体外诊断试剂试题及标准答案

体外诊断试剂试题及标准答案1.单项选择题（每题1分，共20分。每题只有一个正确答案，请将正确选项字母填入括号内）1.1根据《体外诊断试剂注册管理办法》，第三类体外诊断试剂注册检验用样品数量不得少于（）批次。A.1B.2C.3D.5答案：C1.2酶联免疫吸附试验（ELISA）中，TMB显色液终止反应后最大吸收波长为（）nm。A.405B.450C.492D.630答案：B1.3关于胶体金免疫层析法，下列描述错误的是（）。A.检测线包被的是标记抗体B.质控线包被的是抗种属IgGC.结果判读依赖毛细作用D.属于定性或半定量方法答案：A1.4实时荧光PCR中，Ct值与初始模板量的关系是（）。A.Ct值越大模板量越多B.Ct值与模板量对数呈线性负相关C.Ct值与模板量呈线性正相关D.Ct值与模板量无关答案：B1.5用于糖化血红蛋白（HbA1c）测定的标准参考物质是（）。A.NGSPB.IFCCC.JDSD.CAP答案：B1.6化学发光免疫分析（CLIA）中，常用的直接标记物是（）。A.吖啶酯B.辣根过氧化物酶C.碱性磷酸酶D.荧光素答案：A1.7体外诊断试剂稳定性研究中，加速稳定性试验温度通常选择（）。A.2–8℃B.25℃±2℃C.37℃±2℃D.45℃±2℃答案：C1.8关于室内质控图（LeveyJennings），下列说法正确的是（）。A.12S规则表示1个质控值超出±2SD为失控B.10X规则表示连续10次结果在均值同一侧为警告C.R4S规则用于判断随机误差D.22S规则仅适用于多水平质控答案：C1.9血细胞分析仪用溶血剂中，氰化高铁血红蛋白法的显色产物最大吸收峰为（）nm。A.450B.504C.540D.575答案：C1.10流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞时，采用的绝对计数方法是（）。A.侧向角散射法B.微球单平台法C.倍比稀释法D.荧光补偿法答案：B1.11对乙肝表面抗原（HBsAg）检测试剂进行性能评估时，不需要考察的指标是（）。A.分析灵敏度B.分析特异性C.线性范围D.钩状效应答案：C1.12时间分辨荧光免疫（TRFIA）中，镧系元素螯合物的荧光寿命通常为（）。A.10⁻⁹sB.10⁻⁶sC.10⁻³sD.10³μs答案：D1.13体外诊断试剂说明书不需要标注的内容是（）。A.医疗器械注册证编号B.主要原材料生物来源C.生产企业售后服务电话D.临床试验样本量答案：D1.14关于核酸提取磁珠法，下列说法正确的是（）。A.磁珠表面修饰羧基基团B.结合缓冲液含高盐低pHC.洗脱缓冲液为75%乙醇D.磁场强度越大提取效率越低答案：B1.15血气分析仪中，PCO₂电极属于（）。A.玻璃电极B.气敏电极C.离子选择场效应管D.极谱电极答案：B1.16对肌钙蛋白I（cTnI）检测试剂，下列干扰因素最小的是（）。A.类风湿因子B.生物素≥20ng/mLC.溶血≥500mg/dLD.甘油三酯≥1000mg/dL答案：A1.17体外诊断试剂生产洁净区，空气洁净度级别为C级的静态悬浮粒子最大允许数≥0.5μm为（）个/m³。A.352000B.3520000C.35200D.3520答案：A1.18对凝血酶原时间（PT）测定，ISI值越接近1.0，说明（）。A.组织凝血活酶灵敏度越低B.结果与WHO标准品差异越大C.试剂对口服抗凝药监测越不敏感D.试剂灵敏度越接近WHO参考答案：D1.19免疫比浊法测定C反应蛋白时，抗原过量产生的现象是（）。A.前带现象B.后带现象C.钩状效应D.基质效应答案：B1.20关于体外诊断试剂召回，下列说法正确的是（）。A.三级召回需在72小时内通知企业B.一级召回是指一般风险C.召回信息应上报国家药监局D.