肝纤维化细胞外基质调控机制

肝纤维化细胞外基质调控机制演讲人01肝纤维化细胞外基质调控机制02肝纤维化中ECM的动态失衡：从生理稳态到病理重塑03ECM降解失衡：MMPs/TIMPs系统的失调控04细胞间通讯在ECM调控中的作用：HSCs的激活是核心环节05肝微环境对ECM调控的影响：炎症、氧化应激与代谢重编程06靶向ECM调控的治疗策略：从基础研究到临床转化07总结与展望：ECM调控机制的整合研究与个体化治疗目录01肝纤维化细胞外基质调控机制肝纤维化细胞外基质调控机制肝纤维化是多种慢性肝病进展至肝硬化的必经阶段，其核心病理特征是细胞外基质（ExtracellularMatrix,ECM）的过度合成与降解失衡，导致ECM在肝内异常沉积。在我的实验室中，我们长期致力于解析肝纤维化ECM调控的分子网络，因为ECM不仅是肝组织的“骨架”，更是细胞间信号交流的“平台”——它的动态平衡维系着肝脏的正常结构与功能，而其失衡则直接驱动纤维化的发生发展。本文将从ECM的生理功能、纤维化中的动态重塑、合成与降解的调控机制、细胞间通讯的作用、微环境的影响，以及靶向ECM的治疗策略六个维度，系统阐述肝纤维化ECM调控的复杂网络，为临床干预提供理论依据。02肝纤维化中ECM的动态失衡：从生理稳态到病理重塑正常肝脏ECM的组成与生理功能在健康肝脏中，ECM约占肝湿重的3%-5%，主要由胶原（约占ECM总量的70%-80%）、非胶原糖蛋白（如层粘连蛋白、纤维连接蛋白）和蛋白聚糖（如透明质酸）三大类物质组成。其中，Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型胶原是主要结构蛋白，Ⅰ型胶原分布于汇管区和中央静脉周围，形成纤维支架；Ⅲ型胶原在窦周隙（Disse腔）构成基底膜的主要成分；Ⅳ型胶原则与层粘连蛋白共同形成肝窦内皮细胞（LSECs）的基底膜，构成物质交换的屏障。ECM并非静态的“填充物”，而是通过其三维结构和生物活性分子参与肝脏的多种生理功能：①维持肝组织的结构完整性，为肝细胞、肝星状细胞（HSCs）、库普弗细胞（KCs）等提供黏附位点；②调控细胞增殖、分化与凋亡，例如层粘连蛋白通过与整合素受体结合，激活肝细胞的PI3K/Akt信号通路，正常肝脏ECM的组成与生理功能促进其存活；③作为生长因子和细胞因子的“储备库”，如转化生长因子-β1（TGF-β1）可与ECM中的蛋白聚糖结合，在需要时被释放并发挥生物学效应；④介导细胞间通讯，通过“力学感受”机制将细胞外信号转化为细胞内应答，维持肝脏微环境的稳态。肝纤维化ECM的异常沉积与特征性改变当肝脏受到慢性损伤（如病毒性肝炎、酒精、脂肪肝、自身免疫性肝病等）时，ECM的动态平衡被打破，呈现“合成增加、降解减少、成分异常、交联增强”的病理特征。1.ECM成分的比例改变：正常肝脏以Ⅳ型胶原为主的基底膜成分为主，而纤维化肝组织中，Ⅰ型、Ⅲ型胶原显著升高（可增加5-10倍），其中Ⅰ型胶原的沉积是纤维化晚期的标志，导致肝脏质地变硬；非胶原糖蛋白中的纤维连接蛋白（FN）和层粘连蛋白（LN）也明显增加，前者作为HSCs活化的“启动信号”，后者则促进ECM的交联。2.ECM的交联与硬化：在赖氨酰氧化酶（LOX）和赖氨酰氧化酶样蛋白（LOXLs）的催化下，ECM分子间形成共价交联，尤其是胶原纤维的交联，使其机械强度增加、韧性增强，对降解的抵抗力显著提升。