骨折不愈合的微创活检与病理诊断方案

骨折不愈合的微创活检与病理诊断方案演讲人01骨折不愈合的微创活检与病理诊断方案02引言：骨折不愈合的临床挑战与微创活检的必要性03骨折不愈合的临床病理基础：从“现象”到“本质”的认知深化04微创活检技术的选择与操作规范：精准、安全、个体化05挑战与未来方向：精准诊断的“破局之路”06总结：以“微创”为径，以“病理”为镜，叩问骨愈合的本质07参考文献目录01骨折不愈合的微创活检与病理诊断方案02引言：骨折不愈合的临床挑战与微创活检的必要性引言：骨折不愈合的临床挑战与微创活检的必要性在创伤骨科的临床实践中，骨折不愈合（nonunion）是困扰医患的难题之一。据统计，闭合性骨折的不愈合发生率约为5%-10%，而开放性骨折、高能量损伤或合并软组织缺损的患者中，这一比例可上升至20%-30%[1]。骨折不愈合不仅导致患肢功能障碍、慢性疼痛，更给患者带来沉重的心理负担与社会经济压力。传统诊断主要依赖影像学检查（如X线、CT）及临床病程观察，但影像学上的“不愈合征象”（如骨端硬化、髓腔封闭、骨痂缺失）往往滞后于实际病理改变，且无法明确不愈合的分子机制与微环境特征——例如，是成骨/成软骨细胞活性不足？局部血供重建失败？还是慢性低度感染的存在？这些信息的缺失，常导致治疗方案选择盲目（如盲目植骨、更换内固定），甚至延误最佳干预时机。引言：骨折不愈合的临床挑战与微创活检的必要性微创活检（minimallyinvasivebiopsy）作为连接临床观察与病理本质的“桥梁”，通过精准获取病变组织样本，为骨折不愈合的病理机制解析、分型诊断及个体化治疗决策提供了关键依据。与传统开放活检相比，微创活检在影像引导（如CT、超声）下完成，具有创伤小、并发症少、定位精准的优势，尤其适用于深部或合并软组织条件差的病例[2]。近年来，随着病理诊断技术的进步（如免疫组化、分子病理、microRNA检测），微创活检已从单纯的“形态学观察”升级为“多维度表型分析”，其价值远不止于“确认是否愈合”，更在于“解释为何不愈合”。作为一名长期从事创伤骨科与骨病理研究的临床工作者，我深刻体会到：每一次精准的活检，都是对骨折不愈合本质的一次“叩问”；而一份严谨的病理报告，则是制定个体化治疗方案的“指南针”。本文将从骨折不愈合的临床病理基础出发，系统阐述微创活检的技术选择、操作规范、质量控制，以及病理诊断的标准化流程与多模态整合策略，旨在为同行提供一套全面、可借鉴的诊疗思维框架。03骨折不愈合的临床病理基础：从“现象”到“本质”的认知深化骨折不愈合的定义与分型：临床与病理的交叉视角目前，国际内固定研究学会（AO/OTA）将骨折不愈合定义为：骨折超过9个月，且连续3个月无愈合进展，伴或不伴临床症状[3]。但这一标准存在局限性——例如，糖尿病患者的骨折愈合延迟可能超过9个月，但最终仍能达到愈合；而某些感染性不愈合可能在3个月内即出现明确病理改变。因此，病理诊断的核心在于“超越时间标准”，从组织细胞水平明确愈合障碍的本质。从病理机制上，骨折不愈合可分为三大类型（表1），其临床特征与活检策略差异显著：表1骨折不愈合的病理分型与临床特征|分型|病理特征|影像学表现|临床特点||--------------|-----------------------------------|--------------------------|------------------------|骨折不愈合的定义与分型：临床与病理的交叉视角|肥大性不愈合|骨端骨质疏松，髓腔宽大，骨痂形成活跃但连接不良|骨端膨大，髓腔增宽，无硬化|局部无红肿，活动时可及异常活动