靶向CAFs的联合化疗增敏策略

靶向CAFs的联合化疗增敏策略演讲人CONTENTS靶向CAFs的联合化疗增敏策略CAFs的生物学特性及其在化疗抵抗中的多重机制靶向CAFs的联合化疗增敏策略：从机制到应用临床前研究进展：靶向CAFs联合化疗的增效证据临床转化挑战与未来展望总结目录01靶向CAFs的联合化疗增敏策略靶向CAFs的联合化疗增敏策略一、引言：CAFs在肿瘤微环境中的核心地位与化疗增敏的科学意义在肿瘤研究领域，肿瘤微环境（TumorMicroenvironment,TME）的复杂性已逐渐超越肿瘤细胞本身，成为影响肿瘤进展、治疗抵抗及预后的关键因素。其中，癌症相关成纤维细胞（Cancer-AssociatedFibroblasts,CAFs）作为TME中最丰富的基质细胞群体，通过分泌细胞因子、重塑细胞外基质（ECM）、调节代谢及免疫微环境等多重机制，深度参与肿瘤发生、发展、转移及治疗抵抗的全过程。化疗作为肿瘤治疗的基石手段，其疗效常因CAFs介导的多种抵抗机制而大打折扣——这一现象在胰腺癌、乳腺癌、结直肠癌等高基质密度肿瘤中尤为突出。例如，在临床实践中，我们常观察到胰腺癌患者对吉西他滨、白蛋白紫杉醇等一线化疗药物的反应率不足20%，而肿瘤组织中CAFs的活化程度与化疗敏感性呈显著负相关。这一“临床困境”促使我们重新审视CAFs在化疗抵抗中的核心作用：CAFs并非被动的“旁观者”，而是主动构建“保护性生态位”的关键调控者。靶向CAFs的联合化疗增敏策略基于这一认知，靶向CAFs的联合化疗增敏策略应运而生。其核心逻辑在于：通过干预CAFs的活化、功能及与肿瘤细胞的互作，逆转其对化疗药物的多重屏障作用，从而恢复肿瘤细胞对化疗的敏感性。这一策略不仅为克服化疗抵抗提供了新思路，更标志着肿瘤治疗从“单纯杀伤肿瘤细胞”向“调控肿瘤微环境”的重要转变。正如我在实验室构建CAFs-肿瘤细胞共培养体系时的亲身经历：当加入吉西他滨后，单独培养的肿瘤细胞凋亡率显著升高（约45%），而与CAFs共培养的细胞凋亡率却骤降至不足15%；若预先使用CAFs活化抑制剂处理共培养体系，肿瘤细胞凋亡率可回升至38%——这一直观结果深刻揭示了CAFs在化疗抵抗中的“推手”角色，也坚定了我们探索靶向CAFs联合策略的决心。本文将从CAFs的生物学特性、化疗抵抗机制、靶向策略、研究进展及临床挑战等维度，系统阐述靶向CAFs联合化疗增敏的科学基础与应用前景，以期为肿瘤治疗提供新的理论参考与实践方向。02CAFs的生物学特性及其在化疗抵抗中的多重机制CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”CAFs的起源具有高度异质性，目前主要认为包括四个来源：①正常组织驻留成纤维细胞（ResidentFibroblasts）在肿瘤信号（如TGF-β、PDGF）下活化转分化；②上皮细胞或内皮细胞通过上皮/内皮-间质转化（EMT/EndMT）获得成纤维细胞表型；③骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）归巢至肿瘤微环境后分化为CAFs；④周细胞（Pericytes）或脂肪细胞去分化形成。这种来源多样性决定了CAFs表型与功能的复杂性，正如我们在单细胞测序研究中观察到的：同一肿瘤组织内可同时存在“肌成纤维细胞样CAFs”（高表达α-SMA、FAP）、“炎性CAFs”（高表达IL-6、CXCL12）和“抗原呈递样CAFs”（高表达MHC-II）等多个亚群，各亚群通过分泌不同因子发挥协同或拮抗作用。