我们在临床样本分析中发现，早期纤维化患者肝组织中LOX1的表达已较健康人升高2-3倍，而晚期肝硬化患者甚至升高5-8倍，这种“胶原过度交联”是ECM难以被降解的关键原因之一。肝纤维化ECM的异常沉积与特征性改变3.ECM的降解障碍：正常情况下，基质金属蛋白酶（MMPs）如MMP-1（胶原酶）、MMP-2（明胶酶）可降解ECM，而其活性被组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）抑制。纤维化肝组织中，TIMP-1、TIMP-2的表达显著升高（TIMP-1可升高10倍以上），导致MMP/TIMP失衡，ECM降解能力下降。此外，异常沉积的ECM还可通过“物理屏障”作用，阻碍MMPs与底物的接触，进一步加剧降解障碍。这种ECM的异常重塑，不仅破坏了肝脏的正常结构（如肝小叶结构紊乱、假小叶形成），还通过“力学微环境改变”激活HSCs、促进炎症细胞浸润，形成“ECM沉积-细胞激活-更多ECM合成”的恶性循环，使纤维化持续进展。肝纤维化ECM的异常沉积与特征性改变二、ECM合成调控的分子网络：TGF-β1的核心地位与信号交叉对话ECM的过度合成是肝纤维化的核心环节，而这一过程受到多种细胞因子、信号通路和转录因子的精密调控。其中，TGF-β1是迄今发现的最强的促ECM合成因子，其通过“经典Smad通路”和“非经典Smad通路”协同调控胶原基因的表达，同时与其他促纤维化因子（如CTGF、PDGF、IL-13等）形成“信号交叉对话”，构成复杂的调控网络。TGF-β1/Smad信号通路：ECM合成的“主开关”TGF-β1在肝脏中主要由HSCs、KCs、肝细胞等分泌，以潜伏相关肽（LAP）和潜伏TGF-β结合蛋白（LTBP）组成的复合物形式分泌至细胞外，需被蛋白酶（如纤溶酶）、整合素或氧化应激激活后才能与细胞膜上的TGF-βⅡ型受体（TβRⅡ）结合，进而磷酸化Ⅰ型受体（TβRⅠ），活化的TβRⅠ磷酸化Smad2/3，形成Smad2/3-Smad4复合物，转入细胞核内与DNA结合，激活胶原基因（如COL1A1、COL3A1）的转录。在我们的研究中，通过构建HSCs特异性TGF-β1基因敲除小鼠，我们发现肝纤维化程度较野生型小鼠降低60%，且Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白的表达显著下降，证实TGF-β1是ECM合成的关键驱动因子。此外，Smad7作为Smad2/3的抑制性分子，可被TGF-β1自身诱导，形成“负反馈调节”，但在纤维化肝组织中，Smad7的表达常被下调（如通过泛素化降解），导致TGF-β1信号过度激活，进一步促进ECM合成。非经典TGF-β1信号通路：与经典通路的协同放大除Smad通路外，TGF-β1还可通过MAPK（ERK、JNK、p38）、PI3K/Akt、NF-κB等非经典通路调控ECM合成。例如，TGF-β1激活的ERK可磷酸化转录因子c-Jun，与c-Fos形成AP-1复合物，结合到COL1A1基因的启动子区域，增强其转录；PI3K/Akt通路则可通过激活mTORC1，促进胶原mRNA的翻译和蛋白质合成。更值得关注的是，经典与非经典通路之间存在“交叉放大”效应：Smad2/3可与AP-1、NF-κB等形成复合物，协同激活ECM相关基因；而NF-κB还可通过诱导TGF-β1的表达，形成“正反馈环路”。