||感染性不愈合|慢性炎症细胞浸润（淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞），骨质破坏，脓肿形成|骨溶解，死骨形成，软组织肿胀|窦道形成，反复流脓，C反应蛋白升高||萎缩性不愈合|骨端硬化，髓腔封闭，骨痂缺如，纤维组织填充|骨端密度增高，髓腔狭窄，无骨痂|患肢短缩，假关节形成，疼痛明显|值得注意的是，约15%-20%的不愈合病例存在“混合型”特征（如萎缩合并感染，或肥大合并成骨障碍），这要求活检样本需兼顾“形态观察”与“病原学/分子检测”，避免以单一标准分型导致的误判。2341骨折不愈合的关键病理机制：微环境失衡与细胞功能异常骨折愈合的本质是“骨再生”过程，涉及炎症期、修复期、重塑期三个连续阶段，每个阶段均需精确调控的细胞因子、生长因子及细胞间相互作用[4]。当这一调控网络失衡时，即发生不愈合。1.炎症期延长与巨噬细胞极化异常：正常骨折后，巨噬细胞从M1型（促炎）向M2型（促修复）极化，分泌IL-10、TGF-β等促进血管生成与成骨。而在不愈合病例中，活检常显示M1型巨噬细胞持续浸润（CD68+、iNOS+），IL-1β、TNF-α等促炎因子高表达，形成“慢性炎症微环境”，抑制成骨细胞分化[5]。2.血管生成障碍与内皮细胞功能缺陷：血管新生是骨痂形成的基础。萎缩性不愈合的病理切片中，CD31（内皮细胞标志物）染色阳性血管数量显著减少，且VEGF表达低下；而肥大性不愈合虽血管数量正常，但血管壁结构异常（如基底膜增厚），提示“无效血管生成”[6]。骨折不愈合的关键病理机制：微环境失衡与细胞功能异常3.成骨/成软骨细胞分化受阻与Wnt/β-catenin信号异常：骨髓间充质干细胞（BMSCs）的成骨分化是骨痂形成的关键。在代谢性疾病（如糖尿病）或药物相关不愈合（如长期使用糖皮质激素）中，活检可见Runx2、Osterix等成骨标志物表达降低，而Wnt信号抑制剂（如DKK1）表达升高，导致“软骨内成骨障碍”[7]。4.慢性感染与生物膜形成：约10%的不愈合由隐匿性感染引起，病原体（如金黄色葡萄球菌）形成的生物膜能逃避宿主免疫清除，持续分泌毒素（如α-溶血素），诱导骨质破坏与炎症反应。常规细菌培养阳性率不足50%，需结合病理组织革兰染色、PCR检测或宏基因组测序[8]。对这些机制的深入理解，是制定靶向活检策略的前提——例如，怀疑血管生成障碍时，需重点获取骨-软骨交界区组织；怀疑感染时，需同时进行病原学检测与炎症标志物评估。04微创活检技术的选择与操作规范：精准、安全、个体化微创活检技术的分类与适应证选择目前，骨折不愈合的微创活检技术主要包括CT引导下经皮活检、超声引导下活检、关节镜辅助活检及导航下活检，其选择需结合骨折部位、软组织条件、不愈合类型及预期检测目标（表2）。表2微创活检技术的选择与应用场景|技术|适应证|禁忌证|优势|局限性||--------------------|---------------------------------|-------------------------|-------------------------------|-------------------------------|微创活检技术的分类与适应证选择|CT引导下经皮活检|深部骨折（如股骨颈、骨盆）、硬化骨|凝血功能障碍、无法俯卧|定位精准，可穿透硬化骨|辐射暴露，无法实时动态观察|01|超声引导下活检|表浅部位（如胫骨、桡骨）、合并软组织肿胀|伤口开放、气胸风险|实时动态，无辐射，便携|对操作者经验要求高，穿透力弱|02|关节镜辅助活检|关节内骨折不愈合（如踝关节、膝关节）|关节僵硬、严重感染|直视下取样，可同时处理病变|需麻醉，有神经血管损伤风险|03|导航下活检|复杂部位（如脊柱、骶髂关节）|导航设备不可及|三维定位，误差<1mm|设备昂贵，操作复杂|04微创活检技术的分类与适应证选择以最常见的“CT引导下经皮活检”为例，其核心优势在于“多平面重建（MPR）功能”——可清晰显示硬化骨的厚度、髓腔方向及与神经血管的毗邻关系，避免盲目穿刺导致的并发症（如出血、神经损伤）。