生物技术生物科技公司生物技术实习报告

生物技术生物科技公司生物技术实习报告一、摘要2023年6月5日至8月23日，我在一家生物技术公司担任分子生物学实验助理。核心工作成果包括完成120例基因克隆实验，成功率为92%，其中10例用于后续蛋白质表达验证；参与构建并优化了3种CRISPRCas9基因编辑方案，单次实验效率提升至45%；运用qPCR技术对5组样本进行表达量检测，数据重复性变异系数（CV）控制在5%以内。专业技能应用方面，熟练掌握高通量测序数据分析流程，处理了包含1500条序列的RNASeq数据集，通过自定义脚本筛选出差异表达基因200个。提炼出标准化的细胞培养SOP流程，将单次实验准备时间缩短30%，可复用的方法论包括基于生物信息学工具的实验结果快速验证体系。二、实习内容及过程1.实习目的希望通过实践了解生物技术公司的实际运作模式，将学校学的分子生物学知识用到具体项目上，提升实验操作技能，感受职场氛围。2.实习单位简介公司主要做基因编辑和细胞治疗相关研发，实验室有基因合成、细胞培养、测序分析等核心团队，项目周期短则几个月，长则要等临床数据。我所在的部门负责新药靶点的筛选验证，每天都能看到各种WesternBlot结果贴满白板。3.实习内容与过程第12周主要是熟悉环境，导师让我跟着做细胞传代和质粒提取，慢慢掌握了E.coli的LB培养液配比和CompetentCell的冻存条件。6月15号开始独立负责一个CRISPRCas9筛选实验，需要转染293T细胞，第3天观察GFP荧光，淘汰掉阴性对照。实验过程中发现有些培养皿的细胞密度不均，最后筛选出的阳性克隆效率只有35%，远低于预期的50%，导师建议我调整转染试剂的比例。遇到的问题主要是测序数据分析，刚开始看STAR软件输出的BAM文件时完全懵，完全不知道怎么往下走。花了2天时间看公司发的教程，又问了测序组学长，最后学会了用featureCounts统计基因表达量。7月10号参与了一个RNA干扰项目，需要用siRNA敲低某个靶基因的表达，结果做qPCR验证时发现对照组也有表达量变化，后来发现是RNA提取时试剂污染了，重新做了实验后CV降到了4%。4.实习成果与收获8周内独立完成了5个实验，其中3个达到了项目要求。具体数据是：基因克隆成功率92%，筛选出可用crispRNA12条，RNA干扰效率最高达到70%。最大的收获是学会了如何优化实验流程，比如通过预实验确定最佳转染条件，能省不少时间。5.问题与建议遇到的困难有2个，一个是实验设备使用频率太高但维护不及时，有时候做电泳要等1小时；另一个是培训机制不完善，刚来的2周没系统教过什么安全规范，差点把乙醇喷到培养箱里。建议公司可以建立设备预约系统，并且每周抽半天时间集中培训新员工，特别是生物安全这块要反复强调。我对职业规划的影响是更清楚自己喜欢做实验，但测序分析这块还得继续补课，打算下学期重点学R语言相关的课程。三、总结与体会1.实习价值闭环这8周像是在学校理论和实际之间搭了一座桥。6月刚进公司时，面对真实的实验需求还是有点懵，比如做蛋白电泳时跑不出来条带，后来跟着师兄摸索了缓冲液pH值和电压参数，第3周独立操作时才稳定下来。最让我有成就感的是7月那个基因编辑项目，最初效率只有32%，通过调整质粒比例和转染次数，最后提到44%，虽然离目标还有距离，但导师说这种改进在项目里很常见。现在回头看，当初觉得难懂的实验流程，比如如何从测序原始数据到筛选差异基因，现在再看STAR和featureCounts的教程就清晰多了。实际操作中体会到，很多教科书上的实验步骤需要根据实际情况调整，比如用TRIzol提取RNA时，我的样品吸光度比值一直飘在1.9左右，最后通过增加氯仿比例才达标，这在学校做实验时完全没遇到过。2.职业规划联结这次经历让我更确定想往分子生物学方向发展，特别是基因治疗这块。之前在学校觉得细胞培养就是简单传代，现在知道每一步的细节都可能影响结果，比如CO2培养箱的湿度控制，或者胰酶消化时间的判断，这些在简历上很难写出来，但确实是核心竞争力。现在开始系统复习生物信息学课程，打算下学期考个NGS数据分析的证书，公司用的R语言我也在自学，希望能有机会参与更复杂的实验。导师跟我说过，刚毕业时没人特别看重你的实验经验，反而会用工具和解决问题的能力来筛选人，这点给我很大启发。比如我之前会花2小时做WesternBlot，现在学会了用ImageJ批量分析，效率提升一半。3.行业趋势展望在公司看到很多文献提到的碱基编辑技术，感觉离临床应用很近了。我们组也在用PAM序列设计来优化CRISPR的脱靶率，这种小改动可能就能让一个项目成败。实验室用的酶和试剂价格都不便宜，但为了提高效率大家还是愿意投入，这说明现在生物技术行业更注重性价比。不过我观察到，有些供应商的试剂盒批次差异挺大，比如做qPCR的SYBRGreen试剂，有时扩增效率会低10%，这种问题在实验室很头疼。公司每周会发行业动态邮件，里面有很多人工智能预测靶点的案例，感觉未来药物研发会越来越依赖大数据，如果继续做实验，可能需要同时懂点编程。7月底有个基因治疗会议，我争取去听了，回来整理的笔记里提到AAV载体递送效率的问题，导师说这是目前研究的重点方向。4.心态转变最明显的改变是抗压能力。学校实验出问题可能重做一次就行，但公司这边一个实验要花几个月，中间任何环节出错都前功尽弃。比如有一次做细胞计数，结果细胞活力突然从98%掉到65%，后来发现是冰箱温度设错了，这种细节让我意识到责任感。现在遇到问题不会再慌，会先查3个文献再跟导师讨论，感觉自己从被动接受知识变成了主动解决问题。有时候加班到9点回宿舍，躺在床上翻实验记录本，突然想到个优化方案，第二天赶紧去验证，这种成就感以前在学校体会不到。四、致谢1.感谢公司提供这次实习机会，让我把书本上的分子克隆知识用在实际