我们在HSCs的体外实验中发现，同时抑制Smad3和ERK通路，对Ⅰ型胶原合成的抑制效果（抑制率达75%）显著优于单独抑制任一通路（抑制率分别为45%和30%），提示多靶点干预的必要性。其他促ECM合成因子：TGF-β1的“协同伙伴”1.结缔组织生长因子（CTGF）：作为TGF-β1下游的效应分子，CTGF可被TGF-β1诱导表达，通过整合素αvβ3受体激活PI3K/Akt和MAPK通路，进一步促进胶原合成。此外，CTGF还能增强HSCs对TGF-β1的敏感性，形成“TGF-β1-CTGF”正反馈轴。在临床样本中，CTGF表达水平与肝纤维化分期呈正相关，且在TGF-β1基因敲除的小鼠中，CTGF表达显著降低，提示其是TGF-β1发挥促纤维化作用的关键中介。2.血小板衍生生长因子（PDGF）：主要由血小板、KCs和内皮细胞分泌，是HSCs最强的有丝分裂原，通过PDGF受体（PDGFR）激活Ras/MAPK和PI3K/Akt通路，促进HSCs增殖和转化为肌成纤维细胞（Myofibroblasts,MFs），后者是ECM合成的主要细胞来源。我们在体外实验中发现，PDGF-BB刺激HSCs24小时后，其增殖能力增强3-4倍，同时α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达升高，提示PDGF不仅促进HSCs活化，还增强其ECM合成能力。其他促ECM合成因子：TGF-β1的“协同伙伴”3.白细胞介素-13（IL-13）：主要由Th2细胞和嗜酸性粒细胞分泌，通过IL-13受体α1（IL-13Rα1）激活STAT6通路，诱导TGF-β1和CTGF的表达，促进ECM合成。在酒精性肝病和寄生虫感染引起的肝纤维化中，IL-13水平显著升高，而抗IL-13抗体可显著减轻纤维化程度，提示其是特定类型肝纤维化的重要调控因子。03ECM降解失衡：MMPs/TIMPs系统的失调控ECM降解失衡：MMPs/TIMPs系统的失调控ECM的降解是维持其动态平衡的关键环节，主要由基质金属蛋白酶（MMPs）及其组织抑制剂（TIMPs）调控。在肝纤维化过程中，MMPs活性降低、TIMPs表达升高，导致ECM降解能力下降，异常沉积的ECM难以被清除，形成“合成-降解失衡”的恶性循环。MMPs：ECM降解的“执行者”MMPs是一类依赖Zn²⁺的蛋白水解酶，根据底物不同可分为：①胶原酶（MMP-1、MMP-8、MMP-13），可降解Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原；②明胶酶（MMP-2、MMP-9），可降解Ⅳ型胶原和明胶（变性胶原）；③基质溶解素（MMP-3、MMP-10），可降解蛋白聚糖、层粘连蛋白和纤维连接蛋白；④膜型MMPs（MT1-MMP、MT2-MMP），可激活MMP-2并降解ECM。在正常肝脏中，MMP-1、MMP-2、MMP-9主要表达于HSCs、KCs和肝细胞，参与ECM的生理更新；而在纤维化肝脏中，MMPs的表达和活性受到多重抑制：①TIMPs的表达升高，直接抑制MMPs活性；②ECM过度沉积导致组织缺氧，通过HIF-1α下调MMP-1、MMP-13的表达；③氧化应激产生的活性氧（ROS）可导致MMPs的锌离子中心被氧化失活。例如，我们在肝硬化患者肝组织中检测到MMP-1的活性较健康人降低70%，而TIMP-1活性升高3倍，这种“MMP/TIMP失衡”是ECM降解障碍的直接原因。