血液系统疾病伴随诊断的流式细胞术应用

血液系统疾病伴随诊断的流式细胞术应用演讲人01血液系统疾病伴随诊断的流式细胞术应用血液系统疾病伴随诊断的流式细胞术应用一、引言：血液系统疾病伴随诊断的临床需求与流式细胞术的技术优势作为一名长期深耕于血液病实验室诊断领域的临床工作者，我深刻体会到血液系统疾病的复杂性与诊断挑战性。从形态学看似“同病异治”的急性白血病，到临床表现隐匿的骨髓增生异常综合征（MDS），再到需要精准分型的淋巴瘤，每一例患者的背后都离不开“伴随诊断”这一核心环节——即在明确疾病诊断的基础上，进一步识别疾病亚型、预后分层、治疗靶点及微小残留病（MRD），为个体化治疗提供关键依据。而流式细胞术（FlowCytometry,FCm）作为单细胞水平多参数分析的金标准，凭借其高灵敏度、高特异性、快速检测及可重复性等优势，已成为血液系统疾病伴随诊断中不可或缺的技术手段。021血液系统疾病伴随诊断的核心内涵与临床意义1血液系统疾病伴随诊断的核心内涵与临床意义伴随诊断（CompanionDiagnostic,CDx）的概念最初伴随靶向药物研发兴起，在血液系统疾病中，其内涵更为广泛：不仅包括对治疗靶点的检测（如CD20、BCR-ABL融合基因蛋白），更涵盖疾病分型、预后评估、MRD监测、耐药机制解析等多个维度。例如，急性髓系白血病（AML）患者通过免疫分型可区分正常核型与不良预后亚型；慢性淋巴细胞白血病（CLL）患者通过CD38、ZAP-70表达及TP53突变状态可指导利妥昔单抗或BTK抑制剂的选择；多发性骨髓瘤（MM）患者通过浆细胞免疫表型可监测治疗反应与复发风险。这些伴随诊断信息直接决定了治疗方案的“个体化”程度，是改善患者预后的关键。032流式细胞术的技术原理及其在伴随诊断中的独特价值2流式细胞术的技术原理及其在伴随诊断中的独特价值流式细胞术的工作原理基于抗原抗体特异性结合：将待测细胞悬液与荧光标记的单克隆抗体孵育，通过鞘流聚焦使细胞单列通过激光束，检测细胞散射光（反映大小、复杂度）及荧光信号（反映抗原表达强度）。其技术优势在伴随诊断中尤为突出：-多参数同步分析：可同时检测1-30+种抗原，实现单细胞表型的高维度解析，如白血病免疫分型中需联合lineage（CD13、CD33）、髓系（CD117、MPO）、淋系（CD19、CD7）、异常（CD56、CD7）等标志物；-单细胞水平检测：可识别罕见细胞群（如MRD中10⁻⁴水平的残留白血病细胞），灵敏度显著高于形态学；-客观量化分析：通过荧光强度直方图、散点图及聚类分析，实现抗原表达的半定量与定量，避免主观判读偏差；-快速高效：单管检测可分析数万个细胞，2-4小时内出结果，满足临床急症需求。043个人从业体会：从实验室到临床的精准诊断之路3个人从业体会：从实验室到临床的精准诊断之路回顾十余年实验室工作，我曾遇到一例初诊为“急性淋巴细胞白血病（ALL）”的儿童患者，形态学提示原始细胞占比85%，但流式细胞术检测发现其CD13、CD33阳性，CD19弱表达，最终修正为“混合表型急性白血病（MPAL）”，并调整化疗方案。随访3年，患者持续缓解，这一案例让我深刻认识到：伴随诊断不是“锦上添花”，而是“雪中送炭”——流式细胞术提供的精准表型信息，直接改变了患者的治疗轨迹。在临床与实验室的紧密协作中，我们始终以“患者为中心”，通过流式细胞术这一“桥梁”，将基础研究与临床需求深度融合，推动血液系统疾病诊疗向“精准化”迈进。流式细胞术在血液系统疾病伴随诊断中的技术基础与关键环节流式细胞术在伴随诊断中的应用并非简单的“仪器检测+结果报告”，而是涉及样本处理、抗体选择、panel设计、数据分析等全流程的标准化与优化。任何一个环节的疏漏，都可能导致假阳性或假阴性，影响临床决策。051流式细胞术的基本原理与多参数分析特性1.1抗原抗体特异性结合与荧光信号检测流式细胞术的核心是抗原抗体反应，抗体的特异性直接影响结果的准确性。