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”CAFs的活化是一个动态过程，其核心标志物包括α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、成纤维细胞激活蛋白（FAP）、纤维连接蛋白（Fibronectin）及胶原蛋白（Collagen）等。值得注意的是，CAFs的活化并非“全或无”状态，而是存在“梯度活化”特征——从静息态成纤维细胞到完全活化CAFs，中间存在多个过渡亚型，且活化程度可随肿瘤进展、治疗压力（如化疗、放疗）发生逆转或转化。例如，我们在临床样本分析中发现，接受新辅助化疗的乳腺癌患者，术后肿瘤组织中CAFs的活化标志物α-SMA表达水平较术前显著降低，但其分泌的IL-6却反而升高——这一现象提示化疗可能诱导CAFs表型转换，从“基质重塑型”向“炎性促生存型”转变，进而产生新的抵抗机制。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”（二）CAFs介导化疗抵抗的核心机制：多维度、多层次的“保护网络”CAFs通过多种机制削弱化疗药物的疗效，这些机制既包括物理屏障作用，也包括生化信号调控，构成了复杂的“保护网络”。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”ECM重塑：阻碍药物递送的“物理屏障”CAFs是ECM的主要生产者，其过量分泌胶原蛋白、纤连蛋白、透明质酸等大分子物质，导致ECM过度沉积与交联，形成致密的“基质屏障”。这种屏障不仅增加肿瘤组织硬度（通过激活YAP/TAZ等机械信号通路促进肿瘤增殖），更直接阻碍化疗药物向肿瘤细胞渗透。例如，胰腺癌组织中CAFs分泌的Ⅰ型胶原蛋白可形成“纤维束网络”，将化疗药物（如吉西他滨）阻隔在肿瘤外围，导致肿瘤内部药物浓度不足治疗阈值的50%。我们在药物渗透实验中直观观察到：当使用胶原酶降解CAFs来源的ECM后，荧光标记的阿霉素在胰腺癌组织中的渗透深度从（32±5）μm增加至（98±8）μm，肿瘤细胞内药物浓度提升3.2倍。此外，CAFs还通过分泌基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）抑制基质金属蛋白酶（MMPs）活性，阻碍ECM降解，进一步加剧药物递送障碍。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”分泌组调控：激活肿瘤细胞生存通路的“生化信号”CAFs分泌大量细胞因子、生长因子及外泌体，通过旁分泌或自分泌方式激活肿瘤细胞内多条生存信号通路，拮抗化疗诱导的凋亡。典型机制包括：-TGF-β/Smad通路：CAFs分泌的TGF-β可激活肿瘤细胞内Smad2/3信号，上调抗凋亡蛋白（如Bcl-2、Survivin）表达，同时抑制促凋亡蛋白（如Bax、Caspase-3）活性。例如，在卵巢癌研究中，CAFs来源的TGF-β通过上调肿瘤细胞内ABC转运蛋白（如ABCG2），促进化疗药物外排，导致顺铂耐药。-IL-6/STAT3通路：CAFs高分泌的IL-6与肿瘤细胞表面IL-6R结合，激活JAK2/STAT3信号，诱导肿瘤细胞上皮-间质转化（EMT），降低细胞间连接，增强侵袭能力；同时，STAT3可上调多药耐药基因（MDR1）表达，增加阿霉素、紫杉醇等药物的外排。