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文档简介

重庆万州沙河中学2026届下学期高三生物试题期中测试卷注意事项1.考生要认真填写考场号和座位序号。2.试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上,在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答;第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3.考试结束后,考生须将试卷和答题卡放在桌面上,待监考员收回。一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1.分裂间期依次分为G1、S和G2期,研究者将处于不同时期的细胞进行融合,实验如图所示。其中灰色的部分是细胞核,黑点代表中心体。下列推测不合理的是()A.中心体的复制始于G1期,在G2期复制完毕B.中心体和DNA的复制可能同时进行C.S期细胞中存在使G1期细胞核进入S期的物质D.引发中心体复制的物质持续存在到G2期2.大肠杆菌拟核DNA是环状DNA分子。将无放射性标记的大肠杆菌,置于含3H标记的dTTP的培养液中培养,使新合成的DNA链中的脱氧胸苷均被3H标记。在第二次复制未完成时将DNA复制阻断,结果如下图所示。下列选项中对此实验的理解错误的是()A.DNA复制过程中,双链会局部解旋B.Ⅰ所示的DNA链被3H标记C.双链DNA复制仅以一条链作为模板D.DNA复制方式是半保留复制3.下列有关细胞的结构和功能的叙述,正确的是()A.载体蛋白是镶在细胞膜内外表面的蛋白质B.细胞识别与糖蛋白中蛋白质有关,与糖链无关C.线粒体DNA位于线粒体外膜上,编码参与呼吸作用的酶D.细胞产生的激素与靶细胞膜上相应受体的结合可实现细胞间的信息传递4.下列根据各概念图作出的判断,正确的是()