单克隆抗体识别的抗原决定簇（表位）需具有疾病特异性，如CD34是造血干/祖细胞的标志物，在AML中异常表达提示预后不良；CD56在骨髓瘤中高表达与髓外浸润相关。荧光素的标记需遵循“光谱不重叠”原则，常用FITC（488nm激发）、PE（488nm激发，强荧光）、PerCP-Cy5.5（488nm激发）、APC（633nm激发）等，通过多色激光配置与滤光片组合，实现多参数同步检测。1.2单细胞水平的多参数同步分析传统形态学只能观察细胞形态，而流式细胞术可同时获取细胞的“物理特性”（前向散射FSC-细胞大小、侧向散射SSC-细胞内部复杂度）与“免疫表型”（多抗原表达）。例如，在AML中，原始细胞通常表现为FSC低-SSC低（较成熟细胞小），同时伴CD34、CD117、HLA-DR等标志物表达；通过CD45与SSC设门，可有效排除成熟粒细胞、红细胞干扰，精准定位原始细胞群。1.3数据采集与标准化处理流程数据采集需保证细胞数量充足（一般≥10⁴个细胞/管），并通过“电压-补偿-荧光微球”标准化校准，确保不同批次检测结果的可比性。数据分析软件（如FlowJo、Kaluza）通过设门策略（如FSC/SSC设门→CD45设门→原始细胞设门→抗原表达分析），逐步排除无关细胞，最终获得目标细胞的免疫表型。例如，在MRD检测中，需通过“CD45dim/SSClow+CD19+CD10+（B-ALL）”或“CD34+CD117+HLA-DR+（AML）”等设门，识别残留白血病细胞。062伴随诊断中流式细胞术的panel设计策略2.1疾病特异性标志物的筛选与组合panel设计是伴随诊断的核心，需根据疾病类型、诊断目的（初诊分型/预后分层/MRD监测）选择标志物组合。以AML为例，初诊panel需覆盖：-系列特异性标志物：髓系（CD13、CD33、MPO）、红系（CD71、GlyA）、巨核系（CD41、CD61）；-干/祖细胞标志物：CD34、CD117；-异常标志物：CD7、CD19、CD56（跨系表达提示不良预后）；-预后相关标志物：CD34高表达（不良）、CEBPA突变（良好）。而在MRD监测中，panel需针对患者初诊时的“白血病免疫表型（Leukemia-AssociatedImmunophenotype,LAIP）”设计，如患者初诊表达CD34+CD117+CD13+CD33-CD7+，则MRD检测需包含以上标志物，以提高特异性。2.2覆盖诊断、预后、治疗监测的多维度panel理想的伴随诊断panel应实现“一管多用”，即通过一次检测获取诊断、预后、治疗靶点等多维度信息。例如，在CLL中，panel需包含：01-诊断标志物：CD5+CD23+CD43+（CLL免疫表型）；02-预后标志物：CD38（≥30%提示预后不良）、ZAP-70（阳性提示不良）；03-治疗靶点：CD20（利妥昔单抗靶点）、CD52（阿仑单抗靶点）。04通过多色流式（如8-10色），可在单管中完成以上检测，减少样本用量与检测时间。052.3抗体克隆选择与荧光素匹配优化不同克隆的抗体识别同一抗原时，可能因亲和力、表位差异导致检测结果不一致。例如，CD34抗体克隆581（IgG1）与8G12（IgG1）相比，后者对干细胞的识别更敏感。荧光素的选择需考虑“亮度匹配”：强表达抗原（如CD45）配低亮度荧光素（如FITC），弱表达抗原（如CD34）配高亮度荧光素（如PE或APC），避免信号饱和或无法检测。此外，需设置同型对照（IgG1-FITC等）与荧光-minus-one（FMO）对照，以区分非特异性结合与阳性信号。073样本处理与质量控制的关键要素3.1样本采集、运输与保存的标准化流程血液系统疾病样本主要包括骨髓、外周血、淋巴结穿刺物等，需使用EDTA抗凝（避免肝素干扰抗体结合），采集后4小时内处理（防止细胞凋亡或抗原丢失）。