靶向AXL的双抗在肿瘤转移抑制中的应用

靶向AXL的双抗在肿瘤转移抑制中的应用演讲人CONTENTS靶向AXL的双抗在肿瘤转移抑制中的应用###一、AXL在肿瘤转移中的生物学机制###二、靶向AXL单抗的研究现状与局限性###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势###四、靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中的具体应用####5.1技术挑战目录靶向AXL的双抗在肿瘤转移抑制中的应用###引言在肿瘤临床与基础研究领域，转移始终是横亘在治愈之路上的最大障碍之一。据统计，约90%的肿瘤相关死亡源于转移而非原发灶病变，而肿瘤转移是一个多步骤、多因素参与的复杂生物学过程，涉及上皮-间质转化（EMT）、细胞侵袭、血管生成、免疫逃逸等多个环节。在众多参与转移的分子靶点中，AXL受体酪氨酸激酶（AXLreceptortyrosinekinase，以下简称AXL）因其在肿瘤转移中的关键调控作用，已成为近年来抗转移药物研发的热点。AXL属于TAM（TYRO3、AXL、MER）家族受体，其配体为Gas6，通过激活下游PI3K/AKT、MAPK、NF-κB等信号通路，不仅促进肿瘤细胞的侵袭和迁移，还参与肿瘤微环境（TME）的重塑，介导免疫抑制和化疗耐药。靶向AXL的双抗在肿瘤转移抑制中的应用尽管靶向AXL的单克隆抗体（单抗）和小分子抑制剂已在临床前和早期临床试验中展现出一定的抗转移活性，但单一靶点阻断往往难以完全克服肿瘤的代偿性激活和信号通路冗余。双特异性抗体（双抗）作为一种能够同时结合两个不同靶点的新型生物制剂，通过“双重打击”策略，理论上可实现对肿瘤转移多环节的协同抑制，尤其在AXL与其他免疫检查点、促血管生成因子或转移相关分子的联合阻断中，具有独特的优势。本文将从AXL在肿瘤转移中的生物学机制出发，系统阐述靶向AXL双抗的设计策略、作用机制、临床应用潜力及面临的挑战，以期为肿瘤转移的精准治疗提供新的思路。###一、AXL在肿瘤转移中的生物学机制####1.1AXL的结构与激活机制AXL基因定位于人类染色体19q13.2，编码一种典型的I型跨膜糖蛋白，由胞外的配体结合区、跨膜区和胞内的酪氨酸激酶结构域组成。其胞外区包含两个免疫球样结构域（Ig1和Ig2）和两个纤维连接蛋白III型结构域（FNIII-1和FNIII-2），其中Ig2结构域是Gas6结合的关键区域。Gas6作为AXL的唯一已知配体，通过其γ-羧基谷氨酸（Gla）结构域与磷脂酰丝氨酸（PS）结合，同时通过LG结构域与AXL的胞外区相互作用，诱导AXL形成同源二聚体，激活胞内酪氨酸激酶结构域的自磷酸化，进而招募下游adaptor蛋白（如GRB2、GAB1、PI3K等），启动多条信号转导通路。###一、AXL在肿瘤转移中的生物学机制值得注意的是，AXL的激活不仅依赖于配体Gas6，还可通过“配体非依赖性”方式激活，如与其他受体（如EGFR、HER2、MET）形成异源二聚体，或通过肿瘤微环境中的炎症因子（如TNF-α、IL-6）上调AXL表达。这种激活方式的多样性，使得AXL在肿瘤转移中具有广泛的调控作用。####1.2AXL在肿瘤转移关键步骤中的作用肿瘤转移是一个多步骤级联过程，包括局部侵袭、intravasation、循环存活、extravasation和定植转移灶。AXL几乎全程参与这一过程，其作用机制主要包括以下方面：#####1.2.1促进上皮-间质转化（EMT）和细胞侵袭###一、AXL在肿瘤转移中的生物学机制EMT是肿瘤细胞获得侵袭和迁移能力的关键事件，其特征为上皮标志物（如E-cadherin）表达下调，间质标志物（如N-cadherin、Vimentin）表达上调。AXL可通过激活PI3K/AKT和MAPK通路，上调转录因子Snail、Twist和ZEB1的表达，诱导EMT发生。