市售葡萄糖酸锌产品中锌含量的测定

市售葡萄糖酸锌产品中锌含量的测定1绪论第1节研究的意义锌是人体必需的微量元素之一。在人的重要生理过程中比如人体生长发育、内分泌、遗传、生殖、神经等过程中起着不可替代的作用。此外，锌产品作为一种市面上销售旺盛的保健产品，用于改善人的生长发育以及营养吸收等方面，补锌产品尤其是在少儿保健产品方面占有重要的份额[1,2]。目前，市场上补锌的医药和保健产品很多[3]，根据锌的组分和原料的不同，市场上常见的含锌产品主要分为以下三类：含代无机锌类产品：诸如：氯化锌、硫酸锌、碱式碳酸锌、硝酸锌以及磷酸锌等等，这种含锌产品大多属处方药类，具有药效快速，大多用于临床治疗，目前多应用于临床以促进伤口愈合。而且因为副作用强烈，保健产品很少含有这类化合物锌。含代有机锌类产品：比如乳酸锌、甘草锌、柠檬酸锌、葡萄糖酸锌、醋酸锌、氨基酸锌、烟酸锌等，相对于无机锌产品，这类产品具有副作用少，容易吸收，广泛应用于各类含锌类药物和保健产品，也是目前市面含锌产品最丰富的一类。含代生物类锌类：比如锌硒宝片，含锌类的鸡蛋、酵母锌以及蛋白粉之类也属于此类，这种锌与营养蛋白质实现结合，实现蛋白与锌同补的效果，这类产品一般用于保健产品，尤其保健食品[4,5]。葡萄糖酸锌片的作用主要是补充人体锌元素。萄糖酸锌用于治疗缺锌引起的营养不良、异食癖、神经衰弱，厌食症以及口腔溃疡等等。相对于其他补锌产品，葡萄糖酸锌的口感比较好，而且价格便宜，因而成为目前补锌产品的主流[6,7]。正因为市场上葡萄糖酸锌产品过多，不同葡萄糖酸锌产品之间锌的实际含量多少便成为人们所关心的话题。产品中锌含量过少，补锌的效果不显著；如果锌含量过多，加上长期超量的复用，又会造成副作用，比如恶心、胃部痉挛、呕吐以及痢疾等等。这就需要对市场中已有的葡萄糖酸锌产品进行含量进行定量分析，通过对含锌量进行准确标定的方式来确定市场中不同品牌含锌产品的质量，所以，如何准确、快速的分析市场上葡萄糖酸锌产品的含锌量，便成为目前人民广泛关注的问题。本研究将通过分光光度计法，探索一种能够快速测量市面葡萄糖酸锌产品中锌含量的方法，并用此法对市面上常见的几种葡萄糖酸锌产品的含锌量进行标定。第2节国内外研究的进展葡萄糖酸锌含量相关研究比较多，测定的方法包括化学和仪器分析。化学分析主要是滴定法；仪器分析是常用的方法包括紫外吸收光谱、原子吸收光谱法[8]、气相色谱、液相色谱、离子色谱法、电化学法和化学发光。比较常见的锌含量测定方法有滴定法、分光光度法和高压液相色谱法[9]。黄丽英等人采用滴定法测量了彼阳新盖口服液中葡萄糖酸锌的含量，试验中以乙二胺四乙酸二钠为配位剂，以PAN为显色指示剂进行滴定实验[10]。张立坤和龚梅英采用络合滴定的方式，对葡萄糖酸锌的含锌量进行的分析和定[11]量。任宗芬等人采用配位滴定的方式排除葡萄糖酸锌中赖氨酸锌的干扰，从而获得葡萄糖酸锌的含量[12]。滴定分析是种常规的化学滴定方法，这种方法具有方法简单，对实验设备要求不高等特点，但目前很多葡萄糖酸锌产品中含有大量的色素、焦糖以及其他显色物质，这些物质会对滴定终点的判定产生影响。高压液相色谱法方面的文献最多，本法具有精度高，准确度好的优点。Shamilishvili等人采用高压液相色谱法对作物中的锌的含量进行的测定，并评估了不同的锌摄入量对人体健康的影响，最后对面粉中过氧化苯甲酰的含量值进行了限定[13]。Gugała等人分别采用高效液相色谱法测定血液中锌的含量，采用KromasilC18做为色谱柱，冰醋酸、甲醇、N,N-二甲基甲酰胺作为流动相，对葡萄糖酸锌的含量进行测定，这种方法比较可靠，数据比较精确[14]。Jia等人提出了采用高效液相色谱法中的C18柱，通过梯度流动相测定过葡萄糖酸锌的方法，并认为这种方法重现率高，回收率比较好，采用的样品比较少等特点[15]。Alber等人认为高效液相色谱法有简单可靠、精确度高等优点[16]。许素英采用分光光光度法测定葡萄糖酸锌产品中的含锌量，通过测量的最大吸收波长，绘制标准曲线，以及与葡萄糖酸锌文献数据作为对比，进而求出葡萄糖酸锌产品中锌的含量[17]。