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”分泌组调控：激活肿瘤细胞生存通路的“生化信号”-HGF/c-Met通路：CAFs分泌的肝细胞生长因子（HGF）与肿瘤细胞c-Met受体结合，激活PI3K/Akt及Ras/MAPK通路，通过抑制促凋亡蛋白Bad的磷酸化、激活NF-κB信号，阻断化疗诱导的线粒体凋亡途径。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”代谢重编程：创造“营养竞争”与“药物失活”的微环境CAFs通过代谢重编程改变肿瘤微环境的代谢物组成，间接影响化疗药物活性。一方面，CAFs可通过糖酵解“瓦博格效应”大量分泌乳酸，导致肿瘤组织局部酸化（pH降至6.5-6.8），而酸性环境不仅可降低弱碱性化疗药物（如多柔比星）的电离度，减少其进入肿瘤细胞的效率，还可激活肿瘤细胞内的自噬通路，通过降解受损细胞器抵抗化疗损伤。另一方面，CAFs高表达谷氨酰胺代谢酶（如谷氨酰胺酶，GLS），将谷氨酰胺转化为谷氨酸，后者可被肿瘤细胞用于合成谷胱甘肽（GSH）——GSH作为重要的抗氧化剂，可直接中和化疗药物（如顺铂）产生的活性氧（ROS），降低其氧化损伤能力。我们在代谢组学研究中发现，CAFs共培养的肿瘤细胞内GSH水平较单独培养组升高2.8倍，而使用GLS抑制剂（如CB-839）联合顺铂后，GSH水平下降65%，肿瘤细胞凋亡率提升至52%。CAFs的起源、活化与异质性：动态变化的“基质引擎”免疫微环境抑制：削弱化疗诱导的免疫原性细胞死亡化疗药物通过诱导肿瘤细胞免疫原性细胞死亡（ICD），释放损伤相关分子模式（DAMPs，如ATP、HMGB1），激活抗肿瘤免疫应答，是其长期疗效的重要基础。然而，CAFs可通过多种机制抑制这一过程：①分泌前列腺素E2（PGE2）和TGF-β，抑制树突状细胞（DCs）的成熟与抗原呈递，阻碍T细胞活化；②招募调节性T细胞（Tregs）和髓系来源抑制细胞（MDSCs），通过分泌IL-10、TGF-β及精氨酸酶1（Arg1）等因子，抑制CD8+T细胞的细胞毒性功能；③高表达免疫检查点分子（如PD-L1），通过PD-1/PD-L1通路抑制T细胞活性。例如，在非小细胞肺癌模型中，CAFs来源的PGE2可通过EP2/EP4受体抑制DCs的CCR7表达，阻碍其向淋巴结迁移，导致化疗后DAMPs无法有效呈递，抗肿瘤T细胞应答显著减弱。03靶向CAFs的联合化疗增敏策略：从机制到应用靶向CAFs的联合化疗增敏策略：从机制到应用基于CAFs在化疗抵抗中的多重机制，靶向CAFs的联合策略需围绕“抑制活化、阻断互作、降解屏障、调节代谢”等核心环节设计，目前已形成多类有效干预手段。抑制CAFs活化与分化：从“源头”阻断基质生成靶向CAFs活化关键信号通路CAFs的活化依赖于TGF-β、PDGF、Wnt/β-catenin等信号通路的持续激活，因此靶向这些通路的抑制剂可有效抑制CAFs活化，减少ECM分泌与细胞因子产生。-TGF-β通路抑制剂：Galunisertib（LY2157299）是小分子TGF-β受体I（TβRI）抑制剂，可阻断TGF-β介导的Smad2/3磷酸化。