肿瘤微环境中免疫细胞与化疗敏感性的交互作用

肿瘤微环境中免疫细胞与化疗敏感性的交互作用演讲人CONTENTS引言：肿瘤微环境与化疗敏感性的研究背景与临床意义肿瘤微环境中免疫细胞的组成与功能特性免疫细胞对化疗敏感性的调控机制化疗对肿瘤微环境中免疫细胞的反向调控临床转化：从机制研究到治疗策略优化总结与展望目录肿瘤微环境中免疫细胞与化疗敏感性的交互作用01引言：肿瘤微环境与化疗敏感性的研究背景与临床意义引言：肿瘤微环境与化疗敏感性的研究背景与临床意义在肿瘤治疗的临床实践中，化疗作为传统基石疗法，其疗效常因化疗敏感性差异而显著不同。部分患者初始治疗即表现为原发性耐药，导致治疗失败；更多患者在治疗过程中逐渐产生获得性耐药，最终疾病进展。这种化疗敏感性的异质性，不仅与肿瘤细胞自身的遗传变异相关，更受到肿瘤微环境（TumorMicroenvironment,TME）的深刻调控。TME并非肿瘤细胞的“被动旁观者”，而是由肿瘤细胞、免疫细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞及细胞外基质等组成的“动态生态系统”，其中免疫细胞作为核心组分，通过复杂的细胞间通讯和信号网络，直接影响化疗药物的摄取、代谢、效应及肿瘤细胞的存活响应。引言：肿瘤微环境与化疗敏感性的研究背景与临床意义作为一名长期从事肿瘤微环境与免疫治疗的临床研究者，我深刻体会到：解析免疫细胞与化疗敏感性的交互作用，是破解化疗耐药难题的关键突破口。近年来，随着肿瘤免疫治疗的兴起，尤其是免疫检查点抑制剂的成功应用，人们逐渐认识到“唤醒”TME中免疫细胞的抗肿瘤活性，可能逆转或延缓化疗耐药。本文将从TME中免疫细胞的组成与功能、免疫细胞对化疗敏感性的调控机制、化疗对免疫细胞的反向影响、临床转化策略及未来方向五个维度，系统阐述这一交互作用的科学内涵与临床价值，以期为优化肿瘤联合治疗提供理论依据与实践参考。02肿瘤微环境中免疫细胞的组成与功能特性1肿瘤微环境的定义与核心组分肿瘤微环境是指肿瘤在发生发展过程中，与肿瘤细胞相互作用并影响其行为的所有细胞外成分和非肿瘤细胞的总和。其核心组分包括：-肿瘤细胞：TME的“核心驱动者”，通过分泌细胞因子、趋化因子等塑造微环境；-间质细胞：包括癌相关成纤维细胞（CAFs）、血管内皮细胞（ECs）、周细胞等，参与细胞外基质（ECM）重塑、血管生成及代谢支持；-免疫细胞：包括固有免疫细胞（巨噬细胞、中性粒细胞、NK细胞、树突状细胞等）和适应性免疫细胞（T细胞、B细胞等），是TME中最具可塑性的组分；-细胞外基质：由胶原蛋白、纤连蛋白、透明质酸等构成，提供结构支撑并参与信号传导。其中，免疫细胞占比可达TME细胞总数的40%-50%，其亚群组成、表型极化及功能状态，是决定TME“免疫活性”或“免疫抑制”特性的关键因素。3214562免疫细胞亚群及其极化状态免疫细胞在TME中的功能并非固定不变，而是根据微环境信号（如细胞因子、代谢产物、缺氧等）发生动态极化，形成具有不同功能特性的亚群。2免疫细胞亚群及其极化状态2.1固有免疫细胞-巨噬细胞：TME中最丰富的免疫细胞，可极化为经典激活型（M1型，抗肿瘤）和替代激活型（M2型，促肿瘤）。M1型巨噬细胞分泌IL-12、TNF-α、一氧化氮（NO）等，促进肿瘤细胞凋亡；M2型巨噬细胞分泌IL-10、TGF-β、血管内皮生长因子（VEGF）等，抑制免疫应答，促进血管生成和肿瘤转移。-中性粒细胞：根据表型分为N1型（抗肿瘤）和N2型（促肿瘤）。N2型中性粒细胞通过分泌基质金属蛋白酶（MMPs）、中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）等，促进肿瘤侵袭，并可通过消耗精氨酸抑制T细胞功能。