孙赛兰等人研究了双水相萃取分光光度法测定葡萄糖酸锌产生误差问题的原因，以及改进的途径，同时认为，在测试方法可靠性方面，分光光度法是测定添加剂过氧化苯甲酰含量的有效方法[18]。另外，国内还有很多学者关于分光光度法在葡萄糖酸锌产品中锌含量研究过程中进行了积极的改进和完善，使分光光度法在葡萄糖酸锌含量研究过程中更可靠，更简便、更有效[19]。第3节分光光度法的简介一般地，紫外-可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测以及显示装置组成。光源发出的复合光通过单色器被分解成单色光，当单色光通过样品室时，一部分被样品吸收，其余未被吸收的光到达检测器，被转变为电信号，经电子电路的放大和数据处理后。通过显示系统给出测量结果。图1.1紫外可见分光光度计的结构分光光度法的定量分析的依据是朗伯一比尔(Lambert-Beel)定律。物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。第4节研究的内容本章首先对分光光度法进行了介绍，对本研究柠檬酸锌定量分析的方法进行选择，然后介绍定量分析的原理，以及分光光度法在葡萄糖酸锌定量研究中的应用，并分析了分光光度法在葡萄糖酸锌定量研究过程中的优点。然后采用两种显色方法分别对5种市售的葡萄糖酸锌口服液产品进行了锌含量测定，即碱性-EDTA法和酸性铬黑T法。碱性-EDTA法：探讨测定葡萄糖酸锌片中葡萄糖酸锌含量的方法。方法根据葡萄糖酸锌在碱性条件和EDTA存在的条件下下与锌试液生成蓝色化合物，在620nm处有吸收峰的特点，用可见分光光度法测定其含量。酸-铬黑T法：本法锌元素在采用铬黑T作为指示剂，在pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液方法显红色的方法，波长574nm下可以达到最大吸收波长，并建立分光光度计的光吸收-浓度的关系，并对5种市售葡萄糖酸锌产品的样品的锌含量进行了分析和对比。最后，本文比较了这两种测试方式的精度以及特点。2方法和材料第1节主要仪器与药品本研究主要的实验仪器如表2-1所示。表2-1主要实验仪器和药品仪器型号生产厂家紫外一可见分光光度计UV759/UV759S北京普析化学仪器有限公司电子分析天平ME54E瑞士梅特勒-托利多仪器制造公司酸度计PHS-3C上海伟业测试仪器磁力搅拌装置

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上海司乐仪器移量管1-25mL天津盛达三合玻璃仪器生化培养箱LRH-150B广东省医疗器械厂生产干燥箱CH215江苏启东机电设备厂样品瓶25mL,50mL华东华玻容量瓶50-1000mL蜀牛玻璃仪器本研究的主要实验药品如表2-2所示。表2-2主要实验药品药品规格生产厂家锌(II)标准试剂色谱级上海安谱实验科技股份有限公司磷酸二氢钾AR广州化学试剂厂蒸馏水 二次蒸馏自制醋酸AR广州化学试剂厂醋酸钠AR广州化学试剂厂磷酸氢二钠AR广州化学试剂厂氯化钠AR天津国药试剂乙二胺四醋酸二钠AR天津国药试剂三羟甲基氨基甲烷AR天津大茂化工医用酒精CP天津大茂化工第2节测试样品的来源本研究所测试的葡萄糖酸锌溶液有5种，规格如表2-3所示。表2-3测试用的葡萄糖酸锌口服液编号品牌说明书规格锌浓度/换算规格1三精35.3mg/100mL3.53mg/mL10mL/支2川奇30.07mg/100mL3.007mg/mL10mL/支3江中40.0mg/100mL40.0mg/mL10mL/支4健安喜35.14mg/100mL3.51mg/mL10mL/支5奥诺25.3mg/100mL2.53mg/mL10mL/支第3节标准溶液的配制1.0g/L锌(II)标准溶液的制备：采用分析天平准确称取4.3970gZnSO4·7H2O，加二次蒸馏水充分搅拌、溶解，静置30min后，以二次蒸馏水作为溶剂，将溶液用1000mL容量瓶中定容成1000mL，即得本实验所用1.0g/L锌(II)标准溶液。10μg/L锌(II)标准溶液的配置：用移液管准确取1.0g/L锌(II)标准溶液10mL，采用以二次蒸馏水作为稀释溶剂，用1000mL容量瓶中定容成1000mL的溶液，即得本实验所用10μg/L锌(II)标准溶液。