外周血样本在CLL或慢性期白血病中可替代骨髓，但需保证原始细胞比例≥1%（否则灵敏度不足）；骨髓液需充分抗凝，避免凝固块导致细胞损失。3.2细胞制备与染色技术的质量控制红细胞裂解是骨髓样本处理的关键步骤，需选用低渗透压裂解液（如ammoniumchloride），避免损伤细胞膜抗原。细胞计数需精确，保证抗体与细胞的最佳比例（一般1:10-1:20），抗体孵育时间15-30分钟（4℃避光），避免长时间孵育导致内化或非特异性结合。洗涤步骤（2-3次PBS）可去除未结合抗体，降低背景噪音。3.3仪器校准与日常维护的重要性流式细胞仪需定期进行“光路校准”（使用荧光微球调整激光功率与光电倍增管电压）、“液流校准”（调整鞘流压力保证细胞单列通过）及“灵敏度校准”（检测微球荧光强度变异系数CV值，要求CV<2%）。日常维护包括清洁喷嘴（防止堵塞）、更换鞘液（避免细菌污染）、检查气路（保证液流稳定），只有仪器处于最佳状态，才能确保数据的准确性与重复性。3.3仪器校准与日常维护的重要性流式细胞术在常见血液系统疾病伴随诊断中的具体应用流式细胞术在不同血液系统疾病中的伴随诊断策略各有侧重，需结合疾病特点与临床需求制定个体化方案。以下从白血病、淋巴增殖性疾病、骨髓瘤、MDS四大类疾病展开，阐述其在伴随诊断中的具体应用。081急性白血病的伴随诊断：免疫分型与微小残留病监测1.1WHO分型框架下的免疫表型分析急性白血病（AL）的WHO分型强调“形态学+免疫学+遗传学+分子生物学（MICM）”整合，其中免疫分型是区分髓系、淋系及混合表型的关键。根据WHO2022版分类，AL分为急性髓系白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、混合表型急性白血病（MPAL）等，流式细胞术可通过标志物组合快速区分：-AML：髓系标志物（CD13、CD33、MPO）≥2项，淋系标志物阴性（或<20%）；-B-ALL：B系标志物（CD19、CD79a、cCD22）≥2项，髓系标志物阴性（或<20%）；-T-ALL：T系标志物（CD3、cCD3、CD7）≥2项，髓系标志物阴性（或<20%）；-MPAL：双系或双表型表达（如髓系+淋系标志物均≥20%）。1.2急性髓系白血病的系列特异性抗原表达模式AML的免疫表型具有高度异质性，不同亚型标志物组合各异：-伴t(8;21)(q22;q22);RUNX1-RUNX1T1的AML：CD34+CD117+CD19+（异常B系表达），CD13+CD33+，MPO+；-伴inv(16)(p13.1q22);CBFB-MYH11的AML：CD34+CD117+，CD13+CD33+CD15+，HLA-DR+，单核细胞标志物（CD14、CD64）弱阳性；-急性早幼粒细胞白血病（APL，伴PML-RARA）：CD13+CD33+CD34-（原始细胞不表达CD34），HLA-DR-，侧向散射（SSC）增高（颗粒丰富）。此外，异常表达CD7（髓系淋系抗原交叉）或CD56（NK细胞标志物）提示不良预后，需强化治疗。1.3急性淋巴细胞白血病的跨系抗原与异常表达ALL中，约30%患者存在跨系抗原表达，影响预后与治疗方案：-B-ALL：常见CD34+CD10+（普通型），但CD13/CD33阳性（髓系表达）或CD65阳性（粒系相关）提示预后不良；-T-ALL：CD7+CD5+，但CD1a+CD3+（皮质胸腺细胞）提示预后较好，CD99+CD117+（早期前体T-ALL）易复发；-伯基特白血病（BL）：CD19+CD20+CD10+，sIgM+（成熟B细胞表型），Ki-67>90%（高增殖活性），需与急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）鉴别。