《临床检验技术》课件-项目四：血小板与止血凝血检验

临床检验基础1.血小板计数血小板计数血小板是由巨核细胞产生，就有维持血管内皮完整性以及粘附、释放、聚集、血块收缩和促凝作用等功能

血小板血小板计数

血小板计数血小板计数（PLT）是测定单位容积（通常为1L）的血液中血小板的数量（单位109/L）可使用血液分析仪、显微镜或流式细胞仪进行检测血细胞分析仪检测法

原理有电阻抗法和(或)光散射法，分别根据血小板的电阻抗特性和光学特性计数血小板数量。

注意检测结果数值或图形异常，或结果出现仪器报警提示时，均应使用血涂片显微镜检查法进行结果确认，必要时使用计数板在显微镜下计数血小板。显微镜计数法

原理血液经稀释液稀释和破坏红细胞后，混匀、充池、在显微镜下计数一定体积内的血小板数量，经过换算求出每升血液中血小板的数量。显微镜计数法试剂２器材试剂１■1%草酸铵稀释液分别用少量蒸馏水溶解草酸铵1.0g及EDTA-Na２0.012g,合并后加蒸馏水至100ml,混匀，过滤后备用。由尿素、EDTA-Na２

、甲醛和H2O组成。■器材显微镜、改良Neubauer血细胞计数板、试管等■复方尿素稀释液

（许汝和液）显微镜计数法操作

0.38ml稀释液20ul血液混匀充池、静置镜下计数、计算显微镜计数法结果计算血小板数/L=5个中方格内血小板数×1012/L

显微镜计数法1324应防止血小板稀释液被微粒和细菌污染，配制后应过滤。试管及吸管也应清洁。针刺应稍深，使血流顺畅流出。拭去第一滴血后，首先采血进行血小板检测。操作应迅速，防止血小板聚集和破坏。采集标本后应在1小时内完成检测。血液加入稀释液内要充分混匀，滴计数池后应静置10~15分钟。室温高湿度低时注保持计数池周围的湿度，以免水分蒸发而影响计数结果。计数时光线要适中，不可太强，应注意将有折光性的血小板与杂质和灰尘予以区别。附在血细胞旁边的血小板也要注意，不要漏数。注意事项流式细胞仪检测法

原理用单克隆抗体染色标记血小板，根据光强度和散射光强度、用流式细胞检测原理计数血小板，是国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的参考方法。血小板计数参考区间参考区间仪器法（静脉采血）（125～350）×109/L显微镜法成人：男（85～303）×109/L

女（101～320）×109/L新生儿：(100～300）×109/L儿童：（100～300）×109/L

临床意义生理性变化正常人的血小板数随时间和生理状态而波动病理性增高（血小板计数超过350×109/L）

（1）原发性增多（2）反应性增多（3）其他疾病病理性降低（血小板计数低于125×109/L）（1）血小板生成障碍（2）血小板破坏增多（3）血小板消耗过多CAB临床意义14临床检验技术2.血细胞分析之血小板目录CONTENTS血小板检验的参数01血小板的形态03血小板复检04典型案例分析05血小板计数原理及临床意义02序列号名称涵 义1PLT血小板计数2PDW血小板分布宽度3MPV平均血小板体积4P-LCR大血小板比率5PCT血小板压积6IPF#网织血小板绝对值7IPF%网织血小板百分比血小板检验的参数PLT检测原理及临床意义原理鞘流电阻抗（五分类）；电阻抗法（三分群）；光散射法临床意义PLT增高：慢粒早期、脾切除、急性失血、特发性血小板增多症；减少：血小板减少性紫癜、系统性红斑狼疮、DIC、中毒、过敏、再障等；在血小板减少症中可以用来鉴别诊断网织血小板（IPF）临床意义M3ITP

AAAA-CRIPF%↑H-IPF%↑IPF#↓IPF%↑H-IPF%↑IPF#↑巨核细胞及血小板的形态异常血小板大小异常小血小板：<1.5μm，小于1/4红细胞直径大血小板：4-7μm，接近正常红细胞直径巨大血小板：>7.5μm，具有多形性形态异常畸形（杆状、蛇形等）、不规则等，无疾病特异性，不规则和畸形>10%有意义颗粒异常颗粒减少分布异常血小板有聚集性，在正常的骨髓片中聚集成堆，非抗凝外周血涂片中聚集或散在分布，血小板减少、血小板无力症-血小板无聚集功能患者外周血及骨髓片中血小板散在分布。常规EDTA抗凝外周血涂片中血小板散在分布，聚集影响仪器计数，可改用枸橼酸钠纠正异常血小板序号规则名称复检界定门诊标准复检方法1WBC,RBC,HGB,PLT,Ret超出线性WBC>440ORRBC>8ORHGB>250ORPLT>5000OR网织红细胞百分比>23OR网织红细胞绝对值>0.72涂片镜检2WBC(200%)白细胞数3天内百分比增加或减少200重测标本3PLT(一)PLT>1000涂片镜检4PLT(二)血小板数7天内百分比增加或减少100检查标本5PLTclumpflag血小板异常直方图|血小板凝集检查标本6HGB(一)HGB<40重测标本7HGB(二)血红蛋白浓度10天内百分比增加或减少100重测标本8可疑警报(除了IG/Band)乳糜|HGB异常|红细胞凝集|缺铁|HGB异常|碎片|红细胞溶血不良重测标本9LyseresistantRBC红细胞溶血不良涂片镜检10RBC凝集红细胞凝集检查标本11WBC,RBC,HGB,PLT无结果无结果或结果不全重测标本12PLT计数血小板数7天内百分比增加或减少100重测标本13WBC计数(<3)白细胞数7天内百分比增加或减少100重测标本14PLT聚集推片血小板凝集涂片镜检15HGB规则HGB<40ORHGB>200重测标本16WBC异常异常淋巴细胞|白细胞异常散点图|原始细胞|左移|幼稚粒细胞存在涂片镜检17PLT干扰FRC%>5|小红细胞症|Fragments?>120重测标本并使用PLT-F通道1819WBC规则遵医嘱WBC<0.2ORWBC>1000|原始细胞|异常淋巴细胞初诊、复诊的白血病患者非休疗期、AA患者大于3个月、儿科患者、CML患者、淋巴瘤患者等重测标本并使用WPC通道涂片镜检血小板复检23嗜碱血小板异常的案例WBC5.0×109/L;Hb120g/L;PLT20×109/L免疫性血小板减少症EDTA依赖性抗体介导血小板聚集换用枸橼酸钠、肝素抗凝管外周血涂片染色镜检假性血小板减少继发性血小板减少慢性肝病伴或不伴脾大内科巨脾药物:肝素、奎尼丁、奎宁、降糖药、抗生素、抗结核、抗血小板药物