召回无需向使用单位公布答案：C2.多项选择题（每题2分，共20分。每题有两个或两个以上正确答案，多选、少选、错选均不得分）2.1下列属于均相免疫分析技术的是（）。A.酶放大免疫分析（EMIT）B.克隆酶供体免疫分析（CEDIA）C.荧光偏振免疫分析（FPIA）D.化学发光磁微粒免疫分析答案：A、B、C2.2关于PCR扩增抑制物，下列说法正确的是（）。A.肝素可通过结合Taq酶抑制扩增B.血红蛋白中血红素可干扰DNA聚合酶C.尿素>50mmol/L可抑制扩增D.腐殖酸可通过螯合Mg²⁺抑制扩增答案：A、B、C、D2.3对体外诊断试剂进行临床评价时，可采用的研究设计包括（）。A.前瞻性队列研究B.病例对照研究C.横断面研究D.随机对照试验答案：A、B、C2.4下列属于定量检测体外诊断试剂的是（）。A.丙型肝炎病毒RNA定量试剂B.糖化血红蛋白（HbA1c）测定试剂C.甲胎蛋白（AFP）化学发光试剂D.粪便隐血胶体金试剂答案：A、B、C2.5影响化学发光免疫分析本底信号的因素包括（）。A.磁珠包被抗体纯度B.清洗缓冲液中Tween20浓度C.反应管材质透光性D.实验室环境PM2.5水平答案：A、B、C2.6关于体外诊断试剂注册检验，下列说法正确的是（）。A.第三类试剂需在中国食品药品检定研究院检验B.检验用样品应为同一批次生产C.注册检验报告有效期为5年D.检验项目包括准确性、精密度、线性等答案：A、B、D2.7下列属于核酸POCT技术平台的是（）。A.重组酶聚合酶扩增（RPA）B.环介导等温扩增（LAMP）C.依赖核酸序列的扩增（NASBA）D.微滴式数字PCR（ddPCR）答案：A、B、C2.8对肌酐检测试剂，下列干扰描述正确的是（）。A.羟苯磺酸钙可致假阳性B.高浓度胆红素可致负干扰C.酮体>20mmol/L可致酶法假降低D.头孢类抗生素可致Jaffe法假升高答案：B、D2.9关于体外诊断试剂包装标签，下列必须标注的是（）。A.储存条件及温度B.生产批号C.体外诊断专用标识D.预期用途简述答案：A、B、C、D2.10下列属于流式细胞术荧光染料的是（）。A.FITCB.PEC.PerCPCy5.5D.吖啶橙答案：A、B、C3.填空题（每空1分，共20分）3.1根据《医疗器械分类目录》，用于血型鉴定的体外诊断试剂管理类别为第________类。答案：三3.2实时荧光PCR中，TaqMan探针5′端标记的是________，3′端标记的是________。答案：荧光报告基团、荧光淬灭基团3.3胶体金颗粒的直径一般控制在________nm范围内，可呈现明显红色。答案：20–403.4化学发光免疫分析中，常用的固相载体为________，其表面功能基团为________。答案：磁微粒、羧基或甲苯磺酰基3.5凝血酶时间（TT）测定中，加入的标准试剂为________单位/mL的凝血酶。答案：2.03.6对体外诊断试剂进行线性评价时，EP6A文件推荐最少稀释________个浓度水平。答案：93.7糖化血红蛋白IFCC参考方法为________色谱串联________光谱。答案：液相、质谱3.8血气分析仪PO₂电极的阴极材料通常为________，阳极材料为________。答案：铂、银/氯化银3.9免疫比浊法测定补体C3，波长一般选择________nm。答案：3403.10体外诊断试剂稳定性研究中，实时稳定性温度条件为________℃±________℃。答案：2、83.11流式细胞术检测CD4+CD8+双阳性细胞，需使用________激光器激发________荧光染料。答案：488nm、PE3.12核酸提取中，蛋白酶K的最适反应温度为________℃，作用为降解________。答案：56、蛋白质3.13对乙肝表面抗原检测试剂，分析灵敏度单位常表示为________IU/mL。