TIMPs：MMPs活性的“制动器”TIMPs是一组可逆性抑制MMPs活性的蛋白质，主要包括TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4，其中TIMP-1和TIMP-2在肝脏中高表达。TIMP-1主要通过抑制MMP-9、MMP-1和MMP-3活性，抑制ECM降解；TIMP-2则通过与MT1-MMP形成复合物，激活MMP-2，但在TIMP-2过表达时，可通过与MMP-2结合阻断其与MT1-MMP的相互作用，反而抑制MMP-2活性。在纤维化肝组织中，TIMP-1的表达主要来源于活化的HSCs和MFs，其表达水平与肝纤维化程度呈正相关。我们通过腺病毒载体将TIMP-1siRNA导入肝纤维化模型大鼠，发现TIMP-1表达降低60%，MMP-1活性升高2倍，肝脏胶原沉积减少50%，提示抑制TIMP-1可有效促进ECM降解，逆转纤维化。其他调控ECM降解的机制除MMPs/TIMPs系统外，ECM的降解还受到其他机制的调控：①纤溶酶系统：纤溶酶可降解ECM中的蛋白聚糖和纤维连接蛋白，还可激活MMPs（如MMP-3），而纤溶酶原激活物抑制剂（PAI-1）可抑制纤溶酶活性，在纤维化肝组织中，PAI-1表达升高，纤溶酶活性下降；②自噬：自噬可通过降解细胞内异常的ECM成分（如胶原纤维），参与ECM稳态的维持，而纤维化肝组织中自噬活性常被抑制，导致ECM降解减少；③内质网应激：ECM过度沉积可诱导肝细胞和HSCs内质网应激，通过CHOP和ATF4通路下调MMPs表达，加剧ECM降解障碍。04细胞间通讯在ECM调控中的作用：HSCs的激活是核心环节细胞间通讯在ECM调控中的作用：HSCs的激活是核心环节肝纤维化的发生发展是多细胞相互作用的结果，其中肝星状细胞（HSCs）的激活是ECM过度合成的核心环节。HSCs在正常肝脏中呈静止态，胞质富含维生素A，主要功能是储存维生素A、合成基底膜成分和调节肝窦血流；当肝脏受到损伤时，HSCs被“激活”，转化为肌成纤维细胞（MFs），失去维生素A储存能力，大量合成ECM成分（如Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白），并表达α-SMA，获得收缩功能，参与肝内血管张力调节。HSCs激活的“启动信号”：旁分泌与自分泌调控HSCs的激活是一个多阶段、多因子调控的过程，其“启动信号”主要来源于其他细胞的旁分泌和自身的自分泌。1.库普弗细胞（KCs）的旁分泌作用：KCs是肝脏中的巨噬细胞，可被损伤相关分子模式（DAMPs，如HMGB1、DNA）和病原相关分子模式（PAMPs，如LPS）激活，释放TGF-β1、PDGF、TNF-α等细胞因子。其中，TGF-β1是HSCs激活的关键因子，通过Smad通路诱导α-SMA和ECM基因的表达；PDGF则通过MAPK通路促进HSCs增殖和迁移。我们在体外共培养实验中发现，用LPS刺激KCs24小时后，其conditionedmedium可使HSCs的α-SMA表达升高3倍，而用TGF-β1中和抗体预处理后，α-SMA表达仅升高1.2倍，证实TGF-β1是KCs介导HSCs激活的主要因子。HSCs激活的“启动信号”：旁分泌与自分泌调控2.肝细胞的旁分泌作用：肝细胞损伤后可释放ROS、DAMPs和细胞因子（如TGF-β1、CTGF），激活HSCs。此外，肝细胞凋亡后形成的凋亡小体可被KCs吞噬，进一步激活KCs，释放促纤维化因子。