1×10-3mol/L铬黑T指示剂溶液的配制：用分析天平准确称取0.46231g铬黑T，采用以无水乙醇作为稀释溶剂，用1000mL容量瓶中定容成1000mL的溶液，即得本实验所用1×10-3mol/L铬黑T指示剂溶液。pH=5.5醋酸-醋酸钠缓冲液的配制：称取64.20g醋酸钠加二次蒸馏水300mL溶解，采用pH计在线测量溶液的pH值，加入醋酸调pH值到5.5，后加蒸馏水补充，定容到1000mL，即获得本研究所用的pH=5.5醋酸-醋酸钠缓冲液。pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液配制四份，备用，用前需要将四份pH=5.5醋酸-醋酸钠缓冲液充分混合后装瓶保存。pH=9.0碱性显色液的配置：准确称取6.0600g三羟甲基氨基甲烷，加盐酸赖氨酸3.610g、氯化钠5.830g、乙二胺四醋酸二钠3.7000g，再加二次蒸馏水溶解到1000mL，即可获得pH值9.0的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。第4节实验的主要步骤本研究为分光光度法测定市场上葡萄糖酸锌中锌的含量，实验的大致方法为：实验中最大吸收波长的确定；锌标准溶液标准吸收曲线的绘制与研究；测试方法的确立；锌含量的测定以及不同品牌葡萄糖酸锌中锌含量的实验。3实验与讨论第1节酸性-铬黑T法1.1最大波长的确定实验溶液的配置：用移液管取10μg/L锌(II)标准溶液30mL，用移液管量取1×10-3mol/L铬黑T指示剂溶液5mL，量取pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液10mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL得到确定锌(II)标准溶液最大波长的实验样品。参照溶液的配置：不加10μg/L锌(II)标准溶液，其他方法如实验溶液，用移液管量取1×10-3mol/L铬黑T指示剂溶液5mL，量取pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液10mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL得到确定锌(II)标准溶液最大波长的参照样品。将得到的两份溶液放入比色皿，采用分光光度计在400-800nm的波长范围内进行全波段扫描，测定样品在不同波长下的吸光度(A)，得到的数据如图3-1所示。图3-1锌(II)-铬黑T溶液不同波长下的吸光度如图3-1所示，实验溶液在574nm处有最大吸收峰，而空白溶液中，铬黑T溶液最大吸收峰在波长526nm处，两者的波长相差51nm而且两者的最大吸光度也有很大的不同。因此，pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液，采用在铬黑T指示剂完全可以将实验溶液与参比溶液区分开来，所以本实验采用此法作为测试锌含量的测试方法，采用574nm作为本法的最大吸收波长。1.2标准曲线的绘制定量取10μg/L锌(II)标准溶液0mL、5mL、10mL、15mL、20mL、25mL以及30mL，用移液管量取1×10-3mol/L铬黑T指示剂溶液5mL，量取pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液10mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL得到确定锌(II)标准曲线测试溶液。另外，取0mL的溶液作为空白参比溶液。在确定的波长574nm，25℃的条件下，测定其吸光度，每个样品重复5次，然后取5次测量值的平均值，即为该浓度下的吸光度。每次测量均需要对测量池清洗次，清洗时先用蒸馏水冲洗，然后用pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液清洗。标准曲线实验的实验结果如表3-1所示。