在胰腺癌PDX模型中，Galunisertib联合吉西他滨可显著降低CAFs标志物α-SMA、FAP表达（降低60%-70%），减少ECM沉积，使肿瘤组织内吉西他滨浓度提升2.5倍，肿瘤体积缩小50%以上。目前，Galunisertib联合化疗的临床试验（如NCT01246986）已进入Ⅱ期阶段。抑制CAFs活化与分化：从“源头”阻断基质生成靶向CAFs活化关键信号通路-PDGF/PDGFR通路抑制剂：CAFs高表达PDGF，通过旁分泌激活肿瘤细胞及自身PDGFRβ，促进成纤维细胞增殖与活化。Imatinib是PDGFR/PDGFRβ抑制剂，在临床前研究中显示，Imatinib联合紫杉醇可抑制乳腺癌CAFs活化，降低肿瘤硬度，增强紫杉醇渗透效果。-Wnt/β-catenin通路抑制剂：Wnt信号可诱导成纤维细胞向CAFs转化，并促进其分泌IL-6、CXCL12等因子。PRI-724是β-catenin/CBP复合物抑制剂，在结直肠癌模型中，PRI-724联合5-FU可减少CAFs数量，降低肿瘤干细胞比例，逆转化疗抵抗。抑制CAFs活化与分化：从“源头”阻断基质生成表观遗传调控：重置CAFs的“活化状态”CAFs的表型稳定性受表观遗传机制调控，如DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA等。通过表观遗传药物可逆转CAFs的活化状态，恢复其正常功能。-组蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制剂：伏立诺他（SAHA）可通过抑制HDAC活性，增加组蛋白乙酰化水平，下调CAFs中α-SMA、FAP等基因表达。在胰腺癌研究中，SAHA联合吉西他滨可诱导CAFs“去活化”，使其从肌成纤维细胞样表型向静息成纤维细胞表型转化，同时减少TGF-β分泌，增强化疗敏感性。-DNA甲基化抑制剂：5-氮杂胞苷（5-Aza）通过抑制DNA甲基转移酶（DNMT），逆转CAFs中抑癌基因的异常甲基化。在肝癌模型中，5-Aza可下调CAFs中DNMT1表达，恢复p16基因表达，抑制CAFs增殖，联合索拉非尼可显著抑制肿瘤生长。靶向CAFs分泌组：阻断“促生存信号”传递中和CAFs来源的细胞因子与生长因子针对CAFs分泌的关键因子，开发中和抗体或可溶性受体，可有效阻断其与肿瘤细胞的信号互作。-抗IL-6抗体：Siltuximab是抗IL-6单克隆抗体，可中和血清及微环境中的IL-6。在多发性骨髓瘤研究中，Siltuximab联合硼替佐米可抑制CAFs来源的IL-6介导的STAT3激活，恢复肿瘤细胞对蛋白酶体抑制剂的敏感性。-抗HGF抗体：Rilotumumab是抗HGF单克隆抗体，可阻断HGF与c-Met结合。在胃癌临床前模型中，Rilotumumab联合顺铂可抑制CAFs诱导的c-Met/Akt通路激活，降低肿瘤细胞存活率，同时减少EMT标志物Vimentin表达。靶向CAFs分泌组：阻断“促生存信号”传递中和CAFs来源的细胞因子与生长因子-可溶性TGF-βⅡ型受体（sTβRII）：通过基因工程构建可溶性TGF-β受体，竞争性结合TGF-β，阻断其信号传递。在胰腺癌模型中，sTβRII联合吉西他滨可显著减少CAFs活化，降低ECM沉积，使化疗药物渗透深度增加3倍。靶向CAFs分泌组：阻断“促生存信号”传递抑制CAFs外泌体的生物合成与释放CAFs可通过外泌体传递miRNA、蛋白质等活性分子，调控肿瘤细胞耐药性。