1.4微小残留病（MRD）的流式检测：灵敏度与临床意义MRD是AL治疗后复发的独立危险因素，流式细胞术检测MRD的灵敏度可达10⁻⁴-10⁻⁵，显著优于形态学（灵敏度10⁻²）。其检测策略包括：-基于“差异表型”的策略：正常造血细胞与白血病细胞的免疫表型差异，如正常B细胞表达CD45+CD19+CD10+CD20+，而白血病细胞可能CD45dimCD19+CD10-CD20-；-基于LAIP的策略：针对患者初诊时的异常表型设计panel，如AML患者初诊CD34+CD117+CD13+CD33dimCD7+，则治疗后检测该表型细胞是否存在；-临床意义：AML患者巩固治疗后MRD<0.1%，5年无复发生存率（RFS）显著高于MRD≥0.1%者；B-ALL患者MRD<10⁻⁴时，可考虑化疗减量，避免过度治疗。2341092慢性淋巴细胞增殖性疾病的伴随诊断：分型与预后分层2慢性淋巴细胞增殖性疾病的伴随诊断：分型与预后分层慢性淋巴细胞增殖性疾病（CLPD）是一组异质性疾病，包括CLL、毛细胞白血病（HCL）、淋巴浆细胞淋巴瘤（LPL）等，流式细胞术是鉴别诊断的核心工具。2.1慢性淋巴细胞白血病的免疫表型特征与预后标志物CLL的典型免疫表型为“CD5+CD23+CD43+dimCD20dim”，需与其他CLPD鉴别（如mantlecelllymphoma,MCL：CD5+CD23-CD43+CD20+）。预后标志物检测是伴随诊断的重点：-CD38：≥30%细胞阳性提示预后不良，与IGHV突变状态相关（CD38+者多为未突变型）；-ZAP-70：阳性（>20%）提示不良预后，但因检测方法差异（流式vsIHC），需结合临床；-TP53突变：通过流式可检测TP53蛋白过表达（>20%），与化疗耐药及预后不良相关，是CLL分层治疗的关键指标（TP53突变者需选择BCL-2抑制剂如维奈克拉，而非化疗）。2.2其他B细胞慢性淋巴增殖性疾病的鉴别诊断CLPD的鉴别需结合免疫表型与临床特征，流式细胞术可通过标志物组合快速区分：01-毛细胞白血病（HCL）：CD19+CD20+CD11c+CD25+CD103+，CD5-CD23-，细胞表面有“毛刺样”突起（流式SSC增高）；02-边缘区淋巴瘤（MZL）：CD19+CD20+CD5-CD10-CD23-，可伴CD43+，需与CLL鉴别；03-套细胞淋巴瘤（MCL）：CD19+CD20+CD5+CD43+CD23-，cyclinD1+（遗传学检测t(11;14)），为MCL特异性标志物。042.3T/NK细胞慢性淋巴增殖性疾病的免疫分型T/NK-CLPD相对少见，包括T-大颗粒淋巴细胞白血病（T-LGLL）、NK型白血病等，流式细胞术可通过T细胞受体（TCR）Vβ谱系分析、NK细胞标志物（CD16、CD56）等明确诊断：-T-LGLL：CD3+CD8+CD57+，TCRVβ单克隆增殖（提示恶性克隆），可伴CD16+；-侵袭性NK型白血病：CD3-CD56+CD16+，CD122（IL-2Rβ）+，病情进展迅速，需与反应性NK细胞增多鉴别。103多发性骨髓瘤的伴随诊断：浆细胞表型与疗效监测3多发性骨髓瘤的伴随诊断：浆细胞表型与疗效监测多发性骨髓瘤（MM）是浆细胞恶性增殖性疾病，流式细胞术可通过浆细胞免疫表型分析实现诊断、分型与疗效监测。3.1骨髓瘤浆细胞的异常免疫表型特征正常浆细胞表达CD38+CD138+CD19+CD45+，而骨髓瘤浆细胞具有异常表型：-CD19-CD45dim/-：几乎100%骨髓瘤浆细胞CD19缺失（与正常浆细胞鉴别）；-CD56+：约70%患者CD56阳性，与骨病相关；-CD117+CD20+：部分患者表达，提示不良预后；-CD28+CD81+：与染色体1q21扩增相关，提示预后不良。此外，流式可检测“浆细胞增殖指数”（Ki-67），>3%提示高增殖，易复发。