表3-1锌(II)-铬黑T标准曲线实验数据浓度Cμg/mL吸光度A测量次数平均123450.500.12790.12800.12810.12770.12820.13661.000.25330.25340.25340.25380.25300.26941.500.41090.41120.41170.41120.41100.43692.000.51250.51260.51250.51290.51220.54492.500.66940.66940.66970.66940.66910.71193.000.79040.79000.79060.79020.78970.8405根据表3-1中的数据制作葡萄糖酸锌的标准实验曲线，并且通过回归计算计算，计算出回归方程的表达式为：A=0.2799C-0.0009，相关系数R2=0.999，对相关性系数进行显著性检验的结果为：P＜0.01，表明溶液的浓度度与吸光度的比值关系良好，二者之间呈显著正相关的线性关系。1.3测试方法的建立吸光度在0.2-0.8之间的线性关系比较好，因此，实验中，采用0.5-3.0μg/mL浓度范围，超过浓度范围值的浓度经过需经过稀释后进行测量，同理，在进行实验设计时，应尽可能的将实验体系的药物浓度控制在0.5-3.0μg/mL的浓度范围内。所以在实验前，需要根据样品的浓度计算样品的稀释倍数，使得测量体系的最终浓度满足0.5-3.0μg/mL的范围，样品所需稀释的倍数如表3-2所示。表3-2葡萄糖酸锌的说明书浓度及稀释倍数编号品牌说明书锌浓度样品稀释倍数1三精3.53mg/mL20002川奇3.07mg/mL20003江中40.0mg/mL20004健安喜3.51mg/mL20005奥诺2.53mg/mL2000由图所示，葡萄糖酸锌口服液要达到可测量的浓度，稀释倍数要达到2000倍，稀释后测试样品的锌(II)可达到1.0-2.0μg/mL。所以，设计葡萄糖酸锌口服液测试样的方法如下：取葡萄糖酸锌口服液5mL，采用二次蒸馏水定容至1000mL；取步骤1种的溶液10mL，用移液管量取1×10-3mol/L铬黑T指示剂溶液5mL，量取pH=4.5醋酸-醋酸钠缓冲液10mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL得到葡萄糖酸锌口服液的测试样。1.4计算方法与结果用分光光度计测量葡萄糖酸锌口服液的吸光度，锌含量的计算是通过标准曲线及其回归公式获得，并且通过回归计算计算，柠檬酸锌-铬黑T标准溶液吸光度-浓度回归方程的表达式为：A=0.2799C-0.0009，进而获得吸光度转化成对锌(II)浓度关系的的方程为：（3-1）将表3-2中的吸光度数据带入公式，得到制备样品的浓度，在测试样品的制备过程中，溶液被稀释了2000倍，所以：每份测试样品的实际浓度为=C×2000（μg/mL）=C×2（mg/mL）（3-2）根据公式3-1和3-2，得到葡萄糖酸锌口服液样品的实际浓度，如表3-3所示。表3-3锌(II)-铬黑T方法下锌的实际含量编号品牌吸光度测试浓度/μg/mL样品浓度/mg/mL1三精0.49111.75603.51202川奇0.42181.50853.01723江中0.559711.99863.99714健安喜0.49081.75503.50995奥诺0.34981.25122.5024第2节碱性-EDTA法探讨测定葡萄糖酸锌片中葡萄糖酸锌含量的方法。方法根据葡萄糖酸锌在碱性条件和EDTA存在的条件下下与锌试液生成蓝色化合物，在620nm处有吸收峰的特点，用可见分光光度法测定其含量。2.1最大波长的确定实验溶液的配置：用移液管取10μg/L锌(II)标准溶液8mL，用移液管量取pH=9.0碱性显色液30mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL，得到确定锌(II)标准溶液最大波长的实验样品。参照溶液的配置：不加100μg/L锌(II)标准溶液，其他方法如实验溶液，移液管量取pH=9.0碱性显色液30mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL，得到确定锌(II)标准溶液最大波长的参照样品。