2024-2025学年四川省天立集团高二下学期期中联测生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1四川省天立集团2024-2025学年高二下学期期中联测一、单项选择题(共15题，每小题3分，共45分。每小题只有一个选项符合题目要求。)1.《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程：以糯米或粳米等蒸熟，“酿瓮中七日……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”，“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列说法正确的是（）A.为使酵母菌进行酒精发酵，酿制时“瓮”应装满后密封B.“糯米或粳米”中所含物质只能为微生物提供碳源和氮源C.在利用酵母菌发酵的“七日”中，水和酒精是同时产生的D.发酵过程中密封不严，醋酸菌将酒精转化为乙酸使酒“酸坏”【答案】D〖祥解〗参与酒的制作的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，此时糖类被分解为二氧化碳和水，在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。【详析】A、酒精发酵时，一般将容器内2/3的空间装满糯米或粳米，剩下的1/3空间留有空气，利于酵母菌有氧呼吸，进行繁殖，A错误；B、糯米和粳米作为培养酵母菌的基质，可以为酵母菌提供碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等，B错误；C、酵母菌发酵的“七日”中，前期主要是有氧呼吸，该过程产生水，后期才开始无氧呼吸产生酒精，因此水和酒精不是同时产生的，C错误；D、醋酸菌为需氧菌，若密封不严，会导致醋酸菌繁殖，将酒精变为乙醛进而生成乙酸（即醋酸），使酒酸坏，D正确。故选D。2.某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌：醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列相关叙述错误的是（）A.糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌B.发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸C.醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况D.啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间【答案】B〖祥解〗醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。【详析】A、蒸煮的目的：使原料在高温下灭菌，同时使植物细胞破裂，淀粉被释放出来，利于淀粉水解，糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的均有利于灭菌和糖化过程，A正确；B、图中制酒用到了酒曲，酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，霉菌属于真菌，其为需氧型，该过程霉菌产生的淀粉酶有利于将糯米中的淀粉分解，其中的乳酸菌进行的是无氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸过程完成酿酒的过程，醋酸发酵过程中主要利用了醋酸杆菌的有氧呼吸进行醋酸发酵，B错误；C、醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发酵物，有利于散热，可控制发酵温度和改善通气状况，C正确；D、啤酒酿造流程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧有利于酵母菌有氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而可缩短发酵时间，D正确。故选B。3.纤维素分解菌是一种新型饲料添加剂，能够提高粗纤维饲料的转化率，为养殖业提供更多的饲料来源。研究人员从某动物粪便中分离筛选纤维素分解菌，步骤如图。下列分析错误的有（）A.培养基A与B的物理性质和营养配方均有差别B.步骤②④⑤的培养基接种菌种的方法均不相同C.能在甲中生长的不一定是能分解纤维素的微生物D.丙中透明圈直径大小能直接反映细菌分解纤维素能力的强弱【答案】D〖祥解〗使用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数目往往比活菌数目少。【详析】A、培养基A是液体培养基，培养基B是固体的选择培养基，所以二者的物理性质和营养配方均有差别，A正确；B、②是液体培养基，③是稀释涂布平板法接种，④是挑选单菌接种到16个小格中，接种方法不同，B正确；C、甲培养基是选择培养基，用涂布平板法操作得到菌落，培养基上生长的菌落不一定均为纤维素分解菌，其他杂菌可能利用纤维素分解菌的分解产物进而在此培养基上存活，C正确；D、根据培养基丙中菌落周围形成的透明圈直径与菌落直径比值来判断细菌分解纤维素的能力，该值越大，说明细菌分解纤维素的能力就越强，D错误。故选D。4.植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（）A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株【答案】B〖祥解〗（1）植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。（2）分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。【详析】A、酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确；B、过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误；C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C正确；D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。故选B。5.迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述错误的是（）A.迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体B.诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸C.悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团D.茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率【答案】B〖祥解〗（12）植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。（2）植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。【详析】A、迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体，生长旺盛，分裂能力较强，A正确；B、诱导愈伤组织时需加入NAA和细胞分裂素，B错误；C、悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团，获得更多的营养物质和氧气，使得其可以进一步分裂，C正确；D、加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量，推测茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物（不是植物生长所必须的）的合成速率，D正确。故选B。6.实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示。下列叙述错误的是（）A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开C.丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象D.丁过程表示传代培养，传代培养的正常动物细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞【答案】D〖祥解〗图示中甲表示从实验小鼠获取皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒；乙表示用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞；丙表示原代培养过程；丁表示传代培养。