例如，在非小细胞肺癌（NSCLC）中，AXL高表达的肿瘤细胞表现出更强的迁移和侵袭能力，而AXL基因敲除可逆转EMT表型，抑制肺转移。#####1.2.2增强肿瘤细胞存活和抗凋亡能力循环中的肿瘤细胞（CTCs）需抵抗血液流动的剪切应力、免疫细胞杀伤及缺氧等压力，才能成功定植转移灶。AXL通过激活AKT通路，抑制促凋亡蛋白（如Bad、Caspase-9）的活性，同时上调抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Survivin）的表达，增强CTCs的存活能力。此外，AXL还可通过激活NF-κB通路，诱导IL-6、IL-8等炎症因子的分泌，进一步促进肿瘤细胞的存活和增殖。###一、AXL在肿瘤转移中的生物学机制#####1.2.3介导肿瘤微环境免疫抑制肿瘤微环境的免疫逃逸是转移灶形成的重要条件。AXL在肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）、髓源性抑制细胞（MDSCs）等免疫细胞中高表达，其激活可促进TAMs向M2型极化，分泌TGF-β、IL-10等免疫抑制因子；同时，AXL可通过PD-L1/PD-1通路抑制T细胞的活性，形成“免疫抑制性微环境”。研究表明，在乳腺癌模型中，AXL抑制剂可减少TAMs浸润，恢复CD8+T细胞的抗肿瘤功能，抑制肝转移。#####1.2.4促进血管生成和转移灶定植转移灶的形成依赖于新生血管的供应。AXL可通过激活VEGF信号通路，上调内皮细胞中VEGF的表达，促进血管生成。此外，AXL还通过调控肿瘤细胞的黏附和迁移，帮助其在转移灶中定植。例如，在前列腺癌中，AXL高表达的肿瘤细胞更易定植于骨转移灶，其机制与AXL介导的骨微环境重塑（如激活破骨细胞）密切相关。###一、AXL在肿瘤转移中的生物学机制####1.3AXL高表达的临床意义与预后相关性大量临床研究证实，AXL在多种实体瘤（如肺癌、乳腺癌、结直肠癌、胰腺癌等）中高表达，且与肿瘤转移、化疗耐药和患者不良预后显著相关。例如，在NSCLC中，AXL高表达患者的淋巴结转移率和远处转移率显著高于AXL低表达患者，且总生存期（OS）和无进展生存期（PFS）明显缩短；在三阴性乳腺癌（TNBC）中，AXL高表达与骨转移、肺转移的发生风险呈正相关，是独立的不良预后因素。这些临床数据进一步凸显了AXL作为抗转移治疗靶点的价值。###二、靶向AXL单抗的研究现状与局限性####2.1靶向AXL单抗的作用机制与临床前研究目前，针对AXL的单抗主要包括两类：一类是阻断AXL与Gas6结合的配体阻断型抗体，如BGB324（bemcentinib）、ADU-AXL-11等；另一类是抑制AXL激酶活性的抗体，如MAH-X4等。这些单抗通过结合AXL的胞外区，阻断Gas6诱导的二聚化和激活，或直接抑制激酶活性，从而抑制下游信号通路的激活，发挥抗转移作用。在临床前研究中，AXL单抗展现出显著抗转移活性。例如，BGB324在乳腺癌模型中可抑制肺转移的形成，减少转移结节数量；在胰腺癌模型中，BGB324联合吉西他滨可显著延长小鼠生存期，其机制与抑制EMT和肿瘤血管生成相关。此外，AXL单抗还可逆转化疗耐药，如在顺铂耐药的卵巢癌模型中，BGB324可恢复肿瘤细胞对顺铂的敏感性。###二、靶向AXL单抗的研究现状与局限性####2.2靶向AXL单抗的临床研究进展基于临床前数据，多项AXL单抗已进入临床试验阶段。例如，BGB324在I/II期临床试验中，联合化疗治疗晚期NSCLC显示出一定的抗转移效果，尤其在AXL高表达亚组中，PFS显著延长；在I期临床试验中，ADU-AXL-11在晚期实体瘤患者中表现出良好的安全性和初步抗肿瘤活性。然而，这些单抗在III期临床试验中多未达到主要研究终点，其疗效存在局限性。####2.3靶向AXL单抗的局限性分析尽管AXL单抗在临床前研究中表现出潜力，但其临床疗效受到以下因素的限制：#####2.3.1肿瘤信号通路的代偿性激活###二、靶向AXL单抗的研究现状与局限性AXL属于TAM家族，其同源家族成员TYRO3和MER在AXL被抑制时可被上调，形成“代偿性激活”，导致疗效下降。