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文档简介

山东省菏泽市鄄城县第一中学2026届招生全国统一考试生物试题模拟试题请考生注意:1.请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上,请用0.5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2.答题前,认真阅读答题纸上的《注意事项》,按规定答题。一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1.驱蚊香草为常用绿化及驱蚊的优良植物,某科研小组研究不同浓度植物生长调节剂NAA对驱蚊香草种子发芽率的影响。实验中各实验组将健壮饱满的驱蚊香草种子放在不同浓度NAA溶液中浸泡3h,而后取出各组种子并放于25℃恒温箱中,培养至第3天和第7天的实验结果如下图所示。下列叙述错误的是()A.该实验的实验结果不仅受NAA浓度的影响,还受培养时间的影响B.第3天时NAA促进驱蚊香草种子萌发的最适浓度是1.5mg/LC.第3天和第7天的实验结果都能说明NAA的作用具有两重性D.NAA的浓度是该实验的自变量,培养温度是该实验的无关变量2.下列关于生命活动变化关系的描述,不正确的是()A.细胞体积增大,与外界物质交换效率降低 B.细胞液浓度增大,植物细胞吸水能力增强C.生长素浓度升高,细胞生长速度一定加快 D.体内血浆渗透压降低,抗利尿激素释放减少3.在外界压力刺激下,大脑“反奖励中心”脑区中的神经元胞外K+浓度下降,引起神经元上N、T通道蛋白活性变化,使神经元输出抑制信号,抑制大脑“奖赏中心”的脑区活动,从而产生抑郁,具体机制如下图所示。研究发现,适量的氯胺酮可以阻断N通道的开放,从而缓解抑郁症。下列相关叙述不正确的是()A.外界压力刺激使“反奖励中心”脑区神经元周围的神经胶质细胞K+通道数目增加B.神经元胞外K+浓度下降引起膜电位变化可能引起N和T通道开放C.“反奖励中心”脑区的神经元可以电信号方式向“奖赏中心”脑区输出抑制信号D.T通道蛋白的激活剂可以作为治疗抑郁症的药物4.下列有关细胞的叙述正确的是()A.微量元素在生物体内不可缺少,如叶绿素的合成离不开Mg元素B.蛋白质、核酸、淀粉等生物大分子的单体在排列顺序上都具有多样性C.线粒体是有氧呼吸的主要场所,在其中生成的产物有丙酮酸、二氧化碳和水D.细胞质基质是活细胞进行新陈代谢的主要场所5.为研究R型肺炎双球菌转化为S型的转化因子是DNA还是蛋白质,进行了下图所示的转化实验。对本实验作出的分析,不.正.确.的是A.本实验通过酶解去除单一成分进行研究B.甲、乙组培养基中只有S型菌落出现C.蛋白酶处理结果显示提取物仍有转化活性D.本实验结果表明DNA使R型菌发生转化6.我国养殖蜜蜂的历史有数千年之久,人们通过人工饲养蜜蜂而取蜂蜜、蜂王浆等产品。养蜂业不但能够向社会提供丰富的蜜蜂产品,而且还可以帮助农民脱贫致富,尤其重要的是蜜蜂为农作物授粉能够产生巨大的经济效益。我国目前约有30万左右职业养蜂人,他们需要根据花期在各地进行转场,同时也要注意防治蜂螨、老鼠等害虫害兽。近期新冠肺炎疫情期间养蜂人因遭遇不能及时转场的困难而受到关注。以下相关说法正确的是()A.老鼠偷食蜂蜜,蜜蜂中的能量流入老鼠体内B.蜜蜂与其授粉采蜜的植物间存在互利共生的关系C.油菜花农田里喷洒农药将诱导蜜蜂产生抗药变异D.养蜂人不能及时转场将使今年豌豆等农作物产量下降二、综合题:本大题共4小题7.(9分)微生物产生的脲酶能特异性分解尿素,在农业、食品工业和污水处理中用途广泛。例如酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:(1)从土壤中筛选产脲酶菌时,所配制的固体培养基从功能上分析,该培养基属于____________培养基。(2)分离和纯化产脲酶菌,向培养基中加入酚红,可根据____________的比值大小,初步筛选出高效产脲酶菌。(3)对同一浓度的脲酶生产菌稀释液,分别用显微镜直接计数法计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量____________(填“多于”“等于”或“小于”)后者,其原因是____________________________________。(4)固定脲酶时,常用交联壳聚糖和脲酶中的氨基反应成键进行固定,此方法称为____________。固定产脲酶菌时,将海藻酸钠和产脲酶菌的混合液注入CaCl2溶液后,若形成的凝胶珠偏大,且具有拖尾现象,可能的原因是________________________;凝胶珠偏大将导致________________________,使酶的作用效率下降。8.(10分)图示pIJ732是一种常用质粒,其中tsr为硫链丝菌素(一种抗生素)抗性基因;mel为黑色素合成基因,其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落;而限制酶SacⅠ、SphⅠ,BglⅠ在pIJ732上分别只有一处识别序列。回答下列问题。表1pIJ732pZHZ8BglⅡ1.7kb2.7kb表2固体培养基中硫链丝菌素浓度(μg/mL)312113不含质粒的链霉菌生长状况+++++++++--“+”表示生长;“-”表示不生长。(1)限制性内切核酸酶可以识别双链DNA中特定核苷酸序列,并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间_______的断裂,切割形成的末端有_______两种。