【详析】A、离体动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，甲过程表示从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒，A正确；B、皮肤细胞培养前需用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开，并制成细胞悬液，B正确；C、丙过程表示原代培养，动物细胞原代培养该过程中会出现接触抑制现象，C正确；D、丁过程表示传代培养，由于接触抑制，正常动物细胞培养时在培养瓶壁上只能形成单层细胞，D错误。故选D。7.下列有关细胞工程技术的叙述正确的是（）A.动物细胞培养过程中加入血清的培养基需要进行高压蒸汽灭菌B.大量制备一种单克隆抗体需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞C.核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物D.受体母畜对移入子宫的外来胚胎会发生免疫排斥反应【答案】C〖祥解〗（1）核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物。（2）受体母畜对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体母畜体内的存活提供了可能。【详析】A、动物细胞培养过程中需要对培养液和培养用具进行灭菌处理，但不需要高压蒸汽灭菌，高温可能会使血清中的物质性质发生改变，A错误；B、单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此大量制备一种单克隆抗体不需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞，B错误；C、核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物，C正确；D、受体母畜对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体母畜体内的存活提供了可能，D错误。故选C。8.下列有关“DNA粗提取与鉴定”、“PCR扩增”、“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述中，正确的是（）A.DNA的粗提取与鉴定实验中可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取DNAB.电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察C.PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在复性过程中起作用D.将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，溶液即可变为蓝色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。【详析】A、DNA的粗提取与鉴定实验中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白质溶于酒精的原理，可以初步分离DNA与蛋白质，A错误；B、用电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料，核酸染料能与DNA分子结合，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，B正确；C、PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在延伸过程中根据碱基互补配对原则来合成新的DNA链，C错误。D、将提取到的丝状物先溶解于2mol/L的的NaCl溶液，再加入适量二苯胺溶液充分混匀后，需要水浴加热，试管冷却后溶液呈现蓝色，D错误。故选B。9.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的ADC(“生物导弹”)，能够用于杀死人类某些癌细胞。其过程如图所示，下列有关叙述错误的是（）A.①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B.体外培养杂交瘤细胞时需置于95%的O2和5%的CO2C.②过程需要筛选并克隆分泌特定抗体的杂交瘤细胞D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性【答案】B〖祥解〗单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。【详析】A、①过程是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用细胞膜具有一定的流动性的特点，和植物原生质体融合的原理基本相同，A正确；B、体外培养杂交瘤细胞时需置于含95%空气和5%CO2的培养箱中，B错误；C、②过程需要筛选并克隆分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；D、抗体的靶向作用，即抗原抗体的特异性结合，使③过程具有高度特异性，D正确。故选B。10.2023年1月，宁夏首批体细胞克隆高产长寿超级奶牛诞生，科研人员选择高产长寿和抗逆性能优异的明星奶牛，采集其耳缘组织，培养皮肤成纤维细胞，再通过核移植生产克隆胚胎，进行胚胎移植及妊娠。下列说法错误的是（）A.为获得更多的超级奶牛，可在胚胎移植前对囊胚或者原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割B.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移C.胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力D.体细胞核移植的成功率非常低，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决【答案】A〖祥解〗（1）胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术；（2）胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。【详析】A、胚胎移植一般选择桑葚胚或囊胚时期的胚胎，A错误；B、胚胎移植是指早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；C、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，较短时间内得到更多的后代，C正确；D、体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此体细胞核移植的成功率非常低，体细胞核移植技术的研究仍在继续，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决，D正确。故选A。11.我国科学家最新研究发现，当卵细胞与精子融合后，卵细胞会特异性表达和分泌BF1和BF2这两种蛋白质，这两种蛋白质能避免受精卵再度与精子融合。下列叙述正确的是（）A.精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的选择透过性有关B.受精过程中，精子和卵细胞的随机结合会导致基因重组C.多精入卵会导致产生双胞胎甚至多胞胎D.BF1和BF2有利于维持受精卵中染色体数目的稳定【答案】D〖祥解〗细胞间的信息交流主要有三种方式：（1）通过化学物质来传递信息；（2）通过细胞膜直接接触传递信息；（3）通过细胞通道来传递信息，如高等植物细胞之间通过胞间连丝。【详析】A、细胞膜上有糖蛋白，与细胞表面的识别等有关，精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的信息交流功能有关，A错误；B、受精过程中精子和卵细胞的随机结合不是基因重组，基因重组发生在减数分裂过程中，B错误；C、多精入卵会导致子代有来自卵细胞和多个精子的染色体，破坏亲子代之间遗传信息的稳定性，因此一个卵细胞与一个精子成功融合后通常不再与其他精子融合，C错误；D、BF1和BF2能避免受精卵再度与精子融合，有利于维持受精卵中染色体数目的稳定，D正确。故选D。12.20世纪70年代以后∶一大批生物技术成果进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，生物技术的发展在造福人类的同时也可能带来潜在的危害。下列有关生物技术的安全性与伦理问题叙述正确的是（）A.转基因技术可使植物获得优良性状，但没有增加生物的基因多样性B.经济、文化和伦理道德观念的不同不会影响人们对转基因技术的看法C.生殖性克隆和治疗性克隆结果本质是相同的，都会面临伦理问题D.人体不会对转基因技术制造的具有传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应【答案】A〖祥解〗转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）.