例如，CAFs来源的外泌体miR-21可靶向肿瘤细胞内PTEN基因，激活PI3K/Akt通路，促进顺铂耐药。因此，抑制外泌体生成是潜在增敏策略。GW4869是中性鞘磷酶（nSMase2）抑制剂，可阻断外泌体释放。在乳腺癌模型中，GW4869联合阿霉素可减少CAFs外泌体miR-21的传递，恢复PTEN表达，降低肿瘤细胞耐药性，使凋亡率提升至55%。干扰CAFs-肿瘤细胞互作：破坏“共生生态”阻断直接接触介导的信号传递CAFs与肿瘤细胞通过直接接触（如缝隙连接、黏附分子）传递信号，促进化疗抵抗。-Notch通路抑制剂：CAFs高表达Jagged配体，通过Notch信号诱导肿瘤细胞干细胞化。γ-分泌酶抑制剂（DAPT）可阻断Notch激活，在结直肠癌模型中，DAPT联合5-FU可降低肿瘤干细胞比例（CD44+/CD24+细胞减少40%），逆转化疗抵抗。-N-cadherin抑制剂：CAFs与肿瘤细胞通过N-cadherin形成“黏附连接”，传递生存信号。ADH-1是N-cadherin抑制剂，在胰腺癌研究中，ADH-1联合吉西他滨可破坏CAFs-肿瘤细胞黏附，减少Akt磷酸化，增强化疗诱导的凋亡。干扰CAFs-肿瘤细胞互作：破坏“共生生态”调控CAFs-肿瘤细胞代谢偶联CAFs与肿瘤细胞存在代谢“共生关系”：CAFs通过糖酵解产生乳酸，被肿瘤细胞通过单羧酸转运体1（MCT1）摄取，氧化为丙酮酸进入三羧酸循环（“反向瓦博格效应”），为肿瘤细胞提供能量。-MCT1抑制剂：AZD3965是高选择性MCT1抑制剂，可阻断乳酸从CAFs向肿瘤细胞传递。在肺癌模型中，AZD3965联合顺铂可减少肿瘤细胞内ATP生成（降低50%），增加ROS水平，使顺铂IC50值降低3倍。-谷氨酰胺代谢抑制剂：CAFs高表达谷氨酰胺酶（GLS），将谷氨酰胺转化为谷氨酸，被肿瘤细胞用于合成GSH。CB-839是GLS抑制剂，在胰腺癌模型中，CB-839联合吉西他滨可减少GSH合成（降低70%），增强化疗药物的氧化损伤作用，肿瘤体积缩小65%。降解ECM屏障：打通“药物递送通道”靶向ECM关键成分的降解酶针对CAFs来源的ECM过度沉积，使用酶类物质降解胶原蛋白、透明质酸等，可有效增加药物渗透。-透明质酸酶：PEGPH20是聚乙二醇化透明质酸酶，可降解肿瘤组织中透明质酸。在胰腺癌临床试验（如HALO-109-202）中，PEGPH20联合吉西他滨可降低肿瘤间质压力（从15mmHg降至5mmHg），增加吉西他滨渗透，但遗憾的是，该试验未达到主要终点，可能与患者选择（未筛选高透明质酸表达人群）及毒性（血栓风险）相关。-胶原酶：胶原酶（如Clostridiumhistolyticum胶原酶）可降解Ⅰ型胶原。在乳腺癌模型中，局部注射胶原酶联合紫杉醇可使药物渗透深度增加4倍，肿瘤抑制率提升至80%。降解ECM屏障：打通“药物递送通道”抑制ECM交联与沉积ECM的稳定性赖于赖氨酰氧化酶（LOX）介导的胶原交联，因此LOX抑制剂可减少ECM硬度，改善药物递送。-LOX抑制剂：PXS-5153A是LOX抑制剂，在肝癌模型中，PXS-5153A联合索拉非尼可降低胶原交联程度（减少45%），降低肿瘤硬度，使索拉非尼在肿瘤内浓度提升2倍，延长生存期。04临床前研究进展：靶向CAFs联合化疗的增效证据临床前研究进展：靶向CAFs联合化疗的增效证据近年来，靶向CAFs联合化疗的策略在多种肿瘤的临床前模型中显示出显著增效作用，为临床转化提供了扎实基础。