生物学生物研究实验室研究实习报告

生物学生物研究实验室研究实习报告一、摘要

2023年6月5日至8月22日，我在XX生物研究实验室担任助理研究员，参与细胞分化信号通路研究项目。通过8周实践，完成对30份样本的RNA提取实验，平均纯度达98.2%，为后续qPCR验证提供合格材料；协助构建并优化了3种双荧光素酶报告基因系统，使报告基因活性检测重复性系数（RSD）降低至5.3%；运用ImageJ软件对200张显微图像进行定量分析，建立细胞核形态参数数据库，相关系数（R²）达0.89。掌握RNA提取纯化检测全流程操作规范，熟悉双荧光素酶报告系统构建方法，验证了细胞信号通路干预的实验可行性，形成可复用的样本标准化处理方法论。

二、实习内容及过程

2023年6月5日入职实验室，我的实习目的主要是了解细胞信号通路研究的实际操作流程，并参与项目执行。单位是XX生物研究实验室，研究方向偏向于肿瘤细胞分化机制，实验室有十几个研究员和博士后，设备挺全乎，流式细胞仪、高通量测序平台都挺新。

第13周主要熟悉环境，导师给我安排了RNA提取实验培训。6月12日第一次独立操作TRIzol法提取总RNA，用了15份样本，纯度在97%99%之间，但有两份得率低到4%，导师说可能是裂解不充分。我重新调整了试剂比例，加了一步温和的氯仿抽提，第二次做的时候得率提到8%，纯度也稳定在98%以上。这个经历让我记住了样本均一性对结果的重要性。

第46周参与双荧光素酶报告基因实验。6月25日构建了第一个报告系统，用野生型JAK2基因检测EGFR信号通路活性，但报告基因荧光值波动大，RSD达到12%。后来发现是细胞转染效率问题，实验室常用PEI转染试剂，但效果不理想。我尝试优化了转染条件，把PEI浓度从3μg/mL降到1.5μg/mL，同时加入20%FBS，重复三次实验后RSD降到5.3%，荧光信号也跟预期方向变化了。导师说这种优化在实验里很常见，关键要找对变量。

第78周负责显微图像定量分析。7月30日拿到一批共200张H&E染色图片，需要量化细胞核形态参数。刚开始用肉眼测量，误差明显，后来学了ImageJ软件的ROI分析功能，通过设置阈值自动分割细胞核，再用粒度分析方法计算圆形度、面积等参数，相关系数R²提升到0.89。虽然还有小问题，但基本能满足项目需求。

遇到的最大困难是早期实验失败率高。比如有一次做WesternBlot，膜上条带很弥散，花了两天才意识到是抗体稀释比例不对。解决方法就是查阅文献，并请教师兄师姐，最后把抗体浓度从1:1000降到1:2000，条带才清晰。这个经历让我明白文献和沟通同样重要。

实习成果具体体现在：完成30份样本RNA提取，合格率98.2%；建立双荧光素酶报告系统稳定性标准（RSD<5.3%）；生成200张图像的细胞核参数数据库。这些数据后来直接用于导师的基金申请材料。这段经历让我对实验设计有了更直观认识，比如意识到对照组设置要全面，不能只看主效应。

实验室管理上，感觉每周的组会效率不高，经常跑题，有时候一个简单问题讨论半天。培训机制也有待改进，新来的师兄师姐都是靠师兄带，没有系统培训手册。岗位匹配度方面，我的任务偏向技术执行，但希望能接触更多实验设计讨论。建议可以建立标准化操作流程文档，并定期组织专题培训，比如针对常用软件的使用技巧。另外可以多安排轮岗，这样能更快了解不同实验方向需求。

三、总结与体会

这8周在实验室的经历，让我对生物研究有了更实的感受。刚开始6月5日进实验室时，面对实际操作还是有些懵，特别是RNA提取时，第一次做15个样本，纯度数据在97%99%之间，但有两份低于5%，当时挺焦虑的，因为知道后续qPCR会受影响。后来跟着师兄师姐学，调整了TRIzol试剂比例，加了一步氯仿重抽，第二次做时得率提到8%以上，纯度也稳定在98%以上，这个转变让我明白严谨操作的重要性。

双荧光素酶报告系统优化是另一个收获。6月25日第一次构建时，野生型JAK2检测EGFR通路，报告基因荧光值RSD高达12%，波动太大了。后来发现是细胞转染效率问题，实验室常用PEI转染试剂，但效果不理想。我尝试把PEI浓度从3μg/mL降到1.5μg/mL，同时加入20%FBS，重复三次实验后RSD降到5.3%，荧光信号也跟预期方向变化了。这个过程中体会到实验设计要考虑多因素，不能只看单一指标。

7月30日拿到200张H&E染色图片进行定量分析时，一开始用肉眼测量细胞核参数，误差很大。后来学了ImageJ软件的ROI分析功能，通过设置阈值自动分割细胞核，再用粒度分析方法计算圆形度、面积等参数，相关系数R²提升到0.89。虽然还有小问题，但基本能满足项目需求，这个经历让我意识到数字化工具对科研的巨大帮助。

这次实习最大的价值是让我完成了从学生到职场人的心态转变。以前做实验觉得差不多就行，现在明白每个步骤都要有数据支撑。比如有一次WesternBlot膜上条带很弥散，花了两天时间排查，最后发现是抗体稀释比例不对，从1:1000降到1:2000才解决。这个经历让我明白实验失败是常态，关键是要有耐心和解决问题的能力。

对职业规划来说，这次经历让我更清楚自己喜欢什么。我发现自己对实验技术细节很感兴趣，但也很想参与实验设计。接下来打算深化分子生物学技能，特别是学习更多生物信息学分析方法，考虑考取相关证书，比如实验技术师资格证。同时也在关注行业趋势，比如单细胞测序和空间转录组学在肿瘤研究中的应用越来越广，这些技术可能成为未来发展方向。

实习也让我看到自身不足，比如刚开始写实验记录不规范，后来才养成及时记录关键参数和操作细节的习惯。实验室管理上，每周组会经常跑题，效率不高，这让我意识到团队沟通很重要。未来如果参与项目，希望能更早接触实验设计讨论，而不是只做执行者。总的来说，这次实习让我收获满满，不仅提升了专业技能，更让我对科研工作有了更深的理解和敬畏。

四、致谢

感谢XX生物研究实验室提供这次