(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置换质粒PIJ732上长度为3.4kb的SacⅠ/sphⅠ片段,构建重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度见表1。由此判断目的基因的片段长度为_____kb,判定目的基因中含有一个BglⅡ切割位点的理由是____________________________。(3)导入目的基因时,首先用______处理链霉菌使其成为感受态细胞,再将重组质粒pZHZ8溶于________中与感受态细胞混合,在一定的温度下可以促进链霉菌完成______过程。(4)不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素的固体培养基上生长状况如表2所示。若要筛选导入pzHZ8的链霉菌细胞,所需硫链丝菌素浓度至少应在______μg/mL以上,挑选成功导入pZHZ8的链霉菌的具体方法是________________________。9.(10分)蝗灾已成为草原农牧业生产的重大危害之一,图甲所示为研究者对草原上四种主要蝗虫密度对牧草产量影响的实验结果;图乙为农业部门对某次“亚洲小车蝗”的爆发和防治过程中种群密度的调查结果。(1)由图甲可知,该实验的因变量是_________,狭翅雏蝗密度在_________(头/m2)时,对牧草产量增长最有利。(2)若图乙是对蝗虫的幼虫跳蝻进行调查所获得的结果,则该调查采用的方法是________,由图乙可知,农业工作者分别在图中________点进行了农药防治。e点与a点相比,种群是否________发生变化。(3)图中e点时引人害虫的天敌进行生物防治,使防治效果持久而稳定.生物防治除引入天敌外,还可以采取的措施有________(答两点)。(4)g点之后蝗虫数量重新达到新的动态坏平衡,处于K值(即环境容纳量)。K值是指________。10.(10分)Ⅰ.转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞)。请据图回答:(1)图中①过程用到的酶是_____________,所形成的B叫做_____________。(2)②过程常用_____________处理农杆菌,使之成为____________细胞,利于完成转化过程。(3)图中③过程需要用到的激素是_____________。Ⅱ.黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产,研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。(1)获得CMV的RNA后,需在_____________的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。(2)获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌的________________片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。(3)将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,你认为他们做出以上判断的理由是________________________________。(4)要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行_______________________实验。(5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,请写出实验设计思路:_____________________。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3:1,由此可以得出的结论是___________________(答出两点)。11.(15分)菊花很美,但其害虫较多,利用基因工程培育抗虫菊花是害虫防治的有效手段。胰蛋白酶抑制剂能干扰昆虫的代谢,引起昆虫死亡,但对人体无害。科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因(Pin﹣Ⅱ)通过农杆菌导入菊花细胞,培育成了抗虫菊花。图1表示含目的基因的DNA分子,图2表示质粒,图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Neor表示新霉素抗性基因,复制原点是质粒DNA复制的起点,使其能在受体细胞中存在和遗传。箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。请回答下列有关问题:(1)上述基因工程中,受体细胞是______________,属于__________(填“动物”“植物”或“微生物”)基因工程。(2)为使目的基因与质粒高效重组,最好选用_______________(限制酶)作用于含目的基因的DNA和质粒,然后在___________的作用下形成重组质粒。(3)用农杆菌感染时,应优先选用菊花___________(填“受伤的”或“完好的”)叶片与含重组质粒的农杆菌共培养,选用这种叶片的理由是_________________________________。成功导入重组质粒的细胞会表现为______________________________。(4)用转基因菊花叶片喂养某种菊花害虫,发现害虫死亡率显著增加。试从分子水平写出转基因和非转基因菊花的叶片细胞的不同点:___________________________________。