A.若甲图表示植物细胞内糖类物质,则甲图可以表示多糖b和糖原a的关系B.若乙图中a和b分别代表DNA和RNA,则乙图可以代表硝化细菌的核酸C.丙图可体现出细胞生物膜系统c、核糖体a和线粒体b的关系D.丁图能体现生态系统消费者c、各种动物a和各种真菌b的关系5.如图为某反射弧的部分结构示意图,虚线内代表神经中枢,下列叙述正确的是()A.a端与效应器相连接,b端与感受器相连B.c处的液体是组织液,其理化性质的改变会影响兴奋的传递C.在d、e点之间连接了灵敏电流计,刺激F点和G点都能使电流计发生相同的偏转D.把某药物放在c处,刺激e点,d处无电位变化,说明该药物能阻断神经元之间的兴奋传递6.“结构与功能观”是生物学的基本观点。其内涵是:一定的结构必然有与之相对应的功能存在,且任何功能都需要一定的结构来完成。下列叙述不符合该观点的是()A.功能越复杂的生物膜,其上的蛋白质种类和数量越多B.内质网内连核膜外连细胞膜,广阔的膜面积为酶提供附着点C.人的卵细胞体积较大,相对表面积也大,有利于细胞与周围环境的物质交换D.小肠绒毛上皮细胞内有大量线粒体,有利于细胞的吸收功能二、综合题:本大题共4小题7.(9分)回答下列(一)、(二)小题。(一)回答下列有关发酵食品生产工艺的问题:(1)豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。影响豆豉风味的主要因素,除了菌种类型、发酵温度、pH、氧气等环境因素,还有________(答2个因素)。(2)目前的豆豉发酵基本是一次性的,每次都经过“培养基灭菌→___→发酵→提取”,周而复始。能否________发酵、生产、提取是今后的发展方向。(3)根据所学知识判断,下面哪种微生物更适合用豆芽汁培养基培养_________A醋杆菌B酵母菌C乳酸菌D农杆菌(4)在果醋发酵工艺中,用谷壳糠等将醋杆菌固定化,装在发酵瓶,下端直角玻璃管中塞____________用以过滤空气;物料瓶内装___________________,铝箔封口。发酵过程若流速过快,则可能导致____________,为保障品质,需对发酵瓶流出液________________。(二)为开发利用沿海滩涂盐碱地,我国科学家应用基因工程培育出了耐盐碱水稻新品系,大大提高了水稻等农作物的种植面积,增加了粮食产量。据此请回答下列问题:(1)欲将耐盐碱基因和Ti质粒进行重组形成重组质粒需要的工具酶有限制性核酸内切酶和____________,限制酶一般需要________种,这样设计的目的是____________。(2)将重组Ti质粒构建完成后导入农杆菌,经筛选后,对含目的基因的农杆菌进行大量繁殖,其目的是____________。(3)取田间水稻的幼胚经消毒后接种到____________(固体、半固体、液体)培养基上诱导产生愈伤组织,利用含重组质粒的农杆菌侵染愈伤组织后,将其接种到MS生根培养基上,在该培养基中细胞分裂素具有解除高浓度生长素____________的作用。(4)经组培获得水稻试管苗后,提取其叶片组织中的DNA,采用PCR技术扩增目的基因,目的是为了____________。要检测到转基因水稻中目的基因的表达产物,一般采用的方法是_________。8.(10分)瘦素是一种蛋白质类激素,可作用于下丘脑,调节人的食欲,其作用机理如图所示。X、Y、Z代表信号分子,请据图分析回答:(1)瘦素合成后,以________的方式分泌出细胞,通过_________运输至下丘脑,并与靶细胞上的___________结合。(2)人体内脂肪含量偏高时,瘦素释放量增加,使神经元A兴奋,神经元B抑制,此时神经元A膜外的电位为________,信号分子X与Y的比值增加,同时信号分子Z的释放减少,从而使饱中枢兴奋、饥中枢抑制,降低人的食欲。大多数肥胖者食欲失去控制而检测发现其血液中瘦素水平没有降低,出现这种情况最可能的原因是_______________________________。(3)当人体大量进食后,胰岛素的分泌量___________,促进细胞吸收葡萄糖并将其转变为脂肪。据此判断,当瘦素对胰岛素的分泌具有___________作用时,才可维持体内脂肪含量的相对稳定。(4)饮水不足会使下丘脑分泌的___________激素增加,同时使兴奋传到________,使人主动饮水。某些肥胖患者自身抗体会攻击神经元A上的瘦素受体,这种病在免疫学上称为________。9.(10分)某生态农场遵循“绿水青山就是金山银山”的发展理念,推行生态农业发展模式,如图所示。请回答下列问题:(1)流经该生态农场的总能量指的是_____________________________。从能量流动的角度分析,构建生态农场的实践意义是_____________________。(2)生态农田中的蝗虫、螳螂、青蛙之间相互传递着大量信息,这体现了信息传递具有________的作用。(3)除沼渣和粪尿等外,管理者还需向生态农田施用一定量的化肥,才能使其正常运转和长期发展,其原因是____________。10.(10分)干扰素是动物体内的一种蛋白质,可用于治疗病毒的感染和癌症。长期以来,人们利用相关病毒诱导白细胞产生干扰素再从血液中提取,但每升血只能提取0.05μg。1982年,我国科学家通过基因工程等技术开发研制出我国首个基因工程药物——重组人干扰素。回答下列相关问题。(1)相对于从基因组文库中获取干扰素基因,从已病毒免疫的白细胞中提取mRNA,再反转录并构建的cDNA文库中获取的干扰素基因,更易在大肠杆菌中合成正常干扰素。从基因表达的角度分析,其原因是_____。(2)天然的干扰素很难在体外保存,但通过蛋白质工程可得到“可保存的干扰素”。蛋白质工程以_____和_____的关系为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质。(3)在构建该基因表达载体时,需同时用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理目的基因和质粒,主要目的是_____。(4)质粒中LacZ基因编码的半乳糖苷酶,能催化生成蓝色物质从而将细菌染成蓝色。在含有四环素的培养基中,未被转化的大肠杆菌的生长现象是_____,含有质粒载体的大肠杆菌的生长现象是_____,含有重组质粒的大肠杆菌的生长现象是_____,从而获得所需重组细胞。(注:若能正常生长需要写出菌落特征)(5)转基因细菌产生的干扰素可能会成为某些人的过敏原,存在潜在风险。有科学家将干扰素基因转入小鼠基因组,获得膀胱生物反应器,最终在尿液中获得干扰素。在该操作中,应使干扰素基因在_____细胞中特异性表达。11.(15分)第三代试管婴儿技术(PGD/PGS技术)为大龄夫妇生出健康宝宝提供了保障。PGS是指胚胎植入前进行的遗传筛查,在胚胎植入前对早期胚胎进行染色体数目和结构异常的检测。PGD是指胚胎植入前的基因诊断,主要用于检查胚胎是否携带有遗传缺陷的基因。(1)为了避免某些遗传疾病的产生,有时需要对胚胎的性别进行鉴定。实验证明,鉴定胚胎性别快速、灵敏、准确性高的方法是SRY—PCR法(SRY是位于Y染色体上的性别决定基因,其位置如下图所示),利用PCR技术扩增SRY基因的过程中,需要_______种引物,至少完成_______轮循环,才能获得只含目的基因的DNA片段,最后用_______探针对扩增产物进行检测,若出现阳性反应,则胚胎为_____(填男孩或女孩)。(2)试管婴儿的培育需经过体外受精,在体外受精前要对精子进行________处理,通常采用的体外获能方法有_______两种。(3)判定卵子受精的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到_____。(4)利用_____(填PGD或PGS)技术可以筛选出患21三体综合征的试管婴儿。