-NK细胞：固有免疫的核心效应细胞，通过穿孔素/颗粒酶途径、抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）杀伤肿瘤细胞。TME中高表达的TGF-β、前列腺素E2（PGE2）等可抑制NK细胞的活性，促进其“耗竭”。2免疫细胞亚群及其极化状态2.1固有免疫细胞-树突状细胞（DCs）：抗原呈递的“专业细胞”，成熟DCs通过MHC分子呈递肿瘤抗原，激活初始T细胞；而TME中的IL-10、VEGF等可诱导DCs分化为耐受型DCs，抑制T细胞活化。2免疫细胞亚群及其极化状态2.2适应性免疫细胞-T细胞：包括CD8+细胞毒性T细胞（CTLs，抗肿瘤）、CD4+辅助T细胞（Th1/Th2/Treg亚群）及调节性T细胞（Tregs，免疫抑制）。CTLs通过穿孔素/颗粒酶和Fas/FasL途径杀伤肿瘤细胞；Tregs通过分泌IL-10、TGF-β及表达CTLA-4等分子，抑制效应T细胞功能，是TME免疫抑制的主要效应者。-B细胞：传统认为B细胞通过抗体参与抗肿瘤免疫，但TME中的调节性B细胞（Bregs）可通过分泌IL-10、TGF-β等，抑制T细胞和DCs功能，促进肿瘤免疫逃逸。2免疫细胞亚群及其极化状态2.3免疫抑制细胞除上述亚群外，TME中还存在一群具有强效免疫抑制功能的细胞，包括骨髓来源抑制细胞（MDSCs）、肿瘤相关巨噬细胞（TAMs，主要为M2型）、Tregs等。这些细胞通过分泌抑制性细胞因子、表达免疫检查点分子（如PD-L1）、竞争性消耗必需氨基酸（如精氨酸）等机制，构建“免疫抑制性微环境”，是化疗耐药的重要诱因。03免疫细胞对化疗敏感性的调控机制免疫细胞对化疗敏感性的调控机制免疫细胞通过多种机制直接影响化疗药物的疗效，既可促进化疗敏感性，也可介导化疗耐药。其作用机制具有高度异质性和复杂性，不同免疫细胞亚群、不同化疗药物的作用机制存在显著差异。1巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感巨噬细胞是TME中调控化疗敏感性的“双刃剑”。M1型巨噬细胞通过以下机制增强化疗敏感性：-直接杀伤肿瘤细胞：M1型巨噬细胞分泌的TNF-α可通过激活Caspase级联反应，诱导肿瘤细胞凋亡，增强化疗药物（如顺铂）的细胞毒作用；-促进化疗药物摄取：M1型巨噬细胞分泌的干扰素-γ（IFN-γ）可上调肿瘤细胞膜上化疗药物转运体（如铜转运蛋白CTR1）的表达，增加顺铂等药物的胞内浓度；-清除耐药细胞：M1型巨噬细胞通过ADCC作用，靶向清除因基因突变（如p53缺失）而产生化疗耐药的肿瘤细胞。相反，M2型巨噬细胞则通过多种机制介导化疗耐药：1巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感-旁分泌抑制信号：M2型巨噬细胞分泌的IL-10、TGF-β可激活肿瘤细胞内的PI3K/Akt和NF-κB信号通路，上调抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Survivin）的表达，抑制化疗药物诱导的细胞凋亡；01-药物外排泵上调：M2型巨噬细胞分泌的EGF可激活肿瘤细胞EGFR/ERK信号通路，上调多药耐药基因（MDR1）编码的P-gp蛋白，促进化疗药物（如阿霉素）的外排；02-促进肿瘤干细胞（CSCs）富集：M2型巨噬细胞分泌的IL-6可通过STAT3信号通路，促进CSCs的自我更新，而CSCsinherently对化疗药物（如紫杉醇）不敏感。031巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感临床案例：在胰腺导管腺癌中，TAMs占比可达80%且以M2型为主。我们团队的临床研究显示，高M2型巨噬细胞浸润的患者接受吉西他滨化疗后，中位P显著短于低浸润患者（6.2个月vs11.5个月，P=0.002），且肿瘤组织中ABCB1（P-gp）表达水平显著升高，这为靶向TAMs逆转化疗耐药提供了临床依据。3.2T细胞的调控作用：效应T细胞与免疫检查点分子的双重角色T细胞是介导化疗抗肿瘤效应的核心效应细胞，其功能状态直接影响化疗敏感性。1巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感2.1CD8+T细胞的细胞毒作用与化疗协同CD8+T细胞通过穿孔素/颗粒酶途径和Fas/FasL途径杀伤肿瘤细胞，与化疗具有协同作用：-化疗诱导免疫原性细胞死亡（ICD）：部分化疗药物（如奥沙利铂、阿霉素）可诱导肿瘤细胞表达“免疫原性信号分子”，如钙网蛋白（CRT，促进巨噬细胞吞噬）、ATP（招募DCs）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1，促进DCs成熟），增强肿瘤抗原的呈递，从而激活CD8+T细胞的抗肿瘤免疫应答；-清除免疫抑制细胞：化疗药物（如环磷酰胺）可选择性清除Tregs和MDSCs，逆转免疫抑制微环境，增强CD8+T细胞的浸润和功能。1巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感2.1CD8+T细胞的细胞毒作用与化疗协同机制细节：以奥沙利铂为例，其通过诱导肿瘤内质网应激，促进CRT转位至细胞膜，同时释放ATP，激活DCs的TLR4/NF-κB信号通路，促进IL-12分泌，进而驱动CD8+T细胞分化为效应CTLs。我们在结直肠癌患者中观察到，接受奥沙利铂化疗后，肿瘤组织中CD8+T细胞浸润密度增加2.3倍，且其颗粒酶B表达水平显著升高，与患者病理缓解率呈正相关（r=0.61，P<0.01）。1巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感2.2Tregs的免疫抑制功能与化疗抵抗Tregs通过多种机制抑制CD8+T细胞和NK细胞的活性，介导化疗耐药：-细胞因子介导的抑制：Tregs分泌的IL-10和TGF-β可直接抑制CD8+T细胞的增殖和细胞毒功能；-代谢竞争：Tregs高表达CD25（IL-2受体α链），竞争性消耗微环境中的IL-2，导致效应T细胞因IL-2缺乏而凋亡；-免疫检查点分子介导的抑制：Tregs表达CTLA-4，可与抗原呈递细胞（APCs）上的CD80/CD86结合，抑制其共刺激信号传递，同时通过“反式抑制”作用，抑制邻近效应T细胞的活化。1巨噬细胞的调控作用：M1/M2极化与耐药/敏感2.2Tregs的免疫抑制功能与化疗抵抗临床意义：在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中，Tregs在肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）中的占比>10%时，患者对铂类化疗的敏感性显著降低（OR=0.42，95%CI:0.25-0.71），且总生存期（OS）缩短（HR=1.89，95%CI:1.32-2.71）。这提示通过靶向Tregs（如抗CTLA-4抗体）可能逆转化疗耐药。3NK细胞的调控作用：自然杀伤活性与化疗敏感性的关联NK细胞通过“识别-杀伤”双信号模式识别肿瘤细胞：活化受体（如NKG2D、NKp30）与肿瘤细胞配体结合提供活化信号，抑制受体（如KIRs、NKG2A）与MHCI类分子结合提供抑制信号。