参考答案一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1、B【解析】

生长素的两重性是指低浓度促进生长,高浓度抑制生长,由图可知,无论是3天的检测结果还是7天的检测结果,随NAA溶液浓度的增加,均是先表现了促进发芽,然后表现了抑制发芽,所以均能体现两重性。【详解】A、从第3天或第7天的实验结果均可看出,NAA的浓度不同导致种子的发芽率不同,所以NAA的浓度可以影响实验结果,第3天和第7天的实验结果相比,说明培养时间也可以影响实验结果,A正确;B、第3天时虽然1.5mg/L的NAA在图中的实验结果中促进种子萌发效果最强,但不能判断该浓度就是促进种子萌发的最适浓度,B错误;C、无论是第3天还是第7天的实验结果,与对照组相比,既有发芽率高于对照组的也有发芽率低于对照组的,所以能说明NAA的作用具有两重性,C正确;D、不同组别间的NAA浓度不同,所以NAA的浓度属于该实验的自变量,不同组别的培养温度都是25℃,所以培养温度属于该实验的无关变量,D正确。故选B。理解两重性以及最适浓度时促进效果最好是解题的关键。2、C【解析】

1.细胞体积增大,相对表面积减小,物质运输效率降低。2.细胞吸水能力和细胞液的浓度呈正相关,但是能否吸水,取决于细胞液浓度是否大于外界溶液浓度。3.生长素的作用具有两重性,低浓度促进植物生长,高浓度,抑制植物生长。4.饮水过多时→细胞外液渗透压降低→下丘脑感受器受到刺激减弱→垂体释放抗利尿激素减少→肾小管、集合管重吸收水分减少→尿量增加;同时大脑皮层不再产生渴觉。【详解】A、细胞体积增大,相对表面积减小,导致细胞与外界物质交换效率降低,A正确;B、根据以上分析可知,细胞液浓度增大,植物细胞吸水能力增强,B正确;C、生长素的作用具有两重性,低浓度促进植物生长,高浓度,抑制植物生长,并非生长素浓度升高,植物细胞生长速度就加快,有可能抑制生长,C错误;D、体内血浆渗透压降低,对下丘脑的渗透压感受器刺激减弱,抗利尿激素分泌减少,D正确。故选C。3、D【解析】

神经冲动的产生过程:静息时,神经细胞膜对钾离子的通透性大,钾离子大量外流,形成内负外正的静息电位;受到刺激后,神经细胞膜的通透性发生改变,对钠离子的通透性增大,钠离子大量内流,形成内正外负的动作电位。兴奋部位和非兴奋部位形成电位差,产生局部电流,兴奋就以电信号的形式传递下去。【详解】A、通过左侧图和最右侧图可以看出,外界压力刺激使“反奖励中心”脑区神经元周围的神经胶质细胞K+通道数目增加,A正确;B、由中间图示和最右侧图示可以看出,神经元胞外K+浓度下降引起膜电位变化可能引起N和T通道开放,B正确;C、图中有放电信号,可知神经元可以电信号方式向“奖赏中心脑区输出抑制信号,C正确;D、T通道蛋白激活剂可导致产生抑郁,故T通道蛋白的激活剂不可以作为治疗抑郁症的药物,D错误。故选D。4、D【解析】