参考答案一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1、A【解析】

细胞周期包括分裂间期和分裂期,分裂间期历时长,占细胞周期的90%--95%,G1期主要进行RNA和蛋白质的生物合成,并且为下阶段S期的DNA合成做准备;S期最主要的特征是DNA的合成;G2期主要为M期做准备,但是还有RNA和蛋白质的合成,不过合成量逐渐减少。【详解】A、分析图解可知,图中细胞S期时已经出现两个中心体,说明中心体在S期结束之前已经复制完毕,A错误;

B、DNA复制发生在S期,通过图一细胞融合的结果可知,中心体和DNA复制可能同时进行,B正确;

C、根据图一细胞融合的结果可知,S期细胞中可能存在使G1期细胞核进入S期的物质,C正确;

D、根据图细胞融合结果可知,引发中心体复制的物质持续存在到G2期,D正确。

故选A。2、C【解析】

DNA复制是以亲代DNA分子为模板合成子代DNA分子的过程。DNA复制条件:模板(DNA的双链)、能量(ATP水解提供)、酶(解旋酶和聚合酶等)、原料(游离的脱氧核苷酸);DNA复制过程:边解旋边复制;DNA复制特点:半保留复制。识图分析可知,大肠杆菌拟核中的DNA两条链都做模板,进行半保留复制。【详解】A、根据以上分析可知,DNA复制过程中,会边解旋边复制,因此双链会局部解旋,A正确;B、识图分析可知,Ⅰ所示的DNA链是新合成的子链的一部分,由于原料是被3H标记的,因此Ⅰ所示的DNA链有3H标记,B正确;C、根据图示可知,双链DNA复制时两条链都作为模板,C错误;D、由于合成的子代DNA中保留了一条模板链,因此DNA复制方式是半保留复制,D正确。故选C。3、D【解析】

本题考查了细胞膜以及线粒体的结构和功能。细胞膜主要由脂质与蛋白质构成,还含有少量的糖类。在细胞膜的外表面,有一层由蛋白质和糖类结合形成的糖蛋白,也叫糖被。它在细胞的生命活动中具有重要功能,如保护、润滑、识别等作用。激素与靶细胞膜上相应受体的结合属于细胞之间交流中的间接信息交流。线粒体是具有双层膜的半自主性细胞器,其遗传物质DNA位于基质中。【详解】A、载体蛋白都是跨膜蛋白,它贯穿在整个磷脂双分子层中,A错误;B、细胞识别与细胞膜外侧的糖蛋白有关,而糖蛋白由蛋白质和多糖组成,B错误;C、线粒体DNA位于线粒体的基质中,C错误;D、细胞产生的激素作用于靶细胞膜上相应受体,实现细胞间的信息传递,D正确。故选D。4、B【解析】

多糖有纤维素、淀粉和糖原,纤维素是构成植物细胞壁的主要成分,淀粉是植物细胞的储能物质,糖原是动物细胞的储能物质。核酸包括DNA和RNA,细胞生物既含有DNA又含有RNA。生物膜系统由细胞膜、细胞器膜和核膜构成。【详解】A、糖原是动物细胞内的多糖,植物细胞内的多糖是淀粉和纤维素,A错误;B、硝化细菌为原核生物,细胞中含有DNA和RNA两种核酸,B正确;C、核糖体没有膜,不构成生物膜系统,C错误;D、真菌一般属于分解者,寄生的真菌属于消费者;动物不都是消费者,部分动物属于分解者,如某些原生动物和蚯蚓、白蚁等,D错误。故选B。5、B【解析】

分析题图,该图的神经传导方向应该是a→d→c→e,所以a连接感受器,c连接效应器。【详解】A.分析反射弧的结构示意图可知,a连接感受器,c连接效应器,A错误;B.c处为组织液,如果理化性质改变很容易影响神经递质在两神经间的传递,B正确;C.在d、e点之间连接了灵敏电流计,神经冲动只能由d点传到e,刺激F点,神经冲动先传至d,再传至e,故电流计会有2次偏转,刺激G点神经冲动只能传至e,故电流计会有1次偏转,故电流计的偏转不相同,C错误;D.神经冲动是单向传导的,只能由d点传到e,所以即使不放药物,刺激e点d点也不会有电位变化,D错误。6、C【解析】