答案：WHOinternational3.14体外诊断试剂注册申报资料中，综述资料应包括________、________、________三部分。答案：产品概述、生物安全性说明、主要研究结果总结3.15根据CLSIEP5A3，批内精密度评价需每日重复测定________次，连续________天。答案：2、204.名词解释（每题3分，共15分）4.1钩状效应答案：在免疫测定中，当待测抗原浓度过高时，过量抗原分别与固相抗体和标记抗体结合，形成“夹心”结构减少，导致信号反而降低的现象。4.2分析特异性答案：测定方法在存在相关干扰物质（如结构类似物、交叉反应物）时，仅检测目标分析物的能力，通常以交叉反应率或干扰率表示。4.3临界值（Cutoff）答案：用于区分阳性结果与阴性结果的阈值，通常通过ROC曲线或百分位数法确定，其设定直接影响试剂灵敏度和特异性。4.4数字PCR答案：将PCR反应体系分割成大量独立微反应单元，分别进行扩增并终点检测，通过泊松分布计算绝对模板拷贝数，无需标准曲线即可实现核酸精确定量。4.5伴随诊断答案：与特定药物共同开发的体外诊断试剂，用于筛选可能受益于该药物治疗或存在严重不良反应风险的患者，是精准医疗的重要工具。5.简答题（每题5分，共25分）5.1简述体外诊断试剂临床性能评估中“一致性研究”的设计要点。答案：需选择代表性人群，包括目标疾病患者、易混淆疾病患者及健康人；样本量应满足统计学要求，通常阳性不少于100例，阴性不少于100例；采用考核试剂与对比方法同步盲法检测；计算阳性符合率、阴性符合率、总符合率及95%置信区间；对不一致样本采用第三方复核或临床诊断确认；记录人口学特征、疾病分期、干扰因素；报告遵循STARD规范。5.2说明化学发光免疫分析中磁微粒包被工艺的关键参数及控制策略。答案：关键参数包括磁珠浓度、抗体投入量、偶联缓冲液pH与离子强度、偶联时间、封闭剂种类及浓度、封闭时间、清洗次数。控制策略：采用DOE设计优化抗体/磁珠比例；在线监测pH与电导；使用封闭剂（如BSA、酪蛋白）降低非特异吸附；通过BCA法测定上清抗体残留量计算偶联效率；采用动态光散射检测粒径分布；批间CV<5%；建立磁珠再分散性检测标准（吸光度RSD<2%）；储存液添加0.05%ProClin300防止微生物污染；2–8℃避光保存，建立有效期模型。5.3列举核酸POCT产品在设计时需解决的三大技术难点并给出解决思路。答案：①抑制物耐受：采用抑制剂耐受型聚合酶、内参扩增监控、样品前处理微流控纯化；②多重扩增：引入多色荧光探针、引物二聚体预测软件、降落PCR策略；③气溶胶污染：采用全封闭卡盒、UDGdUTP防污染系统、一次性微流控芯片。5.4简述凝血分析仪光学法与磁珠法检测凝血酶原时间（PT）的原理差异。答案：光学法通过测量血浆浊度变化，纤维蛋白形成导致吸光度增加，达到阈值时间即为PT；受黄疸、乳糜、溶血干扰大。磁珠法在磁场驱动下磁珠做周期性运动，纤维蛋白形成使磁珠振幅下降，电磁传感器检测振幅突变点；不受光学干扰，但需定期校准磁珠质量。5.5说明体外诊断试剂说明书中“检验结果的解释”应包含的核心内容。答案：明确阳性、阴性、灰区定义及临床意义；列出可能影响结果的因素（药物、疾病、操作）；给出与金标准方法差异的潜在原因；提供定量试剂参考区间及医学决定水平；描述不同人群（年龄、性别、妊娠）差异；提示需结合临床及其他检查综合判断；给出进一步确诊建议；注明灰区样本处理流程（重复检测或动态观察）。6.计算与分析题（共30分）6.1线性回归与回收实验（8分）某葡萄糖检测试剂用标准品配成5个浓度：2.5、5.0、10.0、20.0、30.0mmol/L，各重复测定3次，平均吸光度分别为0.102、0.205、0.398、0.801、1.195。