例如，在AXL抑制剂治疗的肿瘤模型中，TYRO3和MER的表达显著升高，下游信号通路重新激活，促进肿瘤转移。#####2.3.2肿瘤微环境的复杂性AXL不仅表达于肿瘤细胞，还高表达于TAMs、MDSCs等免疫细胞。单抗对肿瘤细胞AXL的抑制难以完全逆转免疫抑制微环境，甚至可能通过“反馈调节”增强其他免疫抑制分子的表达（如PD-L1），限制抗转移效果。#####2.3.3脱靶效应与毒性部分AXL单抗因与TAM家族其他成员（如MER）存在结构相似性，可能产生脱靶效应，导致正常组织损伤。例如，MER在胎盘发育、组织修复中发挥重要作用，其抑制可能引发出血、伤口愈合延迟等不良反应。###二、靶向AXL单抗的研究现状与局限性#####2.3.4缺乏有效的患者筛选标志物目前，AXL单抗的临床试验多未建立有效的患者筛选标准，AXL表达的异质性（如原发灶与转移灶表达差异、肿瘤细胞与微环境细胞表达差异）可能导致部分患者对治疗无应答。###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势####3.1双抗的分子设计原则与平台技术双抗是含有两个不同抗原结合位点的人工抗体，其设计需满足以下原则：高亲和力、低免疫原性、良好的稳定性及药代动力学特性。目前，双抗的设计平台主要包括“Knobs-into-holes”（KiH）技术、scFv（单链可变区片段）融合技术、BiTE（双特异性T细胞衔接器）技术等。例如，KiH技术通过改造抗体的CH3结构域，形成“凸起”和“凹陷”，促进两条重链的正确配对，减少抗体的错配；scFv技术将两个抗体的可变区通过linker连接，形成双特异性分子，具有分子量小、组织穿透性强等优点。####3.2靶向AXL双抗的主要类型与设计策略###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势根据靶点组合的不同，靶向AXL的双抗可分为以下几类，每一类均针对肿瘤转移的不同环节发挥作用：#####3.2.1AXL/免疫检查点双抗免疫检查点（如PD-1、CTLA-4）是肿瘤免疫逃逸的关键分子，与AXL联合阻断可同时抑制AXL介导的免疫抑制和免疫检查点通路，重塑肿瘤微环境。例如，AXL/PD-1双抗可同时结合肿瘤细胞表面的AXL和T细胞表面的PD-1，一方面阻断AXL介导的M2型巨噬细胞极化和T细胞抑制，另一方面直接解除PD-1对T细胞的抑制，激活抗肿瘤免疫反应。#####3.2.2AXL/促血管生成因子双抗###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势VEGF是肿瘤血管生成的关键因子，与AXL具有协同促转移作用。AXL/VEGF双抗可同时阻断AXL和VEGF信号通路，抑制肿瘤血管生成和转移。例如，在肝癌模型中，AXL/VEGF双抗可显著减少微血管密度，抑制肺转移，其效果优于单药联合。#####3.2.3AXL/转移相关分子双抗除了免疫和血管生成相关靶点，AXL还可与其他转移相关分子（如c-MET、整合素）形成双抗。例如，AXL/c-MET双抗可同时阻断两条促转移通路，抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移。在胰腺癌模型中，AXL/c-MET双抗可显著降低肝转移的发生率，其机制与抑制EMT和肿瘤细胞存活相关。#####3.2.4AXL/肿瘤抗原双抗###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势肿瘤相关抗原（如HER2、EGFR）在肿瘤细胞表面高表达，与AXL形成双抗可实现肿瘤细胞的精准靶向。例如，AXL/HER2双抗可特异性结合HER2阳性肿瘤细胞，通过AXL阻断抑制其转移能力，同时通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）效应杀伤肿瘤细胞。