蛋白质在细胞膜行使功能时起重要作用,因此,功能越复杂的细胞膜,蛋白质的种类和数量越多;内质网能有效地增加细胞内的膜面积,其外连细胞膜,内连核膜,将细胞中的各种结构连成一个整体。【详解】A、蛋白质是生命活动的主要承担者,生物膜上的蛋白质主要有载体蛋白、受体蛋白、酶等,三种蛋白质都具有专一性,因此生物膜上蛋白质的种类和数量越多,膜的功能越复杂,A正确;B、内质网内连核膜外连细胞膜,广阔的膜面积为酶提供附着点,B正确;C、人卵细胞的体积较大,相对表面积小,不利于细胞与周围环境的物质交换,C错误;D、小肠绒毛上皮细胞内有大量线粒体,可产生大量能量用于细胞主动运输吸收营养物质,D正确。故选C。解答此题需要明确生物膜系统的结构、功能,熟悉各种细胞器的分布及作用,并能结合选项分析作答。二、综合题:本大题共4小题7、大豆品种(原料)、发酵时间接种连续地B脱脂棉球酒水混合物发酵不充分定期检测/监控(答到一个词给分)DNA连接酶2防止质粒和目的基因自身环化以及定向连接获取大量重组质粒(让目的基因扩增或克隆目的基因)半固体抑制根生长检测目的基因是否成功导入抗原-抗体反应【解析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌,其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理:(1)在有氧条件下,反应式如下:C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量;(2)在无氧条件下,反应式如下:C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。3、基因工程的操作步骤:一是获取目的基因;二是构建基因表达载体(核心);三是将目的基因导入受体细胞(导入植物细胞一般有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管道法等);四是检测和鉴定目的基因(一是检测目的基因是否导入成功,二是检测目的基因是否成功表达,三是检测目的基因控制的性状是否在能在植株上表现出来)。【详解】(一)(1)影响豆豉风味的因素很多,包括菌种类型、发酵温度、pH、氧气等环境因素还有发酵的大豆品种原料和发酵时间。(2)发酵过程利用了微生物的代谢,因此培养过程要经过“培养基灭菌→接种→发酵→提取”。这种发酵技术基本上是一次性的,因此如何连续性低发酵、生产、提取是今后的发展方向。(3)豆芽汁培养基适合培养真菌,选项中只有酵母菌属于真菌,故选B。(4)醋酸菌是好氧细菌,下端直角玻璃管中塞脱脂棉球用以过滤空气。物料瓶内装酒水混合物,铝箔封口。发酵过程若流速过快,则可能导致发酵不充分,为保障品质,需对发酵瓶流出液进行定期检测。(二)(1)重组质粒构建过程中,用的工具酶包括限制性核酸内切酶和DNA连接酶,其中限制性核酸内切酶一般用两种,这样防止目的基因和质粒发生自身环化以及定向连接。(2)为了获取大量重组质粒,可对含目的基因的农杆菌进行大量繁殖。(3)愈伤组织的培养采用的是半固体培养基。生长素具有两重性,低浓度促进生长,高浓度抑制生长,在MS生根培养基上,细胞分裂素具有解除高浓度生长素抑制生根的作用。(4)提取叶片组织的DNA,采用PCR技术扩增目的基因,鉴定目的基因是否成功导入。对于检测转基因水稻中目的基因是否表达,可采用抗原-抗体杂交方法。本题考查视频发酵和基因工程的相关知识,要求考生识记相关发酵技术的原理、方法和流程,基因工程的原理及意义,掌握基因工程采用的工具及具体操作步骤,能结合所学的知识准确分析各题。8、胞吐体液(或血液)特异性受体负电位其体内神经元B缺少瘦素受体增加抑制抗利尿大脑皮层自身免疫病【解析】

