合成生物抗菌肽研发工程师岗位招聘考试试卷及答案

合成生物抗菌肽研发工程师岗位招聘考试试卷及答案填空题1.阳离子抗菌肽通常带______电荷，易与细菌细胞膜结合。2.合成抗菌肽的两种主要方法是化学合成和______。3.抗菌肽的常见二级结构包括α-螺旋和______。4.最低抑菌浓度的英文缩写是______。5.固相合成抗菌肽常用的保护基策略是______（Fmoc）。6.基因工程表达抗菌肽常与______蛋白融合以降低毒性。7.天然抗菌肽的重要来源包括昆虫、植物和______。8.毕赤酵母表达系统可实现抗菌肽的______表达，便于纯化。9.抗菌肽破坏细菌细胞膜的主要方式是形成______。10.液相合成抗菌肽适合长度______的肽链（填“>50aa”或“<50aa”）。单项选择题1.以下哪种不是抗菌肽的抗菌机制？A.破坏细胞膜B.抑制细胞壁合成C.抑制核酸复制D.促进细胞增殖2.固相合成抗菌肽中，脱除Fmoc保护基的试剂是？A.TFAB.哌啶C.盐酸D.醋酸3.以下哪种宿主不常用于基因工程表达抗菌肽？A.大肠杆菌B.毕赤酵母C.哺乳动物细胞D.枯草芽孢杆菌4.抗菌肽与传统抗生素相比，核心优势是？A.广谱抗菌B.低毒性C.不易耐药D.易降解5.检测抗菌肽活性的常用方法是？A.MIC测定B.ELISAC.WesternblotD.PCR6.富含半胱氨酸的抗菌肽是？A.CecropinB.DefensinC.MagaininD.Thionin（植物来源）7.液相合成抗菌肽的常用缩合试剂不包括？A.DCCB.HBTUC.TFAD.DIC8.抗菌肽的长度通常为？A.5-10aaB.10-50aaC.50-100aaD.>100aa9.以下哪种生物是抗菌肽的天然来源？A.家蚕B.大肠杆菌C.酿酒酵母D.小鼠（仅选项）10.融合表达抗菌肽的目的不包括？A.提高表达量B.便于纯化C.增强活性D.降低毒性多项选择题1.抗菌肽的分类依据包括？A.来源B.结构C.电荷D.抗菌谱2.基因工程表达抗菌肽的常用宿主有？A.大肠杆菌B.毕赤酵母C.昆虫细胞D.枯草芽孢杆菌3.抗菌肽的应用领域包括？A.医药B.农业C.食品防腐D.化妆品4.影响抗菌肽活性的因素有？A.氨基酸序列B.二级结构C.电荷D.疏水性5.固相合成抗菌肽的关键步骤包括？A.树脂连接B.氨基酸偶联C.脱保护D.裂解纯化6.抗菌肽活性检测的指标有？A.MICB.MBCC.IC50D.EC507.属于阳离子抗菌肽的是？A.CecropinB.DefensinC.MagaininD.阴离子抗菌肽（排除）8.抗菌肽的非膜作用机制包括？A.抑制蛋白合成B.抑制核酸复制C.激活自溶酶D.破坏细胞壁9.毕赤酵母表达系统的优势是？A.分泌表达B.翻译后修饰C.高表达量D.成本低10.抗菌肽研发涉及的生物信息学方法有？A.序列比对B.结构预测C.分子对接D.活性位点分析判断题1.所有抗菌肽都带正电荷。（×）2.固相合成可实现抗菌肽大规模生产。（×）3.MIC是最低杀菌浓度。（×）4.大肠杆菌表达抗菌肽需融合表达。（√）5.抗菌肽对真菌无活性。（×）6.毕赤酵母可分泌抗菌肽。（√）7.液相合成适合长肽（>50aa）。（√）8.抗菌肽易产生耐药性。（×）9.天然抗菌肽仅来源于动物。（×）10.环化可提高抗菌肽稳定性。（√）简答题1.简述化学固相合成抗菌肽的基本流程。答案：采用Fmoc策略，流程为：①树脂活化（如Wang树脂）与第一个氨基酸偶联；②哌啶脱除Fmoc保护基；③依次偶联后续氨基酸（HBTU/DIPEA缩合）；④TFA/苯酚裂解肽链并脱除侧链保护基；⑤反相HPLC纯化粗肽；⑥MIC测定验证活性。关键是每步偶联效率检测（茚三酮法），确保序列正确。2.基因工程表达抗菌肽为何常融合表达？答案：①降低毒性：抗菌肽对宿主（如大肠杆菌）有毒，融合后减弱毒性；②稳定肽链：小肽易被蛋白酶降解，融合载体蛋白（GST/His-tag）增强稳定性；③便于纯化：标签可通过亲和层析（镍柱）分离；④提高表达量：载体蛋白增强转录翻译效率。融合后需用thrombin切除标签获得活性肽。3.抗菌肽的主要抗菌机制是什么？答案：①膜作用：阳离子肽与细菌膜（负电）静电结合，插入形成孔道，破坏膜完整性，导致内容物泄漏；②非膜作用：进入细胞抑制细胞壁合成、核酸复制、蛋白合成，或激活自溶酶。不同肽可能结合多种机制，广谱肽多依赖膜作用。4.抗菌肽相比传统抗生素的优势与不足？答案：优势：①不易耐药（靶点多）；②低毒性（真核膜电荷差异）；③广谱（细菌、真菌、病毒）；④易降解（环境友好）。不足：①成本高（合成贵/表达量低）；②稳定性差（易被蛋白酶降解）；③体内活性低（血清结合失活）；④规模化难（发酵工艺优化难）。讨论题1.如何优化抗菌肽的稳定性和体内活性？答案：优化策略包括：①结构修饰：引入D-氨基酸（抗降解）、环化（稳定结构）、PEG化（延长半衰期）；②序列改造：平衡疏水性/电荷（增强膜结合，减少血清结合）；③表达系统：选择毕赤酵母分泌表达（避免胞内降解）；④配方优化：脂质体/纳米粒包裹（靶向递送）；⑤定向进化：筛选高稳定/活性突变体。例如，环化可显著提高血清稳定性和抗菌活性。2.抗菌肽在农业领域的应用前景及挑战？答案：前景：①替代抗生素（畜禽养殖，减少耐药）；②植物病害防治（真菌/细菌病害，如小麦赤霉病）；③饲料添加剂（提高免疫力）。挑战：①成本高（规模化生产难）；②稳定性差（土壤/肠道降解，持效短）；③环境影响（生态平衡）；④审批难（安全性评估不完善）；⑤效果不稳定（受pH/微生物影响）。需通过基因工程降本，或开发缓释剂型解决稳定性问题。答案汇总填空题答案1.正2.基因工程表达3.β-折叠4.MIC5.芴甲氧羰基6.载体7.动物8.分泌9.孔道10.>50aa单项选择题答案1.D2.B3.C4.C5.A6.B7