笔者曾接诊一例股骨颈骨折术后不愈合患者，常规X线显示股骨头骨端硬化，髋关节活动时疼痛剧烈。术前CT重建显示硬化骨厚度达8mm，髓腔完全封闭，我们采用“环钻活检法”（直径4mm），沿股骨颈长轴穿刺，成功获取骨-软骨交界区组织，病理提示“成骨细胞活性低下，血管数量减少”，最终导向“自体骨植骨+富血小板血浆（PRP）注射”治疗方案，6个月后达骨性愈合。微创活检的操作流程与质量控制规范的活检操作是保证样本质量与诊断准确性的前提，需遵循“三明确一评估”原则：明确穿刺路径、明确取样部位、明确样本处理流程，术前充分评估风险与收益。1.术前规划：-影像学评估：查阅患者近3个月内的X线、CT或MRI，明确不愈合类型（肥大/萎缩/感染）、骨端硬化范围、髓腔通畅度及软组织条件。MRI在显示骨髓水肿、骨挫伤及软组织病变方面更具优势，可作为CT的补充[9]。-穿刺路径设计：避开神经、血管（如胫骨前内侧避开腓总神经）、肌腱及重要内脏器官。例如，胫骨中上段活检选择前外侧入路，避免损伤胫前血管；骨盆活检需通过髂骨翼“安全三角区”，避免进入盆腔。微创活检的操作流程与质量控制-患者准备：完善凝血功能（PT、INR、PLT）、血常规（排除感染或贫血），签署知情同意书（告知出血、感染、病理性骨折等风险）。术前停用抗凝药物（如阿司匹林）至少5天。2.术中操作：-定位与麻醉：CT扫描确定穿刺点，标记皮肤，2%利多卡因局部浸润麻醉（深部需麻醉骨膜）。-穿刺与取样：根据组织硬度选择活检针：对硬化骨采用“骨活检枪”（如Temno针，弹簧驱动，获取核心组织）；对软组织或纤维瘢痕采用“负压吸引针”（如Sure-Cut针）。取样需包含“骨组织-软骨-纤维组织”多成分，避免仅取血凝块或坏死组织。例如，肥大性不愈合需取“活跃的骨痂组织”，萎缩性不愈合需取“硬化骨边缘的纤维组织”，感染性不愈合需取“窦道周围肉芽组织”。微创活检的操作流程与质量控制-样本分装：立即将样本分为三部分：①10%中性甲醛固定（用于石蜡包埋、HE及免疫组化）；②EDTA抗凝管（用于分子检测，如PCR、基因测序）；③无菌EP管（用于细菌培养、药敏试验）。分装后标记患者信息、取样部位及固定液类型，避免混淆。3.术后管理：-压迫止血：穿刺点加压包扎15-20分钟，观察有无肿胀、出血（如血肿形成，需冷敷并抬高患肢）。-活动限制：24小时内避免剧烈活动，防止样本移位或病理性骨折（尤其是对骨质疏松患者）。-并发症监测：密切观察患肢感觉、运动及血运情况，警惕神经损伤、骨筋膜室综合征；若术后3天出现局部红肿热痛、体温升高，需警惕感染可能，及时复查血常规及CRP。活检样本的质量控制：从“获取”到“可用”的质控标准样本质量直接影响病理诊断的准确性，需满足“三性”要求：完整性（组织长度≥1cm，直径≥2mm，避免碎裂）、代表性（包含目标病变区域，如硬化骨、肉芽组织）、无污染（避免血液、骨水泥或固定液过度浓缩导致的细胞自溶）。常见问题及解决对策：-样本量不足：多因穿刺深度不够或骨硬度大导致。对策：术前CT测量硬化骨厚度，选择合适长度的活检针；若首次取样失败，调整角度或位置再次穿刺（避免在同一通道反复穿刺，导致样本混入血液）。