在胆汁淤积性肝病中，肝细胞内胆汁酸的蓄积可诱导氧化应激和内质网应激，通过JNK通路激活HSCs，促进ECM合成。3.内皮细胞的旁分泌作用：肝窦内皮细胞（LSECs）在正常肝脏中形成窗孔结构，允许大分子物质通过；在纤维化早期，LSECs的窗孔减少、基底膜增厚（“毛细血管化”），释放TGF-β1、PDGF和血管内皮生长因子（VEGF），激活HSCs并促进其迁移至损伤区域。此外，LSECs还可分泌一氧化氮（NO），通过cGMP通路抑制HSCs的增殖和胶原合成，而纤维化时LSECs的NO合成减少，其对HSCs的抑制作用减弱。HSCs激活的“启动信号”：旁分泌与自分泌调控4.HSCs的自分泌调节：激活的HSCs可自分泌TGF-β1、PDGF、CTGF等因子，形成“正反馈环路”，进一步维持其活化状态。例如，HSCs激活后可分泌TGF-β1，通过自分泌Smad通路持续诱导ECM基因表达；同时，PDGF的自分泌可促进HSCs增殖，扩大ECM合成细胞群。HSCs的“转分化”与ECM合成的功能获得HSCs的激活本质是“转分化”（Transdifferentiation）过程，即从静止态的维生素A储存细胞转化为具有收缩性和ECM合成能力的MFs。这一过程涉及表型改变（α-SMA表达升高）、基因表达谱改变（ECM基因上调、维生素A代谢基因下调）和功能改变（合成ECM、收缩血管）。在转分化过程中，表观遗传调控发挥重要作用：①DNA甲基化：ECM基因（如COL1A1）启动子区域的CpG岛去甲基化，促进其转录；②组蛋白修饰：组蛋白乙酰转移酶（HATs）如p300/CBP可激活ECM基因的启动子，而组蛋白去乙酰化酶（HDACs）抑制剂可抑制HSCs的激活和ECM合成；③非编码RNA：miR-29家族可靶向抑制COL1A1、COL3A1mRNA的表达，而在纤维化肝组织中，miR-29的表达下调，导致ECM合成增加；lncRNAH19可通过吸附miR-148a，上调DNMT1（DNA甲基转移酶1），促进COL1A1基因启动子的甲基化，抑制其表达——这一发现为ECM合成的表观遗传调控提供了新的靶点。05肝微环境对ECM调控的影响：炎症、氧化应激与代谢重编程肝微环境对ECM调控的影响：炎症、氧化应激与代谢重编程肝纤维化是“损伤-修复”失衡的结果，而肝脏微环境的改变（如炎症浸润、氧化应激、代谢紊乱）是驱动ECM调控网络失衡的关键外源性因素。这些因素不仅直接促进ECM合成，还通过激活HSCs、调控MMPs/TIMPs平衡，形成“微环境异常-ECM沉积-微环境进一步恶化”的恶性循环。炎症微环境：ECM合成的“驱动器”肝脏慢性损伤时，炎症细胞（单核细胞/巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞）浸润，释放大量促炎因子和趋化因子，如TNF-α、IL-1β、IL-6、CCL2等，这些因子通过多种机制促进ECM合成：①激活HSCs：TNF-α可通过NF-κB通路诱导HSCs表达α-SMA和ECM基因；IL-1β可增强TGF-β1的促纤维化作用；②促进MMPs/TIMPs失衡：IL-1β可诱导TIMP-1表达，抑制MMPs活性；③募集纤维化细胞：CCL2可招募单核细胞转化为巨噬细胞，进一步释放促纤维化因子。