将得到的两份溶液放入比色皿，采用分光光度计在400-800nm的波长范围内进行全波段扫描，测定样品在不同波长下的吸光度(A)，得到的数据如图3-3所示图3-3碱性—EDTA法不同波长下的吸光度如图3-3所示，实验溶液在624nm处有最大吸收峰，所以本实验采用此法作为测试锌含量的测试方法，采用624nm作为本法的最大吸收波长。2.2标准曲线的绘制定量取10μg/L锌(II)标准溶液0mL、10mL、20mL、30mL、40mL、50mL、60mL以及70mL，液管量取pH=9.0碱性显色液30mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL得到确定锌(II)标准溶液最大波长的实验样品。另外，取0mL的溶液作为空白参比溶液。在确定的波长574nm，25℃的条件下，测定其吸光度，每个样品重复5次，然后取5次测量值的平均值，即为该浓度下的吸光度。每次测量均需要对测量池清洗次，清洗时先用二次蒸馏水冲洗，然后用pH=9.0三羟甲基氨基甲烷缓冲液清洗。标准曲线实验的实验结果如表3-4所示，实验获得的标准曲线如图3-4所示。表3-4碱性锌(II)标准曲线实验数据浓度Cμg/mL吸光度A测量次数平均123451.000.11190.11200.11210.11170.11220.111982.000.22150.22160.22160.22200.22120.221583.000.35940.35960.36010.35960.35940.359624.000.44820.44830.44820.44850.44800.448245.000.58540.58540.58570.58540.58520.585426.000.69130.69090.69150.69110.69060.691087.000.79900.79900.79870.79900.79910.79896表3-4碱性锌(II)标准曲线实验数据根据表3-4中的数据制作葡萄糖酸锌的标准实验曲线，并且通过回归计算计算，计算出回归方程的表达式为：A=0.1151C-0.0007，相关系数R2=0.999，对相关性系数进行显著性检验的结果为：P＜0.01，表明溶液的浓度度与吸光度的比值关系良好，二者之间呈显著正相关的线性关系。2.3测试方法的建立吸光度在0.2-0.8之间的线性关系比较好，因此，实验中，采用2.0-7.0μg/mL浓度范围，超过浓度范围值的浓度经过需经过稀释后进行测量，同理，在进行实验设计时，应尽可能的将实验体系的药物浓度控制在2.0-7.0μg/mL的浓度范围内。所以在实验前，需要根据样品的浓度计算样品的稀释倍数，使得测量体系的最终浓度满足2.0-7.0μg/mL的范围。根据几种品牌葡萄糖酸锌锌含量的说明书，确定样品的稀释倍数如表3-5所示。表3-5葡萄糖酸锌的说明书浓度及稀释倍数编号品牌说明书锌浓度样品稀释倍数1三精3.53mg/mL10002川奇3.07mg/mL10003江中40.0mg/mL10004健安喜3.51mg/mL10005奥诺2.53mg/mL1000由图所示，葡萄糖酸锌口服液要达到可测量的浓度，稀释倍数要达到2000倍，稀释后测试样品的锌(II)可达到1.0-2.0μg/mL。所以，设计葡萄糖酸锌口服液测试样的方法如下：取葡萄糖酸锌口服液2mL，采用二次蒸馏水定容至100mL；取步骤1种的溶液5mL，液管量取pH=9.0碱性显色液30mL，采用二次蒸馏水作为稀释溶液定容至100mL，得到葡萄糖酸锌口服液的测试样。2.4计算方法与结果用分光光度计测量葡萄糖酸锌口服液的吸光度，锌含量的计算是通过标准曲线及其回归公式获得，并且通过回归计算计算，柠檬酸锌-铬黑T标准溶液吸光度-浓度回归方程的表达式为：A=0.1151C-0.0007，进而获得吸光度转化成对锌(II)浓度关系的的方程为：（3-3）将表3-2中的吸光度数据带入公式，得到制备样品的浓度，在测试样品的制备过程中，溶液被稀释了1000倍，所以：每份测试样品的实际浓度为=C×1000（μg/mL）=C（mg/mL）（3-4）根据公式3-3和3-4，得到葡萄糖酸锌口服液样品的实际浓度，计算结果如表3-6所示。