对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。【详析】A、转基因技术能克服远缘杂交不亲和的障碍，因此其增加了生物变异的范围，但并未产生新的基因，即没有增加生物的基因多样性，A正确；B、由于不同的人在经济、文化和伦理道德观念等方面存在差异，因此不同的人对转基因技术会有不同的看法，B错误；C、生殖性克隆是以产生新个体为目的克隆，治疗性克隆是为了治疗疾病，C错误；D、人体会对转基因技术制造的具有超强的传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应，但不一定能杀灭病原体，D错误。故选A13.在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是()①A过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶②B过程需要加入卡那霉素进行选择培养③C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质、琼脂④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测A.①②③④⑤ B.①②④⑤C.③④⑤ D.①③④⑤【答案】B〖祥解〗借抗虫棉的培育过程考查基因工程的基本操作程序以及基因分离定律的灵活运用，旨在考查对知识的理解和应用知识解决实际问题的能力。质粒作为运载体的特点：能够自我复制，或整合到染色体上随染色体复制；有多个限制酶切点(便于切割)；有标记基因(便于进行检验)目的基因整合到受体细胞的一条染色体上，而其同源染色体上没有该交易时时，基因遗传遵循分离定律。【详析】①A过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，①正确；②B过程需要加入卡那霉素进行选择培养，②正确；③C过程为脱分化过程，培养基中需加入营养物质、琼脂、激素以及卡拉霉素，③错误；④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测，④正确；⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测，⑤正确；故选B。14.研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入酵母中，让酵母产生LTP1蛋白。下图为该实验过程的部分流程。下列说法正确的是（）A.运用PCR扩增LTP1基因时，应选择左图的A和D作为引物B.为方便构建重组质粒，可在引物5’端添加限制酶的识别序列C.如图中为了筛选导入重组质粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培养基D.为了让大麦的基因在酵母中表达，需要在目的基因两侧添加大麦的启动子和终止子【答案】B〖祥解〗图示表示将使啤酒产生丰富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中，使其产生LTP1蛋白，酸出泡沫丰富的啤酒的过程，图中A为获取目的基因的过程，B为质粒，C为基因表达体。【详析】A、结合题意可知，DNA复制只能从5’到3’，而DNA聚合酶只能从引物的3’端延伸DNA链，因此构建前利用PCR技术扩增目的基因时，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和C作为引物，A错误；B、为构建重组质粒(即将目的基因和质粒整合到一起)，在引物5’端需要适当增加限制酶识别序列B正确；C、由图可知，构建基因表达载体时，四环素抗性基因被破坏，而青霉素抗性基因没有被破坏，因此将导入C的酵母菌分别在含有青霉素和四坏素的两种选择培养基上培养，则在含有青霉素的培养基上能存活，但在含有四环素的培养基上不能存活，才能筛选导入重组质粒的啤酒酵母，C错误；D、为了让大麦的基因在酵母中表达，需要在目的基因两侧添加酵母的启动子和终止子，D错误。故选B。15.蛋白质工程是基因工程的延伸，下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（）A.通过蛋白质工程改造后的蛋白质的性状不可以遗传B.蛋白质工程和基因工程都需要构建基因表达载体C.蛋白质工程需要限制酶、DNA连接酶和载体等工具D.蛋白质工程经常要建立蛋白质高级结构的三维模型【答案】A〖祥解〗蛋白质工程是通过对基因进行修饰改造或重新合成，从而改造蛋白质进而改造性状。【详析】A、蛋白质工程是通过对基因进行修饰改造或重新合成，从而改造蛋白质进而改造性状，其本质是通过基因控制性状，故可遗传，A错误；B、蛋白质工程是通过对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，同基因工程一样，都需要构建基因表达载体，B正确；C、蛋白质工程需要限制酶、DNA连接酶和载体等工具，C正确；D、蛋白质工程先要根据预期蛋白质功能设计建立蛋白质高级结构的三维模型，D正确。故选A。二、非选择题(本题共5小题，共55分。)16.土壤中的有些细菌可以利用石油中的多环芳怪，研究人员从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌；采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。实验所用的培养基成分如下：培养基I：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。（1）实验所用培养基中作为碳源的成分是______。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体体内可以参与合成_____（答出2种即可）等生物大分子。（2）用稀释涂布平板法对菌株A计数时，每毫升菌液中细菌细胞数为2×108个，每个平板上涂布0.1mL，且每个平板上长出的菌落数约200个，则至少应将菌株A的菌液稀释_____倍。（3）为进一步探究并比较A、B两个菌株在不同条件下降解石油的能力，科研人员将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基I中培养，得到A、B菌液；再在液体培养基I、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板I、Ⅱ，并分别在平板I、Ⅱ上各打甲、乙两孔；在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B-菌液分别接种到平板I的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作；适宜条件下培养相同时间，记录平板I、Ⅱ的透明圈大小如下表：菌株透明圈大小平板I平板ⅡA+++++B++-注：“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示无透明圈本实验的自变量是____。推测在平板上透明圈出现的原因是_____。（4）现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是__，理由是____。【答案】（1）①.石油②.DNA、RNA、蛋白质（2）105（3）①.培养基的成分和菌株的类型②.细菌将平板中的石油分解（4）①.A②.A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长〖祥解〗（1）选择培养基是指在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，允许特定微生物生长，阻止或抑制其他微生物生长的培养基。（2）培养基的成分主要包括碳源、氮源、无机盐和水。（3）种群数量呈现“J”型增长，t代后的种群数量为Nt=N0×λt，λ表示后一代是前一代种群数量的倍数。【解析】（1）由题干可知，该实验的实验目的为比较A和B两株菌降解石油的能力，故培养基中应只有石油做唯一碳源。生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖等，其中含有N的为核酸和蛋白质。（2）根据题意，假设至少将摇瓶M中的菌液稀释X倍，才能保证稀释后的0.1mL菌液中细菌细胞数不超过200个，初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×108个/mL，则稀释之前0.1mL菌液中有2×107个细菌，可得2×107×（1/X）=200，则X=105，因此至少应将摇瓶M中的菌液稀释105倍。（3）本实验中人为改变的量是培养基的成分和菌株的类型，所以培养基的成分和菌株的类型是本实验的自变量。由于细菌将平板中的石油分解，则在平板上出现透明圈。（4）通过平板Ⅰ中A的透明圈较大，得出A分解石油的能力强于B，平板Ⅱ中A的透明圈较大，说明A在缺氮条件下生存和繁殖能力强于B，所以在缺氮条件下，治理油污应选用A菌株。17.人血清白蛋白(HSA)是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA．请结合相关知识回答下列问题。