细胞内的元素根据元素含量的高低分为大量元素和微量元素两大类。大量元素:C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg;微量元素如:Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo等。组成细胞的化合物包括:有机物(糖类、脂质、蛋白质和核酸)和无机物(水和无机盐)。【详解】A、镁属于大量元素,A错误;B、组成淀粉的单体是葡萄糖,在排列顺序上不具有多样性,B错误;C、丙酮酸是在细胞质基质中产生的,C错误;D、细胞质包括细胞质基质和细胞器,其中细胞质基质是活细胞进行新陈代谢的主要场所,D正确。故选D。5、B【解析】

格里菲斯的实验证明,在S型细菌中存在某种转化因子,但是不知道转化因子是什么。在艾弗里证明遗传物质是DNA的实验中,艾弗里将S型细菌的DNA、蛋白质、糖类等物质分离开,单独的、直接的观察它们各自的作用。另外还增加了一组对照实验,即DNA酶和S型活菌中提取的DNA与R型菌混合培养。【详解】A、本实验通过加蛋白酶和DNA酶解去相应的物质,将DNA、蛋白质分开,用单一成分进行研究,A正确;B、甲组是混合培养,乙组是出去蛋白质后再混合培养,均能发生转化,但转化率低,培养皿中有R型及S型菌落,B错误;C、乙组实验中加蛋白酶处理后,培养皿中有S型菌落,则说明提取物仍有转化活性,C正确;D、丙组实验中加入DNA酶后,没有S型菌落,说明DNA的结构被破坏了,若是结构完整,则有S型菌落,进一步对照说明DNA使R型菌发生转化,D正确;故选B。6、B【解析】

能量流动中同化量是指该营养级生物消化吸收的能量,没被消化吸收的依然属于上一营养级的能量。互利共生是指两者生活在一起,相互依赖,彼此有利,分开后对双方都不利,“同生共死”的同步性变化的种间关系。【详解】A、蜂蜜是蜜蜂采集的,但并没有被蜜蜂吃掉同化,所以老鼠偷吃蜂蜜,并不是蜜蜂中的能量流入老鼠体内,应该还是植物中的能量流入老鼠体内,A错误;B、互利共生不仅仅局限于地衣和根瘤菌与豆科植物等这种紧密的互利共生关系,蜜蜂为植物传粉,植物给蜜蜂提供花蜜,这也是互利共生的关系,B正确;C、不是农药诱导产生突变,而是农药将抗药性个体筛选出来,C错误;D、豌豆为自花传粉植物,不需要蜜蜂帮助传粉,所以养蜂人不能及时转场不会使今年豌豆等农作物产量下降,D错误。故选B。自然选择是筛选出适应环境的个体,人工选择是选择出符合生产需要的个体。豌豆是自花传粉植物,自然状态下为纯种。二、综合题:本大题共4小题7、选择红斑与菌落的直径多于前者产脲酶菌是分散的或活菌和死菌一起计数,后者存在多个产脲酶菌形成一个菌落的情况或只计数活菌化学结合法海藻酸钠(和产脉酶菌的混合液)浓度过高酶和底物接触的机会小【解析】