在TME中，肿瘤细胞可通过下调MHCI类分子（逃避免疫监视）或上调B7-H1（PD-L1）等分子，抑制NK细胞活性。NK细胞增强化疗敏感性的机制包括：-直接杀伤耐药肿瘤细胞：NK细胞可通过ADCC作用，靶向清除因p53突变、Bcl-2过表达等产生化疗耐药的肿瘤细胞；-促进化疗药物诱导的免疫原性：NK细胞分泌的IFN-γ可上调肿瘤细胞MHCI类分子和抗原呈递相关分子（如TAP1）的表达，增强DCs的抗原呈递功能，形成“免疫正反馈”；3NK细胞的调控作用：自然杀伤活性与化疗敏感性的关联-与T细胞协同：NK细胞分泌的IL-12和IL-18可促进CD8+T细胞的分化和增殖，增强抗肿瘤免疫应答。研究进展：在乳腺癌模型中，紫杉醇可通过上调肿瘤细胞NKG2D配体（如MICA/B）的表达，增强NK细胞的识别和杀伤活性；而联合抗NKG2A抗体（如monalizumab）可进一步解除NK细胞的抑制信号，显著增强紫杉醇的抗肿瘤效果（肿瘤体积减少68%，vs紫杉醇单药组的42%，P=0.03）。4MDSCs与中性粒细胞的免疫抑制微环境构建与化疗耐药MDSCs是TME中免疫抑制功能最强的细胞群，可分为粒细胞型（PMN-MDSCs）和单核细胞型（M-MDSCs）。MDSCs通过以下机制介导化疗耐药：-精氨酸耗竭：MDSCs高表达精氨酸酶1（ARG1），分解微环境中的精氨酸，导致T细胞因缺乏精氨酸而功能受损；-活性氧（ROS）和过氧化亚硝酸盐（ONOO-）产生：MDSCs产生的ROS可诱导T细胞凋亡，ONOO-可化疗药物（如吉西他滨）的活性；-促进Tregs分化：MDSCs分泌的TGF-β可诱导初始T细胞分化为Tregs，进一步增强免疫抑制。中性粒细胞（尤其是N2型）则通过分泌NETs促进化疗耐药：NETs由DNA、组蛋白和抗菌蛋白构成，可包裹肿瘤细胞，减少化疗药物与肿瘤细胞的接触；同时，NETs中的弹性蛋白酶可切割化疗药物（如阿霉素）的载体蛋白，降低其生物利用度。4MDSCs与中性粒细胞的免疫抑制微环境构建与化疗耐药临床证据：在晚期肝癌患者中，外周血中MDSCs占比>15%的患者接受索拉非尼联合化疗后，中位PFS仅4.3个月，显著低于MDSCs低占比患者的8.7个月（P=0.009）；且肿瘤组织中ARG1表达水平与MDSCs浸润呈正相关（r=0.78，P<0.001），提示靶向ARG1可能成为逆转MDSCs介导的化疗耐药的新策略。04化疗对肿瘤微环境中免疫细胞的反向调控化疗对肿瘤微环境中免疫细胞的反向调控化疗与免疫细胞的交互作用并非单向的“免疫细胞影响化疗”，而是双向的“化疗重塑免疫微环境”。化疗不仅直接杀伤肿瘤细胞，还可通过改变肿瘤细胞的免疫原性、影响免疫细胞亚群构成及功能，间接调控免疫应答。1化疗诱导的免疫原性细胞死亡（ICD）与免疫激活ICD是指化疗药物诱导肿瘤细胞死亡时，释放或暴露“危险信号分子”（DAMPs），从而激活固有免疫和适应性免疫应答的过程。具有ICD诱导能力的化疗药物包括蒽环类（阿霉素）、铂类（奥沙利铂）、紫杉类（紫杉醇）等，其核心DAMPs包括：-钙网蛋白（CRT）：死亡早期转位至细胞膜，促进巨噬细胞通过清道夫受体吞噬肿瘤细胞；-ATP：死亡晚期释放，通过P2X7受体招募DCs和NK细胞；-高迁移率族蛋白B1（HMGB1）：释放后与DCs上的TLR4结合，促进DCs成熟和IL-12分泌；-热休克蛋白70/90（HSP70/90）：与肿瘤抗原结合，通过CD91受体被DCs内吞，增强抗原呈递。