2026年PCR实验室安全操作考试试题及答案

2026年PCR实验室安全操作考试试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1.PCR实验室操作中，正确的个人防护装备穿戴顺序是：A.戴口罩→穿工作服→戴手套→戴护目镜B.穿工作服→戴口罩→戴护目镜→戴手套C.戴护目镜→穿工作服→戴口罩→戴手套D.戴手套→穿工作服→戴口罩→戴护目镜答案：B2.关于生物安全柜的使用，下列错误的是：A.操作前需开机运行10分钟，确认风速达标B.物品应尽量靠近安全柜后缘放置C.操作时手臂应缓慢进出，避免干扰气流D.操作完成后需用75%乙醇擦拭内部，关闭风机前运行5分钟答案：B（应尽量靠近安全柜前缘，避免遮挡回风口）3.实验室高压蒸汽灭菌时，以下哪项不符合要求：A.废弃物袋标记“感染性废物”，松散放置B.灭菌温度121℃，持续30分钟C.液体类物品需使用开口容器，防止爆炸D.灭菌后直接用手取出物品答案：D（需待压力降至0后自然冷却，戴隔热手套取出）4.配制PCR试剂时，若不慎将荧光染料溅到实验台面，应立即：A.用纸巾擦拭后喷洒次氯酸钠B.用75%乙醇覆盖10分钟后擦拭C.用含有效氯2000mg/L的消毒液覆盖30分钟后擦拭D.直接用清水冲洗答案：C（荧光染料可能含核酸污染，需高浓度含氯消毒液处理）5.以下哪类物品可重复使用于PCR实验：A.一次性吸头（未接触样本）B.无核酸酶的玻璃离心管（已高压灭菌）C.污染过的白大衣D.一次性手套（未破损）答案：B（高压灭菌可去除生物污染，无核酸酶玻璃管可重复使用）二、判断题（每题2分，共20分。正确打√，错误打×）1.在PCR实验室缓冲区可短暂饮食补充体力。（×）2.操作样本时，生物安全柜内可同时放置非本次实验物品。（×）3.离心管破裂后，应立即关闭离心机，待5分钟气溶胶沉降后处理。（√）4.实验室废弃物袋装满3/4时需密封，避免搬运时泄漏。（√）5.紫外线消毒时，需确保台面无遮盖，照射时间不少于30分钟。（√）6.配制试剂时，可将不同批号的Taq酶混合使用以避免浪费。（×）7.手套有可见污染时，应在实验室内更换，无需离开操作区域。（×）（需离开污染区更换）8.样本运输时，需使用双层防漏容器，内层标记“生物危害”。（√）9.实验结束后，可直接将含EB的凝胶倒入普通垃圾桶。（×）（需专门有害废物处理）10.新手操作时，可省略实验记录，待完成后补写。（×）三、简答题（每题10分，共30分）1.简述PCR实验室分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区、产物分析区）的核心安全意义。答案：分区可防止交叉污染：试剂准备区（无核酸环境，避免扩增产物污染）；样本处理区（防止样本间污染及操作人员暴露）；扩增区（避免扩增产物泄漏至前区）；产物分析区（处理已扩增的高浓度核酸，需严格与前区物理隔离）。各区物品专用，人员单向流动（试剂→样本→扩增→产物），降低假阳性风险。2.列举3项使用移液器时的安全注意事项。答案：①使用前检查吸头是否安装紧密，避免液体回吸污染移液器；②吸取感染性样本时，需使用带滤芯吸头，防止气溶胶进入移液器内部；③移液后缓慢释放按钮，避免液体飞溅；④接触污染样本后，需用75%乙醇擦拭移液器表面，必要时拆卸消毒；⑤不可倒置移液器（尤其吸头朝下时），防止液体流入活塞。3.若实验中发生样本管破裂导致台面污染，应如何应急处理？答案：①立即停止操作，佩戴额外防护（如双层手套、护目镜）；②用吸水纸覆盖污染区域，喷洒含有效氯5000mg/L的消毒液，静置30分钟；③用镊子移除污染的吸水纸，放入感染性废物袋；④用新的吸水纸蘸取消毒液反复擦拭台面，最后用清水擦拭去除残留；⑤记录污染位置、处理过程及操作人员；⑥对污染区域周围环境（如生物安全柜、移液器）进行核酸污染检测（如荧光定量PCR法），确认清除后恢复实验；⑦处理人员需用肥皂流动水洗手，必要时进行暴露后医学监测。四、案例分析题（30分）某实验室新人在进行新冠病毒核酸检测时，操作如下：未佩戴护目镜，直接用手从冰箱取出冻存样本（未等样本完全融化），在生物安全柜外打开样本管，移液时吸头触碰试管外壁，操作结束后将剩余样本与普通垃圾混放。请指出至少5处错误，并说明正确操作。答案：错误及正确操作：①未佩戴护目镜：可能因样本飞溅导致眼部暴露，需佩戴防冲击护目镜或面罩。②未等样本完全融化直接操作：冻存样本融化不完全会导致浓度不均，且可能因温差引起试管破裂，应置于冰盒缓慢融化至液态。③在生物安全柜外打开样本管：样本处理需在Ⅱ级生物安全柜内进行，避免气溶胶扩散，需将样本转移至安全柜内再开盖。④移液时吸头触碰试管外壁：可能导致交叉污染，应保持吸头垂直，避免接触试管口