1、筛选和分离目的微生物常用选择培养基,从土壤中筛选脲酶生产菌需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基。2、微生物常见的接种的方法①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。【详解】(1)产脲酶菌能产生脲酶,分解尿素,所配制的固体培养基应以尿素为唯一的氮源,该培养基属于选择培养基。(2)细菌合成的脲酶将尿素分解为氨,氨会使培养基中的碱性增强,pH升高,酚红指示剂变红,因此可以根据红斑和菌落的直径的比值大小,初步筛选出高效产脲酶菌。(3)使用稀释涂布平板法进行微生物计数时,但两个细胞或多个细胞连在一起时,平板上显示的只有一个菌落,导致结果可能会偏小,而且血细胞计数板是将活菌和死菌一起计数,因此分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则显微镜直接计数法的数量多于稀释涂布平板法。(4)固定化酶活固定化细胞常用的方法有包埋法、化学结合法和物理吸附法,用交联壳聚糖和脲酶中的氨基反应成键进行固定的方法叫化学结合法。固定产脲酶菌时,将海藻酸钠和产脲酶菌的混合液注入CaCl2溶液后,若海藻酸钠(和产脉酶菌的混合液)浓度过高,则形成的凝胶珠偏大,且具有拖尾现象。若凝胶珠偏大,使得酶和底物接触的机会小,使酶的作用效率下降。本题以分解尿素的微生物的分离为背景,主要考查微生物的分离和培养、固定化酶的相关知识,要求考生识记选择培养基的功能、微生物的计数原理和方法,难度不大。8、磷酸二酯键黏性末端和平末端4.4pIJ732上的原有BglⅡ位点被目的基因置换得到的环状pZH28,仍能被BglⅡ切割成一条线段Ca2+缓冲液转化4根据导入pIJ732的链霉菌菌落呈黑色、导入pZHZ8的链霉菌菌落呈白色的特点,通过观察菌落的颜色进行挑选【解析】

该题主要考察了基因工程的相关操作,基因工程的基本操作步骤为目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入到受体细胞、目的基因的检测与鉴定。限制性核酸内切酶主要作用于识别序列的磷酸二酯键,切割完以后可能会产生黏性末端或者是平末端。将目的基因导入受体细胞时,常常使用Ca2+使得受体细胞成为感受态细胞。【详解】(4)限制性内切核酸酶是作用于其所识别序列中剪切位点的磷酸二酯键,不同的限制酶可以获得不同的末端,主要分为黏性末端和平末端;(2)由题干可知,质粒PIJ732上具有长度为3.4kb的SacⅠ/sphⅠ片段,使用SacⅠ和SphⅠ切取质粒会多置换下3.4kb的片段,而BglⅡ在原质粒和重组质粒上的切割片段相差4.3kb,介于BglⅡ的识别位点位于SacⅠ和SphⅠ之间,所以推测目的基因的片段长度应该为4.3+3.4=4.4kb;在表格中可以反应出重组质粒可以被BglⅡ限制酶切割,切割后称为一条线段,但原有质粒上的相关片段已经被SacⅠ和SphⅠ置换为目的基因,因此推测目的基因中也含有4个BglⅡ切割位点;(3)将目的基因导入到受体细胞之前,需要将受体细胞用Ca2+处理使得受体细胞成为感受态细胞;然后重组质粒要溶解到缓冲液中与感受态细胞融合;从而促进链霉菌完成转化的过程;(4)根据图中的表格可知,要想对重组的链霉菌细胞进行筛选,应该满足不含质粒的链霉菌无法生长的要求,因此所需硫链丝菌素浓度至少应在4μg/mL以上;在该质粒上存在一个mel基因,其表达的产物会使得白色的链霉菌菌落变成黑色菌落,所以导入pIJ732的链霉菌菌落呈黑色,而重组质粒pZHZ8在构建的时候破坏了mel基因,所以该重组质粒导入到链霉菌后菌落呈白色,后通过观察菌落的颜色进行挑选。该题的难点在于基因表达载体的建构,由于切割位点及相对应的限制酶较多,所以准确分析目的基因及质粒的长度和结构就对学生有一个综合性的考察。而目的基因的检测与鉴定则需要在理解以上重组质粒的构建过程的基础上分析标记基因的应用情况。9、牧草产量5样方法a、b、c、d是引入与该生物有利于人们的竞争者、引入该生物的寄生者在环境条件不受破坏的情况下,一定空间中所能维持的种群最大数量【解析】