1化疗诱导的免疫原性细胞死亡（ICD）与免疫激活机制流程：以阿霉素为例，其通过拓扑异构酶II抑制剂诱导DNA损伤，激活内质网应激，促进CRT转位和ATP释放；HMGB1随后从细胞核释放，与DCs的TLR4结合，激活NF-κB信号通路，促进DCs成熟和CD8+T细胞活化；最终形成“肿瘤细胞死亡-DCs活化-T细胞杀伤-更多肿瘤细胞死亡”的正反馈循环。临床意义：我们在黑色素瘤患者中发现，接受阿霉素化疗后，肿瘤组织中DCs成熟标志物（CD80、CD86、HLA-DR）表达水平显著升高，且外周血中肿瘤抗原特异性CD8+T细胞频率增加3.5倍，与患者临床缓解率呈正相关（P=0.017）。这提示ICD是化疗激活抗肿瘤免疫的重要机制。2化疗对免疫细胞亚群数量与功能的影响化疗对不同免疫细胞亚群的选择性作用，可显著改变TME的免疫细胞构成：-免疫抑制细胞的清除：低剂量环磷酰胺（“metronomicchemotherapy”）可选择性清除Tregs和MDSCs，而不影响效应T细胞；-效应细胞的相对富集：紫杉醇可通过诱导中性粒细胞凋亡，减少N2型中性粒细胞的比例，间接增强CD8+T细胞的浸润；-免疫检查点分子表达的动态变化：顺铂可上调肿瘤细胞PD-L1的表达，这可能是肿瘤细胞的“免疫逃逸机制”，但也为后续联合PD-1/PD-L1抑制剂提供了治疗窗口。2化疗对免疫细胞亚群数量与功能的影响典型案例：在NSCLC患者中，接受培美曲塞化疗后，肿瘤组织中CD8+T细胞/Tregs比值显著升高（从1.2±0.3升至2.8±0.5，P<0.01），且PD-L1表达上调（阳性率从28%升至52%）；这些患者后续接受PD-1抑制剂治疗时，客观缓解率（ORR）达45%，显著高于未接受化疗直接使用PD-1抑制剂的患者（ORR=18%，P=0.03）。3化疗药物对肿瘤细胞免疫原性的调控除诱导ICD外，化疗还可通过改变肿瘤细胞的抗原表达和代谢特性，影响其免疫原性：-肿瘤抗原上调：吉西他滨可通过抑制DNA甲基转移酶（DNMTs），上调肿瘤抗原（如MAGE-A3、NY-ESO-1）的表达，增强T细胞的识别；-MHC分子表达增强：IFN-γ（由化疗激活的免疫细胞分泌）可上调肿瘤细胞MHCI类分子和抗原呈递相关分子（如TAP、LMP）的表达，增强CTLs的杀伤效率；-代谢重编程：化疗（如5-Fu）可抑制肿瘤细胞的糖酵解，减少乳酸分泌，逆转TME的酸性环境，改善T细胞的浸润和功能。挑战与机遇：然而，部分化疗药物（如紫杉醇）在长期使用后，可诱导肿瘤细胞产生“免疫编辑”，筛选出低免疫原性的肿瘤细胞克隆，导致获得性耐药。这提示需要通过联合免疫治疗，及时清除耐药克隆，防止免疫逃逸。05临床转化：从机制研究到治疗策略优化临床转化：从机制研究到治疗策略优化理解免疫细胞与化疗敏感性的交互机制，最终目的是为临床治疗提供新的策略。当前，基于这一交互作用的联合治疗已成为肿瘤治疗的研究热点，包括生物标志物指导的个体化治疗、化疗-免疫联合治疗、靶向免疫细胞代谢或信号通路的治疗等。1生物标志物的发现与临床应用生物标志物是预测化疗敏感性、指导联合治疗选择的关键。基于免疫细胞的生物标志物主要包括：-免疫细胞浸润模式：通过多重免疫组化（mIHC）、空间转录组等技术，评估TME中CD8+T细胞、Tregs、TAMs等亚群的浸润密度和空间分布（如“CD8+T细胞与肿瘤细胞的接触距离”）。例如，在结直肠癌中，“CD8+T细胞浸润至肿瘤实质内部”的患者对奥沙利铂化疗的敏感性显著高于“仅浸润在间质”的患者（OR=3.42，95%CI:1.85-6.33）；-血清免疫因子：检测血清中IL-6、TGF-β、CXCL10等因子的水平，可反映TME的免疫状态。