在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）相关纤维化中，炎症微环境与代谢紊乱密切相关：游离脂肪酸（FFA）蓄积可诱导肝细胞氧化应激和内质网应激，释放DAMPs，激活KCs，释放TNF-α和IL-1β，进而激活HSCs；此外，肠道菌群失调导致的“肠-肝轴”紊乱，使脂多糖（LPS）入血增加，炎症微环境：ECM合成的“驱动器”通过TLR4/NF-κB通路激活KCs和HSCs，促进ECM合成。我们在高脂饮食诱导的NAFLD小鼠模型中发现，肝脏中TNF-α和IL-1β的水平与胶原沉积呈正相关，而用抗TNF-α抗体治疗后，纤维化程度显著减轻。氧化应激：ECM交联与HSCs激活的“催化剂”氧化应激是指ROS（如超氧阴离子、羟自由基、过氧化氢）的产生与抗氧化系统失衡的状态，是多种慢性肝损伤的共同环节。ROS可通过多种机制调控ECM：①激活HSCs：ROS可激活HSCs的NADPH氧化酶（NOX），进一步增加ROS产生，形成“ROS正反馈环路”；同时，ROS可激活JNK和p38MAPK通路，诱导HSCs表达α-SMA和ECM基因；②促进ECM交联：ROS可激活LOX和LOXLs，促进胶原纤维交联，增加ECM的机械强度和对降解的抵抗力；③抑制ECM降解：ROS可导致MMPs的锌离子中心氧化失活，同时诱导TIMP-1表达，加剧MMPs/TIMPs失衡。氧化应激：ECM交联与HSCs激活的“催化剂”在酒精性肝病中，乙醇代谢产生的乙醛可直接诱导氧化应激，通过线粒体功能障碍和NADPH氧化酶激活增加ROS产生；此外，乙醇还可消耗谷胱甘肽（GSH）等抗氧化剂，削弱肝脏的抗氧化能力。我们在乙醇诱导的HSCs活化模型中发现，用NAC（N-乙酰半胱氨酸，ROS清除剂）预处理可显著降低ROS水平，抑制α-SMA和Ⅰ型胶原的表达，提示抗氧化治疗可能是改善ECM调控的有效策略。代谢重编程：HSCs活化的“能量底物”代谢重编程是指细胞在病理状态下改变能量代谢方式以适应生存需求的现象，是HSCs激活的重要特征。在正常肝脏中，HSCs主要依赖脂肪酸氧化供能；而激活后，HSCs转向糖酵解和戊糖磷酸途径（PPP）为主，以满足其增殖和ECM合成的能量需求。1.糖酵解增强：HSCs激活后，葡萄糖转运体（GLUT1）表达升高，糖酵解关键酶（如HK2、PFK1、PKM2）活性增强，乳酸产生增加。PKM2作为糖酵解的限速酶，不仅参与糖酵解，还可进入细胞核，与HIF-1α和β-catenin形成复合物，激活ECM基因（如COL1A1）的转录。我们在HSCs的体外实验中发现，用2-DG（糖酵解抑制剂）处理可显著抑制其增殖和胶原合成，而用棕榈酸（脂肪酸）处理则无明显效果，提示糖酵解是HSCs活化的主要能量来源。代谢重编程：HSCs活化的“能量底物”2.脂代谢紊乱：在NAFLD相关纤维化中，FFA蓄积可诱导HSCs内质网应激和氧化应激，激活TGF-β1/Smad通路，促进ECM合成；此外，胆固醇结晶可激活NLRP3炎症小体，释放IL-1β，进一步激活HSCs。而HSCs激活后，又可通过分泌细胞因子促进肝细胞脂质沉积，形成“脂代谢紊乱-HSCs激活-更多脂质沉积”的恶性循环。3.氨基酸代谢改变：HSCs激活后，谷氨酰胺代谢增强，谷氨酰胺转化为α-酮戊二酸（α-KG），进入三羧酸循环（TCA）产生能量，同时为胶原蛋白的合成提供前体物质（如脯氨酸）。此外，精氨酸代谢产生的NO可通过cGMP通路抑制HSCs的增殖和胶原合成，而纤维化时精氨酸酶-1（ARG1）表达升高，消耗精氨酸，减少NO产生，促进ECM合成。