分析图示:图甲示研究者对草原上四种主要蝗虫密度对牧草产量(牧草产量=牧草补偿量一蝗虫取食量)影响的实验结果,该实验的自变量是蝗虫的种类,因变量是牧草产量;图乙为农业部门对某次“亚洲小车蝗”的爆发和防治过程中种群密度的调查结果,图中在a、b、c、d点进行了农药防治,随农药使用次数的增多,害虫群体产生了抗药性,防治效果变差;引入害虫的天敌进行生物防治,能利用生物间的捕食、寄生关系,使防治效果持久而稳定,因此在图中e点时引入害虫的天敌进行了生物防治。【详解】(1)由图甲可知,该实验的因变量是牧草产量,自变量是蝗虫的种类;牧草产量=牧草补偿量一蝗虫取食量,当狭翅雏蝗密度在5头/m2时,牧草补偿量大于蝗虫取食量时,牧草产量会增加,对牧草产量增长最有利。(2)样方法主要用于调查植物和活动范围比较小的动物(如昆虫卵、跳蝻等),故对蝗虫的幼虫跳蝻进行调查采用的方法是样方法;由于农药防治中随农药使用次数的增多,害虫群体产生了抗药性,防治效果变差,故农业工作者分别在图中a、b、c、d点进行了农药防治;e点与a点相比,种群密度降低,种群中抗药性的基因频率上升,种群是已经发生变化。(3)生物防治除引入天敌外,还可以采取的措施有引入与该生物有利于人们的竞争者、引入该生物的寄生者等。(4)g点之后蝗虫数量重新达到新的动态坏平衡,处于K值(即环境容纳量)。K值是指在环境条件不受破坏的情况下,一定空间中所能维持的种群最大数量。本题结合曲线图,综合考查估算种群密度的方法、种群数量变化曲线、生物防治、化学防治等知识,要求考生识记估算种群密度的两种常用方法及其适用范围;掌握种群数量变化曲线以及生物防治的措施等,能结合图中信息准确答题。10、DNA连接酶基因表达载体(或者重组质粒)CaCl2溶液(或者Ca2+)感受态生长素和细胞分裂素逆转录酶Ti质粒的T-DNA重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织抗原-抗体杂交用CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄,一段时间后观察结果,分析两组番茄的抗性目的基因已经整合到受体细胞的染色体上、获得的转基因亲本为杂合子【解析】

1、分析题图:①表示基因表达载体的构建过程;②将目的基因导入受体细胞(农杆菌转化法);③④表示植物组织培养过程,其中③是脱分化过程、④是再分化过程.图中A是目的基因、B是基因表达载体(由启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分构成)、C是愈伤组织。2、基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】Ⅰ.(1)①表示基因表达载体的构建过程,需用DNA连接酶将目的基因和运载体(质粒)连接形成重组质粒。B是基因表达载体,由启动子、终止子、目的基因和标记基因等部分构成。(2)将目的基因导入微生物细胞时,常用CaCl2(Ca2+)处理微生物细胞(农杆菌),使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞,利于重组质粒进入微生物细胞(农杆菌)。(3)图中③过程为脱分化,需要用到的激素是生长素和细胞分裂素。Ⅱ.(1)以RNA为模板合成DNA的过程称为逆转录,该过程需要逆转录酶的催化。(2)农杆菌转化法的原理是:农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上。因此获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌Ti质粒的T-DNA片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。(3)重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织,据此可知生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA。(4)检测目的基因是否表达产生相应的蛋白质,需要进行抗原-抗体杂交实验。(5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,可用CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄,一段时间后观察结果,分析两组番茄的抗性。转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3:1,符合基因分离定律,由此可以得出的结论是目的基因已经整合到受体细胞的染色体上,获得的转基因亲本为杂合子。本题考查基因工程和植物组织培养的相关知识,意在考查考生的识记能力和识图能力;理解所

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