表3-6碱性-EDTA方法下锌的实际含量编号品牌吸光度测试浓度/μg/mL样品浓度/mg/mL1三精0.40563.53043.53042川奇0.34823.03103.03103江中0.45763.99463.99464健安喜0.40233.50763.50765奥诺0.28832.50072.5007第3节两种方法的比较将两种测试方法测得的数据进行汇总，并对两种方法获得的结果进行分析，结果如比表3-7所示。表3-7两种测试方法的比较编号品牌酸性-铬黑T法碱性-EDTA法绝对误差相对误差%吸光度样品浓度mg/mL吸光度样品浓度mg/mL1三精0.49113.51200.40563.5304-0.0184-0.522川奇0.42183.01720.34823.0310-0.0141-0.473江中0.559713.99710.45763.99460.01550.394健安喜0.49083.50990.40233.50760.00830.245奥诺0.34982.50240.28832.5007-0.0083-0.33如表3.7所示，两种测试方法的相对误差不大于±0.5%，说明这两种测试方法对葡萄糖酸锌产品中锌含量测试的精确度都很高，这两种方法都比较适合葡萄糖酸锌产品含量的测试。但从两种方法的测试曲线可以看到，酸性-铬黑T在显色灵敏度方面远高于碱性—EDTA法，也就是说，测试同一个含锌产品的过程中，酸性-铬黑T的测量下限比较低。而且，从文献来看，不但葡萄糖酸锌产品在碱性-EDTA的条件下显示蓝色，葡萄糖酸钙在碱性-EDTA的条件下的也会显示蓝色，所以，碱性-EDTA方法不适合同时含有钙和锌产品含量的测试。4结论本章首先对分光光度法进行了介绍，介绍了分光光度法定量分析的原理，然后采用碱性-EDTA法和酸性铬黑T法对柠檬酸锌的含锌量进行了分析，研究了这两种方法在分光光度法测定葡萄糖酸锌定量研究中的应用，并分析了这两种方法的优缺点。然后采用两种显色方法分别对5种市售的葡萄糖酸锌口服液产品进行了锌含量测定，即。1.酸-铬黑T法：在574nm处有最大吸收峰，回归方程的表达式为：A=0.2799C-0.0009，相关系数R2=0.999，对相关性系数进行显著性检验的结果为：P＜0.01，表明溶液的浓度度与吸光度的比值关系良好，二者之间呈显著正相关的线性关系。在进行实验设计时，应尽可能的将实验体系的药物浓度控制在0.5-3.0μg/mL的浓度范围内。2.碱性-EDTA法：在624nm处有最大吸收峰，A=0.1151C-0.0007，相关系数R2=0.999，对相关性系数进行显著性检验的结果为：P＜0.01，表明溶液的浓度度与吸光度的比值关系良好，二者之间呈显著正相关的线性关系。在进行实验设计时，应尽可能的将实验体系的药物浓度控制在2.0-7.0μg/mL的浓度范围内。3.对采用碱性-EDTA法和酸性铬黑T法对5种市售葡萄糖酸锌产品的样品的锌含量进行了分析和对比。分析认为：两种测试方法的相对误差不大于±0.5%，说明这两种测试方法对葡萄糖酸锌产品中锌含量测试的精确度都很高。从两种方法的测试曲线可以看到，酸性-铬黑T在显色灵敏度方面远高于碱性-EDTA法，也就是说，测试同一个含锌产品的过程中，酸性-铬黑T的测量下限比较低。而且，从文献来看，不但葡萄糖酸锌产品在碱性-EDTA的条件下显示蓝色，葡萄糖酸钙在碱性-EDTA的条件下的也会显示蓝色，所以，碱性-EDTA方法不适合同时含有钙和锌产品含量的测试。以上作品的著作权为本作者所有，仅供参考，严禁抄袭，需要全套资料或者专业辅导请联系作者：QQ：2993571832微信：lxj1234511参考文献[1]潘慧.识别小儿缺锌症状,合理喂养,预防小儿缺锌[J].中国社区医师,2013(6):44-44.[2]李荣华.微量元素补剂对人体运动能力及健康的影响——以铁、锌为例[J].开封教育学院学报,2015,35(11):282-283.[3]

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