（1）用最小二乘法求回归方程ŷ=a+bx，并计算相关系数r。（2）取临床样本2份，基础值分别为4.8mmol/L和15.2mmol/L，加入标准品使理论增加值5.0mmol/L，测定值分别为9.6mmol/L和20.1mmol/L，计算回收率并评价。答案：（1）n=15，Σx=135，Σy=4.201，Σx²=1725，Σy²=1.604，Σxy=53.025b=[nΣxy−ΣxΣy]/[nΣx²−(Σx)²]=[15×53.025−135×4.201]/[15×1725−135²]=795.375−567.135/25875−18225=228.24/7650=0.02984a=(Σy−bΣx)/n=(4.201−0.02984×135)/15=0.0327ŷ=0.0327+0.02984xr=228.24/√(7650×6.803)=228.24/228.3≈0.9999（2）回收率1=(9.6−4.8)/5.0×100%=96%；回收率2=(20.1−15.2)/5.0×100%=98%；平均97%，在90–110%范围内，符合要求。6.2精密度与置信区间（6分）某CRP试剂对同一样品每日重复测定2次，连续20天，得到总均值10.2mg/L，总标准差sT=0.35mg/L，批内标准差sw=0.25mg/L。（1）计算批间标准差sB。（2）若允许总误差TEa=20%，请评价该试剂精密度是否满足质量要求（采用σ水平）。答案：（1）sB²=sT²−sw²/2=0.35²−0.25²/2=0.1225−0.03125=0.09125⇒sB=0.302mg/L（2）σ=TEa×均值/总标准差=0.20×10.2/0.35=5.83>5，满足六西格玛质量要求。6.3ROC曲线与Cutoff值（8分）某心肌肌钙蛋白I试剂对急性心肌梗死（AMI）患者120例及非AMI对照180例进行检测，结果如下表：|判定值(ng/L)|灵敏度(%)|特异性(%)||||||10|100|45||20|98|70||30|95|85||40|90|92||50|80|96||60|65|98|（1）计算Youden指数最大时的Cutoff值。（2）若临床要求灵敏度≥95%，应选择哪个Cutoff？此时假阳性率多少？答案：（1）J=灵敏度+特异性−100，计算得：30ng/L时J=80%最大。（2）灵敏度≥95%对应30ng/L，假阳性率=1−特异性=15%。6.4干扰试验（8分）某睾酮化学发光试剂对含不同浓度胆红素的样本进行回收，基础值5.0nmol/L，加入胆红素浓度20、50、100、200mg/L，测定值分别为4.9、4.7、4.5、4.2nmol/L。（1）计算各浓度点干扰率。（2）若厂商声明可接受干扰率±10%，试评价该试剂抗胆红素干扰能力并给出改进建议。答案：（1）干扰率=(测定值−基础值)/基础值×100%，得：−2%、−6%、−10%、−16%。（2）200mg/L超出可接受范围；建议优化抗体亲和力、增加样本稀释比例、或采用胆红素氧化酶预处理。7.综合应用题（共30分）7.1方案设计（15分）某公司拟研发一款同时检测SARSCoV2抗原与甲型/乙型流感抗原的三联胶体金试剂，请完成以下设计：（1）画出试剂条剖面结构示意图并标注关键组分。（2）阐述多重检测避免交叉反应的策略。（3）制定性能评估方案（样本类型、数量、对比方法、评价指标）。答案：（1）剖面：底板→样品垫（玻璃纤维）→结合垫（喷有抗SARSCoV2N单抗胶体金、抗FluANP单抗胶体金、抗FluBNP单抗胶体金）→NC膜：T1线包被抗SARSCoV2N单抗、T2线包被抗FluANP单抗、T3线包被抗FluBNP单抗、C线包被羊抗鼠IgG→吸水垫。（2）策略：选择型别特异性单抗，表位作图确