人体水盐平衡的调节1.体内水少或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少,同时大脑皮层产生渴觉(饮水);2.体内水多→细胞外液渗透压降低→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素少→肾小管、集合管重吸收减少→尿量增加。3.自身免疫病:是由于免疫系统异常敏感,反应过度“敌我不分”将自身物质当做外来异物进行攻击而引起的这类疾病就是自身免疫病。如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、风湿性心脏病等。【详解】(1)瘦素是蛋白质类的物质,合成后要以胞吐的形式释放,然后经体液运输至靶器官,与相关靶细胞上的特异性受体结合,达到信息传递的目的。(2)神经元兴奋时膜外电位为负电位,膜内电位为正电位。题意显示人体内脂肪含量偏高时,瘦素释放量增加,使神经元A兴奋,神经元B抑制,由此推测神经元A膜外的电位为负电位,信号分子X与Y的比值增加,同时信号分子Z的释放也减少,从而使饱中枢兴奋、饥中枢抑制,降低人的食欲。多数肥胖者血液中瘦素含量水平没有降低,但是瘦素没有起到作用,因此,就激素作用机理可推知瘦素与其受体的结合减少,进一步推测可能是神经元A、B上瘦素的受体较少有关,尤其是体内神经元B缺少瘦素受体,导致饥中枢未被抑制。(3)当人体大量进食后,由于血糖浓度升高,胰岛素的分泌量增多,进而促进细胞吸收葡萄糖并将其转变为脂肪,会引起脂肪细胞分泌瘦素增多,达到控制人体进一步肥胖的目的,据此推断瘦素对胰岛素的分泌可能有抑制作用。(4)由分析可知,饮水不足会引起细胞外液渗透压上升,进而刺激下丘脑的渗透压感受器,会使下丘脑分泌的抗利尿激素增加,同时使兴奋传到大脑皮层,使人主动饮水;自身抗体对自身正常细胞攻击导致的疾病属于自身免疫病,因此某些肥胖患者的病因是自身抗体会攻击神经元A上的瘦素受体,根据致病机理可知,这种病在免疫学上称为自身免疫病。本题考查了神经调节、激素调节和免疫失调病等相关知识,要求学生能从材料中获取相关的生物学信息,并能运用这些信息,结合所学知识解决相关的生物学问题。9、生产者固定的太阳能和人工投入饲养场中的能量实现对能量的多级利用,从而大大提高能量的利用率调节生物的种间关系,维持生态系统的稳定农产品输出会带走大量的元素,沼渣和粪尿等不足以将元素都归还农田,因此需要施用化肥以维持输出量与输入量的平衡【解析】

1、生态农业:是按照生态学原理和经济学原理,运用现代科学技术成果和现代管理手段,以及传统农业的有效经验建立起来的,能获得较高的经济效益、生态效益和社会效益的现代化农业。2、生态工程的基本原理:物质循环再生原理(如无废弃物农业)、物种多样性原理(提高生态系统的抵抗力稳定性)、协调与平衡原理(处理生物与环境的协调与平衡,考虑环境容纳量)、整体性原理(考虑自然系统、经济系统和社会系统的统一)、系统性和工程学原理(系统的结构决定功能原理:考虑系统内部不同组分之间的结构,通过改变和优化结构,达到改善系统功能的目的;系统整体性原理:实现总体功能大于各部分之和的效果)。3、该生态工程以沼气工程为中心,各类植物的秸秆用来生产饲料喂养畜、禽、鱼,人、畜、禽粪便作为原料生产沼气,沼渣沼液返还农田、鱼塘,体现了生态工程的物质循环再生原理。该生态工程建设中,该生态系统把鱼塘、农田、饲养场等有机地组合在一起,优化了系统结构,遵循系统的结构决定功能原理。【详解】(1)流经该生态农场的总能量指的是生产者固定的太阳能和人工投入饲养场中的能量;从能量流动的角度分析,构建生态农场的实践意义是实现对能量的多级利用,从而大大提高能量的利用率。(2)生态农田中的蝗虫、螳螂、青蛙之间相互传递着大量信息,这体现了信息传递具有调节生物的种间关系,维持生态系统的稳定的作用。(3)除沼渣和粪尿等外,管理者还需向生态农田施用一定量的化肥,才能使其正常运转和长期发展,其原因是农产品输出会带走大量的元素,沼渣和粪尿等不足以将元素都归还农田,因此需要施用化肥以维持输出量与输入量的平衡。本题结合图解,考查生态工程的相关知识,要求考生识记生态系统的组成成分及营养结构,掌握生态系统中能量流动意义和信息传递的作用,能结合图中信息准确答题,属于考纲理解层次的考查。10、从基因组文库中获得的干扰素基因有内含子,在大肠杆菌中干扰素基因的转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出干扰素蛋白质分子的结构规律生物功能防止目的基因和载体任意连接(或自身环化或反向连接)无法生长正常生长,菌落呈蓝色正常生长,菌落呈白色(或无色)膀胱上皮【解析】

基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】(1)从基因组文库中获得的干扰素基因有内含子,在大肠杆菌中干扰素基因的转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除,无法表达出干扰素。因此相对于从基因组文库中获取干扰素基因,从已病毒免疫的白细胞中提取mRNA,再反转录并构建的cDNA文库中获取的干扰素基因,更易在大肠杆菌中合成正常干扰素。(2)蛋白质工程以蛋白质分子的结构规律和生物功能的关系为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质。(3)在构建该基因表达载体时,需同时用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理目的基因和质粒,主要目的是防止目的基因和载体任意连接(或自身环化或反向连接)。(4)用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理质

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