感染：病毒、支原体、重症肺炎肿瘤放化疗DIC（急性、慢性）血小板异常的案例EDTA依赖性假性血小板减少症（PTCP）用EDTA盐作为抗凝剂的抗凝血检测时，诱导血小板互相聚集、堆积和发生卫星现象，致使全自动血细胞计数仪不能确认血小板，而使血小板计数偏低1、作为一种自身免疫性疾病，主要依据为此类病人中很大比例血清免疫球蛋白升高，出现抗血小板抗体，抗磷脂抗体阳性，将病人血浆与正常人血小板仪器孵育可引起正常人血小板聚集，而正常人血浆与病人血小板一起孵育则不会引起病人血小板聚集。2、是其他疾病的伴随现象，因其出现在其他疾病的开始或治疗过程中，随疾病好转而消失。3、为一种温度依赖性抗体所致。依据是在室温条件下出现血小板聚集现象，而在37度则无此现象的发生。产生机制有3种观点质量血小板检测原理血小板计数血小板形态准确检验报告血小板复检总结3.凝血系统基本理论临床检验技术单击此处编辑母版标题样式01影响血栓与止血的系统单击此处编辑母版标题样式单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式血小板系统单击此处编辑母版标题样式

抗凝血系统发生出血纤维蛋白溶解系统溶栓血液变粘稠了吗？血液流变学02凝血系统凝血因子凝血因子的活化凝血因子中唯一不是蛋白质的凝血因子是钙离子，因子Ⅳ唯一不存在于血浆中的因子是组织因子，因子Ⅲ因子Ⅰ，纤维蛋白原因子Ⅱ，凝血酶原因子Ⅲ，组织因子因子Ⅳ，钙离子因子Ⅵ，为因子Ⅴ的活化形式凝血系统ⅢⅦⅩⅤⅡⅠⅪⅨⅧⅫ单击此处编辑母版标题样式ⅪⅫⅨⅧⅦⅩⅤⅡIIaXIIIXIIIaCovalentbindingDDStabilizedfibrinpolymerCLOT凝血因子XIII术前准备外科术前必备检测妇科人流手术、拔牙血站对于成份血的监测，如新鲜血浆监测血凝检测反映体内出凝血倾向；凝血因子含量的筛查；治疗监测华法令治疗监测肝素治疗监测凝血检验的临床应用4.血浆凝血酶时间测定（TT）临床检验技术01血浆凝血酶时间测定

（thrombinclottingtime,TT）[原理]

标准凝血酶

血浆

[参考值]

16-18s

超过正常对照3s为延长

凝血酶原理

主要检测凝血过程第三阶段和循环抗凝物纤维蛋白原质与量异常FDP增多，干扰纤维蛋白的聚合，如纤溶亢进循环中抗凝物质增多，如AT-Ⅲ、肝素样物质异常球蛋白增多，如多发性骨髓瘤临床意义02血浆纤维蛋白原测定（FIB）

凝血酶凝固法（Clauss法）

[原理]

标准凝血酶

血浆

原理凝血酶时间（TT）纤维蛋白原测定（FIB）.相同吗？临床意义测定方法参比血浆凝固时间标准曲线以凝固时间为横坐标纤维蛋白原含量为纵坐标单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级临床意义单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级临床意义凝血酶时间（TT）纤维蛋白原测定（FIB）.相同吗？临床意义TT延长更多地是肝素和肝素类物质增多导致，常作为抗凝治疗的检测，纤维蛋白原降低不是特别明显的情况下，一般不会表现为TT明显延长，FIB更能反应纤维蛋白原的水平。

临床意义单击此处编辑母版文本样式第二级第三级第四级第五级单击此处编辑母版标题样式5.血栓与止血纤维蛋白溶解系统及检验临床检验技术单击此处编辑母版标题样式60血液凝块又是如何消失的？纤溶系统纤维蛋白溶解系统理论基础01单击此处编辑母版标题样式EDDNon-covalentbindingSolubleFibrinpolymer纤维蛋白聚集IIaXIIIXIIIaCovalentbindingDDStabilizedfibrinpolymerCLOT交联纤维蛋白纤溶酶纤溶酶纤溶酶纤溶酶纤溶酶D-二聚体E纤维蛋白凝块纤维蛋白原DED纤维蛋白单体+纤维蛋白肽可溶性纤维蛋白多聚体

XIIIa凝血酶纤溶酶纤维蛋白降解产物纤维蛋白原降解产物纤维蛋白（原）降解血浆纤维蛋白（原）降解产物的测定02纤维蛋白原、可溶性纤维蛋白、纤维蛋白多