3.2疾病不同阶段的流式细胞术监测策略STEP4STEP3STEP2STEP1MM的治疗分为诱导治疗、巩固治疗、维持治疗及复发阶段，各阶段MRD监测是伴随诊断的核心：-诱导治疗后：MRD阴性（10⁻⁵水平）者，无进展生存期（PFS）显著延长，可考虑维持治疗减量；-巩固治疗后：MRD持续阴性者，预后最佳；-复发阶段：需检测浆细胞表型变化（如CD56丢失、CD117新表达），提示克隆演化，可能更换治疗方案。3.3与其他技术（如NGS）的联合应用价值流式细胞术与NGS在MM伴随诊断中具有互补性：流式可快速检测浆细胞免疫表型与MRD，而NGS可识别IGH重排、KRAS/NRAS突变等遗传学异常。例如，流式检测MRD阴性的患者，NGS可能检测到微小克隆（10⁻⁶水平），提示分子残留；而NGS检测到TP53突变的患者，流式可监测TP53蛋白过表达的浆细胞比例，指导治疗调整。114骨髓增生异常综合征的伴随诊断：异常造血细胞检测4骨髓增生异常综合征的伴随诊断：异常造血细胞检测骨髓增生异常综合征（MDS）是一组克隆性造血干细胞疾病，以无效造血、高风险向AML转化为特征，流式细胞术可通过“异常免疫表型评分”辅助诊断与预后分层。4.1MDS的免疫表型评分系统（IPSS-M）应用-异常细胞群：CD34+CD38-（白血病干细胞样细胞）比例增高。05根据异常指标数量，MDS分为“低评分”（0-1项）、“中评分”（2-3项）、“高评分”（≥4项），评分越高，向AML转化风险越高。06-干/祖细胞标志物异常：CD34+CD117+比例增高（提示无效造血）；03-分化抗原异常：CD45dim/-（原始细胞），CD64+（单核细胞分化异常）；04国际预后积分系统-修订版（IPSS-M）将免疫表型评分纳入预后评估，流式检测的异常指标包括：01-髓系标志物异常表达：CD13/CD33跨系表达（如CD13+CD19+）；024.2病态造血细胞的流式识别特征STEP4STEP3STEP2STEP1MDS的病态造血包括粒细胞、红细胞、巨核细胞三系异常，流式可通过以下特征识别：-粒细胞：CD16dim/-（中性粒细胞分化异常），CD64+（单核细胞标志物异常表达）；-红细胞：CD71+（转铁蛋白受体）+CD36+（糖蛋白IV）双阳性（提示无效红系造血）；-巨核细胞：CD41+CD61+CD42b-（巨核细胞分化障碍），微巨核细胞（CD41+CD45dim/-）增多。4.3预后相关免疫标志物的检测意义01-CD56+：异常表达与染色体复杂核型相关，易进展为AML。除IPSS-M评分外，部分免疫标志物与MDS预后密切相关：-CD34+原始细胞比例：>5%提示预后不良；-HLA-DR表达：低表达（<20%）提示TP53突变，预后极差；0203044.3预后相关免疫标志物的检测意义伴随诊断中流式细胞术应用的挑战与优化策略尽管流式细胞术在血液系统疾病伴随诊断中具有不可替代的价值，但其应用仍面临灵敏度、标准化、数据分析等挑战，需通过技术创新与多学科协作解决。121技术层面挑战：灵敏度、特异性与标准化问题1.1微小残留病检测的灵敏度瓶颈与突破方向传统流式细胞术检测MRD的灵敏度受限于背景噪音（如正常造血细胞表型与白血病细胞重叠），高灵敏度MRD（10⁻⁶）需结合以下策略：-高参数流式细胞术（HPFC）：通过15-30色检测，增加表型维度，如同时检测CD19、CD20、CD79a、CD22、CD24、CD38等B系标志物，提高白血病细胞的识别特异性；-时间分辨流式细胞术（TruCOUNT）：通过绝对计数管精确计算细胞数量，避免样本稀释误差；-流式分选+单细胞测序：流式分选疑似MRD细胞，单细胞测序确认克隆性，进一步提升特异性。1.2非特异性结合与背景干扰的解决方案21非特异性结合（如抗体Fc受体介导的结合）是导致假阳性的主要原因，解决策略包括：-使用Fab片段抗体：Fab片段无Fc段，可完全避免FcR介导的非特异性结合，但成本较高。