(图甲为获取的含HSA基因的DNA片段及酶切位点；图乙是三种限制酶的识别序列；图丙为质粒结构示意图)（1）科研人员利用人肝细胞中的___________构建出cDNA文库，该过程利用的原料是___________，通过该方法合成的DNA含量较少，可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子，根据该基因的序列(5'-CTAG-GTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3')，应选择___________作为PCR的引物。A．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'B．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'C．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'D．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'为使HSA基因能与质粒正确连接，根据图甲、乙、丙，应选择限制酶___________切割目的基因。（2）PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测，常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测，若电泳带有___________条，且与DNAMarker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。（3）目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。目的基因的表达包括转录和翻译两个步骤，后者的原料是___________。若导入到原核生物大肠杆菌中，可用CaCl2处理大肠杆菌，有利于重组质粒的导入的原因是___________。但由于原核细胞中缺少___________等细胞器，不能对表达产物进行加工，可能会影响蛋白质的功能。若将重组质粒导入到真核细胞，如小鼠细胞中，则可避免上述问题的产生。（4）现利用小鼠乳腺作为生物反应器生产该蛋白，可将重组质粒通过___________法导入小鼠的受精卵细胞中，然后将转化的细胞进行培养，由于无法进行全体外胚胎培养，胚胎移植成为胚胎工程中获得转基因小鼠的唯一方法。利用___________技术检测小鼠乳腺分泌物，可以判断目的基因是否表达。【答案】（1）①.mRNA②.（四种）脱氧核苷酸③.A④.EcoRI和BamHI（2）1（或一）（3）①.氨基酸②.使大肠杆菌细胞处于感受态，利于重组质粒进入细胞③.内质网、高尔基体（4）①.显微注射②.抗原—抗体杂交〖祥解〗基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品；基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。【解析】（1）人血清白蛋白基因（HSA）主要在肝脏中合成，为了获得HSA基因，可从人体的肝脏细胞中提取mRNA，通过反转录获得cDNA（双链），构建出cDNA文库，该过程是合成DNA，因此该过程利用的原料是（四种）脱氧核苷酸。根据碱基互补配对原则可知，该基因的两条链序列为5'-CTAGGTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3'、5'-CCGATCGTTGGAGA…GAATTTCGACCTAG-3'，PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合，故引物Ⅰ能与5′-GAATTTCGACCTAG-3'进行配对，为5′-CTAGGTCGAAATTC-3′；引物Ⅱ能与5′-TCTCCAACGATCGG-3'配对，为5′-CCGATCGTTGGAGA-3'，A正确，BCD错误。故选A。限制酶Sau3AⅠ切割目的基因会破坏目的基因，故不能选择限制酶Sau3AⅠ切割目的基因。为了防止目的基因与质粒间的任意连接，应该选择Sau3AⅠ、EcoRⅠ切割质粒。Sau3AⅠ和BamHⅠ的黏性末端相同，故采用BamHⅠ、EcoRⅠ充分切割目的基因。（2）将装有凝胶的胶托从胶盒中取出，放入电泳槽内，加样孔一端朝向负极，向电泳槽中加入电泳缓冲液，使其没过凝胶。电泳一段时间后进行检测，记录Marker每个条带的位置和相应DNA片段长度，若电泳带有1条，且与DNAMarker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。（3）基因表达包括转录（以DNA为模板合成RNA）和翻译（以RNA为模板合成蛋白质），翻译是在核糖体上，以氨基酸为原料，合成多肽链（蛋白质）的过程。用CaCl2处理大肠杆菌，会使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，也就是让细胞成为感受态细胞，利于重组质粒（含目的基因的载体）的导入。原核细胞（如大肠杆菌）只有核糖体这一种细胞器，而真核细胞有内质网、高尔基体等。内质网可对蛋白质进行加工、运输，高尔基体可进一步加工、分类和包装蛋白质。原核细胞缺少内质网、高尔基体，无法对表达产生的蛋白质（多肽链）进行复杂加工（如糖基化、折叠、修饰等），可能影响蛋白质功能。（4）将重组质粒导入动物细胞（受精卵）常采用显微注射技术。将早期胚胎通过胚胎移植技术导入雌性小鼠体内，为了检测小鼠乳腺分泌物中是否合成了人血清白蛋白（HSA），可采用抗原—抗体杂交的方法。18.不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。红豆杉的次生产物紫杉醇是一种高效抗癌药物，但由于红豆杉野生资源匮乏，且红豆杉植株紫杉醇含量极低，导致了紫杉醇的供应严重不足。因此，研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如下图所示。请回答下列问题。注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺处理使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。（1）过程①中将植物组织接种于MS培养基上，经过______过程，产生愈伤组织。（2）过程②中将愈伤组织加入含有______的溶液去壁，离心后弃去上清液，加入洗液多次洗涤后获得原生质体。原生质体培养液中需加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是______。（3）为测定原生质体活力，可采用二乙酸荧光素（FAD）法，已知FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过细胞膜，会留在细胞内发出荧光。据此应选择______的原生质体用于融合。获得的原生质体经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是______。（4）科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和DNA分子标记鉴定，结果如下：后代植株类型染色体数目、形态DNA分子标记鉴定甲12，形态与柴胡染色体相似含双亲DNA片段乙12，形态与柴胡染色体相似无红豆杉DNA片段丙12，形态与柴胡染色体相似含双亲DNA片段和新的DNA片段由表可知，后代植株中______类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本柴胡的染色体，另一方亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以DNA片段的方式整合进柴胡的基因组，作出以上推测的依据是______。【答案】（1）脱分化（2）①.纤维素酶和果胶酶②.维持原生质体正常形态（防止原生质体吸水涨破）（3）①.发出荧光②.杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂（4）①.乙②.甲、丙类型植株细胞的染色体与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段〖祥解〗植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。【解析】（1）离体的植物组织经过脱分化形成愈伤组织。（2）由于植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁；原生质体失去了细胞壁的保护，容易吸水涨破，因此原生质体培养液中需加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是维持原生质体正常形态（防止原生质体吸水涨破）。（3）分析题意，FAD本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质会留在细胞内发出荧光，故应选择发出荧光的原生质体用于融合。杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂，故只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团。（4）根据表格信息可知，植株后代乙无红豆杉DNA片段，说明其不是杂种植株；甲、丙类型植株与柴胡细胞中的染色体数目相同、形态相似，且含有双亲的DNA片段，说明甲、丙植株属于杂种植株，它们的染色体主要由柴胡亲本来源的染色体组成，红豆杉亲本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以遗传物质重组的方式整合进柴胡的基因组。19.黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的小分子代谢产物。为准确检测食品中残留的AFB，科研人员开展下列研究。完成下列问题：（1）科研人员利用小鼠制备抗AFB的单克隆抗体（即AFB单抗），运用了________和________的动物细胞工程技术，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用________。（2）AFB单抗的制备过程如下图，杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ________和Ⅲ________检测，经过多次筛选获得。（3）食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）等。若想确认上述流程获得的AFB单抗具有极强的特异性，应补充的检测是________，预测相应的实验结果是________。（4）科研人员拟将AFB单抗固定在一种新材料上，制备出“检测探针”。已知材料M稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质P可以提高材料M对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图1，探针发光性能与物质P的浓度关系如图2。依据图2结果，科研人员宜选择物质P的浓度为________mg/mL作为生产检测探针的条件，原因是________。（5）单克隆抗体除了上述功能，还有什么作用？写出一种：________。【答案】（1）①.动物细胞融合②.动物细胞培养③.灭活病毒（2）①.克隆化培养②.抗体（3）①.FB单抗与黄绿青霉素（或“CIT”)、伏马菌素（或“FB”)进行抗原-抗体杂交②.不能杂交（或“阴性”无杂交带”）（4）①.0.8②.在物质P浓度为0.8mg/mL时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，且可节省成本（5）治疗疾病、运载药物等〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【解析】（1）单克隆抗体制备过程中需要进行细胞培养和细胞融合，运用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术，动物细胞融合常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用灭活的病毒。（2）图中过程I是动物细胞融合过程，通过过程I获得的杂交瘤细胞需进行步骤I克隆化培养抗体（阳性）和Ⅲ抗体（阳性）检测，经过多次筛选获得能产生目标抗体的杂交瘤细胞，而后对该细胞进行体外或体内培养。（3）食品中的有害残留毒素还可能有黄绿青霉素（CIT）、伏马菌素（FB）等，若想确认上述流程获得的AFB单抗具有极强的特异性，则可用AFB单抗与黄绿青霉素、伏马菌素进行抗原-抗体杂交，由于抗原和抗体杂交的特异性，因此该实验的结果是不能杂交（或“阴性”“无杂交带”）。（4）图3结果表明，在物质P浓度为0.8mg/mL时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，因此科研时可选择该浓度作为生产检测探针的条件，且可节省成本。（5）单克隆抗体特异性强、灵敏度高，据此可用单克隆抗体和相应的药物结合通过单克隆抗体的作用将药物定点到病灶部位进行定向治疗，可以减轻药物的副作用。另外，单克隆抗体还可用于疾病的诊断和治疗。20.为研究Atu5117启动子能否独立启动下游基因的表达，研究人员利用重叠延伸PCR技术，获得“Atu5117启动子和绿色荧光蛋白基因(GFP)”的“嵌合序列”，再构建基因表达载体(仅使用1种限制酶)，以获得含有“嵌合序列”的重组DNA分子。相关过程、基础质粒及限制酶的酶切位点如图1所示。回答下列问题：（1）重叠延伸PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+，以激活___________，PCR中设定复性温度的主要依据是___________。（2）由阶段2“变性后杂交”的原理可知，引物2和引物3在碱基序列上的要求是___________。（3）阶段3构建基因表达载体需要的酶有___________，它们作用的化学键是___________。（4）本实验中，在阶段3需破坏基础质粒上T7启动子的结构，从而使得GFP的表达仅受Atu5117启动子的调控，因此，在设计阶段1和2的引物时，需确保___________(填引物名称)上含有___________(填限制酶的名称)的识别序列。（5）提取受体细胞的相应DNA，利用与阶段3相同的限制酶酶切，进行DNA电泳检测，结果如图2。已知Atu5117启动子、GFP基因、基础质粒的序列大小分别约为490bp、750bp、2750bp(bp代表碱基对)，据图判断受体细胞中___________成功导入了重组DNA分子。【答案】（1）①.耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）②.引物的碱基序列及长度（2）引物2和引物3必须具有碱基互补配对的片段（3）①.限制性内切核酸酶（限制酶）和DNA连接酶②.磷酸二酯键（3'-磷酸酯键）（4）①.引物1和引物4②.BamHI（5）B〖祥解〗（1）基因工程基本操作程序：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达；（2）PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端至3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。【解析】（1）在PCR反应中，Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），该酶能够催化脱氧核苷酸聚合形成DNA链。PCR中引物与模板DNA链在复性阶段结合，不同的引物其碱基序列和长度不同，碱基对的GC含量也不同，GC含量越高，引物的Tm值（解链温度）越高，复性温度一般比引物的Tm值低5℃左右，所以要根据引物的碱基序列及长度来设定复性温度，以保证引物能特异性地与模板链结合。（2）PCR扩增时需要引物，由阶段2“变性后杂交”的原理可知，引物2和引物3在碱基序列上的要求是引物2和引物3必须具有碱基互补配对的片段。（3）阶段3构建基因表达载体需要的酶有限制性内切核酸酶（限制酶）和DNA连接酶，它们作用的化学键是磷酸二酯键（3'-磷酸酯键）。（4）由图可知，T7启动子上含有BamHI的酶切位点，因此在阶段3需破坏基础质粒上T7启动子的结构时，构建基因表达载体仅使用1种限制酶，在设计阶段1和2的引物时，需确保引物1和引物4上含有BamHI的识别序列。（5）利用与阶段3相同的限制酶酶切，如果受体细胞中成功导入了重组DNA分子，酶切后会得到两个DNA片段，已知Atu5117启动子、GFP基因、基础质粒的序列大小分别约为490bp、750bp、2750bp，所以酶切后得到两个DNA片段的大小分别是1240bp和2750bp，符合细胞B的电泳图。四川省天立集团2024-2025学年高二下学期期中联测一、单项选择题(共15题，每小题3分，共45分。每小题只有一个选项符合题目要求。)1.《本草纲目》中记载了酿制烧酒的过程：以糯米或粳米等蒸熟，“酿瓮中七日……入甑蒸令汽上，用器承取滴露”，“凡酸坏之酒，皆可蒸烧”。下列说法正确的是（）A.为使酵母菌进行酒精发酵，酿制时“瓮”应装满后密封B.“糯米或粳米”中所含物质只能为微生物提供碳源和氮源C.在利用酵母菌发酵的“七日”中，水和酒精是同时产生的D.发酵过程中密封不严，醋酸菌将酒精转化为乙酸使酒“酸坏”【答案】D〖祥解〗参与酒的制作的微生物主要是酵母菌，其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，此时糖类被分解为二氧化碳和水，在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。【详析】A、酒精发酵时，一般将容器内2/3的空间装满糯米或粳米，剩下的1/3空间留有空气，利于酵母菌有氧呼吸，进行繁殖，A错误；B、糯米和粳米作为培养酵母菌的基质，可以为酵母菌提供碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等，B错误；C、酵母菌发酵的“七日”中，前期主要是有氧呼吸，该过程产生水，后期才开始无氧呼吸产生酒精，因此水和酒精不是同时产生的，C错误；D、醋酸菌为需氧菌，若密封不严，会导致醋酸菌繁殖，将酒精变为乙醛进而生成乙酸（即醋酸），使酒酸坏，D正确。