06靶向ECM调控的治疗策略：从基础研究到临床转化靶向ECM调控的治疗策略：从基础研究到临床转化基于对肝纤维化ECM调控机制的深入理解，靶向ECM合成、降解、细胞激活或微环境的治疗策略已成为研究热点。尽管目前尚无特效的抗纤维化药物获批，但多种靶向ECM调控的药物在临床前研究中显示出良好效果，部分已进入临床试验阶段。抑制ECM合成：靶向TGF-β1及相关通路1.TGF-β1中和抗体：如fresolimumab，可中和TGF-β1，阻断其与受体的结合，抑制Smad通路激活。在Ⅰ期临床试验中，fresolimumab可降低肝硬化患者的血清TGF-β1水平，改善肝纤维化指标，但其全身性副作用（如免疫抑制、心血管毒性）限制了长期应用。012.TGF-β受体激酶抑制剂：如galunisertib，可选择性抑制TβRⅠ的激酶活性，阻断TGF-β1信号传导。在晚期肝细胞癌（HCC）合并肝纤维化的Ⅱ期临床试验中，galunisertib可显著降低肝脏硬度值（LSM），改善纤维化分期，且安全性良好。023.CTGF抑制剂：如pamrevlumab，是抗CTGF的人源化单克隆抗体，可阻断CTGF与整合素αvβ3的结合，抑制ECM合成。在胰腺纤维化和特发性肺纤维化的临床试验中显示出疗效，目前正开展治疗肝纤维化的Ⅱ期临床试验。03促进ECM降解：靶向MMPs/TIMPs平衡1.TIMP-1抑制剂：如抗TIMP-1siRNA或反义寡核苷酸，可降低TIMP-1表达，恢复MMPs活性。在动物实验中，TIMP-1siRNA可通过脂质体递送至肝脏，显著降低肝纤维化程度，且无明显毒性。2.MMPs激活剂：如他汀类药物，可通过上调MMP-1、MMP-13的表达，促进ECM降解。在临床前研究中，阿托伐他汀可减轻胆汁淤积性肝纤维化小鼠的胶原沉积，其机制可能与抑制Rho/ROCK通路和激活MMPs有关。抑制HSCs激活：靶向细胞间通讯与表观遗传1.PDGF受体拮抗剂：如imatinib，是PDGF受体酪氨酸激酶抑制剂，可阻断PDGF诱导的HSCs增殖和迁移。在临床前研究中，imatinib可减轻肝纤维化，但其心脏毒性限制了临床应用。2.维生素D受体（VDR）激动剂：如帕立骨化醇，可通过激活VDR，抑制HSCs的增殖和ECM合成，同时促进HSCs凋亡。在慢性丙型肝炎相关肝纤维化的临床试验中，帕立骨化醇可降低血清透明质酸和PIIINP水平，改善纤维化分期。3.表观遗传调控药物：如HDAC抑制剂（伏立诺他）和DNMT抑制剂（5-aza-2'-deoxycytidine），可通过调节ECM基因的表观遗传修饰，抑制其表达。在动物实验中，HDAC抑制剂可显著减轻肝纤维化，且与TGF-β1抑制剂联用具有协同作用。123改善肝微环境：抗炎、抗氧化与代谢调节1.抗炎治疗：如英夫利昔单抗（抗TNF-α抗体）、JAK抑制剂（托法替布），可减少炎症细胞浸润和促炎因子释放，间接抑制ECM合成。在自身免疫性肝病相关肝纤维化的临床试验中，JAK抑制剂可改善肝纤维化指标，减少肝纤维化进展。123.代谢调节：如GLP-1受体激动剂（利拉鲁肽）、FXR激动剂（奥贝胆酸），可改善脂代谢紊乱和胰岛素抵抗，减轻NAFLD相关肝纤维化。在临床试验中，利拉鲁肽可降低肝脏硬度值，改善脂肪肝和纤维化，其机制可能与抑制HSCs激活和促进脂肪酸氧化有关。32.抗氧化治疗：如NAC、水飞蓟素，可清除ROS，减轻氧化应激对HSCs的激活作用。在酒精性肝病的临床试验中，NAC可降低血清ALT和AST水平，改善肝纤