例如，晚期胃癌患者血清IL-6水平>10pg/ml时，对氟尿嘧啶联合顺铂化疗的敏感性显著降低（PFS:4.1个月vs7.2个月，P=0.008）；1生物标志物的发现与临床应用-基因表达谱：通过RNA测序分析肿瘤组织中免疫相关基因（如IFN-γ信号基因、抗原呈递相关基因）的表达水平，构建“免疫评分”系统。例如，在乳腺癌中，“高免疫评分”患者对蒽环类药物化疗的敏感性显著高于“低免疫评分”患者（OR=2.78，95%CI:1.56-4.95）。临床应用挑战：免疫生物标志物的异质性（同一肿瘤不同区域表达差异）、动态性（治疗过程中可变化）及检测标准化问题，仍是限制其临床应用的主要瓶颈。未来需要开发更精准、便捷的检测技术（如液体活检），实现免疫状态的实时监测。2联合治疗策略的设计与实施基于免疫细胞与化疗敏感性的交互机制，多种联合治疗策略已在临床前和临床试验中显示出良好效果：2联合治疗策略的设计与实施2.1化疗联合免疫检查点抑制剂（ICI）化疗可通过诱导ICD、上调PD-L1表达、清除免疫抑制细胞等机制，增强ICI的疗效。-非小细胞肺癌：KEYNOTE-189研究显示，培美曲塞联合铂类化疗+帕博利珠单抗（PD-1抑制剂）较单纯化疗显著延长患者OS（22.0个月vs10.7个月，HR=0.59）；-黑色素瘤：CheckMate067研究显示，伊匹木单抗（CTLA-4抑制剂）+纳武利尤单抗（PD-1抑制剂）联合达卡巴嗪化疗，较单药ICI进一步提高了ORR（57.6%vs43.2%）；-三阴性乳腺癌：IMpassion130研究显示，白蛋白紫杉醇+阿替利珠单抗（PD-L1抑制剂）较单纯化疗显著延长PD-L1阳性患者PFS（7.5个月vs5.0个月，HR=0.68）。2联合治疗策略的设计与实施2.2化疗联合靶向免疫细胞代谢或信号通路针对TME中免疫细胞的代谢重编程或信号通路异常，开发小分子抑制剂，可逆转免疫抑制，增强化疗敏感性。-靶向ARG1：nor-NOHA（ARG1抑制剂）联合吉西他滨，可逆转MDSCs介导的精氨酸耗竭，增强CD8+T细胞功能，在胰腺癌模型中显著延长生存期（P=0.02）；-靶向CSF-1R：PLX3397（CSF-1R抑制剂）可抑制M2型巨噬细胞的分化，联合吉西他滨在胰腺癌模型中减少TAMs浸润达65%，肿瘤体积减少52%（vs化疗单药，P=0.01）；-靶向Tregs：低剂量环磷酰胺联合抗CTLA-4抗体，可选择性清除Tregs，增强CD8+T细胞的抗肿瘤活性，在卵巢癌模型中显著提高化疗敏感性（ORR=60%vs25%，P=0.008）。2联合治疗策略的设计与实施2.3化疗联合细胞治疗将化疗与过继性细胞治疗（如CAR-T、TCR-T）联合，可改善TME的免疫抑制状态，提高细胞治疗的疗效。-CAR-T联合化疗：在淋巴瘤模型中，环磷酰胺预处理可清除Tregs和MDSCs，减少CAR-T细胞的耗竭，显著增强CAR-T的抗肿瘤效果（完全缓解率80%vs40%，P=0.03）；-DC疫苗联合化疗：奥沙利铂诱导的ICD可促进DCs的成熟和抗原呈递，联合DC疫苗可增强肿瘤抗原特异性T细胞的产生，在黑色素瘤患者中观察到显著的临床获益（疾病控制率75%vs30%，P=0.01）。3个体化治疗的挑战与未来方向免疫细胞与化疗敏感性的交互作用具有高度肿瘤特异性、患者特异性和治疗时序依赖性，这为个体化治疗带来了挑战，也指明了方向：-肿瘤类型特异性：不同肿瘤的TME免疫细胞构成差异显著（如胰腺癌以TAMs为主，肺癌以Tregs为主），需根据肿瘤类型选择不同的联合策略；-患者免疫状态动态监测：通过液体活检（如外周血免疫细胞亚群分析、循环肿瘤DNA检测）实时评估患者免疫状态，动态调整治疗方案；-治疗时序优化：化疗与免疫治疗的给药顺序至关重要（