####3.3靶向AXL双抗的核心优势与单抗相比，靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中具有以下显著优势：#####3.3.1协同抑制转移相关信号通路双抗通过同时阻断两个靶点，可克服单抗的代偿性激活问题。例如，AXL/TYRO3双抗可同时抑制TAM家族的两个关键成员，阻断下游信号通路的交叉激活，抗转移效果优于单药联合。###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势#####3.3.2重塑肿瘤微环境，增强抗肿瘤免疫AXL/免疫检查点双抗不仅靶向肿瘤细胞，还可作用于免疫细胞，逆转免疫抑制微环境。例如，在乳腺癌模型中，AXL/PD-1双抗可增加CD8+T细胞浸润，减少Treg细胞数量，显著抑制骨转移。#####3.3.3提高肿瘤靶向性，降低系统性毒性双抗的双特异性可增加对肿瘤细胞的靶向结合，减少对正常组织的损伤。例如，AXL/肿瘤抗原双抗可特异性结合肿瘤表面的AXL和肿瘤抗原，降低单抗治疗引起的脱靶效应和毒性。#####3.3.4克服耐药性###三、靶向AXL双抗的设计策略与优势肿瘤耐药是转移治疗失败的主要原因，双抗通过多靶点阻断，可延缓耐药产生。例如，AXL/化疗药物偶联抗体（ADC）可同时发挥AXL阻断和化疗杀伤作用，克服肿瘤细胞对化疗的耐药性。###四、靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中的具体应用####4.1非小细胞肺癌（NSCLC）NSCLC是肿瘤转移最常见的类型之一，约40%的患者初诊时已发生转移，且易出现脑转移、骨转移等。AXL在NSCLC中高表达，与淋巴结转移和预后不良显著相关。目前，多项AXL双抗在NSCLC的临床前研究中展现出抗转移潜力。例如，一款AXL/PD-1双抗（如ABBV-075）在NSCLC模型中可显著抑制肺转移和脑转移，其机制包括：①阻断AXL介导的EMT，减少肿瘤细胞侵袭；②解除PD-1对T细胞的抑制，增强免疫细胞对转移灶的杀伤；③抑制肿瘤血管生成，减少转移灶的血液供应。在I期临床试验中，该双抗在AXL高表达的晚期NSCLC患者中显示出良好的安全性和初步抗肿瘤活性，其中2例患者达到部分缓解（PR），6例患者疾病稳定（SD）。###四、靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中的具体应用####4.2乳腺癌乳腺癌的转移以骨、肺、肝为主，其中三阴性乳腺癌（TNBC）的转移风险最高。AXL在TNBC中高表达，与骨转移和化疗耐药密切相关。靶向AXL双抗在乳腺癌转移抑制中的应用主要集中在以下方面：#####4.2.1AXL/CTLA-4双抗CTLA-4是T细胞活化的重要负调控因子，与AXL联合阻断可增强抗肿瘤免疫。在TNBC模型中，AXL/CTLA-4双抗可显著减少骨转移的形成，其机制与抑制Treg细胞浸润、激活CD8+T细胞相关。临床前研究显示，该双抗联合化疗可延长小鼠生存期，且未增加系统性毒性。#####4.2.2AXL/RANKL双抗###四、靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中的具体应用RANKL是破骨细胞分化的关键因子，与乳腺癌骨转移密切相关。AXL/RANKL双抗可同时阻断AXL介导的肿瘤细胞存活和RANKL介导的骨破坏，抑制骨转移。在乳腺癌骨转移模型中，该双抗可减少骨破坏面积，降低血清骨代谢标志物（如TRACP-5b）水平，缓解骨痛症状。####4.3结直肠癌（CRC）结直肠癌的转移以肝转移为主，约50%的CRC患者会发生肝转移，且预后极差。AXL在CRC肝转移中高表达，与转移灶形成和化疗耐药相关。