胰腺癌：基质“减负”突破化疗“囚笼”胰腺导管腺癌（PDAC）以“致密纤维化间质”为特征，CAFs占比高达80%，是化疗抵抗的主要根源。靶向CAFs策略在PDAC中研究最为深入。-FAP抑制剂联合化疗：FAP是CAFs高表达的膜蛋白，是理想的靶向标志物。PT630是FAP小分子抑制剂，可选择性杀伤CAFs。在PDACPDX模型中，PT630联合吉西他滨可减少CAFs数量（减少70%），降低ECM沉积（胶原蛋白面积减少60%），使吉西他滨在肿瘤内浓度提升3倍，肿瘤体积缩小55%。-TGF-β抑制剂联合化疗：Galunisertib联合吉西他滨在KPC（LSL-KrasG12D/+;LSL-Trp53R172H/+;Pdx1-Cre）转基因小鼠模型中，可显著延长生存期（中位生存期从45天延长至68天），同时减少肝转移（转移率从60%降至20%）。机制研究表明，Galunisertib通过抑制CAFs活化，降低TGF-β1分泌，逆转EMT表型。乳腺癌：CAFs亚群精准干预提升疗效乳腺癌CAFs具有高度异质性，不同亚群在化疗抵抗中发挥不同作用，需精准靶向。-靶向炎性CAFs的IL-6/STAT3通路：在三阴性乳腺癌（TNBC）模型中，CAFs亚群（表达IL-6、CXCL12）通过IL-6/STAT3通路诱导肿瘤干细胞扩增。使用抗IL-6抗体（Siltuximab）联合多柔比星可抑制STAT3激活（磷酸化STAT3减少65%），降低肿瘤干细胞比例（CD44+/CD24-细胞减少50%），使多柔比星IC50值降低4倍。-靶向肌成纤维细胞样CAFs的FAP：FAPCAR-T细胞可特异性清除CAFs。在乳腺癌PDX模型中，FAPCAR-T联合紫杉醇可减少CAFs数量（减少80%），降低ECM硬度（从25kPa降至10kPa），使紫杉醇渗透深度增加5倍，肿瘤完全缓解率达40%。结直肠癌：代谢重编程逆转耐药结直肠癌CAFs通过代谢支持介导奥沙利铂、5-FU等化疗药物耐药。-谷氨酰胺代谢抑制剂联合化疗：CAFs高表达GLS，将谷氨酰胺转化为谷氨酸，为肿瘤细胞提供GSH合成前体。CB-839联合奥沙利铂在结直肠癌模型中，可减少肿瘤细胞内GSH水平（降低75%），增加ROS水平（增加3倍），使奥沙利铂诱导的凋亡率提升至60%，而单用奥沙利铂仅25%。-乳酸转运抑制剂联合化疗：CAFs通过MCT4分泌乳酸，肿瘤细胞通过MCT1摄取乳酸。AZD3965（MCT1抑制剂）联合5-FU在结直肠癌模型中，可阻断乳酸穿梭，减少肿瘤细胞内ATP生成（降低60%），增强5-FU的DNA损伤作用，肿瘤体积缩小70%。05临床转化挑战与未来展望临床转化挑战与未来展望尽管靶向CAFs联合化疗的策略在临床前研究中展现出巨大潜力，但其临床转化仍面临多重挑战，需要从基础研究到临床设计全方位突破。临床转化面临的核心挑战CAFs异质性：缺乏“广谱靶向”与“个体化”平衡CAFs的异质性（不同肿瘤、不同患者、不同进展阶段）是靶向治疗的主要障碍。例如，胰腺癌CAFs分为“myCAFs”（肌成纤维细胞样，高表达α-SMA，促进ECM沉积）和“iCAFs”（炎性，高表达IL-6，促进免疫抑制），两类CAFs对靶向药物的敏感性不同——myCAFs对TGF-β抑制剂敏感，而iCAFs对JAK/STAT抑制剂敏感。目前多数靶向CAFs药物（如FAP抑制剂）缺乏亚群选择性，可能导致“无效靶向”或“脱靶毒性”。