故选D。2.某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌：醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列相关叙述错误的是（）A.糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌B.发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸C.醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况D.啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间【答案】B〖祥解〗醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。【详析】A、蒸煮的目的：使原料在高温下灭菌，同时使植物细胞破裂，淀粉被释放出来，利于淀粉水解，糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的均有利于灭菌和糖化过程，A正确；B、图中制酒用到了酒曲，酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，霉菌属于真菌，其为需氧型，该过程霉菌产生的淀粉酶有利于将糯米中的淀粉分解，其中的乳酸菌进行的是无氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸过程完成酿酒的过程，醋酸发酵过程中主要利用了醋酸杆菌的有氧呼吸进行醋酸发酵，B错误；C、醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发酵物，有利于散热，可控制发酵温度和改善通气状况，C正确；D、啤酒酿造流程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧有利于酵母菌有氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而可缩短发酵时间，D正确。故选B。3.纤维素分解菌是一种新型饲料添加剂，能够提高粗纤维饲料的转化率，为养殖业提供更多的饲料来源。研究人员从某动物粪便中分离筛选纤维素分解菌，步骤如图。下列分析错误的有（）A.培养基A与B的物理性质和营养配方均有差别B.步骤②④⑤的培养基接种菌种的方法均不相同C.能在甲中生长的不一定是能分解纤维素的微生物D.丙中透明圈直径大小能直接反映细菌分解纤维素能力的强弱【答案】D〖祥解〗使用稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数目往往比活菌数目少。【详析】A、培养基A是液体培养基，培养基B是固体的选择培养基，所以二者的物理性质和营养配方均有差别，A正确；B、②是液体培养基，③是稀释涂布平板法接种，④是挑选单菌接种到16个小格中，接种方法不同，B正确；C、甲培养基是选择培养基，用涂布平板法操作得到菌落，培养基上生长的菌落不一定均为纤维素分解菌，其他杂菌可能利用纤维素分解菌的分解产物进而在此培养基上存活，C正确；D、根据培养基丙中菌落周围形成的透明圈直径与菌落直径比值来判断细菌分解纤维素的能力，该值越大，说明细菌分解纤维素的能力就越强，D错误。故选D。4.植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（）A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株【答案】B〖祥解〗（1）植物体细胞杂交技术将来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞（植物体细胞杂交技术），把杂种细胞培育成植株（植物组织培养技术）。其原理是植物细胞具有全能性和细胞膜具有流动性。杂种细胞再生出新的细胞壁是体细胞融合完成的标志，细胞壁的形成与细胞内高尔基体有重要的关系。植物体细胞杂交技术可以克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。（2）分析题图：图示为甲、乙两种植物细胞融合并培育新植株的过程，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②③表示人工诱导原生质体融合以及再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化形成愈伤组织；⑤表示再分化以及个体发育形成植株丙的过程。【详析】A、酶解是为了去除植物细胞的细胞壁，过程①中酶处理的时间不同，说明两种亲本的细胞壁结构有差异，A正确；B、过程②为原生质体的融合，常用PEG诱导原生质体融合，灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，不能用于植物，B错误；C、过程④脱分化和⑤再分化的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素，但在两个过程中比例不同，C正确；D、植物丙是植物甲和植物乙体细胞杂交形成的个体，应具备两者的遗传物质，因此可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株，D正确。故选B。5.迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时，先诱导外植体形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量。下列叙述错误的是（）A.迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体B.诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸C.悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团D.茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率【答案】B〖祥解〗（12）植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。（2）植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。【详析】A、迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体，生长旺盛，分裂能力较强，A正确；B、诱导愈伤组织时需加入NAA和细胞分裂素，B错误；C、悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团，获得更多的营养物质和氧气，使得其可以进一步分裂，C正确；D、加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产量，推测茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物（不是植物生长所必须的）的合成速率，D正确。故选B。6.实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示。下列叙述错误的是（）A.甲过程需要对实验小鼠进行消毒B.乙过程需要用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开C.丙过程表示原代培养，该过程中会出现接触抑制现象D.丁过程表示传代培养，传代培养的正常动物细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞【答案】D〖祥解〗图示中甲表示从实验小鼠获取皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒；乙表示用胰蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞；丙表示原代培养过程；丁表示传代培养。【详析】A、离体动物细胞培养需要无菌、无毒的环境，甲过程表示从实验小鼠身上取下皮肤组织，该过程需要对小鼠进行消毒，A正确；B、皮肤细胞培养前需用胰蛋白酶等处理皮肤组织，使细胞分散开，并制成细胞悬液，B正确；C、丙过程表示原代培养，动物细胞原代培养该过程中会出现接触抑制现象，C正确；D、丁过程表示传代培养，由于接触抑制，正常动物细胞培养时在培养瓶壁上只能形成单层细胞，D错误。故选D。7.下列有关细胞工程技术的叙述正确的是（）A.动物细胞培养过程中加入血清的培养基需要进行高压蒸汽灭菌B.大量制备一种单克隆抗体需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞C.核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物D.受体母畜对移入子宫的外来胚胎会发生免疫排斥反应【答案】C〖祥解〗（1）核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物。