-样本坏死：多因固定不及时（离体后超过30分钟未固定）或固定液浓度不当（甲醛浓度过高导致蛋白变性）。对策：建立“手术室-病理科”绿色通道，样本离体后立即放入10%甲醛（固定液体积为样本体积的10-20倍）。活检样本的质量控制：从“获取”到“可用”的质控标准-目标成分缺失：如仅取到骨皮质而未取到骨松质，或未取到软骨组织。对策：术前MRI明确病变区域，结合CT引导多点取样；对关节内骨折，可联合关节镜直视下取样。四、病理诊断的标准化流程与多模态整合：从“形态”到“机制”的深度解析病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作病理诊断是微创活检的“最终输出”，需遵循“标准化、个体化、多维度”原则，流程可分为“样本处理-形态观察-特殊染色-免疫组化-分子检测”五个步骤。1.样本处理：-固定：10%甲醛固定24-48小时（时间过短导致固定不足，过长导致抗原丢失）。-脱钙：对含骨组织的样本，采用EDTA脱钙（pH7.4，4℃），避免强酸（如硝酸）破坏细胞形态。脱钙时间需根据骨硬度调整（一般1-3周），每日监测脱钙程度（用针头轻刺，能穿透即可）。-脱水与包埋：梯度乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋，制成4μm厚切片。病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作2.形态观察（HE染色）：-基础评估：观察骨小梁结构（是否连续、有无断裂）、骨细胞活性（骨陷窝是否空虚）、炎症细胞类型（中性粒细胞提示急性感染，淋巴细胞/浆细胞提示慢性感染）、纤维组织增生情况（是否形成纤维瘢痕）。例如，萎缩性不愈合可见“骨小梁增粗、融合，骨细胞陷窝空虚>50%”，而感染性不愈合可见“骨质破坏，脓肿形成，大量中性粒细胞浸润”。3.特殊染色：-细菌/真菌染色：革兰染色（观察细菌形态）、抗酸染色（排查结核）、PAS染色（检测真菌孢子），适用于感染性不愈合。-纤维成分染色：Masson三色染色（区分胶原纤维与肌纤维）、刚果红染色（排查淀粉样变性），适用于评估纤维瘢痕的成熟度。病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作-铁染色：Prussian蓝染色（检测含铁血黄素沉积），适用于陈旧性出血或金属离子植入物周围反应。4.免疫组化（IHC）：IHC是明确细胞表型、判断功能状态的核心手段，需根据临床问题选择抗体组合（表3）。表3骨折不愈合常用免疫组化抗体及意义|抗体|靶细胞|表达意义|临床关联||--------------|-----------------|-----------------------------------|-----------------------------------|病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作|CD68|巨噬细胞|M1型巨噬细胞标记（iNOS+）|慢性炎症微环境|01|CD163|M2型巨噬细胞|M2型巨噬细胞标记（CD206+）|修复能力评估||CD31|内皮细胞|微血管密度（MVD）计数|血管生成障碍评估||RUNX2|成骨前体细胞|成骨分化标志物|成骨活性低下（如萎缩性不愈合）||SOX9|成软骨细胞|软骨分化标志物|软骨内成骨障碍（如肥大性不愈合）|02030405病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作|Ki-67|增殖细胞|增殖指数（%）|组织修复活性||S-100|神经纤维|神经再生情况|慢性疼痛机制研究|例如，一例胫骨骨折术后不愈合患者，HE染色见大量纤维组织，IHC显示RUNX2（+）、CD31（+血管数<5个/HPF）、CD68（+）>CD163（+），提示“成骨活性低下，血管生成障碍，慢性炎症为主”，导向“PRP联合骨形态发生蛋白（BMP-2）治疗”。