靶向AXL双抗在CRC肝转移中的应用主要包括：#####4.3.1AXL/VEGF双抗###四、靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中的具体应用VEGF是CRC肝转移血管生成的关键因子，AXL/VEGF双抗可抑制肿瘤血管生成和转移。在CRC肝转移模型中，该双抗可减少肝转移结节数量，降低微血管密度，其效果优于贝伐单抗（抗VEGF单抗）。临床前研究显示，AXL/VEGF双抗联合化疗可显著延长小鼠生存期，且未增加出血风险。#####4.3.2AXL/EGFR双抗EGFR在CRC中高表达，与肝转移相关。AXL/EGFR双抗可同时阻断AXL和EGFR信号通路，抑制肿瘤细胞增殖和迁移。在CRC模型中，该双抗可抑制肝转移的形成，其机制与抑制EMT和下游PI3K/AKT通路相关。此外，该双抗还可逆转西妥昔单抗（抗EGFR单抗）的耐药，为CRC肝转移的治疗提供了新的选择。####4.4其他实体瘤###四、靶向AXL双抗在肿瘤转移抑制中的具体应用除了上述肿瘤类型，靶向AXL双抗在胰腺癌、黑色素瘤、卵巢癌等转移抑制中也展现出潜力。例如，在胰腺癌模型中，AXL/c-MET双抗可显著抑制肝转移，其机制与抑制肿瘤细胞侵袭和血管生成相关；在黑色素瘤模型中，AXL/PD-L1双抗可抑制脑转移，恢复T细胞抗肿瘤活性；在卵巢癌模型中，AXL/叶酸受体双抗可靶向转移病灶，通过ADCC效应杀伤肿瘤细胞。###五、靶向AXL双抗的临床转化挑战与未来展望####5.1技术挑战尽管靶向AXL双抗在临床前研究中展现出优势，但其临床转化仍面临以下技术挑战：#####5.1.1分子稳定性与药代动力学特性双抗的分子结构复杂，易在体内发生降解或聚集，影响其稳定性和半衰期。例如，scFv片段的双抗因分子量较小（约50-70kDa），肾脏清除速度快，半衰期较短，需要通过PEG修饰或Fc融合等技术延长其体内循环时间。此外，双抗的构象稳定性也需优化，避免在体内发生变构导致活性下降。#####5.1.2生产工艺与质量控制双抗的生产工艺复杂，涉及两条重链和两条轻链的正确配对，以及抗体的纯化和质控。例如，KiH技术的双抗需严格控制“凸起”和“凹陷”的比例，避免错配产生的抗体杂质。此外，双抗的质量控制需包括纯度、亲和力、稳定性等多项指标，以确保其安全性和有效性。####5.1技术挑战#####5.1.3免疫原性风险双抗作为外源性蛋白，可能引发机体产生抗药物抗体（ADA），影响疗效或导致不良反应。例如，scFv片段的双抗因含有鼠源序列，免疫原性较高，需通过人源化改造降低免疫原性。目前，全人源双抗（如噬菌体展示技术筛选的双抗）可显著降低免疫原性，但其筛选过程复杂、成本较高。####5.2临床挑战靶向AXL双抗的临床应用还面临以下临床挑战：#####5.2.1患者筛选与生物标志物####5.1技术挑战AXL在肿瘤组织和微环境中的表达具有异质性，如何筛选出对AXL双抗敏感的患者是关键。目前，AXL的表达水平（如IHC检测）、基因突变（如AXL扩增）、下游信号通路激活状态（如p-AKT、p-ERK）等可能作为生物标志物，但其临床验证仍需大规模研究。此外，转移灶与原发灶的AXL表达可能存在差异，需通过液体活检（如循环肿瘤细胞CTCs检测）动态监测AXL表达变化，指导治疗。#####5.2.2联合治疗策略的优化AXL双抗的疗效可能与其他治疗手段（如化疗、放疗、免疫治疗）存在协同作用，如何优化联合治疗方案是临床转化的关键。例如，AXL双抗联合化疗可增强对肿瘤细胞的杀伤，联合免疫治疗可重塑肿瘤微环境，但需注意药物毒性的叠加。此外，联合治疗的给药顺序、剂量和疗程也需通过临床研究确定。####5.1技术挑战#####5.2.3安全性与不良反应管理双抗的双特异性可能导致新的不良反应，如免疫相关不良反应（irAEs）、细胞因子释放综合征（CRS）等。例如，AXL/PD-1双抗可能引发免疫相关性肺炎、结肠炎等，需通过密切监测和及时治疗（如糖皮质激素）控制。此外，AXL在正常组织（如胎盘、肝脏）中的低表达也可能导致毒性，需