（2）受体母畜对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体母畜体内的存活提供了可能。【详析】A、动物细胞培养过程中需要对培养液和培养用具进行灭菌处理，但不需要高压蒸汽灭菌，高温可能会使血清中的物质性质发生改变，A错误；B、单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，因此大量制备一种单克隆抗体不需要大量的B细胞和骨髓瘤细胞，B错误；C、核移植中的“去核”是指去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物，C正确；D、受体母畜对移入子宫的外来胚胎不会发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体母畜体内的存活提供了可能，D错误。故选C。8.下列有关“DNA粗提取与鉴定”、“PCR扩增”、“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述中，正确的是（）A.DNA的粗提取与鉴定实验中可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取DNAB.电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察C.PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在复性过程中起作用D.将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后，溶液即可变为蓝色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺溶液混合，并在水浴加热条件下呈现蓝色；耐高温的DNA聚合酶在延伸环节时进行子链的合成。【详析】A、DNA的粗提取与鉴定实验中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白质溶于酒精的原理，可以初步分离DNA与蛋白质，A错误；B、用电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料，核酸染料能与DNA分子结合，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来，B正确；C、PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶在延伸过程中根据碱基互补配对原则来合成新的DNA链，C错误。D、将提取到的丝状物先溶解于2mol/L的的NaCl溶液，再加入适量二苯胺溶液充分混匀后，需要水浴加热，试管冷却后溶液呈现蓝色，D错误。故选B。9.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的ADC(“生物导弹”)，能够用于杀死人类某些癌细胞。其过程如图所示，下列有关叙述错误的是（）A.①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同B.体外培养杂交瘤细胞时需置于95%的O2和5%的CO2C.②过程需要筛选并克隆分泌特定抗体的杂交瘤细胞D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性【答案】B〖祥解〗单克隆抗体的制备：注射特定抗原、从小鼠的脾脏中获得产生特定抗体的B淋巴细胞、将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合、用特定选择培养基筛选出杂交瘤细胞、再利用克隆化培养和抗体检测获得足够多数量的能分泌所需抗体的细胞、将该细胞在体外培养或者注射到小鼠腹腔内增殖、从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体。【详析】A、①过程是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，利用细胞膜具有一定的流动性的特点，和植物原生质体融合的原理基本相同，A正确；B、体外培养杂交瘤细胞时需置于含95%空气和5%CO2的培养箱中，B错误；C、②过程需要筛选并克隆分泌特定抗体的杂交瘤细胞，C正确；D、抗体的靶向作用，即抗原抗体的特异性结合，使③过程具有高度特异性，D正确。故选B。10.2023年1月，宁夏首批体细胞克隆高产长寿超级奶牛诞生，科研人员选择高产长寿和抗逆性能优异的明星奶牛，采集其耳缘组织，培养皮肤成纤维细胞，再通过核移植生产克隆胚胎，进行胚胎移植及妊娠。下列说法错误的是（）A.为获得更多的超级奶牛，可在胚胎移植前对囊胚或者原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割B.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移C.胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力D.体细胞核移植的成功率非常低，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决【答案】A〖祥解〗（1）胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术；（2）胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。【详析】A、胚胎移植一般选择桑葚胚或囊胚时期的胚胎，A错误；B、胚胎移植是指早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；C、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，较短时间内得到更多的后代，C正确；D、体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此体细胞核移植的成功率非常低，体细胞核移植技术的研究仍在继续，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决，D正确。故选A。11.我国科学家最新研究发现，当卵细胞与精子融合后，卵细胞会特异性表达和分泌BF1和BF2这两种蛋白质，这两种蛋白质能避免受精卵再度与精子融合。下列叙述正确的是（）A.精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的选择透过性有关B.受精过程中，精子和卵细胞的随机结合会导致基因重组C.多精入卵会导致产生双胞胎甚至多胞胎D.BF1和BF2有利于维持受精卵中染色体数目的稳定【答案】D〖祥解〗细胞间的信息交流主要有三种方式：（1）通过化学物质来传递信息；（2）通过细胞膜直接接触传递信息；（3）通过细胞通道来传递信息，如高等植物细胞之间通过胞间连丝。【详析】A、细胞膜上有糖蛋白，与细胞表面的识别等有关，精子与卵细胞的识别和融合，与细胞膜的信息交流功能有关，A错误；B、受精过程中精子和卵细胞的随机结合不是基因重组，基因重组发生在减数分裂过程中，B错误；C、多精入卵会导致子代有来自卵细胞和多个精子的染色体，破坏亲子代之间遗传信息的稳定性，因此一个卵细胞与一个精子成功融合后通常不再与其他精子融合，C错误；D、BF1和BF2能避免受精卵再度与精子融合，有利于维持受精卵中染色体数目的稳定，D正确。故选D。12.20世纪70年代以后∶一大批生物技术成果进入人类的生产和生活，特别是在医药和农业生产上发挥了极大的作用，生物技术的发展在造福人类的同时也可能带来潜在的危害。下列有关生物技术的安全性与伦理问题叙述正确的是（）A.转基因技术可使植物获得优良性状，但没有增加生物的基因多样性B.经济、文化和伦理道德观念的不同不会影响人们对转基因技术的看法C.生殖性克隆和治疗性克隆结果本质是相同的，都会面临伦理问题D.人体不会对转基因技术制造的具有传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应【答案】A〖祥解〗转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）.对待转基因技术的利弊，正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。【详析】A、转基因技术能克服远缘杂交不亲和的障碍，因此其增加了生物变异的范围，但并未产生新的基因，即没有增加生物的基因多样性，A正确；B、由于不同的人在经济、文化和伦理道德观念等方面存在差异，因此不同的人对转基因技术会有不同的看法，B错误；C、生殖性克隆是以产生新个体为目的克隆，治疗性克隆是为了治疗疾病，C错误；D、人体会对转基因技术制造的具有超强的传染性和致病性的新型病原体产生免疫反应，但不一定能杀灭病原体，D错误。故选A13.