5.分子检测：-病原学检测：对常规培养阴性的感染性不愈合，采用16SrRNA基因测序（细菌）或ITS测序（真菌），可检出罕见病原体（如痤疮丙酸杆菌、念珠菌）。病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作-基因表达谱：RT-PCR检测Wnt通路（DKK1、sFRP1）、TGF-β通路（TGF-β1、Smad3）等关键因子，明确分子机制。例如，糖尿病不愈合患者DKK1高表达，提示可尝试Wnt激动剂（如特立帕肽）治疗。-microRNA检测：血清或组织microRNA（如miR-29a、miR-133a）可作为“液体活检”标志物，无创监测愈合进程，辅助预后判断[10]。（二）多模态影像与病理的整合诊断：从“孤立”到“融合”的思维升级传统诊疗中，影像学与病理学常被视为“独立环节”，但骨折不愈合的复杂性要求二者深度融合——影像学提供“空间定位”，病理学提供“本质解释”，二者互为补充、相互验证。病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作1.影像引导活检：精准定位目标病变：-CT引导下可实时显示穿刺针位置，确保样本取自“影像学异常区域”（如MRI上的骨髓水肿区、CT上的硬化骨边缘）。例如，一例桡骨远端不愈合患者，MRI显示“尺侧骨端骨髓水肿，桡侧骨端硬化”，我们分别在水肿区与硬化区各取1块组织，病理提示“水肿区成骨活跃，硬化区成骨停滞”，证实“局灶性愈合障碍”，导向“局部植骨+内固定强化”方案。2.病理结果修正影像诊断：避免“以像代病”：-影像学上的“骨溶解”可能由感染、肿瘤或骨吸收导致，需病理鉴别。例如，一例股骨骨折内固定术后骨溶解患者，CT怀疑“感染”，但病理见“破骨细胞活跃（TRAP染色+），未见炎症细胞”，最终诊断为“颗粒病”（内固定物磨损颗粒导致的骨吸收”，通过更换内固定物治愈。病理诊断的标准化流程：固定-制片-染色的规范化操作3.动态监测：影像与病理的“时间轴”整合：-治疗过程中，定期影像学评估（如CT三维重建）结合病理活检（如穿刺后IHC检测RUNX2表达），可实时判断治疗效果。例如，PRP治疗后3个月，CT见骨痂形成，病理RUNX2表达升高，提示“成骨激活”；若RUNX2仍低表达，需调整治疗方案（如增加BMP-2剂量）。病理报告的规范化书写：临床决策的“导航图”一份高质量的病理报告需包含“基本信息、大体描述、镜下所见、免疫组化/分子结果、诊断与建议”五部分，且需结合临床信息（骨折部位、手术史、影像学表现）进行综合判断。示例：萎缩性骨折不愈合病理报告-基本信息：患者，男，45岁，右胫骨中段骨折术后8个月，X线示“骨端硬化，髓腔封闭”。-大体描述：灰白色骨组织1.2cm×0.3cm，质地坚硬，切面无出血。-镜下所见：骨小梁增粗、融合，骨陷窝空虚（>60%），纤维组织增生，散在淋巴细胞浸润。-免疫组化：RUNX2（+，弱表达），CD31（+，3个/HPF），CD68（+）>CD163（+）。病理报告的规范化书写：临床决策的“导航图”01在右侧编辑区输入内容-诊断：右胫骨骨折术后萎缩性不愈合，成骨活性低下，慢性炎症微环境。