-Fc受体阻断：使用人源IgG或FcR阻断剂（如HumanTruStainFcX），阻断抗体与FcR结合；-优化抗体浓度：通过棋盘滴定确定最佳抗体浓度，避免过量抗体导致非特异性结合；431.3多中心检测差异与标准化体系建设01不同实验室的流式细胞术panel、仪器参数、数据分析方法存在差异，导致检测结果可比性差，建立标准化体系是关键：02-参考实验室网络：如欧洲流式细胞术质量控制项目（EQALM）通过室间质评（EQA）推动多中心标准化；03-标准化操作流程（SOP）：制定样本采集、处理、抗体染色、数据采集等环节的SOP，确保各实验室操作一致；04-共享数据库：建立流式细胞术MRD检测的共享数据库（如EuroFlow数据库），提供标准化的免疫表型参考范围。132临床层面挑战：结果解读与临床决策的整合2.1免疫表型复杂性与交叉病例的鉴别1血液系统疾病的免疫表型具有高度异质性，交叉病例（如MPAL、混合表型白血病）易误诊，解决策略包括：2-多参数整合分析：结合形态学、遗传学、分子生物学结果，如MPAL需同时满足“髓系+淋系标志物均≥20%”及遗传学异常（如PML-RARA、BCR-ABL等）；3-流式细胞术与二代测序（NGS）联合：NGS可检测基因融合（如ETV6-RUNX1）或突变（如FLT3-ITD），辅助区分白血病亚型；4-多学科会诊（MDT）：血液科、病理科、检验科、遗传科共同讨论，避免单一技术导致的误诊。2.2流式结果与临床、影像、遗传学信息的整合伴随诊断的最终目的是指导临床决策，需将流式结果与其他临床信息整合：-流式+临床：如CLL患者流式检测CD38≥30%，需结合IGHV突变状态（未突变者预后不良）；-流式+影像：MM患者流式检测MRD阳性，即使影像学无骨病，也需强化治疗；-流式+遗传学：AML患者流式检测CD34+CD117+，同时伴NPM1突变，提示预后良好，可考虑化疗减量。2.3动态监测中趋势分析的临床意义伴随诊断不是“一次性检测”，而是动态监测过程，流式结果的“趋势变化”比“单次结果”更有价值：-MRD水平先降后升：提示复发风险高，需提前干预；-MRD水平持续下降：提示治疗有效，可维持原方案；-免疫表型演变：如AML患者治疗后CD7+细胞新出现，提示克隆演化，可能更换靶向药物。143发展方向：新技术与多组学整合3.1高参数流式细胞术（CyTOF）的应用前景质谱流式细胞术（CyTOF）通过金属元素标记抗体，取代传统荧光素，可同时检测40+种标志物，无光谱重叠问题，分辨率更高。在伴随诊断中，CyTOF可：01-解析白血病干细胞的免疫微环境：检测骨髓中白血病干细胞与T细胞、NK细胞的相互作用，为免疫治疗提供靶点；02-发现新的疾病标志物：通过高参数分析，识别传统流式无法检测的弱表达抗原（如CD34的亚型表达）；03-MRD超灵敏检测：CyTOF的灵敏度可达10⁻⁷，适用于高危白血病的MRD监测。043.2人工智能与机器学习在数据分析中的价值壹流式细胞术的数据量巨大（单样本可产生数百万个数据点），传统人工分析耗时耗力且易漏诊，人工智能（AI）可解决这一难题：肆-预后预测模型：结合流式数据与临床数据，构建预后预测模型（如AML的MRD+免疫表型+遗传学联合模型），指导个体化治疗。叁-异常模式检测：机器学习模型可学习正常与疾病的免疫表型模式，自动识别异常细胞群（如MRD）；贰-自动设门与识别：AI算法（如FlowSOM、t-SNE）可通过无监督学习自动识别细胞群，减少人工设门偏差；3.3流式细胞术与单细胞测序的联合应用探索1单细胞测序（scRNA-seq）可全面分析细胞的基因表达谱，而流式细胞术可快速筛选目标细胞，两者联合可实现“表型+基因型”的精准解析：2-流式分选+scRNA-seq：流式分选疑似白血病细胞，scRNA-seq检测基因突变与表达谱，明确克隆演化机制；3-流式+空间转录组：结合流式免疫表型与空间转录组，分析白血病细