在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞和组织才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答，叙述正确的是()①A过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶②B过程需要加入卡那霉素进行选择培养③C过程为脱分化过程，培养基中只需加入营养物质、琼脂④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测A.①②③④⑤ B.①②④⑤C.③④⑤ D.①③④⑤【答案】B〖祥解〗借抗虫棉的培育过程考查基因工程的基本操作程序以及基因分离定律的灵活运用，旨在考查对知识的理解和应用知识解决实际问题的能力。质粒作为运载体的特点：能够自我复制，或整合到染色体上随染色体复制；有多个限制酶切点(便于切割)；有标记基因(便于进行检验)目的基因整合到受体细胞的一条染色体上，而其同源染色体上没有该交易时时，基因遗传遵循分离定律。【详析】①A过程需要的酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶，①正确；②B过程需要加入卡那霉素进行选择培养，②正确；③C过程为脱分化过程，培养基中需加入营养物质、琼脂、激素以及卡拉霉素，③错误；④D过程可以用放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因作为探针进行分子水平的检测，④正确；⑤D过程可以用虫感染植株进行个体水平的检测，⑤正确；故选B。14.研究人员将大麦细胞的LTP1基因导入酵母中，让酵母产生LTP1蛋白。下图为该实验过程的部分流程。下列说法正确的是（）A.运用PCR扩增LTP1基因时，应选择左图的A和D作为引物B.为方便构建重组质粒，可在引物5’端添加限制酶的识别序列C.如图中为了筛选导入重组质粒的啤酒酵母，只需配制含青霉素的培养基D.为了让大麦的基因在酵母中表达，需要在目的基因两侧添加大麦的启动子和终止子【答案】B〖祥解〗图示表示将使啤酒产生丰富泡沫的LTPI基因植入啤酒酵母菌中，使其产生LTP1蛋白，酸出泡沫丰富的啤酒的过程，图中A为获取目的基因的过程，B为质粒，C为基因表达体。【详析】A、结合题意可知，DNA复制只能从5’到3’，而DNA聚合酶只能从引物的3’端延伸DNA链，因此构建前利用PCR技术扩增目的基因时，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取B和C作为引物，A错误；B、为构建重组质粒(即将目的基因和质粒整合到一起)，在引物5’端需要适当增加限制酶识别序列B正确；C、由图可知，构建基因表达载体时，四环素抗性基因被破坏，而青霉素抗性基因没有被破坏，因此将导入C的酵母菌分别在含有青霉素和四坏素的两种选择培养基上培养，则在含有青霉素的培养基上能存活，但在含有四环素的培养基上不能存活，才能筛选导入重组质粒的啤酒酵母，C错误；D、为了让大麦的基因在酵母中表达，需要在目的基因两侧添加酵母的启动子和终止子，D错误。故选B。15.蛋白质工程是基因工程的延伸，下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是（）A.通过蛋白质工程改造后的蛋白质的性状不可以遗传B.蛋白质工程和基因工程都需要构建基因表达载体C.蛋白质工程需要限制酶、DNA连接酶和载体等工具D.蛋白质工程经常要建立蛋白质高级结构的三维模型【答案】A〖祥解〗蛋白质工程是通过对基因进行修饰改造或重新合成，从而改造蛋白质进而改造性状。【详析】A、蛋白质工程是通过对基因进行修饰改造或重新合成，从而改造蛋白质进而改造性状，其本质是通过基因控制性状，故可遗传，A错误；B、蛋白质工程是通过对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，同基因工程一样，都需要构建基因表达载体，B正确；C、蛋白质工程需要限制酶、DNA连接酶和载体等工具，C正确；D、蛋白质工程先要根据预期蛋白质功能设计建立蛋白质高级结构的三维模型，D正确。故选A。二、非选择题(本题共5小题，共55分。)16.土壤中的有些细菌可以利用石油中的多环芳怪，研究人员从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌；采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。实验所用的培养基成分如下：培养基I：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。（1）实验所用培养基中作为碳源的成分是______。培养基中NH4NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体体内可以参与合成_____（答出2种即可）等生物大分子。（2）用稀释涂布平板法对菌株A计数时，每毫升菌液中细菌细胞数为2×108个，每个平板上涂布0.1mL，且每个平板上长出的菌落数约200个，则至少应将菌株A的菌液稀释_____倍。（3）为进一步探究并比较A、B两个菌株在不同条件下降解石油的能力，科研人员将A、B菌株分别接种在两瓶液体培养基I中培养，得到A、B菌液；再在液体培养基I、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板I、Ⅱ，并分别在平板I、Ⅱ上各打甲、乙两孔；在无菌条件下，将等量等浓度的A菌液和B-菌液分别接种到平板I的甲和乙两孔处，平板Ⅱ也进行同样的操作；适宜条件下培养相同时间，记录平板I、Ⅱ的透明圈大小如下表：菌株透明圈大小平板I平板ⅡA+++++B++-注：“+”表示有透明圈，“+”越多表示透明圈越大，“-”表示无透明圈本实验的自变量是____。推测在平板上透明圈出现的原因是_____。（4）现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理石油污染应选用的菌株是__，理由是____。【答案】（1）①.石油②.DNA、RNA、蛋白质（2）105（3）①.培养基的成分和菌株的类型②.细菌将平板中的石油分解（4）①.A②.A菌株降解石油的能力高于B菌株，并且在没有添加氮源的培养基中也能生长〖祥解〗（1）选择培养基是指在培养基中加入特殊营养物质或化学物质，允许特定微生物生长，阻止或抑制其他微生物生长的培养基。（2）培养基的成分主要包括碳源、氮源、无机盐和水。（3）种群数量呈现“J”型增长，t代后的种群数量为Nt=N0×λt，λ表示后一代是前一代种群数量的倍数。【解析】（1）由题干可知，该实验的实验目的为比较A和B两株菌降解石油的能力，故培养基中应只有石油做唯一碳源。生物大分子包括核酸、蛋白质、多糖等，其中含有N的为核酸和蛋白质。（2）根据题意，假设至少将摇瓶M中的菌液稀释X倍，才能保证稀释后的0.1mL菌液中细菌细胞数不超过200个，初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×108个/mL，则稀释之前0.1mL菌液中有2×107个细菌，可得2×107×（1/X）=200，则X=105，因此至少应将摇瓶M中的菌液稀释105倍。（3）本实验中人为改变的量是培养基的成分和菌株的类型，所以培养基的成分和菌株的类型是本实验的自变量。由于细菌将平板中的石油分解，则在平板上出现透明圈。（4）通过平板Ⅰ中A的透明圈较大，得出A分解石油的能力强于B，平板Ⅱ中A的透明圈较大，说明A在缺氮条件下生存和繁殖能力强于B，所以在缺氮条件下，治理油污应选用A菌株。17.人血清白蛋白(HSA)是由肝脏细胞合成的，具有重要的医用价值，原本只能从血清中提取，现利用基因工程的方法生产HSA．请结合相关知识回答下列问题。(图甲为获取的含HSA基因的DNA片段及酶切位点；图乙是三种限制酶的识别序列；图丙为质粒结构示意图)（1）科研人员利用人肝细胞中的___________构建出cDNA文库，该过程利用的原料是___________，通过该方法合成的DNA含量较少，可通过PCR进行扩增获取较多的DNA分子，根据该基因的序列(5'-CTAG-GTCGAAATTC…TCTCCAACGATCGG-3')，应选择___________作为PCR的引物。A．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'B．引物I是5'-CTAGGTCGAAATTC-3'，引物Ⅱ是5'-TCTCCAACGATCGG-3'C．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-AGAGGTTGCTAGCC-3'D．引物I是5'-GATCCAGCTTTAAG-3'，引物Ⅱ是5'-CCGATCGTTGGAGA-3'为使HSA基因能与质粒正确连接，根据图甲、乙、丙，应选择限制酶___________切割目的基因。（2）PCR扩增结束后需要对PCR产物进行检测，常采用电泳的方法。电泳一段时间后进行检测，若电泳带有___________条，且与DNAMarker对比，产物大小正确，表明PCR扩增成功。（3）目的基因与质粒连接后可以导入到不同的受体细胞中进行表达。目的基因的表达包括转录和翻译两个步骤，后者的原料是___________。若导入到原核生物大肠杆菌中，可用CaCl2处理大肠杆菌，有利于重组质粒的导入的原因是___________。但由于原核细胞中缺少___