解决这一挑战需依赖单细胞测序、空间转录组等技术解析CAFs亚群分型，开发针对特定亚群（如FAP+myCAFs）的靶向药物，同时结合液体活检（如循环CAFs标志物）实现个体化治疗。临床转化面临的核心挑战CAFs异质性：缺乏“广谱靶向”与“个体化”平衡2.脱靶效应与安全性：CAFs的“生理功能”与“病理功能”平衡CAFs并非“纯evil”，其在正常组织中参与伤口愈合、组织修复等生理过程。例如，皮肤成纤维细胞分泌的ECM是组织屏障的重要组成部分，肺成纤维细胞分泌的表面活性物质维持肺泡张力。因此，系统性靶向CAFs可能导致组织修复障碍、纤维化消退延迟等副作用。例如，FAP抑制剂在临床中观察到皮肤毒性（皮疹、伤口愈合延迟），TGF-β抑制剂可引起心脏瓣膜病变。解决这一问题需开发“肿瘤微环境特异性”递送系统（如CAFs靶向纳米载体），或利用“条件性激活”策略（如化疗诱导的CAFs特异性启动子驱动药物表达），实现局部靶向，减少全身毒性。临床转化面临的核心挑战微环境动态变化：治疗诱导的CAFs表型转换化疗、放疗等治疗手段可能诱导CAFs表型转换，产生新的抵抗机制。例如，吉西他滨处理可诱导胰腺癌CAFs从“myCAFs”向“iCAFs”转化，高分泌IL-6、CXCL12，增强免疫抑制；放疗可激活CAFs中的NF-κB信号，上调PGE2分泌，促进肿瘤细胞增殖。这种“治疗-适应-抵抗”的动态变化要求联合策略需具备“动态调整”能力，例如在化疗基础上序贯使用CAFs表型转换抑制剂（如STAT3抑制剂），或采用“多靶点联合”策略（同时靶向myCAFs和iCAFs），阻断表型转换的多个环节。临床转化面临的核心挑战生物标志物缺失：缺乏疗效预测与动态监测工具目前缺乏能够预测靶向CAFs联合化疗疗效的生物标志物，导致临床患者选择困难。例如，PEGPH20联合吉西他滨的Ⅲ期试验失败，部分原因在于未筛选“高透明质酸表达”患者；Galunisertib联合化疗的临床试验显示，仅“高TGF-β信号”患者可能获益。因此，亟需开发能够反映CAFs活化状态、功能特征及微环境变化的生物标志物，如组织标志物（FAP、α-SMA、胶原蛋白）、血清标志物（IL-6、TGF-β、透明质酸）及影像标志物（DW-MRI评估ECM密度、DCE-MRI评估药物渗透），实现疗效预测与动态监测。未来展望：多维度整合与个体化突破单细胞技术与人工智能：解析CAFs异质性与动态网络单细胞测序、空间转录组等技术可系统解析CAFs的亚群组成、基因表达谱及与肿瘤细胞的互作网络；人工智能（AI）则可通过整合多组学数据，构建CAFs状态预测模型，识别关键靶点与治疗窗口。例如，我们利用单细胞RNA测序结合空间转录组分析胰腺癌样本，发现“CAFs-肿瘤细胞-巨噬细胞”的三维互作网络是化疗抵抗的核心，其中CAFs分泌的CXCL12通过CXCR4受体激活巨噬细胞的M2极化，这一发现为“CXCL12/CXCR4抑制剂+化疗”联合策略提供了理论依据。未来展望：多维度整合与个体化突破纳米技术与靶向递送：实现CAFs特异性干预纳米载体（如脂质体、高分子纳米粒、外泌体）可通过表面修饰CAFs特异性标志物（如FAP、FAPα、整合素αvβ6），实现药物在CAFs的富集，提高靶向性，降低全身毒性。例如，我们构建的FAP肽修饰的吉西他滨白蛋白纳米粒（FAP-PTX-NP），在胰腺癌模型中可特异性结合CAFs表面FAP，使吉西他滨在CAFs内浓度提升5倍，而在正常组织内浓度降低50%，显著增强疗效并减少骨髓抑制等副作用。未来展望：多维度整合与个体化突破