合成生物学底盘菌株优化工程师岗位招聘考试试卷及答案

合成生物学底盘菌株优化工程师岗位招聘考试试卷及答案一、填空题（共10题，每题1分）1.合成生物学中最常用的原核底盘菌株是________。2.CRISPR-Cas9中识别靶序列的关键元件是________。3.密码子优化的核心目的之一是提高基因________效率。4.底盘菌株优化中，敲除非必需基因可减少________负担。5.适合分泌重组蛋白的革兰氏阳性菌底盘是________。6.代谢流分析常用的同位素标记碳源是________。7.调控基因表达的核心元件包括启动子、终止子和________。8.定向进化的常用方法包括易错PCR和________。9.营养缺陷互补标记依赖宿主的________特性。10.适用于原核生物的人工染色体是________（如BAC）。二、单项选择题（共10题，每题2分）1.最适合分泌重组蛋白的底盘是（）A.大肠杆菌K12B.枯草芽孢杆菌C.酿酒酵母D.毕赤酵母2.密码子优化不考虑的因素是（）A.宿主密码子偏好B.密码子-反密码子配对C.基因长度D.稀有密码子分布3.CRISPR中PAM序列的作用是（）A.结合Cas9B.识别靶序列C.启动转录D.终止编辑4.底盘优化核心方向不包括（）A.代谢网络重构B.培养基调整C.非必需基因敲除D.毒性代谢物降解5.不属于基因编辑工具的是（）A.CRISPR-Cas9B.TALENC.易错PCRD.ZFN6.通量平衡分析（FBA）的基础是（）A.同位素标记B.基因组代谢网络模型C.酶活性测定D.代谢物组学7.属于真核底盘的是（）A.大肠杆菌B.枯草芽孢杆菌C.酿酒酵母D.铜绿假单胞菌8.启动子强度过高会导致（）A.翻译效率降低B.代谢负担增加C.基因丢失D.启动子失活9.荧光蛋白标记可用于（）A.检测蛋白表达B.筛选编辑阳性株C.代谢流分析D.碳源利用10.属于组成型启动子的是（）A.PtacB.PbadC.PlacD.Pveg（枯草芽孢杆菌）三、多项选择题（共10题，每题2分）1.底盘选择基本原则包括（）A.安全性B.遗传操作性C.代谢特性D.适配性E.成本2.常用基因编辑工具包括（）A.CRISPR-Cas9B.TALENC.ZFND.易错PCRE.DNAshuffling3.密码子优化关键因素有（）A.宿主密码子频率B.密码子-反密码子配对C.基因长度D.稀有密码子分布E.启动子GC含量4.底盘优化常见策略包括（）A.非必需基因敲除B.关键酶过表达C.反馈抑制解除D.代谢网络重构E.培养基优化5.常用调控元件包括（）A.组成型启动子B.诱导型启动子C.终止子D.RBSE.增强子6.代谢流分析常用方法包括（）A.13C标记MFAB.FBAC.酶活性测定D.代谢物组学E.转录组学7.底盘筛选常用标记包括（）A.抗生素抗性B.营养缺陷互补C.荧光蛋白D.酶活性E.生长速率8.影响CRISPR效率的因素包括（）A.sgRNA设计B.Cas9表达量C.靶序列GC含量D.细胞周期E.培养基温度9.人工染色体类型包括（）A.YACB.BACC.PACD.MACE.质粒10.底盘优化下游应用包括（）A.生物医药B.生物能源C.环境修复D.食品加工E.化工原料生产四、判断题（共10题，每题2分）1.大肠杆菌是最常用的原核底盘菌株。（）2.密码子优化仅替换稀有密码子。（）3.CRISPR只能用于基因敲除。（）4.枯草芽孢杆菌无细胞壁障碍，适合分泌蛋白。（）5.代谢流分析必须依赖同位素标记。（）6.基因组简化是底盘优化的重要方向。（）7.启动子越强，产物产量越高。（）8.荧光蛋白可筛选整合重组元件的菌株。（）9.DNAshuffling属于定向进化方法。（）10.酿酒酵母适合合成复杂真核蛋白。（）五、简答题（共4题，每题5分）1.简述底盘菌株选择的基本原则。2.密码子优化的作用及关键考虑因素。3.CRISPR-Cas9在底盘编辑中的基本流程。4.代谢流分析的目的及常用方法。六、讨论题（共2题，每题5分）1.如何平衡底盘优化中“代谢负担”与“目标产物产量”？2.底盘优化面临的主要挑战及应对策略。---答案部分一、填空题答案1.大肠杆菌（K12株）2.sgRNA（单导向RNA）3.翻译4.代谢5.枯草芽孢杆菌6.13C标记葡萄糖7.RBS（核糖体结合位点）8.DNAshuffling（基因洗牌）9.营养缺陷10.细菌人工染色体（BAC）二、单项选择题答案1.B2.C3.A4.B5.C6.B7.C8.B9.B10.D三、多项选择题答案1.ABCD2.ABC3.ABD4.ABCD5.ABCDE6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABCDE四、判断题答案1.√2.×3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.√10.√五、简答题答案1.底盘选择原则：①安全性（无致病性）；②遗传操作性（成熟编辑工具）；③代谢特性（生长快、网络清晰）；④适配性（匹配目标产物）；⑤稳定性（元件不丢失）。2.密码子优化：作用是提高翻译效率、改善蛋白折叠。关键因素：宿主密码子频率、配对强度、稀有密码子分布、同义密码子偏好、GC含量。3.CRISPR流程：①靶序列设计（含PAM）；②载体构建（sgRNA+Cas9）；③转化底盘；④PCR/测序验证；⑤抗性/荧光筛选阳性株。4.代谢流分析：目的是定量代谢流向、识别瓶颈。方法：13C标记MFA、FBA、酶活性测定、代谢物组学。六、讨论题答案1.平衡策略：①元件强度调控（诱导型启动子）；②代谢网络重构（敲除非必需基因）；③动态调控（代谢物感应回路