2026年分子生物学研究方法考核试题冲刺卷

2026年分子生物学研究方法考核试题冲刺卷考试时长：120分钟满分：100分班级：__________姓名：__________学号：__________得分：__________一、单选题（总共10题，每题2分，总分20分）1.下列哪种技术主要用于检测特定DNA序列的杂交？A.PCRB.基因测序C.SouthernblotD.基因芯片2.在蛋白质印迹（Westernblot）实验中，首先需要将蛋白质转移到哪种材料上？A.硅胶凝胶B.聚丙烯酰胺凝胶C.膜（如PVDF或NC膜）D.滤纸3.以下哪种酶是PCR反应中必需的？A.DNA连接酶B.DNA聚合酶C.限制性内切酶D.RNA聚合酶4.下列哪种方法可用于检测基因表达水平的差异？A.基因测序B.RT-PCRC.基因芯片D.限制性酶切5.在基因克隆中，载体通常需要具备哪些特性？A.高拷贝数和稳定性B.大小的限制性内切酶位点C.选择性标记基因D.以上都是6.以下哪种技术可用于构建基因文库？A.基因测序B.基因芯片C.基因文库构建D.RT-PCR7.在流式细胞术（Flowcytometry）中，常用的荧光标记物是什么？A.FITC（异硫氰酸荧光素）B.PE（藻红蛋白）C.APC（藻红蛋白-Cyanine5）D.以上都是8.以下哪种方法可用于检测RNA的完整性？A.NorthernblotB.RT-PCRC.RNA测序（RNA-Seq）D.基因芯片9.在蛋白质组学中，常用的质谱技术是哪种？A.液相色谱-质谱联用（LC-MS）B.气相色谱-质谱联用（GC-MS）C.离子阱质谱D.以上都是10.以下哪种技术可用于检测基因突变？A.基因测序B.Sanger测序C.基因芯片D.以上都是二、填空题（总共10题，每题2分，总分20分）1.PCR的全称是__________。2.Westernblot中，首先需要将蛋白质从凝胶转移到__________上。3.基因芯片主要用于检测__________的差异表达。4.基因文库分为__________文库和cDNA文库。5.RT-PCR是检测__________水平的方法。6.流式细胞术通过检测细胞__________来分析细胞群体。7.RNA测序（RNA-Seq）可以用于检测__________的表达水平。8.蛋白质组学中，常用的质谱技术是__________。9.基因突变检测常用的方法是__________和Sanger测序。10.基因克隆中，载体需要具备__________和选择性标记基因。三、判断题（总共10题，每题2分，总分20分）1.PCR反应需要引物、模板、DNA聚合酶和dNTPs。（√）2.Southernblot主要用于检测DNA序列。（√）3.基因芯片可以同时检测成千上万个基因的表达。（√）4.基因文库构建不需要载体。（×）5.RT-PCR可以检测RNA的完整性。（×）6.流式细胞术只能检测细胞数量。（×）7.RNA测序（RNA-Seq）可以检测基因突变。（×）8.蛋白质组学中，LC-MS是常用的质谱技术。（√）9.基因突变检测只能通过基因测序。（×）10.基因克隆中，载体不需要具备高拷贝数。（×）四、简答题（总共3题，每题4分，总分12分）1.简述PCR的基本原理及其应用。2.简述Westernblot的基本步骤及其原理。3.简述基因芯片的基本原理及其应用。五、应用题（总共2题，每题9分，总分18分）1.某研究小组需要检测某基因在正常细胞和肿瘤细胞中的表达差异，请设计一个实验方案，包括实验方法、主要试剂和步骤。2.某公司需要开发一种新的诊断试剂盒，用于检测某基因的突变，请设计一个实验方案，包括实验方法、主要试剂和步骤。【标准答案及解析】一、单选题1.C解析：Southernblot是检测特定DNA序列杂交的技术，通过将DNA转移到膜上，与探针杂交后进行检测。2.C解析：Westernblot中，蛋白质首先需要从凝胶转移到膜上，以便进行抗体结合和检测。3.B解析：PCR反应中必需的酶是DNA聚合酶，用于合成新的DNA链。4.B解析：RT-PCR可以检测RNA的表达水平，通过反转录为cDNA后进行PCR扩增。5.D解析：载体需要具备高拷贝数、稳定性、选择标记基因和限制性内切酶位点等特性。6.C解析：基因文库构建是将基因组DNA或cDNA片段克隆到载体中，构建成文库。7.D解析：流式细胞术通过检测细胞荧光强度、散射特性等来分析细胞群体。8.C解析：RNA测序（RNA-Seq）可以检测RNA的完整性，通过高通量测序分析RNA转录本。9.D解析：蛋白质组学中，LC-MS是常用的质谱技术，用于检测蛋白质的质荷比和结构。10.D解析：基因突变检测可以通过基因测序和Sanger测序等方法进行。二、填空题1.聚合酶链式反应2.膜3.基因4.基因组5.RNA6.荧光强度和散射特性7.基因8.液相色谱-质谱联用9.基因测序10.高拷贝数和稳定性三、判断题1.√2.√3.√4.×5.×6.×7.×8.√9.×10.×四、简答题1.PCR的基本原理及其应用解析：PCR的基本原理是通过高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤，使DNA双链解开，引物结合到模板上，DNA聚合酶合成新的DNA链。PCR的应用包括基因扩增、基因检测、基因突变检测等。2.Westernblot的基本步骤及其原理解析：Westernblot的基本步骤包括蛋白质电泳、转移、封闭、一抗孵育、二抗孵育和化学发光检测。原理是通过抗体结合特异性蛋白质，进行检测。3.基因芯片的基本原理及其应用解析：基因芯片的基本原理是将大量探针固定在固相载体上，与待测样品杂交，通过检测杂交信号进行基因表达分析。应用包括基因表达谱分析、疾病诊断等。五、应用题1.某研究小组需要检测某基因在正常细胞和肿瘤细胞中的表达差异，请设计一个实验方案，包括实验方法、主要试剂和步骤。解析：实验方法：RT-PCR主要试剂：TRIzol试剂、反转录试剂盒、PCR试剂盒、引物等步骤：（1）提取正常细胞和肿瘤细胞的RNA；（2）将RNA反转录为cDNA；（3）进行PCR扩增，使用特异性引物扩增目标基因；（4）通过凝胶电泳或荧光定量检测PCR产物，比较正常细胞和肿瘤细胞中的表达差异。2.某公司需要开发一种新的诊断试剂盒，用于检测某基因的突变