02在右侧编辑区输入内容-建议：①局部自体骨植骨改善骨传导；②PRP促进成骨；③控制局部炎症（如非甾体抗炎药）。03病理诊断的价值最终体现在指导临床决策上，根据不愈合类型与病理机制，个体化选择“生物治疗、手术干预、病因治疗”三联方案。五、临床决策中的应用与价值：从“诊断”到“治疗”的转化医学实践基于病理分型的个体化治疗策略1.肥大性不愈合：-病理特征：骨痂形成活跃但连接不良，成骨细胞功能正常，血供可。-治疗策略：以“力学稳定”为主，辅以“骨引导”。例如，更换更坚强的内固定（如锁定钢板改为髓内钉），联合脱钙骨基质（DBM）填充骨缺损，无需大量植骨。-病理指导意义：IHC显示SOX9（+）提示软骨内成骨活跃，可不用BMP-2，避免过度干预。2.萎缩性不愈合：-病理特征：成骨活性低下，血管生成障碍，纤维瘢痕形成。-治疗策略：以“生物激活”为主，辅以“骨传导”。例如，自体骨+PRP复合移植（提供成干细胞与生长因子），联合血管内皮生长因子（VEGF）促进血管生成；若DKK1高表达，可加用特立帕肽（Wnt通路激动剂）。基于病理分型的个体化治疗策略-病理指导意义：RUNX2低表达提示需强化成骨诱导，CD31低表达提示需加强血管重建。3.感染性不愈合：-病理特征：慢性炎症细胞浸润，病原体生物膜形成。-治疗策略：以“感染控制”为前提，辅以“骨重建”。首先根据药敏结果使用敏感抗生素（如万古霉素骨水泥珠链），待感染控制后（CRP正常、穿刺培养阴性），行清创植骨术；若病理见“真菌孢子”，需抗真菌治疗（如伏立康唑）。-病理指导意义：16SrRNA测序可明确病原体，指导抗生素选择；革兰染色见“革兰阳性球菌聚集成堆”提示生物膜形成，需联合手术清创。特殊类型骨折不愈合的病理指导治疗1.代谢相关性不愈合（如糖尿病、骨质疏松）：-病理特征：RUNX2、Osterix表达降低，DKK1升高，骨基质矿化障碍。-治疗策略：控制基础代谢（如血糖、血钙），联合双膦酸盐（抑制骨吸收）+特立帕肽（促进成骨）；病理提示“微血管病变”（CD31+血管减少）时，加用前列环素类似物改善循环。2.药物相关性不愈合（如长期糖皮质激素）：-病理特征：BMSCs凋亡增加（TUNEL染色+），骨形成率降低（四环素标记法显示矿化延迟）。-治疗策略：评估是否可停用或减量糖皮质激素，补充维生素D与钙剂，PRP富含生长因子（如PDGF、TGF-β）可逆转BMSCs凋亡。特殊类型骨折不愈合的病理指导治疗-治疗策略：手术干预时需扩大清创范围（切除放射区瘢痕），带血管蒂肌瓣移植（改善血供），联合脱钙骨基质填充。-病理特征：血管壁玻璃样变（Masson染色+），骨细胞坏死广泛，纤维化显著。3.放射性不愈合（如放疗后骨折）：预后评估与随访：病理指标的“动态监测”病理指标不仅是诊断工具，还可用于预后评估与随访监测。例如：-CD31+微血管密度：治疗后>10个/HPF，提示血管重建良好，预后佳；若<5个/HPF，需加强抗血管治疗。-RUNX2表达水平：治疗后较基线升高>50%，提示成骨激活，6个月内愈合概率达80%；若持续低表达，需调整治疗方案。-Ki-67增殖指数：>5%提示组织修复活跃，<2%提示修复停滞，需干预。05挑战与未来方向：精准诊断的“破局之路”挑战与未来方向：精准诊断的“破局之路”尽管微创活检与病理诊断在骨折不愈合诊疗中取得了显著进展，但仍面临诸多挑战：当前面临的挑战-硬化骨穿刺困难，样本量不足；或仅取到“边缘组织”，未反映核心病变。-对“混合型”不愈合（如萎缩+感染），单一样本难以全面评估。1.