可减少非特异性结合，提高信号特异性。44.正确解析：杂交瘤技术通过融合B细胞和骨髓瘤细胞产生单克隆。45.错误解析：EL