活检阳性率与样本代表性问题：-不同医院抗体选择、判读标准不统一，导致结果可比性差；-分子检测成本高，基层医院难以开展，限制了精准诊疗的普及。2.病理诊断的标准化不足：-多数医院仍存在“影像科-骨科-病理科”信息孤岛，缺乏多学科协作（MDT）模式；-人工智能（AI）在影像引导、病理判读中的应用刚起步，尚未形成临床常规。3.影像-病理-临床的整合深度不够：未来发展方向1.技术创新：从“有创”到“微创/无创”：-液体活检：通过检测血清或关节液中microRNA、外泌体（如Exosome-encapsulatedmiR-21）等标志物，无创评估愈合进程，减少组织损伤[11]。-导航活检机器人：结合AI图像分割与机械臂控制，实现毫米级精准穿刺，提高样本质量与安全性。2.技术标准化与质控体系建设：-制定《骨折不愈合微创活检与病理诊断专家共识》，统一活检路径、样本处理、抗体组合及判读标准；-建立“区域骨病理中心”，实现样本集中检测与远程会诊，提升基层诊断水平。未来发展方向3.多模态整合与AI赋能：-构建“影像-病理-临床”一体化数据库，利用深度学习算法（如CNN、Transformer）实现多数据融合分析，提高诊断准确率；-开发AI辅助病理判读系统，自动识别骨细胞活性、血管密度等指标，减轻病理科工作负担。4.基础与临床转化：从“机制”到“靶点”：-深入研究骨折不愈合的分子机制（如单细胞测序揭示BMSCs亚群异质性），开发靶向药物（如DKK1抑制剂、Wnt激动剂）；-探索“组织工程+病理指导”的再生治疗策略，如3D打印生物支架（负载患者自体BMSCs），结合病理动态调整支架材料与生长因子释放速率。06总结：以“微创”为径，以“病理”为镜，叩问骨愈合的本质总结：以“微创”为径，以“病理”为镜，叩问骨愈合的本质骨折不愈合的诊疗，本质是“对骨再生能力的解码与重建”。微创活检作为“精准诊断的钥匙”，以其创伤小、定位准的优势，为病理解析提供了高质量样本；而病理诊断则通过“形态-功能-分子”多维度分析，揭示了不愈合的微观机制，为个体化治疗提供依据。从CT引导下的精准穿刺，到IHC染色的细胞表型分析，再到分子检测的机制探索，每一步都凝聚着“严谨、创新、人文”的医学精神。作为临床工作者，我们需始终牢记：活检不仅是“取组织”，更是“取信息”；病理诊断不仅是“看形态”，更是“悟机制”。唯有将微创活检的技术优势与病理诊断的深度解析紧密结合，推动影像-病理-临床的多学科整合，才能突破骨折不愈合的治疗瓶颈，最终实现“让每一例骨折都能愈合”的医学理想。总结：以“微创”为径，以“病理”为镜，叩问骨愈合的本质未来的道路上，随着液体活检、AI导航、组织工程等技术的突破，骨折不愈合的精准诊断将迈向“无创化、智能化、个体化”的新阶段。而我们，作为这一进程的参与者和见证者，当以“微创”为径，以“病理”为镜，在骨愈合的探索之路上，继续叩问、求索、前行。07参考文献参考文献[1]GiannoudisPV,etal.Fracturenon-union:currentconceptsandcontroversies[J].Injury,2019,50(Suppl3):S3-S8.[2]TemplemanD,etal.Percutaneousbonebiopsyforthediagnosisofosteomyelitis[J].TheJournalofBoneJointSurgery,2004,86(6):1203-1209.[3]MarshDR,etal.Delayedunionandnonunionoffractures[J].JournaloftheAmericanAcademyofOrthopaedicSurgeons,